儿茶素的制备方法

儿茶素的制备方法

1 萃取技术

1.1 溶剂萃取法

这是一种传统的制备儿茶素的技术，要是根据儿茶素易溶于水、酒精和乙酸乙酯等而不溶于氯仿等溶剂而将儿茶素提取或分离, 一般采用水、含水酒精或甲醇提取, 用氯仿或二氯甲烷去除咖啡因和色素, 再用乙酸乙酯萃取。

其原理为利用TP在不同溶液中的溶解度差异进行提取分离。

工艺路线：茶叶原料—溶剂提取—过滤—去杂质—相萃取—干燥—TP粗品。

1.2 超临界流体萃取(SFE)法

是利用在一定的温度和压力下萃取剂处于既非液态也非气态这种超临界流体状态这种特性, 对物质原料进行萃取分离。

宓晓黎等利用超临界CO2萃取茶叶中的EGCG等儿茶素成分的研究发现, 温度60℃、压力41.37Mpa静态萃取10min、改性剂(甲醇)加入量1ml, 动态萃取量为15ml时, EGCG可以完全被萃取, 儿茶素萃取率达到4%。Xue2Li Cao等通过分析和制备型SFE低温高压条件的一系列研究表明: 在温度40℃、压力25Mpa、80%的乙醇条件下, 485g茶叶原料用200ml修饰剂的4LCO2萃取, 能得到3.7g乙醇提取物, 经HPLC分析, 其中咖啡因占22%, EGCG占6.8%, ECG占6.5%。

工艺流程：茶末经SFE萃取——茶多酚粗品——纯化——纯度高的TP

2 沉淀法技术

此法主要是利用茶叶中儿茶素能与某些金属离子形成络合物这一化学性质从而使其达到分离, 也是一种较为常用的提取方法。主要

有重金属盐沉淀法, 钙盐沉淀法, 铝盐重沉淀法等。

盐析纯化儿茶素的工艺流程为: 茶多酚粗提液—盐析—过滤—(滤液)乙酸乙酯萃取回收—浓缩—干燥—成品。

3膜技术

利用超滤及纳滤膜对儿茶素的选择分离。

4层析技术

4．1吸附树脂和离子交换色谱技术

1991年Hi-roshi1Horita报道, 多种吸附树脂AmbeliteXAD - 2 , 4, 7, 8, 16和Duolite S-587,761, 862对儿茶素均有不同程度的吸附与解吸作用。NAK-9、NKA-Ⅱ较适宜茶多酚的分离纯化,并利用此树脂制得咖啡因4%～9%、EGCG 20 %儿茶素总量为34.9%的样品,如果用二氯甲烷预先洗脱咖啡碱,再用80%乙醇洗脱茶多酚,则制得总儿茶素为63%、EGCG 37%、咖啡因<2%的产品。用NK-S3树脂对茶多酚吸附解吸性能良好,吸附量可达81.55mg/g ,用乙醇、乙酸乙酯组成的混合洗脱剂5BV进行解吸,解吸率近100%。陈劲春在树脂对比试验时也发现,聚酰胺对儿茶素有好的吸附作用, 吸附量达76.43mg/g ,但同时得出此树脂对咖啡碱的吸附量也比较大, 达到53.67mg/g,难以达到真正

纯化的目的。

工艺流程：茶叶—热水—浸提—过滤—吸附柱吸附—解析—浓缩干燥—TP。

4.2凝胶柱层析技术

此方法分离机理类似于分子筛,样品中大分子化合物不能进入凝胶颗粒内部,只能在颗粒间移动,阻力小,移动快,走在前面,小分子化合物能自由扩散到凝胶内部,透过层析柱时阻力大,走在后面,由此经过一段时间洗脱,混合物各组分按分子大小而分离。

H．Horita利用Sephadex LH-20和Toyopearl HW-40制备儿茶素混合物, 纯化后儿茶素含量分别达到90.8%和97%。我国无锡轻工大王洪新也利用Sephadex LH-20柱以丙酮/水作梯度洗脱,并结合半制备液相色谱分离纯化得到儿茶素7种单体, 纯度均在99%以上。

4.3高速逆流色谱制备技术(HSCCC)

采用一根100多米长的空心柱(一般为聚四氯乙烯管),当仪器工作时,互不相溶的两相溶剂在绕成线圈的聚四氯乙烯管内具有单向性流体动力平衡性质,溶剂在管内作高速行星运转时,在螺旋管中实现高效接触、混合、分配和传递,由于样品中各组分在两相中的分配能力不同,导致在管内移动的速度也不一样,因而能使样品各组分得以分离。

4.4高效液相制备色谱法（HPLC）

工艺流程：TP粗品经柱分离纯化出儿茶素混合组分，再经HPLC 制备柱分离得到儿茶素单体组分。