【CN110007043A】谷物中9种真菌毒素的检测方法【专利】
一种同时检测多种真菌毒素的方法[发明专利]
![一种同时检测多种真菌毒素的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/4484252b0c22590103029d68.png)
专利名称：一种同时检测多种真菌毒素的方法
专利类型：发明专利
发明人：范自营,高敬铭,张红云,高海军,姬建生,刘莹,秦袆芳,秦复霞
申请号：CN201710231435.0
申请日：20170411
公开号：CN107144645A
公开日：
20170908
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及真菌毒素检测的技术领域，具体涉及一种同时检测多种真菌毒素的方法，包括将样品加入到提取剂中，振荡离心，得到残渣和样品的上清液；向残渣中加入甲醇和纯水，取残渣的上清液；将样品的上清液与残渣的上清液混合为上清液；混合上清液和稀释液，过滤得到提取液；将提取液缓慢通过复合免疫亲和柱并排干，进行至少两次的梯度洗脱并收集洗脱液；将洗脱液用氮气吹干，定容后得到待测液；采用液相色谱质谱联用同时检测待测液中真菌毒素的含量，分别绘制每种真菌毒素的标准曲线，最终计算出样品中真菌毒素的含量。
本发明解决了现有的真菌毒素检测方法只能检测单一毒素的缺陷，检测成本低，提高了检测效率，减少了试剂损耗和污染。
申请人：河南省粮油饲料产品质量监督检验中心
地址：450008 河南省郑州市金水区红专路97号
国籍：CN
代理机构：郑州红元帅专利代理事务所(普通合伙)
代理人：杨妙琴
更多信息请下载全文后查看。
粮食中真菌毒素的检测
粮食中真菌毒素的检测一、前言真菌是微生物中的高等生物，是一类有细胞壁，不含叶绿素，无根叶茎，以腐生或寄生方式生存，能进行有性或无性繁殖的微生物。
自然界中的真菌分布十分广泛，并可作为食品中正常菌相的一部分用来加工食品，但在特定情况下又可造成食品的腐败变质。
有些真菌本身不仅作为病原体引发人类疾病，其代谢产物真菌毒素(mycotoxins)也对人及动物造成危害。
真菌毒素是农产品的主要污染物之一，人畜进食被其污染的粮油食品可导致急、慢性真菌毒素中毒症。
1.1粮食中典型的真菌毒素1）黄曲霉毒素(aflatoxin)主要是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，黄曲霉毒素污染的发生和程度随地理和季节因素以及作物生长、收获、贮存的条件不同而异，粮油作物在收获后、贮藏期以及加工后都能受到产毒菌株污染，有时早在作物收获前就已受到了产毒菌株的污染。
1960年在英格兰南部和东部地区，十几万只火鸡因食用发霉的花生粉而中毒死亡。
剖检中毒死鸡，发现肝脏出血、坏死，肾肿大，病理检查发现肝实质细胞退行性病变及胆管上皮细胞增生。
研究发现火鸡饲料中的花生粉含有一种荧光物质，是导致火鸡死亡的病因，并证实了该物质是黄曲霉的代谢产物，故命名为黄曲霉毒素。
2）赭曲霉毒素最初是从南非的赭曲霉毒株中分离出来的，由赭曲霉(Asper-gillusochraceus)、洋葱曲霉(Aspergillusalliaceus)、鲜绿青霉(Pencilliumviridicatum)、徘徊青霉等代谢产生，包括7种结构类似的化合物，赭曲霉毒素A是其中毒性最强的物质，是自然界中的主要天然污染物。
在一些国家的食品中，赭曲霉毒素A的污染率可达2％～30％。
该化合物主要表现为肾脏毒性。
在巴尔干地方性肾病流行区，6％～18%人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。
3）展青霉毒素(Pat)，又叫棒曲霉毒素和珊瑚青霉毒素，主要是由棒曲霉(Aspergillusclavatus)、扩展青霉(Pencilliumexpansum)、展青霉(Pencilliumpatulium)、曲青霉(Pencilliumaspergillus)等代谢产生的一种免疫抑制剂。
超高效液相色谱-质谱联用法检测青贮玉米中9种真菌毒素
超高效液相色谱-质谱联用法检测青贮玉米中9种真菌毒素万亚美;熊永;庞民好;刘颖超【摘要】为了建立超高效液相色谱-串联质谱检测青贮玉米中黄曲霉毒素B1(AFB1)、B2(AFB2)、G1 (AFG1)、G2(AFG2)、T-2毒素、HT-2毒素、脱氧雪腐镰刀烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、赭曲霉毒素A(OTA)的分析方法,样品采用乙腈提取,C18为分散净化剂的QuEChERS净化柱净化,超高效液相色谱分离,多反应离子监测模式检测,外标法定量.结果显示:青贮玉米中9种真菌毒素的线性关系良好,9种毒素的平均添加回收率为71.86％～110.00％之间,相对标准偏差为0.09％～8.94％.方法检出限(LOD)在0.05～7.5 μg/kg之间,定量限(LOQ)在0.18～25 μg/kg之间.该方法快速灵敏,准确可靠,适用于青贮玉米中9种真菌毒素的检测.【期刊名称】《河北农业大学学报》【年(卷),期】2018(041)004【总页数】5页(P122-126)【关键词】青贮玉米;真菌毒素;超高效液相色谱-质谱联用【作者】万亚美;熊永;庞民好;刘颖超【作者单位】河北农业大学植物保护学院,保定071001;河北农业大学植物保护学院,保定071001;河北农业大学植物保护学院,保定071001;河北农业大学植物保护学院,保定071001【正文语种】中文【中图分类】O657.63青贮玉米是制作优质青贮饲料的专用玉米，因其营养丰富、持绿性好、产量高、易消化等特点，已成为奶牛、肉牛的主要饲粮组分[1-2]。
然而青贮玉米在田间生长及储存过程中常受到多种真菌的污染而产生真菌毒素[3]，例如，黄曲霉毒素B1能够在反刍动物体内转化成黄曲霉毒素M1(AFM1)，不同动物以牛奶中的AFM1代谢物含量最高，人们食用含有AFM1的牛奶及其制品后，容易引起肝脏损伤、肝硬化、肿瘤诱导和致突变及免疫抑制等负面作用[4]。
近年来，为了更好地监测和控制青贮玉米中真菌毒素的污染，保障食品安全和人们身体健康，建立一种简便、快速、经济、准确、可靠的真菌毒素检测方法十分必要。
近红外光谱技术检测粮食中真菌毒素的研究进展
近红外光谱技术检测粮食中真菌毒素的研究进展
吴任之;何小容;陈波;周伟
【期刊名称】《粮食问题研究》
【年(卷),期】2024()2
【摘要】我国是粮食生产大国,在粮食生产、运输、加工、贮藏过程中,易受到真菌污染并产生真菌毒素,严重威胁人和畜禽的生命健康,并造成巨大的经济损失。
由于传统检测方法的检测周期、操作难度、成本损耗等难以满足粮食生产、流通及加工过程中快速实时检测的需要。
因此,开发简单、快速、非破坏性的方法来检测粮食中的真菌毒素污染成为了研究热点。
近红外光谱技术具备非破坏性、分析速度快、成本低、稳定性好、污染小等优点,适合于现场检测,是一种潜在的解决手段。
本文介绍了近红外光谱技术的理论基础,综述了国内外关于近红外光谱技术检测粮食中真菌毒素的应用进展,并对其未来研究发展做出了展望。
【总页数】5页(P22-26)
【作者】吴任之;何小容;陈波;周伟
【作者单位】宜宾黄桷庄粮油集团有限公司;宜宾五粮液股份有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】F32
【相关文献】
1.近红外光谱技术(NIRS)在检测牧草霉菌毒素中的应用
2.近红外技术在真菌生物量和真菌毒素检测中的研究与应用
3.近红外光谱技术在粮食检测中的应用进展
4.粮
食真菌毒素的光谱检测技术研究进展5.近红外光谱技术在粮食真菌毒素检测中的应用进展
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
原粮产品中真菌毒素检测样品前处理方法的建议
原粮产品中真菌毒素检测样品前处理方法的建议
张群
【期刊名称】《黑龙江粮食》
【年(卷),期】2024()2
【摘要】真菌毒素是真菌的次生代谢产物,广泛存在于原粮产品中,多与农作物保存、管理不当有关,具有一定的毒性,需要严格控制真菌毒素含量才能保障原粮产品的安
全性。
真菌毒素样品检测是判定原粮产品真菌毒素含量的重要手段,样品采集及处
理效果直接影响着样品检测结果的可靠性。
本文从原粮产品中的真菌毒素相关概述出发,分析了原粮产品中真菌毒素检测现状,探讨了原粮产品中真菌毒素检测样品前
处理方法及处理技术,以期提供一定的参考价值。
【总页数】3页(P73-75)
【作者】张群
【作者单位】河北省唐山市食品药品综合检验检测中心
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.两种水产品中农药多残留分析的样品前处理方法及其在111种农药和相关化学
品残留同时检测中的应用2.基于免疫层析检测的河豚毒素快速样品前处理方法研
究3.食品中真菌毒素样品前处理方法的研究进展4.农产品中真菌毒素样品前处理
和检测方法研究进展5.原粮产品中真菌毒素检测样品前处理方法的建议
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910337234.8
(22)申请日 2019.04.25
(71)申请人 江苏省农业科学院
地址 210014 江苏省南京市玄武区钟灵街
50号
(72)发明人 俞明正 史建荣 董飞 王淑芳
张笑 赫丹 徐剑宏
(74)专利代理机构 北京国昊天诚知识产权代理
有限公司 11315
代理人 吴家伟
(51)Int.Cl.
G01N 30/88(2006.01)
G01N 30/06(2006.01)
(54)发明名称
谷物中9种真菌毒素的检测方法
(57)摘要
本发明公开了一种谷物中9种真菌毒素的检
测方法，包括以下步骤：取谷物样品，粉碎后过
筛，得到谷物样品粉末；将乙腈与水混匀后作为
提取液加入到谷物样品粉末中，涡旋提取后离
心，收集上清液；取上清液注入EP管中，涡旋振荡
后离心，将上层清液吸出后用氮气吹干，吹干后
的残渣溶解后过滤，收集滤液，作为待测样品提
纯液；将待测样品提纯液注入液相色谱仪，采用
液相色谱-质谱联用进行检测。
本发明提出一种
简单、快速、准确的粮谷中真菌毒素的一次性快
速筛查检测技术，成本低、萃取速度快、操作简
便、灵敏度低、回收率好、稳定性强，为明确粮谷
中真菌毒素的污染及控制、保障粮谷质量安全奠
定了技术基础。
权利要求书1页 说明书7页 附图2页CN 110007043 A 2019.07.12
C N 110007043
A
权 利 要 求 书1/1页CN 110007043 A
1.谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取谷物样品，粉碎后过筛，得到谷物样品粉末；
(2)将乙腈与水混匀后作为提取液加入到所述谷物样品粉末中，涡旋提取后离心，收集上清液；
(3)取所述上清液注入EP管中，涡旋振荡后离心，将上层清液吸出后用氮气吹干，吹干后的残渣溶解后过滤，收集滤液，作为待测样品提纯液；
(4)将所述待测样品提纯液注入液相色谱仪，采用液相色谱-质谱联用进行检测。
2.如权利要求1所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中液相色谱-质谱联用进行检测的方法包括：
色谱条件：色谱柱：C18，流动相A：5mmol/L醋酸铵水溶液，流动相B：甲醇，流动相梯度程序：初始流动相为10％流动相B，保持1min，1min至3min，升到35％流动相B，3-5min升到90％流动相B，5-11min维持90％流动相B，11.01min回到初始流动相，共15min；
质谱条件：离子化方式：电喷雾电离子源；扫描方式：多反应监测模式；离子源温度500℃；雾化气50psi；辅助气50psi；气帘气35psi；喷雾电压：5500V、4500；碰撞室射出电压：10V、-6V。
3.如权利要求2所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述电喷雾电离子源包括ESI+和ESI-。
4.如权利要求3所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)取上清液2mL注入含有分散固相萃取净化填料的4mL EP管中。
5.如权利要求4所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述分散固相萃取净化填料为硫酸镁0.2g，氯化钠0.1g，柠檬酸钠0.1g，C180.1g。
6.如权利要求5所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中以2500r/min，涡旋振荡5min，然后5000r/min离心5min。
7.如权利要求6所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中以2500r/min，涡旋振荡1min，然后5000r/min离心5min。
8.如权利要求7所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中所述粉末过2.00mm孔筛。
9.如权利要求8所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)将乙腈与水以80:20的体积比混合，然后按照体积质量比4:1加入所述谷物样品粉末中。
10.如权利要求9所述的谷物中9种真菌毒素的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中吹干后的残渣，溶解于含0.1％甲酸的50％甲醇水溶液中，然后用0.22μm的滤膜过滤。
2。