第六节 多杀性巴氏杆菌
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第三篇主要的病原微生物
第十三章病原细菌
第六节多杀性巴氏杆菌
多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是畜禽巴氏杆菌病的病原,能使多种畜禽发生出血性败血症或传染性肺炎。本菌分布广泛,正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜,是一种条件性致病菌。
一、生物学特性
(一)形态与培养本菌为球杆状或短杆状,两端钝圆,大小为0.25~0.4μm ×0.5~2.5μm,单个存在,有时成双排列。无鞭毛,不形成芽孢,新分离的强毒株具有荚膜,革兰氏染色阴性。病畜的血液涂片或组织触片经美蓝或瑞氏染色时,可见典型的两极着色,即菌体两端染色深,中间浅(图13-12)。
本菌为需氧或兼性厌氧菌,对营养要求较严格,在普通培养基上生长贫瘠,在麦康凯培养基上不生长,在加有血液、血清或微量血红素的培养基上生长良好,最适温度为37℃,pH为7.2~7.4。在血清琼脂平板上培养24h,可形成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。在血琼脂平板上,长成水滴样小菌落,无溶血现象。在血清肉汤中培养,开始轻度浑浊,4~6d后液体变清朗,管底出现黏稠沉淀,振摇后不分散,表面形成菌环。
本菌可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露糖和半乳糖,产酸不产气。大多数菌株可发酵甘露醇,一般不发酵乳糖,可产生吲哚,MR和V-P试验均为阴性,不S,触酶和氧化酶均为阳性。
液化明胶,产生H
2
(二)血清型本菌主要以其荚膜抗原和菌体抗原区分血清型,前者有6个型,后者有16个型。1984年Carter提出本菌血清型的标准定名:以阿拉伯数字表示菌体抗原型,大写英文字母表示荚膜抗原型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5∶A为多,其次为8∶A;猪的以5∶A和6∶B为主,8∶A和2∶D其次;羊的以6∶B为多;家兔的以7∶A为主,其次是5∶A。C型菌是犬、猫的正常栖居菌,E型主要引发牛、水牛的流行性出血性败血症(仅见于非洲),F型主要发现于火鸡。
(三)抵抗力多杀性巴氏杆菌抵抗力不强,在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡。在阳光暴晒10min,或在56℃15min或60℃10min可被杀死。厩肥中可存活1个月,埋入地下的病死鸡,经4个月仍残存活菌。在干燥的空气中2~3d 可死亡。3%石炭酸、3%福尔马林、10%石灰乳、2%来苏尔、1%氢氧化钠等5min 可杀死本菌。对青霉素、链霉素、四环素、土霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。
二、致病性
本菌对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都有致病性,家畜中以猪最敏感,致猪肺疫,禽类中以鸭最易感,其次是鹅、鸡,致禽霍乱。急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型于黏膜关节等部位,发生出血性炎症等;慢性型则呈现萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠最
易感。
三、微生物学诊断
(一)镜检采取新鲜病料(渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等)涂片或触片,用碱性美蓝或瑞特氏染色液染色,镜检,如发现典型的两极浓染的短杆菌,结合流行病学及剖检,即可作初步诊断。但慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体,需进行分离培养和动物试验。
(二)分离培养最好用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养,麦康凯培养基上不生长,在血琼脂平板上生长良好,形成水滴样小菌落,不溶血,革兰氏染色为阴性球杆菌。将此菌接种在三糖铁培养基上可生长,使底部变黄。必要时可进一步做生化反应鉴定。(图13-13)
(三)动物试验用病料研磨制成1:10乳剂或24h肉汤培养液0.2~0.5ml,皮下注射小鼠、家兔或鸽,动物多于24~48h死亡。由于健康动物呼吸道内常可带菌,所以应参照患畜的生前临床症状和剖检变化,结合分离菌株的毒力试验,作出最后诊断。
若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型,则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。检测动物血清中的抗体,可用试管凝集、间接凝集、琼脂扩散试验或ELISA。
四、防治
疫苗免疫是控制畜禽巴氏杆菌的有效方法,猪可选用猪肺疫氢氧化铝甲醛苗,或用猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联苗,禽用禽霍乱弱毒苗,牛用牛出血性败血症氢氧化铝苗。预防和治疗还可用抗生素、磺胺类、喹诺酮类药物等,尤其在养猪、养禽生产中,药物预防也是行之有效的措施。