《细菌学检验概论》PPT课件

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1.基础培养基
含有基础生长所需的基本 营养成分,最常用的是肉浸液, 俗称肉汤(broth),主要成 分含牛肉浸液和蛋白胨。
与致病性有关
选择抗菌药物参考
革兰阳性球菌 革兰阴性杆菌
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2.抗酸染色(acid-fast stain) 方法: 1、石炭酸复红初染加热3~5min,水洗 2、3% ~ 5%盐酸酒精脱色30s,水洗 3、碱性美蓝复染30s,水洗。 原理:分枝杆菌属的细菌,胞壁脂质多,
4.鞭毛染色:可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量, 在细菌鉴定中,特别是非发酵菌的鉴定中很重要。
5.异染颗粒染色:用于白喉棒状杆菌染色。
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(二)常用的染色方法
6.芽胞染色:
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7.墨汁染色: 一般用于新型隐 球菌检查
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选择培养基 接种
2.凝固物质 琼脂、明胶、卵白
3.抑制剂和指示剂
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(二)培养基种类---按成分和培养目的
1.基础培养基(based medium) 2.营养培养基(nutrient medium) 3.鉴别培养基(differential medium) 4.选择培养基(selective medium) 5.特殊培养基(special medium)
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二、染色标本
(一)常用染料 1.碱性染料:碱性复红、结晶紫、美蓝等 2.酸性染料:有伊红、刚果红等 3.复合染料(中性染料)及荧光染料:复合染料有
瑞氏染料(伊红美蓝)、姬姆萨染料(伊红天青) 等;荧光染料有荧光标记的抗体
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(二)常用的染色方法
1.革兰染色(gram stain)
临床细菌学检验概述
Introduction on Clinic and Diagnostic Bacteriology
江苏大学医学院检验学系 病原生物学教研室
周天戟 教授
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本章内容
第一节 标本的采集和处理原则 第二节 细菌的形态学检查 第三节 细菌的分离培养和鉴定 第四节 细菌的非培养检测方法
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一、培养基的种类和选择
培养基(culture medium) 是由人工方法配制而 成的,专供微生物生长 繁殖使用的混合营养物 制品。
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(一)培养基的组成成分
1.营养物质 蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、 无机盐类、鸡蛋和动物血清生长因子
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第一节 标本的采集和处理原则
一、标本采集的一般原则 1.早期采集 2.无菌操作 3.根据目的菌的特性用不同的方法采集 4.采集量适当 5.注意生物安全
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第一节 标本的采集和处理原则
二、标本的处理 1. 对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌
和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检 2. 其他各种标本采集后最好在2h之内送到实验室 3. 若不能及时送检,标本应置于一定环境中保存 4. 一般情况下,用于细菌培养的标本保存时间不应
超过24h
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5.病人标本中可能含有大量致病菌,必须注意安全 防护
6.标本切勿污染容器的瓶口和外壁,容器必须包装 好,防止送检过程中倒翻或碰破流出
2.常用的方法有压滴法和悬滴法
有动力:可看到细菌自一处移至另一处,有明显
的方向性位移
无动力:细菌呈现布朗运动,只在原地颤动而无
位置的改变
3.有些病原菌通过不染色标本的动力检查可作出初步鉴定
如疑似霍乱患者,镜下观察到来回穿梭似流星状运动的细菌, 制动试验阳性,可初步推断为“疑似O1群霍乱弧菌”。
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其中的分枝菌酸与石炭酸复红结合 成牢固的复合物,能抵抗脱色 意义:可将细菌分为两大类:
-抗酸性细菌 -非抗酸性细菌
(二)常用的染色方法
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(二)常用的染色方法
3.荧光染色
(1)荧光染色法敏感性强,效率高而且容易观察结果,在临床 细菌鉴定中有很大的实用价值。
(2)主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及 痢疾志贺菌等的检测。
辅助诊断
药物敏感试验
明确诊断
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第二节 细菌的形态学检查
细菌形态学检查的意义
1.镜检可以了解有无细菌及大致的菌量 2.通过形态学检查可得到初步诊断,对临床早期诊
断和治疗疾病有一定的参考意义 3.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的
初步识别和分类,用于细菌鉴定
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第三节 细菌的分离培养和鉴定
选择培养方法
选择可疑菌落
选择鉴定方法
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细菌的分离培养和鉴定
一、培养基的种类和选择 培养基的组成成分、培养基种类、培养基的选择
二、分离及培养 细菌的分离、细菌培养方法
三、生化反应和鉴定 碳水化合物的代谢试验 蛋白质和氨基酸的代谢试验 碳源和氮源利用试验
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细菌的形态学检查法
•不染色标本的检查:初步观察、细菌动力 •单染色法:细菌形态 •复染色法:细菌形态、结构与鉴别
革兰染色法(Gram stain)
•抗酸染色法(acid-fast stain) 特殊染色法:负染色、鞭毛染色
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一、不染色标本
1.细菌不经染色直接镜检,主要用于检查生活状态下细菌的动力 及运动状况
方法:
1、结晶紫初染
1 min
2、卢戈氏碘液媒染
1 min
3、95%酒精脱色 30sec~1 min
4、稀释石炭酸复红复染 1 min
原理:
G+等电点低,带正电荷的碱性燃料作色 牢固
G+细胞壁肽聚糖层多,G-细胞壁脂质含 量高ຫໍສະໝຸດ Baidu
G+含有较多核糖核酸镁盐,与结晶紫、 碘结合成大分子复合物
意义:
鉴定细菌
7.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格,必须 按规定包装,由专人运送
8.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送, 有时可直接用抽取标本的注射器运送
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细菌感染的检验程序
直接涂片镜检 初步诊断
分离培养
形态学试验 生化试验 免疫学试验 动物试验
免疫学试验 分子生物学技术 其他检测技术
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