实验五-影响酶活力的因素
实验五影响酶活力的因素
实验10 影响酶活力的因素——正交实验法（碘量法测定酶活力）四个班，每班分16组两个同学一组目的要求：初步掌握正交实验设计法（简称正交法）的使用，运用正交法测定底物浓度、温度和pH这三种因素对酶活力的影响。
实验原理：酶反应受到多种因素的影响，如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和抑制剂等都能影响酶的反应速度。
这种多因素的实验可通过正交法即用—特制的表格——正交表来安排试验，计算和分析实验结果。
这样就能通过少量实验取得较好的效果。
实践证明正交法是一个多、好、快、省的方法，目前已广泛用于农业生产和科学实验中。
本实验运用正交法测定酶浓度、温度、PH值这三个因素对酶活性的影响，并求得在什么样的底物浓度、温度和pH值时酶的活性最大。
酶活力用硫代硫酸钠滴定法测定。
过氧化氢酶能把过氧化氢分解成水和氧，其活力大小以一定时间内一定量的酶所分解的过氧化氢量来表示。
被分解的过氧化氢量可用碘量法间接测定。
当酶促反应进行一定时间后，终止反应，然后以钼酸铵做催化剂，使未被分解的过氧化氢与碘化钾反应放出游离碘，再用硫代硫酸钠滴定碘。
其反应为：H2O2+2KI+H2SO4→I2+K2SO4+2H2OI2+Na2S2O4→2NaI+Na2S4O6反应完后，以样品溶液和空白溶液的滴定值之差求出被酶分解的过氧化氢量，即可计算出酶的活力。
实验器材：试管15毫升试管9*16=144支吸管1毫升2*16=32支吸管5毫升2*16=32支吸耳球16个漏斗1个研钵（或者搅碎机）1个（1台）恒温水浴锅3台铁架台16个蝴蝶夹16个酸碱两用滴定管16个100毫升的三角烧瓶3*16=48个烧杯500毫升18个（装好水放到恒温水浴锅里）实验所需药品：1. 0.01 mol/L 的过氧化氢溶液每组消耗50毫升，每班需16ⅹ50=800毫升1.1毫升过氧化氢溶液，用蒸馏水定容至1000毫升。
（用带盖白色试剂瓶分装10瓶。
分装1000毫升即可，其余3000用白色大试剂瓶装好备用）2. 1.8 mol/L 的硫酸溶液（每组消耗50毫升，每班需16ⅹ50=800毫升）共配4000毫升95毫升浓硫酸，用蒸馏水定容至1000毫升。
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。
淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。
此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。
因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。
从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
酶的基本性质实验报告
一、实验目的1. 了解酶的基本概念和特性。
2. 掌握酶的催化作用及其影响因素。
3. 学习酶活力测定方法。
4. 通过实验，加深对酶学理论的理解。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一、温和等特性。
酶的活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。
本实验通过测定酶活力，分析不同因素对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶制剂- 底物- 水浴锅- 移液器- 计时器- pH计- 温度计2. 实验仪器：- 酶活力测定仪- 分光光度计四、实验方法1. 酶活力测定：- 采用比色法测定酶活力。
- 将底物溶液和酶溶液混合，在一定温度和pH值下反应。
- 使用分光光度计测定反应体系在特定波长下的吸光度。
- 根据吸光度变化计算酶活力。
2. 不同因素对酶活性的影响：- 温度：在0℃、25℃、37℃、50℃、70℃等不同温度下测定酶活力。
- pH值：在pH值分别为3、5、7、9、11的缓冲溶液中测定酶活力。
- 底物浓度：在一定范围内改变底物浓度，测定酶活力。
- 酶浓度：在一定范围内改变酶浓度，测定酶活力。
五、实验结果与分析1. 酶活力测定结果：- 在不同温度下，酶活力随温度升高而增大，在37℃时达到最大值，之后随温度升高而降低。
- 在不同pH值下，酶活力在pH值为7时达到最大值，pH值过高或过低都会使酶活力降低。
- 在一定范围内，底物浓度和酶浓度对酶活力有显著影响。
2. 不同因素对酶活性的影响分析：- 温度：酶活性受温度影响较大，过高或过低的温度都会使酶失活。
- pH值：酶活性受pH值影响较大，不同酶的最适pH值不同。
- 底物浓度：在一定范围内，底物浓度越高，酶活力越大。
- 酶浓度：在一定范围内，酶浓度越高，酶活力越大。
六、实验结论1. 酶具有高效、专一、温和等特性。
2. 酶活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。
3. 在实际应用中，应根据酶的特性选择合适的反应条件，以提高酶的催化效率。
环境酸碱性对酶活性的影响
课题3 环境酸碱性对酶活性的影响课题概述：生物体内的各项代谢，只有在酶的参与下才能迅速进行。
酶的本质是蛋白质，其催化作用受环境酸碱性等条件的影响。
不同类酶均有其作用的最适pH，大于或小于该pH，酶的活性就会下降，直至完全遭到破坏。
双氧水对大多数生物体有害，而许多生物体内都有过氧化氢酶等来分解它。
过氧化氢酶H2O2————→ H2O + O2本实验将以酵母菌为过氧化氢酶来源，利用氧气浓度传感器来测定不同pH环境下酵母菌中该反应的速度，从而确定过氧化氢酶的最适酸碱度。
氧气浓度传感器可测定气体中0—27%范围的氧气的浓度。
其核心装置是一原电池，氧气分子进入其中被还原而引起电流变化，即氧气浓度决定了电流变化的大小，进而改变输出电压的大小。
因此通过对输出电压的测定即可确定气体中氧气的浓度。
目的：1．学会氧气浓度传感器的使用方法。
2．学会测定不同pH的环境下酶促反应的速率，并对各速率进行比较。
器材：实验材料：市售干酵母。
实验仪器及用品：TI—83 Plus图形计算器及CBL系统、氧气浓度传感器（附配套塑料瓶）、玻璃棒、温度计、100mL小烧杯、50mL量筒、刻度移液管、胶头滴管、蒸馏水洗瓶、吸水纸。
实验试剂：3% H2O2溶液、葡萄糖、pH=4 、pH=7、pH=10缓冲溶液。
步骤：一．实验准备1．缓冲溶液的配制：(1) pH=4：1000mL 0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液中加入2mL 0.1mol/L HCl。
(2) pH=7：1000mL 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液中加入582mL 0.1mol/L NaOH。
(3) pH=10：1000mL 0.05mol/L 碳酸氢钠溶液中加入214mL 0.1mol/L NaOH 。
2．0.5克葡萄糖溶解在pH=4 、pH=7、pH=10的缓冲溶液中，成为各pH下2%的葡萄糖溶液。
3．0.5g 干酵母溶解在25mL2%葡萄糖溶液中，搅拌均匀，放置5—10分钟。
影响酶活性的因素实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除影响酶活性的因素实验报告篇一：实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型：分离鉴定实验同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）三、主要仪器设备（必填）五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理（必填）四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析（必填）Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种：1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用benedict试剂检测反应产物。
benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。
na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2与benedict试剂无呈色反应。
酵母蔗糖酶实验报告
一、实验目的1. 学习酵母蔗糖酶的提取方法。
2. 掌握酶活力测定的原理和方法。
3. 了解酶的专一性及其影响因素。
二、实验原理酵母蔗糖酶是一种能够催化蔗糖水解成葡萄糖和果糖的酶。
本实验通过提取酵母细胞中的蔗糖酶，并在一定条件下测定其活力，以了解其催化活性。
三、实验材料与仪器材料：1. 酵母粉2. 蔗糖3. 缓冲液4. 斐林试剂5. 旋光仪仪器：1. 电子天平2. 研钵3. 移液器4. 恒温水浴锅5. 烧杯6. 试管7. 离心机四、实验步骤1. 酵母蔗糖酶的提取- 称取适量酵母粉，加入少量蒸馏水，研磨成匀浆。
- 将匀浆转移至离心管中，离心分离，收集上清液即为酵母蔗糖酶提取液。
2. 酶活力测定- 取适量提取液，加入含有蔗糖的缓冲液，置于恒温水浴锅中保温。
- 定时取样，用斐林试剂检测反应液中的还原糖含量。
- 根据还原糖含量计算酶活力。
3. 酶的专一性实验- 将提取液分别与蔗糖、淀粉等底物反应，观察酶的催化活性。
- 对比实验结果，分析酶的专一性。
4. 影响酶活力的因素实验- 分别在酸性、中性、碱性条件下进行酶活力测定，观察pH对酶活力的影响。
- 分别在不同温度下进行酶活力测定，观察温度对酶活力的影响。
五、实验结果与分析1. 酶活力测定- 酵母蔗糖酶提取液在37℃、pH 6.8条件下，酶活力最高，约为0.5单位/毫升。
2. 酶的专一性实验- 酵母蔗糖酶对蔗糖具有特异性催化作用，而对淀粉无催化活性。
3. 影响酶活力的因素实验- 酶活力受pH和温度的影响较大。
在pH 6.8、37℃条件下，酶活力最高；在酸性或碱性条件下，酶活力明显降低；在低温条件下，酶活力较低。
六、实验结论1. 成功提取了酵母蔗糖酶，并测定了其活力。
2. 酵母蔗糖酶具有特异性催化作用，对蔗糖具有高效催化活性。
3. 酶活力受pH和温度的影响较大，适宜的pH和温度有利于提高酶活力。
七、实验讨论1. 本实验中，酶活力的测定方法较为简单，但结果准确可靠。
酶活性的实验报告
一、实验目的1. 了解酶活性测定的基本原理和方法。
2. 探究温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一和可调节的特性。
酶活性是指酶催化反应的能力，通常用酶活力单位（U）表示。
在一定条件下，酶活力与反应速率成正比，即反应速率越快，酶活力越高。
本实验采用比色法测定酶活性。
在酶催化反应中，底物被转化为产物，同时产生一定量的有色物质。
通过测定有色物质的吸光度，可以计算出酶活力。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶：淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。
- 底物：淀粉、蛋白质、脂肪等。
- 抑制剂：碘化钠、氟化钠、氯化钠等。
- 激活剂：硫酸铵、氯化钙等。
- pH缓冲液：磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液等。
2. 实验仪器：- 紫外-可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管- 试管架- 秒表四、实验方法1. 酶活力测定：- 将酶和底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 根据吸光度计算酶活力。
2. 温度对酶活性的影响：- 将酶和底物混合，分别置于不同温度的水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同温度下酶活性的变化。
3. pH值对酶活性的影响：- 将酶和底物混合，分别置于不同pH值的缓冲液中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同pH值下酶活性的变化。
4. 底物浓度对酶活性的影响：- 将酶和不同浓度的底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
- 分析不同底物浓度下酶活性的变化。
5. 酶浓度对酶活性的影响：- 将不同浓度的酶与底物混合，置于恒温水浴锅中。
- 在一定时间内，每隔一段时间取出一定体积的反应液，用紫外-可见分光光度计测定吸光度。
酶特性实验报告
一、实验目的1. 了解酶的催化作用及其特性。
2. 掌握酶的专一性、温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
3. 学会使用实验方法检测酶的活性。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质，它能够加速生物体内的化学反应。
酶的催化作用具有以下特性：1. 专一性：酶对底物具有高度选择性，只催化特定的反应。
2. 温度依赖性：酶的活性随温度变化而变化，在一定温度范围内酶活性较高。
3. pH值依赖性：酶的活性受pH值影响，最适pH值下酶活性最高。
4. 激活剂和抑制剂：激活剂能够提高酶的活性，抑制剂则降低酶的活性。
本实验通过观察酶的专一性、温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活力的影响，进一步了解酶的特性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 唾液淀粉酶- 淀粉溶液- 蔗糖溶液- 碘液- 班氏试剂- 恒温水浴- 试管- 试管架- 滴管2. 实验仪器：- 电子天平- 烧杯- 移液器- 比色计四、实验方法1. 酶的专一性实验- 将淀粉溶液和蔗糖溶液分别加入试管中，分别加入唾液淀粉酶，观察淀粉溶液变蓝的时间。
- 加入碘液，观察蔗糖溶液是否变蓝。
2. 温度对酶活力的影响实验- 将淀粉溶液和唾液淀粉酶分别加入试管中，分别放入不同温度的水浴中，观察酶活性随温度变化的情况。
3. pH值对酶活力的影响实验- 将淀粉溶液和唾液淀粉酶分别加入试管中，分别加入不同pH值的缓冲液，观察酶活性随pH值变化的情况。
4. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响实验- 在淀粉溶液中加入激活剂和抑制剂，观察酶活性随激活剂和抑制剂加入量的变化。
五、实验结果与分析1. 酶的专一性实验- 淀粉溶液加入唾液淀粉酶后，变蓝时间明显缩短，说明唾液淀粉酶对淀粉具有催化作用。
- 蔗糖溶液加入唾液淀粉酶后，未观察到变蓝现象，说明唾液淀粉酶对蔗糖无催化作用。
2. 温度对酶活力的影响实验- 随着温度的升高，酶活性逐渐增强，在40℃时酶活性达到最高。
- 温度超过40℃后，酶活性开始下降，说明高温抑制了酶的活性。
酶活力测定实验报告
酶活力测定实验报告一、实验目的酶活力测定实验的主要目的是了解酶的活性及其影响因素，掌握测定酶活力的基本方法和原理，以及学会使用相关仪器和试剂进行实验操作。
二、实验原理酶是生物体内具有催化作用的蛋白质或核酸。
酶活力是指酶催化一定化学反应的能力，通常用在一定条件下酶催化反应的速度来表示。
本实验采用分光光度法测定酶活力，其原理是基于酶催化反应所产生的产物在特定波长下具有光吸收特性，通过测定反应体系在该波长下吸光度的变化，可以计算出酶催化反应的速度，从而反映酶的活力。
以过氧化氢酶为例，过氧化氢酶能够催化过氧化氢分解为水和氧气。
在本实验中，通过加入一定量的过氧化氢溶液，使其与过氧化氢酶反应，然后使用高锰酸钾溶液滴定剩余的过氧化氢，根据高锰酸钾溶液的用量计算出过氧化氢酶的活力。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜的猪肝或土豆等富含过氧化氢酶的组织。
过氧化氢溶液（3%）。
高锰酸钾溶液（002 mol/L）。
磷酸缓冲液（pH 70）。
2、实验仪器研钵。
离心机。
移液器。
分光光度计。
恒温水浴锅。
试管、量筒、容量瓶等玻璃仪器。
四、实验步骤1、酶液的制备称取新鲜的猪肝或土豆组织_____g，置于研钵中，加入适量的磷酸缓冲液（pH 70），研磨成匀浆。
将匀浆转移至离心管中，以_____rpm 的转速离心_____min，取上清液即为粗酶液。
2、酶活力的测定取_____支试管，分别标记为 1、2、3。
在 1 号试管中加入_____mL 磷酸缓冲液（pH 70）作为空白对照，在 2、3 号试管中分别加入_____mL 粗酶液。
向 1、2、3 号试管中分别加入_____mL 过氧化氢溶液（3%），立即摇匀，并同时开始计时。
在反应进行_____min 后，迅速向 1、2、3 号试管中分别加入_____mL 浓度为 2 mol/L 的硫酸溶液终止反应。
用移液器吸取_____mL 反应液，加入到另一支装有_____mL 高锰酸钾溶液（002 mol/L）的试管中，摇匀。
酶比活力测定实验报告
摘要：本实验旨在通过测定酶的比活力，了解酶的催化效率和活性水平。
通过一系列实验操作，包括酶液的制备、反应体系的建立、酶活力的测定等，最终计算出酶的比活力。
实验结果表明，所测酶具有较高的比活力，符合预期目标。
关键词：酶比活力；酶活力测定；催化效率一、实验目的：1. 学习酶比活力的测定方法。
2. 了解影响酶活力的因素。
3. 计算并分析酶的比活力。
二、实验原理：酶比活力是指单位重量酶蛋白所具有的酶活力。
其计算公式为：\[ \text{酶比活力} = \frac{\text{酶活力}}{\text{酶蛋白含量}} \]其中，酶活力通常以每分钟转化一定量的底物所释放的产物量表示，酶蛋白含量以毫克为单位。
三、实验材料：1. 酶制剂：蛋白酶、淀粉酶等。
2. 底物：蛋白质、淀粉等。
3. 试剂：盐酸、氢氧化钠、硫酸铜等。
4. 仪器：分光光度计、恒温水浴锅、移液器、试管等。
四、实验方法：1. 酶液的制备：根据说明书，将酶制剂按照一定比例溶解于缓冲液中，制备成一定浓度的酶液。
2. 反应体系的建立：将底物、酶液和缓冲液按一定比例混合，置于恒温水浴锅中，在适宜的温度下进行反应。
3. 酶活力的测定：在反应过程中，定期取样，用分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，根据反应速率计算酶活力。
4. 酶蛋白含量的测定：采用双缩脲法测定酶蛋白含量。
五、实验步骤：1. 准备酶液、底物和试剂。
2. 按照实验方法，制备酶液和反应体系。
3. 在恒温水浴锅中进行反应，并定期取样。
4. 用分光光度计测定底物浓度变化，计算酶活力。
5. 测定酶蛋白含量。
6. 计算酶比活力。
六、实验结果与分析：1. 实验结果：- 酶活力：0.5 U/mg- 酶蛋白含量：1.0 mg/mL- 酶比活力：0.5 U/mg2. 分析：- 通过实验，我们成功测定了酶的比活力，结果与预期相符。
- 酶比活力较高，表明该酶具有较好的催化效率。
- 影响酶活力的因素有温度、pH值、底物浓度等，本实验中温度和pH值均控制在适宜范围内，对酶活力的影响较小。
酶活力的测定
4. 抑制剂和激活剂
抑制剂和激活剂是影 响酶活力的其他因素 。抑制剂会抑制酶的 活性，而激活剂则会 增强酶的活性。在测 定酶活力时，需要排 除抑制剂和激活剂的 影响，并进行适当的 样品处理和数据处理 以确保实验结果的准 确性
酶活力的测定
酶活力的测定
三、实验步骤与操作要点
酶活力测定的实验步骤包括样品准备、反应体系配制、温度控制、时间记录、产物或底物 浓度测定等。在操作过程中需要注意以下几点
酶活力是指酶催化特定化学反应的能力， 通常以单位时间内转换底物的摩尔数来 表示
通过测定酶活力，可以了解酶的性质、 作用机制以及底物特异性等方面的信息一、酶活力测 定的基本原理
酶活力测定的基本原 理是利用酶催化的化 学反应速率与酶浓度 成正比的性质，通过 测定反应速率来推算 酶的浓度和活力。常 用的方法有终点法、 动力学法和连续监测 法
酶活力测定结果受到多种因素 的影响，包括温度、pH值、底 物浓度、抑制剂和激活剂等。 为了获得准确的测定结果，需 要严格控制实验条件，并进行 适当的样品处理和数据处理
酶活力的测定
1. 温度
温度是影响酶活力的 重要因素之一。大多 数酶在一定的温度范 围内具有最佳活性， 温度过高或过低都会 影响酶的活性。因此 ，在测定酶活力时， 需要选择适当的温度 ，并进行温度控制以 确保实验结果的准确 性
酶活力的测定
四、时间记录
时间记录是酶活力测定的关键步骤之一。在酶促反应过程中，需要准确记录反应时间，以 便计算反应速率和产物生成量。在时间记录过程中，需要注意控制反应时间，避免过长或 过短的反应时间对实验结果的影响
酶活力的测定
五、产物或底物浓 度测定
产物或底物浓度的测定是酶活力 测定的关键步骤之一。通过测定 产物或底物的浓度，可以计算出 酶的活性。在浓度测定过程中， 需要注意选择适当的测定方法， 并进行准确的浓度计算。常用的 浓度测定方法有分光光度法、色 谱法等
酶的实验报告结果
一、实验目的通过本次实验，我们旨在了解酶的特性，包括酶的专一性、温度、pH值对酶活力的影响，以及激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效性、专一性和可调节性等特点。
在特定的条件下，酶可以显著提高化学反应的速率。
本实验通过观察酶在不同条件下的催化效果，分析酶的特性。
三、实验材料与仪器1. 材料：淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖、蔗糖、氯化钠、氢氧化钠、盐酸、硫酸铜、苯酚、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠溶液、盐酸溶液、硫酸铜溶液等。
2. 仪器：恒温水浴锅、电子天平、试管、试管架、移液器、滴定管、烧杯、漏斗、滤纸等。
四、实验方法与步骤1. 酶的专一性实验（1）取两只试管，分别加入等量的淀粉溶液和蔗糖溶液。
（2）向两只试管中分别加入等量的淀粉酶和蛋白酶。
（3）将两只试管放入恒温水浴锅中，在37℃下反应30分钟。
（4）用苯酚-硫酸法检测反应后的还原糖含量。
2. 温度对酶活力的影响实验（1）取三只试管，分别加入等量的淀粉溶液。
（2）向三只试管中分别加入等量的淀粉酶。
（3）将三只试管分别放入不同温度（0℃、25℃、50℃）的恒温水浴锅中，反应30分钟。
（4）用苯酚-硫酸法检测反应后的还原糖含量。
3. pH值对酶活力的影响实验（1）取三只试管，分别加入等量的淀粉溶液。
（2）向三只试管中分别加入等量的淀粉酶。
（3）将三只试管分别加入不同pH值的缓冲溶液（pH 4.0、pH 6.8、pH 8.0）。
（4）将三只试管放入恒温水浴锅中，在37℃下反应30分钟。
（5）用苯酚-硫酸法检测反应后的还原糖含量。
4. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响实验（1）取两只试管，分别加入等量的淀粉溶液。
（2）向两只试管中分别加入等量的淀粉酶。
（3）向其中一只试管中加入适量的激活剂（如氯化钠），另一只试管中加入适量的抑制剂（如氢氧化钠）。
（4）将两只试管放入恒温水浴锅中，在37℃下反应30分钟。
（5）用苯酚-硫酸法检测反应后的还原糖含量。
活力测定实验报告
一、实验目的1. 了解活力测定的基本原理和方法。
2. 掌握不同活力测定方法的操作步骤。
3. 通过实验，学会运用活力测定方法分析生物样品。
二、实验原理活力测定是研究生物样品中酶、微生物等生物活性的一种方法。
实验中，通过加入特定底物，使生物样品中的活性成分发挥作用，从而产生一系列可检测的产物。
根据产物的变化，可以计算出生物样品的活力。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：酶、微生物、底物、缓冲液、指示剂等。
2. 仪器：恒温水浴锅、分光光度计、离心机、移液器、试管等。
四、实验方法1. 酶活力测定（1）实验原理：酶催化底物反应，产生可检测的产物。
通过测定产物浓度，计算出酶的活力。
（2）实验步骤：① 准备酶液、底物、缓冲液等。
② 将酶液、底物、缓冲液混合，置于恒温水浴锅中反应。
③ 反应结束后，取出反应液，测定产物浓度。
④ 根据产物浓度和反应条件，计算出酶的活力。
2. 微生物活力测定（1）实验原理：微生物在一定条件下，能够利用底物进行代谢，产生可检测的产物。
通过测定产物浓度，计算出微生物的活力。
（2）实验步骤：① 准备微生物培养液、底物、缓冲液等。
② 将微生物培养液接种到含有底物的培养基中。
③ 在适宜的温度和pH条件下培养微生物。
④ 收集培养液，测定产物浓度。
⑤ 根据产物浓度和培养条件，计算出微生物的活力。
3. 活力测定方法比较（1）实验原理：比较不同活力测定方法的优缺点，选择合适的测定方法。
（2）实验步骤：① 分别采用不同的活力测定方法对同一生物样品进行测定。
② 比较不同方法的测定结果，分析优缺点。
五、实验结果与分析1. 酶活力测定结果根据实验数据，计算出酶的活力。
分析酶活力与底物浓度、温度、pH等条件的关系。
2. 微生物活力测定结果根据实验数据，计算出微生物的活力。
分析微生物活力与底物浓度、温度、pH等条件的关系。
3. 活力测定方法比较结果比较不同活力测定方法的优缺点，分析适用范围。
六、实验结论1. 酶活力测定方法适用于测定酶的催化活性。
实验五影响酶活性的因素
一、目的
影响酶活性的因素
1.了解温度、pH对酶活性的影响； 2.了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、原理
酶的催化活性受温度的影响很大。酶促 反应在低温时进行较慢，随着温度升高而加 快，当达到其最适温度时，酶促反应速度最 快，以后又随着温度升高而减慢，以至完全
停止反应。当酶促反应速度达到最大值时的 温度，称为酶作用的最适温度。唾液淀粉酶 的最适温度为37℃。 酶的活性受环境pH的影响极为显著。通 常，各种酶只有在一定的pH范围内才表现它 的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值， 称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时， 酶的活性逐渐降低。唾液淀粉酶的最适pH值 约为6.8。
附: pH 5.0、6.8、8.0三种缓冲液的配制
锥形瓶号 pH值 1 2 5.0 6.8 0.2mol/LNa2HPO4 （mL） 10.30 15.45 0.1mol/L柠檬酸 （mL） 9.70 4.55
3
8.0
19.45
0.55
2. 器材 ：
(1) 试管与试管架 （4）沸水浴 （6）烧杯 （8）滴管 （2）恒温水浴锅 （3）冰浴 （5）吸管 （7）锥形瓶 （9）白瓷板等。
酶的活性常常受某些物质的影响，有 些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂； 有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制 剂。Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，而Cu2+为其 抑制剂。 本实验以唾液淀粉酶为例，此酶只能催 化淀粉的水解，最终产物为麦芽糖和少量的 葡萄糖 ；淀粉水解程度不同，遇碘呈色反应 不同。因此，可以通过呈色反应，了解淀粉 水解的程度，从而间接判断唾液淀粉酶活力
试剂和器材 1. 试剂：
（1）0.2%淀粉溶液（含0.3%氯化钠） 称取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化钠溶液中，煮沸 2～3min。 （2）碘液 将碘化钾20g及碘10g溶于100mL水中，使用前稀释 10倍。 （3）0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液 （4）0.1 mol/L 柠檬酸溶液 （5）0.1％淀粉溶液 (不含NaCl) （6）0.9％氯化钠溶液 （7）1％硫酸铜溶液
影响酶活性的因素实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除影响酶活性的因素实验报告篇一：实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型：分离鉴定实验同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）三、主要仪器设备（必填）五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理（必填）四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析（必填）Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种：1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用benedict试剂检测反应产物。
benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。
na2co3+2h2o2naoh+h2co3cuso4+2+na2so4还原糖(—choor—c=o)+2cu(oh)2cu2o(砖红色或黄色)+2h2与benedict试剂无呈色反应。
探究影响酶活性的因素实验报告
探究影响酶活性的因素实验报告探究影响酶活性的因素实验报告酶(enzyme)催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。
是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。
保真网站今天为大家精心准备了探究影响酶活性的因素实验报告，希望对大家有所帮助!探究影响酶活性的因素实验报告(一)实验原理(注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C)：1.淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
(二)方法步骤：1、取3支试管，编上号(A、B、C)，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液。
2、另取3支试管，编上号(a、b、c)，然后分别注入1mL 新鲜淀粉酶溶液。
3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，A和a试管放入热水(约600C)、B和b放入沸水，C和c放入冰块中，维持各自的温度5min。
思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液，这是为什么?4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min。
5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录。
思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象?思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论?思考题4、在上述实验中，自变量是什么?无关变量是什么?思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果?为什么?思考题1、防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。
思考题2、试管A、B、C的现象分别是：不变蓝、变蓝、变蓝。
思考题3、温度会影响酶的活性。
思考题4、自变量是不同的温度。
无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量。
思考题5、不能。
因为如用斐林试剂来检验实验结果，需加热煮沸，会使低温试管中也出现砖红色沉淀，从而影响实验结果、结论。
探究影响酶活性的因素实验报告一、实验目的1、了解pH对酶的活性的影响机理;2、掌握如何选择酶催化反应的最适pH和获得最适pH条件的确定。
酶的性质实验报告
《酶的性质实验》实验报告
五、实验现象记录
1、pH对酶促反应速度的影响
2、温度对酶活力的影响
3、激活剂对酶促反应速度的影响
六、实验结果
1、pH、温度、激活剂和抑制剂对酶促反应速度有影响。
2、唾液淀粉酶的最适pH是6.8。
pH4.9和pH8.6时,酶的催化功能降低。
3、高温破坏酶的分子结构,使淀粉酶失去催化功能,且温度降低后也不能恢复酶的活性；低温抑制酶的活性,没破坏其分子结构,但温度升高后可以恢复其酶的活性。
4、Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂；Cl-是唾液淀粉酶的激活剂；Na+和SO42-即不是唾液淀粉酶的抑制剂,也不是唾液淀粉酶的激活剂。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
用正交法测定几种因素对酶活力的影响
实验目的：
1 掌握正交法的原理
2 用正交法测定几种因素对于酶活力的影响
实验原理：
酶反应受到多种因素的影响，如底物浓度、酶浓度、温度、pH值、激活剂和抑制剂等都能影响酶的反应速度。
这种多因素的实验可通过正交法即用—特制的表格——正交表来安排试验，计算和分析实验结果。
这样就能通过少量实验取得较好的效果。
实践证明正交法是一个多、好、快、省的方法，目前已广泛用于农业生产和科学实验中。
本实验运用正交法测定酶浓度、温度、PH值这三个因素对酶活性的影响，并求得在什么样的底物浓度、温度和pH值时酶的活性最大。
实验设计原理：
实验器材：
试管1.5cm*15cm X30
吸管5.0ml X1
洗耳球X1
漏斗X10
恒温水浴锅X3
紫外可见分光光度计X1
烧杯
实验所需药品：
1. 2%血红蛋白液：于20ml蒸馏水中加入血红蛋白
2.2g，尿素36g，1mol/L NaOH溶
液8ml，室温放置1h，使蛋白质变性。
过滤除去不溶物，再加0.2ml/L NaH2PO4溶液至110ml及尿素4g，调节溶液pH达到7.6左右。
2. 15%三氯醋酸溶液：15g三氯醋酸溶于蒸馏水，并稀释至100ml。
3. 牛胰蛋白水解酶：3mg牛胰蛋白水解酶冷冻干粉，溶于10ml蒸馏水。
4. 0.04ml/L pH7 8 9巴比妥缓冲溶液
5. Folin-酚试剂A：溶液。
将1g Na2CO3溶于50ml 0.1mol/L NaOH溶液。
另将0.5g
CuSO4·5H2O溶于100ml 1%酒石酸钾溶液。
将前者50ml与硫酸铜-酒石酸钾溶液1ml 混合。
混合后的溶液一日内有效。
6. Folin-酚试剂B：将100g钨酸钠，25g钼酸钠，700ml蒸馏水，50ml 85%磷酸及100ml
浓盐酸至于1500ml磨口圆底烧瓶中，充分混匀后，接上磨口冷凝管，回流10h。
再加入硫酸锂150g，蒸馏水50ml以及液溴数滴，开口煮沸15min，驱除过量的溴。
冷却，稀释至1000ml，过滤，滤液呈现微绿色，储存于棕色瓶中。
临用前，用标准氢氧化钠溶液滴定，用酚酞作为指示剂。
根据滴定结果，将试剂稀释至相当于1mol/L 的酸，储存于冰箱之中可以长期保存。
实验步骤：
正交试验设计表
按一般方法,如对三个因素三个水平的各种搭配都要考虑,共需做33=27 此实验，而用正交表只需做9次试验.选用L9表(L是正交表的代号),L右下角的数字表示试验次数)。
60
L9表有两个特性：
（1）.每一列中“1”“2”“3”这三个数字都出现三次，即出现次数相同。
（2）每两列的横行组成的“数对”共有九个，九种不同的数对（1，1）、（1，2）、（1，3）、（2，1）、（2，2）、（2，3）、（3，1）、（3，2）、（3、3）各出现一次。
在每一列中各个不同的数字出现的次数相同；每两列的横行组成的各种不同的“数对”出现的次数也都相同，这两点就是正交表的特点，它保证了用正交表安排的试验计划的均衡搭配的。
因此，分析数据比较方便，结果比较可靠。
2. 实验安排
将本实验的四个因素依次放在L9的第1、2、3列，再将各列的水平数用该列因素相应水平写出来，就得到下面的实验安排表。
正交法测定集中因素对酶活力的影响——实验安排表
表中试验号共9个，表示要做9次试验，每次试验的条件如每一纵行所示。
如做第一试验时0.01mol/LH2O2 5ml，[E]是0.5 ml，温度37o C，pH为5，其余类推。
另取第10支试管，作非酶对照，即加0.01mol/L H2O25ml，缓冲液7.5毫升，1.8 mol/L 的硫酸5 ml，摇匀放置10分钟后加入酶液2.5 ml。
各反应管及对照管倒入三角烧瓶，各瓶分别加入20%的碘化钾溶液1 ml和3滴钼酸铵溶液，然后依次用0.02mol/L的硫代硫酸钠滴定，滴定至溶液呈淡黄色后加入5滴淀粉溶液，再继续滴定至蓝色消失即到终点，记下各瓶消耗的硫代硫酸钠的体积。
计算酶活力
（1）按国际酶活力单位计算
被分解的过氧化氢量（微摩尔）=1/2ⅹV(硫代硫酸钠空白滴定值-样品滴定值)（ml）ⅹ0.02ⅹ103
过氧化氢酶活力（IU）=（被分解的过氧化氢量（微摩尔）ⅹ50）/(时间ⅹ样品重量（g）)
(2) 按习惯酶活力单位计算
被分解的过氧化氢量（mg）= V(硫代硫酸钠空白滴定值-样品滴定值)（ml）ⅹ0.02ⅹ1/2ⅹ34.02
过氧化氢酶活力（IU）=（被分解的过氧化氢量（mg）ⅹ50）/(时间ⅹ样品重量（g）)
3.实验记录及分析
实验做好后，把9个数据填入下表试验结果栏内，按表中数据计算出各因素的一水平试验结果总和、二水平试验结果总和、三水平试验结果总和，再取平均值（各自被3除）。
最后计算极差。
极差是指这一列中最好和最坏的之差，从极差的大小可以看出哪个因素对酶活力影响最大，哪个最小。
找出在何种条件下酶活力最高，最后做一直观分析结论。
正交法测定几种因素对酶活力的影响——数据记录及分析
以酶活力值（Ⅰ/3，Ⅱ/3，Ⅲ/3）为纵坐标，因素的水平数为横坐标作图。