疟原虫
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Four human infective species
50%
P. f.
7%
P.M.
<1%
P.O.
43%
P.V.
分布
100 多个国家和地区流行疟疾
2.4 billion people at risk (40% world’s population) 300-500 million cases each year
• 2、厚血膜疟原虫计数：疟原虫数/ul血= 疟原虫数/白细胞数*白细胞数/ ul血。计 数200个以上白细胞，白细胞数/ ul血： 6000。 • 3、薄血膜疟原虫计数：疟原虫数/ul血= RBC疟原虫感染率* RBC数/ ul血。检查 1000个RBC， 男：500万个/ ul血，女： 450万个/ ul血
孢子生殖 雌按蚊叮咬疟疾患者，疟原虫随血液进入蚊 胃内，其他各期原虫在蚊胃中均被破坏和消 化，只剩下大小配子体（即 雌雄配子体）继续在蚊胃内 发育。配子、合子、动合子、 卵囊，发育至这个阶段约需 24～48小时。
随后，卵囊逐渐长大，呈瘤状向蚊胃壁外突起 。在卵囊内，核和细胞浆进行 孢子增殖，形成子孢子。一个 囊内可有1千以至上万个子孢 子。成熟的卵囊破裂后，子孢 子通过蚊体的血腔到达唾液腺。
3、裂殖体
核分裂、胞质也分裂，形成裂殖子。疟色 素成堆。被寄生RBC胀大明显。 4、配子体 圆形或椭圆形，疟色素 分散，核增大，1个。胞质占 满胀大RBC。♀配子体，♂配 子体。
Байду номын сангаас
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
环 状 体 (早期 滋养 体)
p.f.
环较大，核1 环纤细，核1
个,占RBC直 个或2个，占
30000 红内裂殖 12-24 子 36-48h 配子体 圆形 无
新月蜡肠
蚊内发育 105 / T- 111 / T-16 14.5
形态
• 疟原虫包括核、胞浆和色素。 • 吉氏或瑞氏染色：核呈鲜红色或紫红色 ，胞浆呈兰色，色素呈黄褐色或深褐色 。
形态 以p.v.为例。吉氏或瑞氏染色。
1、环状体（早期滋养体） 胞质环状、蓝色。细胞 核1个，红色。 2、滋养体 胞核增大，胞质增多 。伪足、疟色素（棕黄色） 、薛氏小点（淡黄色）、被 寄生RBC胀大。
子孢子注进人体。
（2）输血感染。 （3）胎传感染。
4、在RBC内发育时间： p.v.和 p.f. 48h p.m. 72h
生物学特征
P.V. 红外发育 8d 休眠体 有 P.F. 5d 无 斑点 P.V. 薛氏 P.F. 茂氏
疟色素
棕黄色 黑褐色
8-26
红外裂殖 10000 子 增殖周期 48h RBC胀 大 有
血 片
制
作
采血部位：无名指或耳垂末梢血液。小孩在足 后根。 采血时间：p.v. 在发作数小时至10余小时内。 p.f. 在发作开始时采血。 血液涂片：
染色方法
• 一、吉氏染色： 用甲醇固定薄血膜，待干。将吉氏 染液用水配成3%的稀释液，用滴管将此稀释液滴在 厚、薄血膜上，染色25-30分钟后，用水沿玻片边缘 轻轻冲洗，晾干。大批血片染色时可将玻片插入染色 缸内染色。 • 二、 瑞氏染色： 染色时，在厚、薄血膜间用蜡笔划 一条横线，在厚血膜上加清水2~3滴溶去血红蛋白， 在薄血膜上直接加约1ml瑞氏染液染色2分钟，然后 在薄血膜上再加与染液等量的水、稀释，将染液引到 厚血膜上，使厚、薄血膜同时再染色5~6分钟，水洗 晾干。
红细胞外期
子孢子侵入人体后30分钟内存在于血液循 环里，而随后即离开周围血液，这个阶 段血液内无任何时期的疟原虫。恶性疟 到第7天，间日疟到第9天，血液的感染 性才恢复。 • 红前期裂体增殖时间为：间日疟8天，恶 性疟5.5～6天，蛋形疟9天，三日疟11～ 12天。
迟发性红细胞外期
• 间日疟、蛋型疟有迟发性红外期，且三 日疟感染原可在5～8年原再发，最长者 达30～40年。 • 通常认为恶性疟原虫没有迟发性红外期 。
裂殖体和配子体
• 除虫体略有缩小而着色较深外，几乎与 薄血片一样。
径1/3，常见 RBC直径1/5.
1个原虫。
常见2个原虫
。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
虫体变大，
滋 养 体
p.f.
外周血液难
形状不规则 查到，疟色 ，伪足、空 素黑褐色。 泡、疟色素 。RBC胀大
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
未 成 熟 裂 殖 体
p.f.
中看不到，核 ，疟色素集成
红细胞外期
人体疟原虫的红细胞外期（红外期）是指 由雌蚊叮咬，子孢子进入人体后，在肝 脏实质细胞内进行的裂体增殖，称红细 胞前期（红前期）。红前期是指子孢子 随按蚊叮咬侵入人体后，尚未进入红细 胞内发育前，在肝实质细胞内进行裂体 增殖的阶段。在肝实质细胞发育的裂殖 体均称潜隐体。成熟的潜隐体分裂出来 的裂殖子则称潜隐子。
红细胞内期
• 潜隐子进入红细胞便开始在红细胞内进行裂体 增殖，这个时期称为红细胞内期（红内期）。 潜隐子进入红细胞后成为环状体，摄食红细胞 内的血红蛋白及其他营养，渐渐发育长大，细 胞浆呈阿米巴活动，称阿米巴样体或滋养体。 疟原虫摄食血红蛋白后的代谢产物，积蓄在细 胞浆内，成为疟色素。随着虫体发育，色素逐 渐增多。虫体发育到一定程度，核开始分裂， 经过反复分裂，即有一定数量的裂殖子。
分布
• 高传播地区：云南、海南 • 疫情不稳定地区：湖北、安徽、河南、 江苏等 • 基本控制地区：
分布
分布
• 全国有15个省、自治区近三亿人口的548个县 仍受疟疾威胁， • 其中 7个省的 29个县年发病率超过1%。 • 恶性疟疾仍在7个省、自治区部分县市流行， 其中已知有31个县出现抗氯喹株。 我省疟疾主要在襄樊、随州、孝感、荆门四市 的18个县（市、区）流行
• >1 million deaths each year
我国疟区分布：
1、北纬33以北 低疟区 单纯流行p.v. • 2、北纬25－33 中、低疟区 p.v.（重） • p.f.(存在) p.m.(少见) • 3、北纬25 以南 高疫区(山区) 低疟区(平原) • p.f.(多见) p.v.(次之)
影响染色效果的因素
• 血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片制作质量好 坏等有关外，还受到以下几个因素的影响： • （一）染料和溶剂的质量 染料、甲醇和甘油如果不 纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而影响染色效果。因 此必须用分析纯的甲醇和中性甘油，而且在配制时所 用的器具必须干净而无水份。 • （二） 染液的新旧 新配制的染液因色素尚未充分溶 解，染色力较弱且常呈偏碱性．染液存放时间越久， 染色力越强，尤以吉氏染液更甚。通常在染液配制 1~2周后才使用。盛装染液的瓶子应加塞盖密，以防 吸潮而影响染液质量。
生活史
子孢子
囊合子
动合子
有性生殖 无性生殖
合子 ♀♂配子
在蚊体内
子孢子
迟发型
在人体内
♀♂配子体
裂殖子
速发型
裂殖体 裂殖体
裂殖子 裂殖子
RBC外期（在肝细胞内）
环状体
裂殖体 滋养体
RBC内期（在红细胞内）
生活史
1、终宿主：按蚊 中间宿主：人
2、感染期；子孢子
3、感染方式： （ 1 ） 人 被 含 子 孢 子 按 蚊 叮 咬 ，
疟原虫
malaria parasite
种类
1、间日疟原虫 （Plasmodium vivax）(P.v.)
2、三日疟原虫 （P. malariae）
3、恶性疟原虫 (P. falciparum)
(P.m.)
(P.f.)
4、卵形疟原虫 (P. ovale)
(P.o.)
Plasmodium disease statistics:
镜下形态
大滋养体
裂子体
厚血片形态
• 小滋养体：呈环状或因空泡消失而变成 各种形状，形状的改变因胞浆向核的一 侧，或同时向二侧收缩，或围住核，或 环中间有几处断裂开而决定。 镜检时常见“！”、 “，”、“飞 鸟”、“V”形 和“鸟眼”等。
大滋养体
• 间日疟大滋养体运动活泼，空泡大，故形态变 化较大， 呈阿米巴样或缩成各种形状，常见 有些原虫的胞浆缩为圆形，核和色素均被包在 中间，着色很深，只能看到深兰色的胞浆和黄 褐色的色素折光，核模糊不洁，或仅于调节显 微镜的亮光时，才隐约可见。有些 胞浆皱缩断裂成几个团块，大小不 一，互不连接，核位于胞浆之中或 外边，色素分布不匀。有些则仅见 胞浆和色素而核看不清楚。
团块状，黑褐 色
较大，核分裂 通常在外周血
为2个以上， 均匀 。RBC
疟色素分布不 分裂为2个以上
胀大。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
成 熟 裂 殖 体
p.f.
裂殖子12－ 外周血液难
24个,平均16 查到，裂殖
个。疟色素 子8－36个，
成堆。RBC 平均18－24
胀大。 个，疟色素
集中。
疟原虫 计数
• 1.半定量计数:厚血膜 每个视野观察到疟原虫 平均数估计疟原虫密度。
• • • • • 少：厚血膜疟原虫数小于10个、平均每个视野小于1 +：100个视野中平均每个视野1-5个 ++： 100个视野中平均每个视野6-10个 +++： 100个视野中平均每个视野11-100个 ++++： 100个视野中平均每个视野100以上
疟疾的实验诊断
病原检查 免疫诊断
1.查抗原 可诊断现症病人和带虫者 。血中有疟原虫时才能查出 其抗原，一旦治愈，抗原在 短期内即行消失。 2.查抗体 适用于多次寒热发作又未 查明原因者。原虫血症后1周 可查出抗体，故没有早期诊 断价值。 3.查DNA
1、吉氏染色法： 2、瑞氏染色法： 外周血制成厚、薄 血膜。 3、荧光素吖啶橙染色
伊红美兰染剂的染色作用和原理
• 染色剂种类可分为水溶液和酒精溶液两 类。水溶液包括罗氏染液，费氏染液和J ．S . B染液等，酒精溶液包括吉氏染液 ，瑞氏染液等。这些染液的主要染料都 含有美兰、伊红和美兰氧化后的天青。 染色的原理是染料与被染料物的阴阳离 子互相吸附而结合的一种化学作用。
• 伊红和带阳电的蛋白质(NH3+)相结合，伊 红被吸附而成红色，美兰可和带阴电的 蛋白质(COO-)相结合，美兰被吸附而成 兰色。若蛋白质本身的阴阳电荷相等， 既能与伊红结合，又能与美兰结合，则 被染成兰红相混的紫红色。 美兰和伊红 都不能使核着色，由天青起染媒作用才 能使其作色。疟原虫的核主要是天青和 伊红合并染的，在染色血片时稀释染液 的水要稍偏硷性(pH7.2)环状体的原浆才 能清晰可见。
• （三） 染液稀释后的使用时间 吉氏和瑞氏染液的主 要成份是美蓝，伊红和美蓝氧化产生的天青，三者能 在酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊红遇到美蓝和天 青即产生沉淀。因此，必须在稀释染液当时使用，一 般在半小时内染色力最强。 • （四）染液的稀释浓度 染液的浓度高，其着色就快 而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛氏点粗大显著，但 颜色常偏碱；染液浓度过低则染色时间久，颜色偏酸 ，薛氏点不明显或消失。 • （五）染色时间 染色时间长染色效果好，反之较差 。室温高则着色快，染色时间可略缩短，气温低可适 当延长。因此染色时间应根据染液的质量、新旧、稀 释浓度和气温而适当增减。
• 成熟的裂殖体破裂，裂殖子选逸，一部分被吞 噬细胞吞食，一部分进入正常红细胞进行第一 次裂体增殖。经过数次裂体增殖后，部分进入 红细胞的裂殖子在红细胞内不再进行无性分裂 ，而逐渐发育成为配子体。一般发病5～12天 ，成熟的配子体才在周围血液内出现。疟原虫 在红细胞内完成裂体增殖周期所需的时间有所 不同。间日疟、蛋形疟为48小时，恶性疟为36 ～48小时，三日疟为72小时。
• （六）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲 洗用水应选择pH7.0-7.2的清洁水，通常是新 鲜的蒸馏水或过滤的冷开水、以及自来水等。 如果偏酸或偏碱，可用缓冲蒸馏水调整。染色 后发现血膜颜色偏蓝（偏碱）或偏红（偏酸） 时，可用与之相反的酸、碱度水冲洗血片予以 纠正。 • （七）注意 染色后不要直接将染液倒掉，应 沿玻片或染色缸边缘加水使染液表面一层溢出 ，并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
配 子 体
p.f.
月形，核1个 散。
圆形核1个， 腊肠形或新
充满胀大 分散。
RBC。疟色 。疟色素分
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
除环状体，
p.f.
RBC大小正
被寄 各期RBC均 常或缩小、 生 RBC 胀大、色浅 色浅。茂氏
。薛氏小点 小点。
。
50%
P. f.
7%
P.M.
<1%
P.O.
43%
P.V.
分布
100 多个国家和地区流行疟疾
2.4 billion people at risk (40% world’s population) 300-500 million cases each year
• 2、厚血膜疟原虫计数：疟原虫数/ul血= 疟原虫数/白细胞数*白细胞数/ ul血。计 数200个以上白细胞，白细胞数/ ul血： 6000。 • 3、薄血膜疟原虫计数：疟原虫数/ul血= RBC疟原虫感染率* RBC数/ ul血。检查 1000个RBC， 男：500万个/ ul血，女： 450万个/ ul血
孢子生殖 雌按蚊叮咬疟疾患者，疟原虫随血液进入蚊 胃内，其他各期原虫在蚊胃中均被破坏和消 化，只剩下大小配子体（即 雌雄配子体）继续在蚊胃内 发育。配子、合子、动合子、 卵囊，发育至这个阶段约需 24～48小时。
随后，卵囊逐渐长大，呈瘤状向蚊胃壁外突起 。在卵囊内，核和细胞浆进行 孢子增殖，形成子孢子。一个 囊内可有1千以至上万个子孢 子。成熟的卵囊破裂后，子孢 子通过蚊体的血腔到达唾液腺。
3、裂殖体
核分裂、胞质也分裂，形成裂殖子。疟色 素成堆。被寄生RBC胀大明显。 4、配子体 圆形或椭圆形，疟色素 分散，核增大，1个。胞质占 满胀大RBC。♀配子体，♂配 子体。
Байду номын сангаас
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
环 状 体 (早期 滋养 体)
p.f.
环较大，核1 环纤细，核1
个,占RBC直 个或2个，占
30000 红内裂殖 12-24 子 36-48h 配子体 圆形 无
新月蜡肠
蚊内发育 105 / T- 111 / T-16 14.5
形态
• 疟原虫包括核、胞浆和色素。 • 吉氏或瑞氏染色：核呈鲜红色或紫红色 ，胞浆呈兰色，色素呈黄褐色或深褐色 。
形态 以p.v.为例。吉氏或瑞氏染色。
1、环状体（早期滋养体） 胞质环状、蓝色。细胞 核1个，红色。 2、滋养体 胞核增大，胞质增多 。伪足、疟色素（棕黄色） 、薛氏小点（淡黄色）、被 寄生RBC胀大。
子孢子注进人体。
（2）输血感染。 （3）胎传感染。
4、在RBC内发育时间： p.v.和 p.f. 48h p.m. 72h
生物学特征
P.V. 红外发育 8d 休眠体 有 P.F. 5d 无 斑点 P.V. 薛氏 P.F. 茂氏
疟色素
棕黄色 黑褐色
8-26
红外裂殖 10000 子 增殖周期 48h RBC胀 大 有
血 片
制
作
采血部位：无名指或耳垂末梢血液。小孩在足 后根。 采血时间：p.v. 在发作数小时至10余小时内。 p.f. 在发作开始时采血。 血液涂片：
染色方法
• 一、吉氏染色： 用甲醇固定薄血膜，待干。将吉氏 染液用水配成3%的稀释液，用滴管将此稀释液滴在 厚、薄血膜上，染色25-30分钟后，用水沿玻片边缘 轻轻冲洗，晾干。大批血片染色时可将玻片插入染色 缸内染色。 • 二、 瑞氏染色： 染色时，在厚、薄血膜间用蜡笔划 一条横线，在厚血膜上加清水2~3滴溶去血红蛋白， 在薄血膜上直接加约1ml瑞氏染液染色2分钟，然后 在薄血膜上再加与染液等量的水、稀释，将染液引到 厚血膜上，使厚、薄血膜同时再染色5~6分钟，水洗 晾干。
红细胞外期
子孢子侵入人体后30分钟内存在于血液循 环里，而随后即离开周围血液，这个阶 段血液内无任何时期的疟原虫。恶性疟 到第7天，间日疟到第9天，血液的感染 性才恢复。 • 红前期裂体增殖时间为：间日疟8天，恶 性疟5.5～6天，蛋形疟9天，三日疟11～ 12天。
迟发性红细胞外期
• 间日疟、蛋型疟有迟发性红外期，且三 日疟感染原可在5～8年原再发，最长者 达30～40年。 • 通常认为恶性疟原虫没有迟发性红外期 。
裂殖体和配子体
• 除虫体略有缩小而着色较深外，几乎与 薄血片一样。
径1/3，常见 RBC直径1/5.
1个原虫。
常见2个原虫
。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
虫体变大，
滋 养 体
p.f.
外周血液难
形状不规则 查到，疟色 ，伪足、空 素黑褐色。 泡、疟色素 。RBC胀大
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
未 成 熟 裂 殖 体
p.f.
中看不到，核 ，疟色素集成
红细胞外期
人体疟原虫的红细胞外期（红外期）是指 由雌蚊叮咬，子孢子进入人体后，在肝 脏实质细胞内进行的裂体增殖，称红细 胞前期（红前期）。红前期是指子孢子 随按蚊叮咬侵入人体后，尚未进入红细 胞内发育前，在肝实质细胞内进行裂体 增殖的阶段。在肝实质细胞发育的裂殖 体均称潜隐体。成熟的潜隐体分裂出来 的裂殖子则称潜隐子。
红细胞内期
• 潜隐子进入红细胞便开始在红细胞内进行裂体 增殖，这个时期称为红细胞内期（红内期）。 潜隐子进入红细胞后成为环状体，摄食红细胞 内的血红蛋白及其他营养，渐渐发育长大，细 胞浆呈阿米巴活动，称阿米巴样体或滋养体。 疟原虫摄食血红蛋白后的代谢产物，积蓄在细 胞浆内，成为疟色素。随着虫体发育，色素逐 渐增多。虫体发育到一定程度，核开始分裂， 经过反复分裂，即有一定数量的裂殖子。
分布
• 高传播地区：云南、海南 • 疫情不稳定地区：湖北、安徽、河南、 江苏等 • 基本控制地区：
分布
分布
• 全国有15个省、自治区近三亿人口的548个县 仍受疟疾威胁， • 其中 7个省的 29个县年发病率超过1%。 • 恶性疟疾仍在7个省、自治区部分县市流行， 其中已知有31个县出现抗氯喹株。 我省疟疾主要在襄樊、随州、孝感、荆门四市 的18个县（市、区）流行
• >1 million deaths each year
我国疟区分布：
1、北纬33以北 低疟区 单纯流行p.v. • 2、北纬25－33 中、低疟区 p.v.（重） • p.f.(存在) p.m.(少见) • 3、北纬25 以南 高疫区(山区) 低疟区(平原) • p.f.(多见) p.v.(次之)
影响染色效果的因素
• 血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片制作质量好 坏等有关外，还受到以下几个因素的影响： • （一）染料和溶剂的质量 染料、甲醇和甘油如果不 纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而影响染色效果。因 此必须用分析纯的甲醇和中性甘油，而且在配制时所 用的器具必须干净而无水份。 • （二） 染液的新旧 新配制的染液因色素尚未充分溶 解，染色力较弱且常呈偏碱性．染液存放时间越久， 染色力越强，尤以吉氏染液更甚。通常在染液配制 1~2周后才使用。盛装染液的瓶子应加塞盖密，以防 吸潮而影响染液质量。
生活史
子孢子
囊合子
动合子
有性生殖 无性生殖
合子 ♀♂配子
在蚊体内
子孢子
迟发型
在人体内
♀♂配子体
裂殖子
速发型
裂殖体 裂殖体
裂殖子 裂殖子
RBC外期（在肝细胞内）
环状体
裂殖体 滋养体
RBC内期（在红细胞内）
生活史
1、终宿主：按蚊 中间宿主：人
2、感染期；子孢子
3、感染方式： （ 1 ） 人 被 含 子 孢 子 按 蚊 叮 咬 ，
疟原虫
malaria parasite
种类
1、间日疟原虫 （Plasmodium vivax）(P.v.)
2、三日疟原虫 （P. malariae）
3、恶性疟原虫 (P. falciparum)
(P.m.)
(P.f.)
4、卵形疟原虫 (P. ovale)
(P.o.)
Plasmodium disease statistics:
镜下形态
大滋养体
裂子体
厚血片形态
• 小滋养体：呈环状或因空泡消失而变成 各种形状，形状的改变因胞浆向核的一 侧，或同时向二侧收缩，或围住核，或 环中间有几处断裂开而决定。 镜检时常见“！”、 “，”、“飞 鸟”、“V”形 和“鸟眼”等。
大滋养体
• 间日疟大滋养体运动活泼，空泡大，故形态变 化较大， 呈阿米巴样或缩成各种形状，常见 有些原虫的胞浆缩为圆形，核和色素均被包在 中间，着色很深，只能看到深兰色的胞浆和黄 褐色的色素折光，核模糊不洁，或仅于调节显 微镜的亮光时，才隐约可见。有些 胞浆皱缩断裂成几个团块，大小不 一，互不连接，核位于胞浆之中或 外边，色素分布不匀。有些则仅见 胞浆和色素而核看不清楚。
团块状，黑褐 色
较大，核分裂 通常在外周血
为2个以上， 均匀 。RBC
疟色素分布不 分裂为2个以上
胀大。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
成 熟 裂 殖 体
p.f.
裂殖子12－ 外周血液难
24个,平均16 查到，裂殖
个。疟色素 子8－36个，
成堆。RBC 平均18－24
胀大。 个，疟色素
集中。
疟原虫 计数
• 1.半定量计数:厚血膜 每个视野观察到疟原虫 平均数估计疟原虫密度。
• • • • • 少：厚血膜疟原虫数小于10个、平均每个视野小于1 +：100个视野中平均每个视野1-5个 ++： 100个视野中平均每个视野6-10个 +++： 100个视野中平均每个视野11-100个 ++++： 100个视野中平均每个视野100以上
疟疾的实验诊断
病原检查 免疫诊断
1.查抗原 可诊断现症病人和带虫者 。血中有疟原虫时才能查出 其抗原，一旦治愈，抗原在 短期内即行消失。 2.查抗体 适用于多次寒热发作又未 查明原因者。原虫血症后1周 可查出抗体，故没有早期诊 断价值。 3.查DNA
1、吉氏染色法： 2、瑞氏染色法： 外周血制成厚、薄 血膜。 3、荧光素吖啶橙染色
伊红美兰染剂的染色作用和原理
• 染色剂种类可分为水溶液和酒精溶液两 类。水溶液包括罗氏染液，费氏染液和J ．S . B染液等，酒精溶液包括吉氏染液 ，瑞氏染液等。这些染液的主要染料都 含有美兰、伊红和美兰氧化后的天青。 染色的原理是染料与被染料物的阴阳离 子互相吸附而结合的一种化学作用。
• 伊红和带阳电的蛋白质(NH3+)相结合，伊 红被吸附而成红色，美兰可和带阴电的 蛋白质(COO-)相结合，美兰被吸附而成 兰色。若蛋白质本身的阴阳电荷相等， 既能与伊红结合，又能与美兰结合，则 被染成兰红相混的紫红色。 美兰和伊红 都不能使核着色，由天青起染媒作用才 能使其作色。疟原虫的核主要是天青和 伊红合并染的，在染色血片时稀释染液 的水要稍偏硷性(pH7.2)环状体的原浆才 能清晰可见。
• （三） 染液稀释后的使用时间 吉氏和瑞氏染液的主 要成份是美蓝，伊红和美蓝氧化产生的天青，三者能 在酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊红遇到美蓝和天 青即产生沉淀。因此，必须在稀释染液当时使用，一 般在半小时内染色力最强。 • （四）染液的稀释浓度 染液的浓度高，其着色就快 而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛氏点粗大显著，但 颜色常偏碱；染液浓度过低则染色时间久，颜色偏酸 ，薛氏点不明显或消失。 • （五）染色时间 染色时间长染色效果好，反之较差 。室温高则着色快，染色时间可略缩短，气温低可适 当延长。因此染色时间应根据染液的质量、新旧、稀 释浓度和气温而适当增减。
• 成熟的裂殖体破裂，裂殖子选逸，一部分被吞 噬细胞吞食，一部分进入正常红细胞进行第一 次裂体增殖。经过数次裂体增殖后，部分进入 红细胞的裂殖子在红细胞内不再进行无性分裂 ，而逐渐发育成为配子体。一般发病5～12天 ，成熟的配子体才在周围血液内出现。疟原虫 在红细胞内完成裂体增殖周期所需的时间有所 不同。间日疟、蛋形疟为48小时，恶性疟为36 ～48小时，三日疟为72小时。
• （六）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲 洗用水应选择pH7.0-7.2的清洁水，通常是新 鲜的蒸馏水或过滤的冷开水、以及自来水等。 如果偏酸或偏碱，可用缓冲蒸馏水调整。染色 后发现血膜颜色偏蓝（偏碱）或偏红（偏酸） 时，可用与之相反的酸、碱度水冲洗血片予以 纠正。 • （七）注意 染色后不要直接将染液倒掉，应 沿玻片或染色缸边缘加水使染液表面一层溢出 ，并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
配 子 体
p.f.
月形，核1个 散。
圆形核1个， 腊肠形或新
充满胀大 分散。
RBC。疟色 。疟色素分
P.V.、P.F.疟原虫形态区别
p.v.
除环状体，
p.f.
RBC大小正
被寄 各期RBC均 常或缩小、 生 RBC 胀大、色浅 色浅。茂氏
。薛氏小点 小点。
。