影响鲎试验结果的常见因素

影响鲎试验结果的常见因素

药品细菌内毒素检查法，是一项操作简便、快速、标准化程度高，应用成本低廉的新技术，又是一项生物学反应复杂的体外检测方法。由于影响因素较多，实验操作的准确性尤为重要。其次是目前美国药典收载的药品品种达680多种，但是在我国因人体重与国外的差异，供试品的内毒素限量值不尽相同。所以，在实际工作中对美国药典收载的品种和文献报道的方法只能作为参考，对同一种药品的检查法不能照搬以免造成工作的失误。因此在实际工作中应注意如下几个问题：

1、实验前应复合鲎试剂产品的灵敏度和自身凝集时间，因为鲎试剂本身灵敏度的改变或质量不符合要求，能影响您的实验结果。

2、细菌内毒素工作品效价误差或效价不稳定，可影响实验结果。建议您选用中检所提供的细菌内毒素标准品，必要时或有条件者应标定细菌内毒素标准品的效价。

3、请您选用厂家配备的细菌内毒素检查用水。因为：BET用水是一种特殊的水，它不仅是要求细菌内毒素限值<0.03Eu/ml，而且要求有严格的PH （6.0-8.0）范围，不能用注射用水替代使用。

4、实验操作的误差：操作顺序和熟练程度尤为重要。实验顺序如下所示：

①制备内毒素标准溶液→②稀释检品→③溶解鲎试剂→④摆放试管→⑤加样或加试剂→⑥封口恒温→⑦观察结果并记录

5、实验器具的洁净度影响：一般用硫酸清洁液浸泡4小时，用自来水冲洗干净，再用新鲜蒸馏水冲洗三道，并干热（250℃）恒温1.5h即可。实验用的玻璃器具必须严格无菌无热原，建议不要使用一次性朔料制品。

6、实验条件：实验室要求洁净，无尘埃空气流通，若是空调室，应备有一台超净工作台。

7、温度：实验室温度为25±2℃较好，恒温水浴箱温度为37±1℃为宜。

8、样品本身干扰，对含有多糖类药品，应选用特异性鲎试剂或普通鲎试剂加G因子抑制剂使用。对PH较低的样品应调节PH值。