三点测交实验

实验六 果蝇的三点测交
一、实验目的：
掌握三点测交的原理及方法；学习三点测交的数据统计处理及分析方法；了解绘制遗传学图的原理和方法。
二、实验材料：
黑腹果蝇品系：野生型果蝇（+++） 红眼、长翅、直刚毛
三、实验原理：
连锁交换定律：处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。
三点测交：三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。主要过程是：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换。
如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换，那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积，但实际上观察到的双颊还值往往低于预期值，因为每一次发生单交换，它邻近也发生一次交换的机会就减少一半，这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。
四、实验内容：
1、 选处女蝇：每组做正，反交各1瓶，正交选野生型为母本，三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母本，野生型为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养；
2、 7d后，释放杂交亲本（一定要干净）；
3、 再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型及性别。
4、 选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养，其余F1代果蝇处死；
5、 7d后，处死F1亲本；
6、 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d，观察眼色，翅形及刚毛形态。正交只需统计雄性个体。要求每组至少统计250只果蝇。