蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备培训课件

标本应包括：坐骨神经、腓肠肌、股骨头 和一段脊柱骨四部分。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
15
7、检验标本
将制备好的标本浸泡到任氏液中510min，待其功能稳定后，用任氏液沾 湿的锌铜弓的两极接触神经，如腓肠 肌迅速发生收缩，则标本机能正常。
依次用温热的玻璃棒和食盐的接触和 洗脱检验肌肉收缩的变化。
于人工配制的任氏液中，其兴奋性在几
个小时内保持不变。若给坐骨神经一个
适宜的刺激，可在神经和肌肉上产生一
个可传导的动作电位，肉眼可以看到一
次肌肉的收缩和舒张，表明神经和肌肉
兴奋了一次。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
3
【动物和器材】
蟾蜍或蛙； 任氏液； 常规手术器械； 毁髓针、锌铜弓、解剖盘、玻璃分针、
蛙类的某些基本生命活动和生理功能与 哺乳类动物有相似之处，而且其离体组 织的生活条件比较简单，易于控制和掌 握，来源也较丰富，因此在生理学实验， 常用蛙或蟾蜍的坐骨神经--腓肠肌标本 来观察神经肌肉的兴奋性、刺激与反应 的规律及肌肉收缩的特点等。
制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨 神经腓肠肌标本是生理学实验的基本操 作技术之一。
2．你认为该标本的制作方法有哪些需 要改进的地方？请说出你的想法。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
19
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
16
【注意事项】
1）双毁髓时应注意捻动探针并使蟾蜍头部 前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内， 如被射入，应立即用生理盐水冲洗眼睛。
2）标本制备过程中应经常滴加任氏液，防 止标本干燥，以保持正常生理活性。
3）避免污染、过度牵拉或用器械夹伤坐骨 神经和腓肠肌。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
6
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
7
2、剥制后肢标本
剪除躯干上部及内脏：左手持手术镊提起 两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横 向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。 用金冠剪在颅骨后方剪断脊柱。左手握住 蟾蜍下肢，大拇指抵住脊柱尾骨，右手用 粗剪刀沿脊柱两侧（避开坐骨神经）剪开 腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。 剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于烧杯 内。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
17
思考与讨论
（1）用锌铜弓刺激坐骨神经如何引起 腓肠肌收缩？
（2）如何保持离体标本的机能正常？ （3）剥去皮肤的后肢标本能用自来水
冲洗吗？
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
18
探索性问题
1．该标本可以进行哪些实验研究？试 设计实验内容。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
1
【目的要求】
1. 学习蛙类动物单毁髓和双毁髓的 方法。
2. 掌握坐骨神经–腓肠肌标本的制 备方法。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
2
【基本原理】
两栖类动物生存环境较简单，离体组织 或器官所要求的条件也较简单。坐骨神
经和腓肠肌属于可兴奋组织，把它们置
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
12
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
13
5、分离股骨
沿膝关节剪除并刮净股骨周围的肌肉， 保留股骨的后2/3，剪断股骨。
注意：勿剪断坐骨神经。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
14
6、游离腓肠肌
在腓肠肌跟腱下穿线并结扎，提起结扎线， 剪断肌腱与胫腓骨的联系，游离腓肠肌， 剪去膝关节下部的后肢，保留腓肠肌与股 骨的联系，制备出完整的坐骨神经-腓肠肌 标本。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
8
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
9
剥皮：避开神经，左手持镊子夹住脊 柱，右手捏住皮肤边缘，向下牵拉剥 离皮肤。拉至大腿时，如阻力较大， 可先剥下一侧，再剥另一侧。将全部 皮肤剥除后，将标本置于盛有任氏液 的培养皿中。然后洗净双手和用过的 全部手术器械，再进行下列步骤。
培养皿、烧杯、滴管、蛙板、蛙钉等。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
4
【步骤】
双毁髓 剥制后肢标本 分离两后肢 分离坐骨神经
分离股骨 游离腓肠肌 检验标本
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
5
1、双毁髓
左手握蟾蜍，背部向上。用食指按压其头部前端， 拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓 针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺 之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针由 凹陷处垂直刺入枕骨大孔（进针深度约2mm，有 脱空感即到达椎管），然后针尖向前刺入颅腔， 在颅腔内搅动，以毁脑组织。再将毁髓针退至枕 骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管， 以捣毁脊髓。脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢 突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物 （pithed toad） 。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
10
3、分离两后肢
将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右 手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联 合，使两后肢完全分离。
3/11/2021
蟾蜍离体坐骨神经–腓肠肌标本制备
11
4、分离坐骨神经
ຫໍສະໝຸດ Baidu
将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用大头针将 标本背位固定于蛙板上。用玻璃分针沿脊神 经向后分离坐骨神经。股部沿腓肠肌正前方 的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，纵向分离 暴露坐骨神经的大腿部分，直至分离至腘窝 胫神经分叉处。剪断盖在坐骨神经上方的梨 状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌 之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐 骨神经发出部位的一小块脊柱骨。将已游离 的坐骨神经搭在腓肠肌上。