葡萄糖参考方法
葡萄糖检验方法化学
葡萄糖检验方法化学葡萄糖检验方法是一种常见的临床化验方法，用于检测人体内血糖水平，是评估糖尿病、高血糖和低血糖等疾病的重要手段。
化学方法是其中一种常见的检验方法，本文将介绍葡萄糖的化学检验方法，包括其原理、步骤、常用试剂和设备等内容。
一、葡萄糖检验方法的原理葡萄糖在化学检验中通常采用的方法是酶法测定。
其原理是利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时还原辅酶将还原成辅酶。
还原辅酶与二甲基氨基苯磺酸钠在碱性条件下生成紫色化合物，用分光光度计在546nm波长下测定其吸光值，从而得到葡萄糖的含量。
二、葡萄糖检验方法的步骤1.标准曲线的制备：分别取不同浓度的葡萄糖标样，用蒸馏水稀释成一系列标样液，按步骤加入试管中，然后加入相应的试剂。
2.血浆或尿样的处理：将待测样品离心去蛋白，获得上清液进行检测。
3.反应过程：将标样液与试管中的试剂充分混合后，放入37摄氏度水浴中进行恒温反应。
4.测定吸光值：用分光光度计在546nm波长下测定样品的吸光值，根据标准曲线计算出样品中的葡萄糖含量。
三、葡萄糖检验方法的常用试剂和设备1.试剂：包括葡萄糖标样、葡萄糖氧化酶、辅酶、二甲基氨基苯磺酸钠等。
2.设备：分光光度计、水浴仪、离心机等。
葡萄糖检验方法化学的实验操作中需要严格掌握试剂用量、反应温度和时间等关键因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
实验人员还需要注意操作过程中的安全，避免与试剂接触，确保个人安全。
在临床应用中，葡萄糖检验方法的化学测定为医生提供了重要的实验数据，有助于评估病人的血糖水平和疾病状况，为疾病的诊断和治疗提供参考依据。
对葡萄糖检验方法化学的研究和掌握具有重要意义。
通过本文对葡萄糖检验方法化学的介绍，希望能够使读者对该检验方法有一个清晰的了解，从而为临床实验工作提供帮助和指导。
也希望医学工作者们能够不断深入研究，推动葡萄糖检验方法的不断改进和完善，为临床医学实践提供更加准确、可靠的数据支持。
葡萄糖测定方法操作规程
葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。
糖尿病葡萄糖指标参考值表
糖尿病葡萄糖指标参考值表
糖尿病葡萄糖指标参考值表，是根据糖尿病患者的血糖水平制定的参考标准。
根据世界卫生组织的定义，正常的空腹血糖值应该在3.9-6.1mmol/L之间。
而对于糖尿病患者来说，他们的空腹血糖值应该控制在7.0mmol/L以下。
以下是糖尿病患者常见的葡萄糖指标参考值：
1. 空腹血糖值：正常值为3.9-6.1mmol/L，糖尿病患者应控制在7.0mmol/L以下。
2. 餐后血糖值：正常值为小于7.8mmol/L，糖尿病患者应控制在10.0mmol/L以下。
3. 糖化血红蛋白值：正常值为4%-5.6%，糖尿病患者应控制在7.0%以下。
4. 糖尿病患者血糖控制目标：空腹血糖值应低于7.0mmol/L，餐后2小时血糖值应低于10.0mmol/L，糖化血红蛋白值应低于7.0%。
以上是常见的糖尿病葡萄糖指标参考值，糖尿病患者应在医生的指导下进行血糖控制。
定期检查血糖水平，及时调整治疗方案，可以有效预防并控制糖尿病的进展。
- 1 -。
0GTT实验方法,参考值和临床意义
0GTT实验方法,参考值和临床意义
糖耐量试验，也称葡萄糖耐量试验，是诊断糖尿病的一种实验室检查方法。
主要有静脉和口服两种，前者称IVGTT，后者称OGTT。
IVGTT只用于评价葡萄糖利用的临床研究手段，或胃切除后，吸收不良综合症等特殊病人。
OGTT
则是临床最常见的检查手段。
OGTT试验、方法、正常值、临床意义是：
（1）OGTT试验：即葡萄糖耐量试验，是指人体对葡萄糖的耐受能力。
（2）方法
①进行OGTT试验之前每天糖类的摄人量不少于150g，有正常的体力活
动至少3d。
②试验前过夜空腹8〜14h。
早上不吃饭，不服降糖药，可以饮水。
③抽空腹血后，喝葡萄糖水200〜300ml（含75g无水葡萄糖），于
5min内喝完，记录喝第一口糖水的时间。
喝糖水后不要大运动量活动和吸烟，不喝茶及咖啡。
④服糖后在30min、lh、2h、3h分别抽血1次，共4次。
⑤取血后应尽早将标本送检。
（3）正常值
①空腹血糖3.9〜6lmmol/L。
②30min血糖<11lmmol/L。
③lh血糖<11lmmol/L。
④2h血糖<7.8mmol/L。
（4）临床意义：作为糖尿病诊断的标准。
葡萄糖测定标准操作规程
葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理：（葡萄糖氧化酶法）葡萄糖氧化酶（GOD）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。
过氧化物酶（PoD）在色原性氧受体4-氨基安替比咻（4-AA）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色酶类化合物，即Trinder反应。
红色醍类化合物的生成量成正比。
D-葡萄糖+。
2+”2。
建,•＞葡萄糖酸+%。
22%。
?+KAA+对羟基苯甲酸钠pod＞红色醍类物质+4H2O2.试剂组成成分保存8小时，2〜8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融!4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时，本试剂线性范围可达25mmol∕L0样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释倍数为10.7. 2.单位换算：mg∕dl=mπιol∕L×188.检验方法的局限性8.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：Rh无色或淡红色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在50Onm处，光径ICm时，空白吸光度AWO.2009.4线性范围：试剂的线性区间为[2.2-25]mmol∕L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.2-4.7]πιπκ)l∕L区间内，线性绝对偏差不超过±10U∕L;(4.7-25)mmol/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：使用参考物质测定时，当浓度W4.16mmol∕L,实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol∕L,当浓度＞4.16mmol∕L,实测值与标识值偏差应在±20%范围内。
葡萄糖耐量试验参考范围
葡萄糖耐量试验参考范围好啦，今天咱们来聊聊葡萄糖耐量试验，听起来是不是有点复杂？其实没那么可怕，咱们就把它当成一次有趣的“糖分大冒险”。
想象一下，咱们的身体就像一辆车，而葡萄糖就是车子的燃料。
你想啊，车子得有足够的油才能跑得动，咱们的身体也一样，得有足够的糖分来保持活力。
不过，问题来了，咱们的身体能不能好好处理这些糖分呢？这就得靠葡萄糖耐量试验来揭晓了。
咱们得知道，葡萄糖耐量试验的主要目的是检查身体对糖分的反应。
一般来说，医生会让你空腹，之后喝一杯超甜的葡萄糖水，嘿，听起来是不是就有点恶心？但没关系，咱们的目标就是看看你身体里的“车子”能不能顺利把糖分转化成能量。
试验后，医生会定期抽血，检查你血液中的葡萄糖含量。
根据不同的时间点，看看你是“顺风车”，还是“抛锚”的状态。
咱们说说这个参考范围。
正常情况下，空腹时你的血糖应该在70到100毫克每分升之间。
喝完葡萄糖水后，两小时内，正常的血糖水平应该在140毫克每分升以下。
如果超出这个范围，那就得考虑一下了，可能是糖尿病的前兆。
哎，真是让人心慌慌呀，毕竟谁都不想被“糖”给困住。
试验的时候，医生也会问你一些问题，比如你最近的饮食习惯、运动情况之类的，嘿，这可不是在审问你，而是在收集信息帮助你。
毕竟每个人的身体状况都不同，咱们不能拿一个标准去套每个人嘛。
想象一下，吃了一大堆甜甜圈的你，跟一个坚持健身的朋友，结果肯定不一样呀，对吧？葡萄糖耐量试验就像是身体的一次“体检”，它让你了解自己对糖分的处理能力。
就好比你把车开到修理厂，看看有没有需要修理的地方。
如果你平时吃得比较多，又缺乏运动，这次试验可能就会给你敲响警钟。
听起来有点可怕，但其实这也是一种提醒，别把身体逼得太紧，适当放松一下，给自己加点“油”。
咱们也不能忘了生活中的小技巧。
比如说，多吃一些富含纤维的食物，像蔬菜、水果、全谷物，这些可是天然的“润滑油”。
想象一下，当你的车子加了好油，开起来是不是顺畅多了？同样，给身体加点好东西，血糖水平自然就会更稳定。
用GOD法测定血清中葡萄糖浓度
酶法：葡萄糖氧化酶法
（一）化学法
方法
磷钼酸法 （Folin-Wu）
类型
原理
定量 G+Cu2+→Cu2O↓ 分光 Cu2O +磷钼酸试剂 →蓝色钼化合物
（430nm）
用途及备注
稳定、准确、但对 葡萄糖无特异性，
受血中非糖还 原物 质的影响。
邻甲苯胺法
定量
G+邻甲苯胺→蓝绿色的席弗(Schiff)碱 （630nm）
思考题：
a) 本实验原理为酶促化学反应，为何未加终止剂 终止酶的反应？
b) 本实验涉及显色反应，该反应与血清碱性磷酸 酶活力测定中的显色反应有何异同？
c) 为何不同检测方法所提供的空腹正常血糖参考 值存在差异？
葡萄糖氧化酶法： 3.89~6.11mmol/L Folin-Wu法： 4.4~6.7mmol/L 邻-甲苯胺法： 3.89~6.11mmol/L
③ 严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白 血滤液，然后再进行测定。
临床意义：
生理性高血糖：摄入高糖食物，情绪紧张
病理性高血糖：
①糖尿病
②内分泌腺功能障碍
③颅内压增高
④脱水引起高血糖
生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动
病理性低血糖：特发性功能性低血糖，依次是药源性，
肝源性和胰岛素瘤等。
❖调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮 质激素和肾上腺素。
血糖的来源、去路
血糖水平恒定的生理意义
保证重要组织器官的能量供应，特别是某些以 葡萄糖供能的组织器官。 ➢ 脑组织不能利用脂酸，正常情况下主要以来葡 萄糖供能； ➢ 红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能； ➢ 骨髓及神经组织代谢活跃，经常利用葡萄糖供 能。
临床生化检验 第三章 葡萄糖的测定
糖代谢紊乱－－高血糖和糖尿 脂类代谢紊乱－－高血脂、酮症酸中毒 体重减轻和生长迟缓 微血管、神经病变和白内障的发生
糖尿病的诊断
临床症状
糖尿病的诊断
生化诊断
血糖的测定 尿糖的测定 葡萄糖耐量试验
一、血糖的测定
1．出现糖病症状加上随机血糖浓度≥11.1mmol/L。 2．空腹血糖≥7.0mmol/L。空腹指至少8h内无含热量食 物的摄入。 3．口服葡萄糖耐量试验（OGTT） ，2h血糖浓度 ≥11.1mmol/L。
空白管（B） 标准管（S） 测定管（U）
－
－
0.1
－
0.1
－
0.1
－
－
3.0
3.0
3.0
混匀，置沸水中煮沸10min，取出置冷水中冷却5min， 在630nm处比色，以空白管调零，读取各管吸光度。
计算
血清葡萄糖 (mmol/L)
测定管吸光度 标准管吸光度
5
参考值
临床意义
评价
回收率98.6%～99.6%，线性范围可达30.8mmol/L， 日 内CV2%左右，日间CV不大于4%。特异性强，但不及氧化 酶法。
第一节 体液葡萄糖测定 一、己糖激酶法（ＨＫ法）（理解） 原理：
葡萄糖＋ATP ＨＫ 葡萄糖-６-磷酸＋ADP 葡萄糖-6-磷酸＋NADP＋ G-6-PD ６-磷酸葡萄糖内酯 +NADPH
NADPH在340nm有吸收峰
评价：
本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化 分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。
生理性：饥饿和剧烈运动
低血糖
病理性:药源性、肝源性、胰岛素瘤等
三、邻邻甲苯胺法（理解）
原理：
7.2葡萄糖的检测
一、发展历史 古代印度：蚂蚁尝尿
尿轮(urine wheel)
二、标本因素
检测标本
全
血
血
浆
或
血
清
脑
胸
尿
间
脊
膜
液
质
液
液
液
三、血糖检测方法
1. 决定性方法：同位素稀释气相色谱-质谱法
概述
2. 常规方法——酶法 ①葡萄糖氧化酶法 ②己糖激酶法 ③葡萄糖脱氢酶法
四、酶法特点
酶法的特点：
1. 具有良好的特异性； 2. 便于检测：吸光度或电流改变； 3. 应用广泛：自动生化分析仪或POCT仪器。
六、血糖计
血糖计的原理
血糖计：当葡萄糖浓度 ≥100mg/dL时，其允许 误差范围是≤15％
自动生化分析仪：允 许误差≤2.0%
2017年SMBG销售额132 亿美元
七、血糖连续监测
连续血糖监控仪（ continuous glucose monitor, CGM)是指通过葡萄糖传感器监测皮下组织间 液的葡萄糖浓度变化的技术。
指示反应： NAD+（NADP+）+ 2H ⇌ NADH（NADPH）+ H+
举例：乳酸脱氢酶反应：
问题：请总结还有哪些生化检验项目是通过“ 脱氢酶指示系统”完成检测的？ 思维拓展：利用“脱氢酶指示系统”还可以 建立哪些新的检验项目？
己糖激酶法是测定葡萄糖的参考方法，目 前也用于常规检测
适用于血液、尿液、脑脊液中葡萄糖的测定
原理：
植入方式
CGM的特点：每1～5分钟检测一次葡萄糖 ；具报警功能；传感器每6天更换一次；既 能独立使用，也可连接到胰岛素泵（仿生胰
葡萄糖检验方法化学
葡萄糖检验方法化学
一、氧化反应
氧化反应是葡萄糖常用的检测方法之一。
在酸性环境中，葡萄糖具有还原性，可以通过与特定的氧化剂反应被氧化，产生特定的颜色变化或沉淀物，从而进行葡萄糖的定性或定量检测。
常用的氧化剂包括高锰酸钾、硝酸银等。
高锰酸钾法：在酸性环境中，高锰酸钾可以将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时高锰酸钾被还原为锰离子。
通过滴定反应消耗的高锰酸钾量，可以计算出葡萄糖的含量。
该方法操作简便，但需要使用滴定管和精确称量试剂，且误差较大。
硝酸银法：在酸性环境中，硝酸银与葡萄糖反应生成黑色银沉淀。
通过沉淀物的生成和颜色变化可以定性检测葡萄糖的存在。
该方法操作简便，但需要使用硝酸银试剂，且沉淀物容易受其他物质干扰。
二、酯化反应
酯化反应也是葡萄糖常用的检测方法之一。
在酸性环境中，葡萄糖可以与羧酸反应生成酯类化合物，通过检测酯类化合物的生成可以检测葡萄糖的存在。
常用的羧酸包括醋酸、乳酸等。
醋酸-硫酸法：在硫酸存在下，醋酸与葡萄糖反应生成酯类化合物。
通过检测酯类化合物的生成可以计算出葡萄糖的含量。
该方法操作简便，但需要使用醋酸和硫酸试剂，且误差较大。
乳酸法：在酸性环境中，乳酸与葡萄糖反应生成酯类化合物和水。
通过检测酯类化合物的生成可以计算出葡萄糖的含量。
该方法需要使用乳酸试剂，但误差较小。
需要注意的是，上述化学检测方法可能存在误差和干扰物质的影响，因此在实际应用中需要进行充分的验证和校准。
同时，对于不同的样品和检测需求，可能需要采用不同的检测方法进行葡萄糖的定量或定性检测。
血清葡萄糖(GLU)——生化检测项目
血清葡萄糖（GLU ）
一、检测原理
在己糖激酶的作用下，葡萄糖被三磷酸腺苷酸（ATP ）磷酸化。
葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的作用下被氧化，进而降低了二核糖酸尼古丁胺腺嘌呤（NADH ）的水平，在340nm 或410nm 条件下测量NADH 的吸收值，作为反应终点数值。
葡萄糖+ATP −−−→−己糖激酶
G6P+ADP
G6P+NAD+−−→−PD
G 66-磷酸糖苷+NADH+H+
二、参考区间
血清：3.9—6.1mmol/L
三、临床意义
1、升高见于：糖尿病、慢性胰腺炎、甲状腺功能亢进、心肌梗死、皮质醇增多症、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素瘤；脑外伤、脑溢血。
2、降低：见于各种原因引起的胰岛素分泌过多或对抗胰岛素的激素分泌不足、甲状腺功能不全、肾上腺功能不全、脑垂体恶病质、急性进行性肝脏疾病(急性黄色肝萎缩、急性肝炎、肝癌、磷及砷中毒等)、新生儿低血糖症等。
葡萄糖参考方法
测定葡萄糖的推荐参考方法1.样本处理、保存和储藏a：在处理任何葡萄糖溶液中最基本的预防措施是防止糖分解。
这种方法设计用于无细胞的样本。
为了更好地保持葡萄糖的最初浓度必须避免微生物和细菌污染，这是样本分解的主要来源，少量样本的蒸发也可能产生严重问题，由于化学污染能在很短时间内产生，因此，在处理和保存样本时严格要求样本瓶清洁、无菌、密闭。
b:葡萄糖标准溶解稀释在1g/L安息香酸溶液中，可抗微生物污染，它在4℃可长期保存在室温下可稳定数周。
葡萄糖标准的水稀释液或其他稀释液和复溶冻干品对糖分解非常不稳定，须经过无菌或加入防腐剂处理。
c：用于这个分析的样本所使用的生物样品严格限定为血清和血浆，两种标本在制备与保存中要求特殊的防腐抗细菌学糖酵解以及细胞学伤害。
冻干血清产品不一定分离这些污染物，通常比新鲜收集的阴性血清糖酵解速度快。
血液在无菌条件下收集，即使使用了防腐剂，过期控制与校准品样品也必须进行过滤以除掉组织细胞和微生物，由于细胞糖酵解的完全抑制剂有限，许多这样物质存在干扰问题，因此血浆与血清必须离心确保产生与细胞分离的血清。
血清可以保存到任何时间。
在含有抗凝剂或收集的血清中加入足量防腐剂。
肝素、草酸盐、柠檬酸和EDTA不干扰这项分析。
NaF是安全防腐剂，但是作为高浓度的专用抗凝剂不可避免的产生血浆不稳定并干扰这项分析。
肝素以外的抗凝剂导致血样本中细胞内水和其他物质的渗透压的改变，最终导致血浆葡萄糖浓度的改变。
d.血中NaF在2.0mg/ml浓度是推荐防腐浓度。
NaF最好与1mg/mlEDTA-Na2盐联合使用，这个混合物在常规真空采血管中是可能的(加到收集的血清或血浆中，1mg/ml NaF浓度足够)。
e：收集的新鲜样本必须立即混匀，轻轻地溶解干的抗凝剂，防止冷冻血浆中Fb 的后期问题.f样本长期储藏的关键是无菌、密闭、低温和远离细胞或化学污染物。
超过48h 的保存，即使已经经防腐处理，样本也应在容器中冷冻，确保密闭和防止水蒸气渗入；选择深色小玻璃瓶。
生物化学：葡萄糖测定(酶法)
葡萄糖氧化酶法
1
【实验要求】
1. 掌 握 掌 握 血 糖 测 定 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 （ GODPOD法）的原理，操作方法 2.熟悉葡萄糖测定的临床意义； 3.巩固分光光度计的使用。
2
【实验原理】
葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖 酸，并产生过氧化氢。在过氧化氢酶（POD）及色原性 受体4-氨基安替比林（4-AAP）的存在下，过氧化氢释 放氧使色素原氧化生成红色醌类化合物。醌的生成量与 葡萄糖成正比，在波长520nm处比色，求得葡萄糖含量。
7
【临床意义】
3.生理性或暂时性低血糖 见于饥饿、剧烈运动、注射胰岛 素后、妊娠和服用降糖药后。 4.病理性低血糖 见于(1)胰岛β细胞增生瘤等，使胰岛素分 泌过多；(2)对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能 减退，肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、 肾上腺皮质激素分泌减小；(3)严重肝病患者，由于肝脏储 存糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
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【注意事项】
1、注意准确的加入所需要的液体量。 2、注意胆红素、谷胱甘肽、尿酸和维生素C等一些还 原性物质将使结果受到干扰。
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【打扫卫生】
1、实验结束后对自己用过的试管、移液管等物 品进行清洗。 2、打扫桌面与地面卫生。 3、带齐本人物品，离开实验室。
10
谢 谢！
11
【计算】
血清葡萄糖（mmol/L）＝ Au Cs As
Au:测定管吸光度 As:标准管吸光度 Cs:标准管浓度
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【参考范围】
血清葡萄糖：3.89～6.11 mmol/L
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【临床意义】
1.生理性高血糖 见于饭后1～2h，注射葡萄糖或摄入高糖 食物后、情绪紧张肾上腺素分泌增加时，但不应超过 10mmol/L。 2.病理性高血糖 见于(1)内分泌腺功能障碍能引起高血糖， 如胰腺β细胞损害导致胰岛素分泌缺乏，血糖可超过正常， 临床上称为糖尿病。其他内分泌疾病引起的各种对抗胰岛 素的激素分泌增加也会出现高血糖；(2)颅内压增高：颅内 压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等； (3)由于脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等可使血 糖轻度增高。
口服葡萄糖耐量试验(OGTT)试验及意义
创作编号：GB8878185555334563BT9125XW创作者：凤呜大王*口服葡萄糖耐量试验（OGTT）试验及意义口服葡萄糖耐量实验（oral glucose tolerance test, OGTT）是检查人体血糖调节功能的一种方法。
正常人服用一定量的葡萄糖后，血糖浓度暂时性升高（一般不超过8.9mmol/L），但在2小时内血糖浓度又可恢复至正常空腹水平。
在服用一定量的葡萄糖后，间隔一定时间测定血糖和尿糖，观察血液葡萄糖水平及有无尿糖出现，称为耐糖试验。
若因内分泌功能失调等因素引起糖代谢失常时，食入一定量的葡萄糖后，血糖浓度可急剧升高，而且短时间内不能恢复到原来的浓度水平，称为糖耐量失常。
临床上对症状不明显的患者，可采用口服葡萄糖耐量试验来判断有无糖代谢异常。
一、葡萄糖耐量试验的方法1．做OGTT试验前3天，停止胰岛素治疗，可正常饮食，每天饮食中碳水化合物含量不应低于150克（但要控制在250～300克范围），并且维持正常活动。
2．次日晨空腹抽取血液2ml，抗凝，测定血浆葡萄糖，此为空腹血糖。
3．在5分钟之内饮入300毫升含7医学教育网原创5克葡萄糖的糖水（对于儿童则中按每千克体重给1.75克葡萄糖，计算口服葡萄糖用量，直至达到75克葡萄糖时止），喝糖水后30分钟、1小时、2小时分别静脉取血一次，并留取尿液做尿糖定性试验。
整个试验中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食，应安静地坐在椅子上。
4．测定血糖浓度，并绘制耐糖曲线：将各次所测得的血糖浓度与对应的时间作图，绘制糖耐量曲线。
二、正常参考值：见下表。
不同年龄段糖耐量结果的血糖值上限（mmol/L）三、结果判断服葡萄糖后各时限血糖或空腹血糖、高峰值与2小时血糖值大于相应年龄的正常上限者可诊断为糖尿病。
如一点或一点以上血糖值超过正常上限，而未达到糖尿病标准，则为糖耐量异常。
各时限血糖均在正常上限内，属正常。
四、临床意义1．OGTT对隐性糖尿病诊断有帮助，在实际应用中亦可简化OGTT，即只取空腹和服糖后2小时标本测定血糖值，一般认为2小时值是关键性的。
葡萄糖检测标准
葡萄糖检测标准
葡萄糖检测标准根据不同情况而有所差异，具体如下：
1. 空腹血浆葡萄糖水平应该低于毫摩尔每升。
2. 75克葡萄糖耐量试验当中两小时的血糖应该是小于毫摩尔每升。
3. 随机的静脉血浆葡萄糖水平不应该超过毫摩尔每升。
4. 对于糖尿病的诊断标准，空腹血糖大于等于毫摩尔每升，糖耐量试验当中两小时血糖大于等于毫摩尔每升，随机静脉血浆葡萄糖水平大于等于毫摩尔每升。
5. 空腹血糖介于和之间的为空腹糖调节受损，餐后2小时血糖介于和毫摩尔每升之间的为糖耐量异常。
以上数据仅供参考，具体的葡萄糖检测标准建议咨询专业医生。
葡萄糖的测定
葡萄糖的测定1.原理：葡萄糖+O2+H2GOD 葡萄糖酸+H2O22H2O2+4—氨基氨替比林+酚过氧化物酶醌亚胺+4H2O2 .标本采集与处理：2.1受检者的准备：采血前禁食十二小时，避免激烈运动；在采样检查前应停止服用各种药物为宜，特别是对血糖有影响的药物：使血糖升高的药物有：咖啡因、环磷酰胺、茶碱、避孕药、升糖激素类、甲状腺素等；使血糖降低的药物有：印度大麻、胍乙啶类等。
2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位，静坐5分钟后从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带；2.3抗凝剂：应采用氟化钠的样本管收集，以防止细菌污染和糖酵解，或采用肝素抗凝血浆样本。
2.4标本处理：血标本应尽快送实验室。
血清或血浆应尽快从样本管中分离，应无溶血。
血清或血浆样本在4℃可稳定24小时，30℃可稳定4小时。
2.5标本拒收：接收标本时应检查标本是否符合要求（要求封密、无溶血、无杂物）、所用试管是否正确、试管签是否填写完整、并询问采血日期和具体时间，对不合格标本应退回重采，并填写记录。
2.6采血管要求:采血时要求使用一次性无菌注射器，一人一管，用后毁形，用500mg/L有效氯浸泡消毒３０分钟，回收、焚烧、做好登记3.试剂：3.1试剂组成（柏定生物工程（北京）有限公司）试剂Ⅰ葡萄糖氧化酶（GOD）﹥13U/ml试剂Ⅱ磷酸缓冲液（PH7.0）100 mmol/L酚11 mmol/L4—氨基安替比林0.77 mmol/L3.2标准液：5.6 mmol/L3.3质控血清：应在测量未知样本的同时检测质控物并确保质控在可接受的范围内，并且结果必须在三个标准差范围内。
3.3.1质控品批号及范围:批号022431，范围*±2st和*±3s。
3.2.2保存环境:在2—8℃保存，有效期内稳定。
3.4稳定性：试剂在2—8℃保存，有效期为一年，混合后2—8℃可稳定一个月。
4.仪器：上海迅达公司的半自动生化分析仪XD811。
葡萄糖测定
葡萄糖测定摘要】体液中葡萄糖含量的高低是标志着人体健康状况的重要指标，尤其是糖尿病人的血液葡萄糖监控。
葡萄糖浓度的突然升高与降低都预示着一种异常情况的发生。
许多葡萄糖测定的电化学和光化学方法已经被报道并应用于不同样品的分析。
【关键词】葡萄糖采血管检验(一)葡萄糖氧化酶法1.原理葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生一分子过氧化氢。
在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚)的存在下，过氧化氢分解，释放出初生态氧，氧化色素原，生成有色化合物。
2.试剂推荐使用有批准文号的优质市售试剂盒。
配制方法如下(仅供参考)：(1)0.1 mol／L(pH 7.0)磷酸盐缓冲液：溶解无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g于800 ml蒸馏水中，用1 mol／L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1 L。
(2)酶试剂：取葡萄糖氧化酶l 200 U、过氧化物酶1 200 U、4-氨基安替比林10 mg、叠氮钠100 mg，加上述磷酸盐缓冲液至80 ml左右，调节pH至7.0，加磷酸缓冲液至100 ml。
置冰箱保存，至少可稳定3个月。
(3)酚试剂：重蒸馏酚100 mg溶于100 ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色，可先配成500 g／L的溶液，用时稀释)。
贮存于棕色瓶中。
(4)酶酚混合试剂：酶试剂及酚试剂等量混合，在冰箱内可以存放1个月。
(5)葡萄糖标准贮存液(100 mmol／L)：无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存)。
称取1.802 g，以12 mmol／L苯甲酸溶液溶解并移入100 ml容量瓶内，再以12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至100 ml刻度处，放置2小时后方可应用。
(6)葡萄糖标准应用液(5 mmol／L)：吸取葡萄糖标准贮存液5 ml，于100 ml容量瓶中，用12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
葡萄糖测定实验
葡萄糖酸+H2O2
POD
2 H2O2+4-氨基安替吡林啉+酚
醌亚胺+4H2O
试剂主要成分与浓度:
试剂 主要成分 葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ） R1 过氧化物酶（ＰＯＤ） 磷酸缓冲液（ＰＨ７.０） R2 酚 4-氨基安替吡林啉 11mmol/l 0.77mmol/l 900U/L 100mmol/L 实验浓度 13000U/L
２.如果x、y之间呈直线关系，即可用经典 的直线回归分析法作统计处理，其结果 可以显示候选方法的测定结果有无系统 误差存在 直线回归方程y=a+bx，a为回归直线 的截距，代表恒定误差的大小；b回归系 数，即直线的斜率，代表比例误差的大 小
3.作相关分析 在方法比较试验中，相关系数可作 为被评价方法可否被接受的一项统计学 指标． 对求出的相关系数还应作相关系数 的t检验
方法学比对概念
• 用两种方法同时测定一批标本计算出两 种方法间检测的差值,以此来估计被评价 方法在实际测定病人标本时可能引入的 总系统误差的水平.
意义
• 将候选方法与准确度已知的方法(如参考 方法)作对比分析,以评价候选方法的准确 度,是考核候选方法是否可被采用的重要 试验.方法比较试验是用于检测候选方法 系统误差的大小包括恒定误差和比例误 差,如对适当的数据进行分析,也可以提供 误差的性质.本实验以己糖激酶法为参考 方法，用来评价葡萄糖氧化酶法的总系 统误差
葡萄糖校准液:5.55mmol/l
• 将１０ mlR1 与９０ ml Ｒ２混合均匀，即 为工作液． • 样品： 新鲜无溶血血清（１-15号样本）
操作步骤：
空白管 工作液 蒸馏水 校准 样品 3.0ml ０.０2ml ０.０2ml ０.０2ml 校准管 3.0ml 样品管 3.0ml
葡萄糖检验
果糖胺－血清糖化白蛋白测定（ＧAlb）
*临床意义：
血清白蛋白比血红蛋白半衰期短，约为19
天，测定ＧAlb可有效反映患者过去2～3周内平
均血糖水平，是糖尿病近期控制的一个指标。
胰岛素测定
临床意义： １、对有空腹低血糖的患者进行评估。 ２、确认需胰岛素治疗的糖尿病患者。 ３、判断２型糖尿病的预后。 ４、评估胰岛素抵抗。
腹10～16h.
坐位取血后5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，妊 娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给予，不超75g。糖后 每隔30分钟取血1次，共4次。必要时可延长时间，可长达服糖 后６小时。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验。整个
过程不可吸烟、和咖啡、喝茶或进食。
胰岛素释放试验*和Ｃ肽测定
正常人口服葡萄糖后，血浆胰岛素水
平在30～60分钟上升至高峰，可为基础值
的5～10倍，3～4小时恢复到基础水平。Ｃ 肽水平升高5～６倍。 血胰岛素和Ｃ肽测定有助于了解Ｂ细 胞合成和分泌功能以及指导治疗，但不作 为诊断糖尿病的依据。
七、尿糖测定 （一）定性测定 （二）尿中糖的鉴定 （三）定量测定：邻甲苯胺法
病理性：见于糖尿病；内分泌腺（甲 状腺、肾上腺皮质或髓质、胰岛细胞 功能亢进；颅内压升高刺激血糖中枢； 呕吐、腹泻、高热等引起的脱水。
尿糖：若血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L，即超过了肾小球滤过率，出
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测定葡萄糖的推荐参考方法1.样本处理、保存和储藏a：在处理任何葡萄糖溶液中最基本的预防措施是防止糖分解。
这种方法设计用于无细胞的样本。
为了更好地保持葡萄糖的最初浓度必须避免微生物和细菌污染，这是样本分解的主要来源，少量样本的蒸发也可能产生严重问题，由于化学污染能在很短时间内产生，因此，在处理和保存样本时严格要求样本瓶清洁、无菌、密闭。
b:葡萄糖标准溶解稀释在1g/L安息香酸溶液中，可抗微生物污染，它在4℃可长期保存在室温下可稳定数周。
葡萄糖标准的水稀释液或其他稀释液和复溶冻干品对糖分解非常不稳定，须经过无菌或加入防腐剂处理。
c：用于这个分析的样本所使用的生物样品严格限定为血清和血浆，两种标本在制备与保存中要求特殊的防腐抗细菌学糖酵解以及细胞学伤害。
冻干血清产品不一定分离这些污染物，通常比新鲜收集的阴性血清糖酵解速度快。
血液在无菌条件下收集，即使使用了防腐剂，过期控制与校准品样品也必须进行过滤以除掉组织细胞和微生物，由于细胞糖酵解的完全抑制剂有限，许多这样物质存在干扰问题，因此血浆与血清必须离心确保产生与细胞分离的血清。
血清可以保存到任何时间。
在含有抗凝剂或收集的血清中加入足量防腐剂。
肝素、草酸盐、柠檬酸和EDTA不干扰这项分析。
NaF是安全防腐剂，但是作为高浓度的专用抗凝剂不可避免的产生血浆不稳定并干扰这项分析。
肝素以外的抗凝剂导致血样本中细胞内水和其他物质的渗透压的改变，最终导致血浆葡萄糖浓度的改变。
d.血中NaF在2.0mg/ml浓度是推荐防腐浓度。
NaF最好与1mg/mlEDTA-Na2盐联合使用，这个混合物在常规真空采血管中是可能的(加到收集的血清或血浆中，1mg/ml NaF浓度足够)。
e：收集的新鲜样本必须立即混匀，轻轻地溶解干的抗凝剂，防止冷冻血浆中Fb 的后期问题.f样本长期储藏的关键是无菌、密闭、低温和远离细胞或化学污染物。
超过48h 的保存，即使已经经防腐处理，样本也应在容器中冷冻，确保密闭和防止水蒸气渗入；选择深色小玻璃瓶。
通过特定的合适的螺旋帽可获得一个很好的密封，在小于30℃的水容箱中冰冻样本迅速融化。
在同一瓶反复溶解，样本反复取样，增加样本潜在分解、蒸发和污染的危险。
2.要求和材料说明a:量值测量（1）天平精密度（2）天平准确度（3）样本转移（量取）b:分光光度计测量（1）比色杯系统（a）固定位置（b）单一杯子（c）单一1.0cm比色杯（2）340nm分光光度计特性（a）光谱溶液、波长和杂散光：340nm时半波宽≤8nm。
重复测定340nm处波长精密度和准确度在±2nm之间，340nm处杂散光<0.1%，这些影响因素的总和被消除时不降低仪器对超浓度NADH的溶液的线性反应性，NADH溶液吸光度的实验在340nm时，吸光度在正常设定狭缝宽度时为1.0±10%范围内。
适当的空白溶液时在仪器半波宽2倍外时不改变超过±0.5%。
（b）稳定性：低于噪音，每小时吸光度漂移<0.001Abs，在要求的狭缝和能量水平时，在1.0 Abs时，每小时吸光度漂移<0.003 Abs。
（c）分光光度计不精密度，包括噪声。
对0.000--1.500 Abs范围甚至更宽时，重复读数时的变异率（1SD）<0.0005 Abs或任意吸光度读数的0.25%。
（d）分光光度计线性：在0.100-1.000 Abs之间的任何水平，测定吸光度的线性斜率是最好的，通过调零后，应<0.001 Abs或小于吸光度的0.5%。
在葡萄糖分析或NADH的精确稀释量的吸光度测量的定标反应曲线的测量中，（分光光度计元件导致的）相应浓度吸光度的变化率的测量误差，与0.2-1.000 Abs之间的测定的变异率0.5%没有明显不同，<0.2 Abs时，相应影响在均值变化率+0.001 Absc：玻璃制品（1）所有玻璃制品必须化学清洁，清洁程序包括至少用（）冲洗2遍，蒸馏水和在清洁环境中干燥。
（2）（3）d：化学说明书：（1）试剂水：（2）无CO2水：试剂水在敞开的长颈烧瓶中煮沸15分钟，用透明的玻璃瓶盖或用碱石灰帽盖住冷却，直到使用前。
（3）葡萄糖标准：用国家标物局有证D-葡萄糖标准品：SRM917配制，葡萄糖标准液的原有尖顶瓶储存于实验室的充满无水硫酸钙的真空干燥容器中。
（4）化学试剂（a）硫酸锌，7个结晶水，ACS说明书（b） Ba(OH)2,8H2O, ACS说明书（c）醋酸Mg,4 H2O, ACS说明书（d）Tris base， reagent grade（e） Tris -HCL reagent grade（f）β-NAD+(氧化型)，2 H2O,纯度>98%，常规称重。
（g） ATP-Na2.3 H2O,纯度>98%，常规称重。
（h）牛血清AlB,第五部分，纯度96-99%。
（i）葡萄糖-1-磷酸，二钠盐，4 H2O，纯度>98% （j） D-果糖，NAS/NRC说明书（k）安息香酸：见ACS说明书（5）酶说明：（a） HK(ATP:6-磷酸D-葡萄糖转移酶；EC 2.7.1.1），酶来源于酵母，要求高纯度，4.d中给出恰当的酶检验数据，注意4.d(2).（b） G6PDH(6-磷酸-D-葡萄糖：NAD（P）氧化还原酶；EC 1.1.1.49），酶来源于肠膜明串珠菌，可以悬浮于硫酸胺液或为冻干粉，要求高纯度，4.d中给出恰当的验证数据，注意4.d(2).3.血清或血浆中葡萄糖测定程序：a:原液标准液的配制：（1）安息香酸稀释液（1g/l）：在大容量瓶中用2000ml热的试剂水溶解2.0gACS级安息香酸，彻底混匀，盖盖冷却至室温。
全部液体倒进试剂瓶，密闭保存于室温。
（2）葡萄糖标准贮存液（10g/l）：称取5.000±0.002gNBS无水D-葡萄糖，放入500ml class A级容量瓶中，用安息香酸稀释液冲洗和稀释葡萄糖至容量瓶的2/3瓶处，旋转使葡萄糖完全溶解，加安息香酸溶液至500ml标记线下1cm处，把容量瓶放20℃±1℃水槽中，水没至瓶颈处，密闭，用安息香酸稀释液补足前平衡溶液30分钟。
塞紧颠倒混匀至少10次，每一次颠倒、旋转倒置容量瓶10秒。
每125ml一份，放入带有螺旋盖的硼硅酸盐的瓶中，盖紧并标记，还要注明日期。
保存在4℃或-20℃。
一瓶用于制备1整套系列标准液。
如果处理得当，准备充分，这种标准原液可以长期稳定，但还是建议每6个月重新配制。
在一个新批号开始使用之前，从新标准原液配一个新的mg/dl(11.10ml/l)工作标准，与旧的系列标准在一批测试各双份比较它们的变异。
（3）葡萄糖工作标准液（a）配制一套纯品葡萄糖的系列工作标准液：葡萄糖标准原液和安息香酸稀释液在20℃+1℃的水浴箱中平衡30分钟，按下表转移等份的葡萄糖原液至100ml classA 容量瓶中，用安息香酸稀释液稀释至接近刻度，在水浴箱中平衡15分钟后调至刻度线。
为配制标准需准备一特殊系列的安息香酸稀释液中一部分是用于配制试剂空白的，它用作“0”浓度标准液。
一次配制一套完整系列标准液，如果任何一个浓度减少或有怀疑，整批都将被替换。
旧的和新的系列标准通过一个分析批双份分析测试进行比较。
（b）工作标准液贮存于4-ounce聚乙烯螺旋帽瓶中，放4℃不超过1个月。
塑料存贮瓶的清洗很关键，交叉污染不被发现，对测定的影响会从一种溶液倒另一种溶液。
尽管安息香酸是一种很好的抗常规糖酵解微生物的防腐剂，它不能防御严重的细菌污染。
（c）在每一分析日中，要求平衡至25℃的工作标准重新分到干净管中，原液瓶重新放回冰箱。
b试剂配制（1）沉淀蛋白试剂(a)ZnSO4溶液（22g/l）：用刚配好的热的无CO2蒸馏水大约900ml溶解22g ZnSO4。
7 H2O，溶液冷却至室温后，移到1L容量瓶中，用无CO2水稀释至1000ml充分混匀，移至玻璃瓶，密闭保存。
(b)饱和Ba(OH)2溶液，用刚配好的热的无CO2蒸馏水约950ml溶解刚开瓶称取的80g Ba(OH)2。
8H2O，溶液冷至室温，移到1L容量瓶中，用无CO2蒸馏水稀释至1000ml，充分混匀，转移到存储瓶中，存储瓶用短圆柱形指示型SIO2凝胶（硅胶）保护碱石灰咀，咀的寿命相当短，碱石灰必须经常更换。
允许超量的Ba(OH)2和不溶解的碳酸盐沉淀过夜或几天，必要时，稀释前清除它。
（d） Ba(OH)2溶液，0.11N。
如果不干扰沉淀，转移245ml饱和Ba(OH)2到1L容量瓶，用无CO2蒸馏水稀释至1000ml，用这个稀释的Ba(OH)2溶液滴定10ml硫酸锌溶液用酚酞做指示剂（0.5%指示剂溶解于95%乙醇中，2滴）滴至淡粉色为终点，结果应为10ml ZnSO4溶液需要10±0.1ml Ba(OH)2溶液滴定。
若超过这个范围，在Ba(OH)2溶液中根据大致计算量加入适量Ba(OH)2或无CO2水，重新滴定。
转移校正好的Ba(OH)2溶液至使用碱石灰咀和苏打水瓶或细水瓶管试剂瓶中，每个月用滴定法检查该溶液当量浓度。
（2） 25℃时，PH7.5的0.1m Tris buffer,含5.0mmol/l乙酸镁（a） TRIS-HCL 原液，在2.0L 的容量瓶中用试剂水溶解31.52g TRIS-HCL并稀释到2000ml。
（b）Tris base原液：在500ml容量瓶中用试剂水溶解6.06 g Tris base 并稀释至500ml。
配制酶试剂时需新鲜配制这个原液。
（c）PH7.5 Tris -Mg buffer，在一个大烧杯里，混合800ml Tris -HCL液和200ml 的Tris base溶液，然后在溶液里溶解1.1g醋酸镁。
在25℃测定混合液的PH，必要时，用Tris -HCL液或Tris base溶液调至PH7.5±0.1。
用0.45μm滤菌膜过滤溶液，到一个无菌带螺旋帽的硼硅酸盐玻璃贮存瓶中，配酶试剂时要新鲜配制，贮存于4℃冰箱。
C：酶试剂的准备与分析（1）酶试剂成分的本质分析(a)试剂（ⅰ）Tris -白蛋白：在250ml容量瓶中用Tris -Mg buffer溶解0.5g牛血清白蛋白，校正至250ml。
储存在大约4℃冰箱。
（ⅱ）NAD+原液：在Tris -Mg缓冲液中溶解0.9952g氧化型NAD+，补足至250ml，在4℃冰箱保存，配制当天测定。
（ⅲ）ATP原液：在Tris –Mg buffer中溶解0.8268g ATP二钠盐，并补足至250ml，保存于4℃冰箱，配制当天测定。
（ⅳ）葡萄糖，用0.1%安息香酸稀释60ml葡萄糖标准原液至100ml，保存在4℃冰箱。
（ⅴ）己糖激酶原液：在25℃称量或用Darrow和Colowick的方法或使用6-磷酸葡萄糖脱H酶的方法测定酶含量获得总活性1250U的己糖激酶，转移至250ml 酶的容量瓶，用Tris –Mg buffer调至刻度，放在4℃冰箱保存，配制当天分析。