【CN110007043A】谷物中9种真菌毒素的检测方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910337234.8

(22)申请日 2019.04.25

(71)申请人 江苏省农业科学院

地址 210014 江苏省南京市玄武区钟灵街

50号

(72)发明人 俞明正　史建荣　董飞　王淑芳　

张笑　赫丹　徐剑宏　

(74)专利代理机构 北京国昊天诚知识产权代理

有限公司 11315

代理人 吴家伟

(51)Int.Cl.

G01N 30/88(2006.01)

G01N 30/06(2006.01)

(54)发明名称

谷物中9种真菌毒素的检测方法

(57)摘要

本发明公开了一种谷物中9种真菌毒素的检

测方法，包括以下步骤：取谷物样品，粉碎后过

筛，得到谷物样品粉末；将乙腈与水混匀后作为

提取液加入到谷物样品粉末中，涡旋提取后离

心，收集上清液；取上清液注入EP管中，涡旋振荡

后离心，将上层清液吸出后用氮气吹干，吹干后

的残渣溶解后过滤，收集滤液，作为待测样品提

纯液；将待测样品提纯液注入液相色谱仪，采用

液相色谱-质谱联用进行检测。本发明提出一种

简单、快速、准确的粮谷中真菌毒素的一次性快

速筛查检测技术，成本低、萃取速度快、操作简

便、灵敏度低、回收率好、稳定性强，为明确粮谷

中真菌毒素的污染及控制、保障粮谷质量安全奠

定了技术基础。权利要求书1页 说明书7页 附图2页CN 110007043 A 2019.07.12

C N 110007043

A

权　利　要　求　书1/1页CN 110007043 A

1.谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取谷物样品，粉碎后过筛，得到谷物样品粉末；

(2)将乙腈与水混匀后作为提取液加入到所述谷物样品粉末中，涡旋提取后离心，收集上清液；

(3)取所述上清液注入EP管中，涡旋振荡后离心，将上层清液吸出后用氮气吹干，吹干后的残渣溶解后过滤，收集滤液，作为待测样品提纯液；

(4)将所述待测样品提纯液注入液相色谱仪，采用液相色谱-质谱联用进行检测。

2.如权利要求1所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中液相色谱-质谱联用进行检测的方法包括：

色谱条件：色谱柱：C18，流动相A：5mmol/L醋酸铵水溶液，流动相B：甲醇，流动相梯度程序：初始流动相为10％流动相B，保持1min，1min至3min，升到35％流动相B，3-5min升到90％流动相B，5-11min维持90％流动相B，11.01min回到初始流动相，共15min；

质谱条件：离子化方式：电喷雾电离子源；扫描方式：多反应监测模式；离子源温度500℃；雾化气50psi；辅助气50psi；气帘气35psi；喷雾电压：5500V、4500；碰撞室射出电压：10V、-6V。

3.如权利要求2所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述电喷雾电离子源包括ESI+和ESI-。

4.如权利要求3所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)取上清液2mL注入含有分散固相萃取净化填料的4mL EP管中。

5.如权利要求4所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述分散固相萃取净化填料为硫酸镁0.2g，氯化钠0.1g，柠檬酸钠0.1g，C180.1g。

6.如权利要求5所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中以2500r/min，涡旋振荡5min，然后5000r/min离心5min。

7.如权利要求6所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中以2500r/min，涡旋振荡1min，然后5000r/min离心5min。

8.如权利要求7所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述粉末过2.00mm孔筛。

9.如权利要求8所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)将乙腈与水以80:20的体积比混合，然后按照体积质量比4:1加入所述谷物样品粉末中。

10.如权利要求9所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中吹干后的残渣，溶解于含0.1％甲酸的50％甲醇水溶液中，然后用0.22μm的滤膜过滤。

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