酵素免疫分析法
制作酵素生物实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景随着人们对环保意识的提高，减少垃圾排放、实现资源循环利用成为当务之急。
酵素作为一种环保、经济的生物催化剂，在日常生活中具有广泛的应用。
本实验旨在通过自制酵素，探究其制作过程、功能及其在环保领域的应用价值。
二、实验目的1. 了解酵素的制作原理及过程。
2. 掌握自制酵素的方法。
3. 探究酵素在环保领域的应用。
三、实验材料1. 原料：黑糖、果皮、菜渣、水。
2. 容器：玻璃瓶、塑料瓶等。
3. 工具：剪刀、量杯、搅拌棒等。
四、实验步骤1. 准备材料：根据比例（黑糖:果皮:水 = 1:3:10）准备原料。
如：1kg黑糖、3kg果皮、10L水。
2. 配制糖水：将黑糖放入容器中，加入水，搅拌均匀，直至糖完全溶解。
3. 加入果皮：将切好的果皮加入糖水中，确保果皮全部浸泡在糖水中。
4. 密封容器：用塑料膜或橡皮塞封口，确保容器密封。
5. 发酵：将容器放置在温暖、通风处，每隔一段时间摇晃容器，使固体物沾到液体。
6. 观察变化：随着时间的推移，发酵液颜色逐渐变为棕色，体积减小，表面出现气泡。
7. 成熟酵素：经过一定时间的发酵，酵素成熟。
此时，发酵液呈现棕色，表面有泡沫，无明显异味。
五、实验结果与分析1. 制作过程：通过实验，我们成功制作了酵素。
实验过程中，我们严格按照比例配制原料，确保了酵素的品质。
2. 酵素功能：酵素具有以下功能：（1）降解有机物：酵素可以分解厨余垃圾、动植物尸体等有机物，减少垃圾排放。
（2）净化水质：酵素可以去除水体中的有害物质，提高水质。
（3）改善土壤：酵素可以促进土壤微生物的生长，提高土壤肥力。
（4）保健作用：酵素中含有丰富的营养成分，具有保健作用。
六、实验结论1. 酵素是一种环保、经济的生物催化剂，具有广泛的应用价值。
2. 自制酵素的方法简单易行，成本低廉。
3. 酵素在环保领域具有重要作用，可以有效减少垃圾排放、提高资源利用率。
七、实验建议1. 在制作酵素时，应注意选择新鲜、无污染的原料，以确保酵素的质量。
酶联免疫法
酶联免疫吸附试验（又称酵素免疫分析法，Enzyme-linked immunoassay，简称ELISA）利用抗原抗体之间专一性键结之特性，对检体进行检测；由于结合于固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性，因此设计其键结机制后，配合酵素呈色反应，即可显示特定抗原或抗体是否存在，并可利用呈色之深浅进行定量分析。
根据待测样品与键结机制的不同，ELISA可设计出各种不同类型的检测方式，主要以三明治法（sandwich）、间接法（indirect）、以及竞争法（Competitive）三种为主，以下为各种方法之介绍.三明治法常用于检测大分子抗原，一般之操作步骤为:1.将具有专一性之抗体固著（coating）于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体2.加入待测检体，检体中若含有待测之抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结3.洗去多余待测检体，加入另一种对抗原专一之一次抗体，与待测抗原进行键结4.洗去多余未键结一次抗体，加入带有酵素之二次抗体，与一次抗体键结5.洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果三明治法分别以两种抗体对检体中的抗原进行两次专一性辨认，因此专一性相当高，但此待测抗原必须是多价抗原，如此才可获得两种以上的专一性抗体，以分别进行夹心；而且此法需要足够的表位空间以进行抗原抗体的夹心，所以并不适用于半抗原或小分子抗原等分子量较小之标的。
间接法间接法常用于检测抗体，一般之操作步骤为：1.将已知之抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余之抗原2.加入待测检体，检体中若含有待测之一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结3.洗去多余待测检体，加入带有酵素之二次抗体，与待测之一次抗体键结4.洗去多余未键结二次抗体，加入酵素受质使酵素呈色，藉仪器（ELISA reader）测定塑胶盘中的吸光值（OD值），以评估有色终产物的含量即可测量待测抗原的含量。
竞争法竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：1.将具有专一性之抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体2.加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结3.加入带有酵素之抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酵素之抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来。
抗双股去氧核醣核酸抗体的重组Fab片断之表现及其特性分析
全身性紅斑性狼瘡 (Systemic Lupus Erythematosus，SLE) 是一種具有各式各樣 臨床症狀的自體免疫疾病，患者最特別的地方在於血清中有各種自體抗體的 產生，其中最常見到的自體抗體是抗雙股去氧核醣核酸抗體 (anti-dsDNA antibodies)，它也被認為是導致SLE最主要的自體抗體，尤其是和狼瘡性腎炎 (lupus nephritis) 有關。在本實驗中，我們利用聚合酶鏈鎖反應 (Polymerase Chain Reaction，PCR) 來放大老鼠融合瘤細胞 (hybridoma cell) 所分泌的腎原 性 (nephritogenic) 抗雙股去氧核醣核酸抗體的重鏈 (Heavy chain) 和輕鏈 (Light chain) 基因片段，我們將反應產物選殖入pComb3H載體中，然後利用限制酵 素作用於重組DNA，以分析在隨意挑選的菌株中，確認已含有重鏈及輕鏈基 因片段，接著再將它們以大腸桿菌來表現Fab片段並分析其免疫特性。利用西 方墨點法 (Western blot)、抗老鼠IgG抗體分析後，結果證實8個能夠表現Fab片 段的菌株 (T1, T3, T4, T5, T8, T9, T10, 及T11) 都有50 kDa的Fab蛋白存在。酵 素連結免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 則顯示這8 個能夠表現Fab的菌株與dsDNA呈現較低的結合能力。由於DNA序列分析的 結果顯示這些菌株的重鏈和輕鏈來自於相同germline的免疫球蛋白基因，因此 我們的實驗結果指出抗雙股去氧核醣核酸抗體的Fc片段對於其抗原結合力具 有關鍵性的影響。
Expression and cahgaariancsttedriozuatbiole
间接竞争elisa实验原理
间接竞争elisa实验原理
ELISA（enzyme-linked immunosorbent assay）实验原理是生物分析技术中最常用的发光免疫检测技术，它主要采用发光双抗原技术，来测定酶标物质或抗原抗体，它将酶作为检测和显示
发光反应的桥梁，组成一个特殊的免疫系统，其基本思想是利用
活性试剂将目标物质与酶或抗原抗体结合，然后再经由发光催化反应检测。
ELISA实验于1970年由Engvall 及 Perlman 提出，其用抗原抗体及酶组成一个特殊的免疫系统，被检测的物质（抗原或抗体）结
合在特殊酶上，发光试剂(如酵素标记物、二抗原、发光试剂等）连称后，在受体结合后诱导发光，由发光信号最终获得定量结果。
ELISA实验一般用于抗原、抗体的定量检测，具有可灵敏度高、
响应时间短、占用空间小、工作人员较少等优点，且分子量大小
的测定范围较广，可应用于血清学、免疫学、病毒学、细胞生理
学和药物代谢等多个领域。
由于采用的是一种直接的试验方法，
可以迅速测量出抗原或抗体的含量，优于间接酶连结免疫实验方法，尤其适合于临床检测领域。
长期服用酵素好转反应
如果你食用酵素产品三、四个月中,身体内那个部位、器官不好,或曾受伤后未完全复原、毒素积存太多,就可能有下列的好转(玄冥反应) 正常现象出现,恭喜你正在康复中!1、好转现象:皮肤发痒或出疹原因:是免疫系统强了,白血球吞噬皮下的细菌或毒素。
肝、肾功能不好,毒素回流也会痒。
背上热、痛痒,可能是汗腺或皮脂腺改善而的( 通常皮肤干燥) 现象。
风疹块痒是典型的胆汁回流( 肝胆不好所致)处理方法:可加强酵素產品的使用2、好转现象:昏睡原因:有慢性肝硬化现象,肝细胞修补恢复期需大量休息处理方法:昏睡随着细胞恢复渐渐正常3、好转现象:小便多原因:肾脏、胰脏、神经系统、膀胱差。
通常有糖尿病或感染处理方法:改善后渐正常4、好转现象:小便臭原因:细胞内毒素排除处理方法:改善后渐正常5、好转现象:排气原因:肠胃蠕动改善处理方法:改善后渐正常、6、好转现象:下痢原因:大肠差,通常带油处理方法:通常一天约二、三次,但没有不舒服,改善后就消失了7、好转现象:胀气原因:肠胃不好者处理方法:好现象,使用量可酌情稍减) 少量多餐、多运动8、好转现象:清神亢奋、精神好、睡不着原因:身体正在消耗多余的脂肪,此时脂肪正转化成热能处理方法:正常现象,数天之后自然消失9、好转现象:口干舌燥原因:细胞活动增加,就像运动后一样会口渴处理方法:多喝万大產品10、好转现象:身体略感酸痛原因:身体往健康的方向运作时,身体较弱的部位会有反应处理方法:自然现象,适应期好转反应11、好转现象:腰酸原因:骨骼神经受压迫。
肾脏不好。
太胖。
女性要考虑子宫机能不好。
坐姿不正确。
处理方法:随着细胞生长,酸感渐渐消失,可多喝人万大產品12、好转现象:痰多咳嗽原因:肺细胞活化,有能力把痰排出处理方法:几天内排完就消失13、好转现象:想呕吐或感觉胃不舒服原因:大部分的人有偏食习惯,突然改变口味( 纯净蔬果,非肉类) 有时不适应处理方法:适应两: 天就好了14、好转现象:胃痛原因:胃或十二指肠溃疡( 饭后30 分钟食用)处理方法:忍耐几天就过去了,多吃蔬菜水果,补充水分15、好转现象:便秘原因:体内没有足够的水分,因大多数人的体内水分含量不足处理方法:多喝酵素產品、多吃蔬菜水果,补充水分16、好转现象:头痛原因:头部神经或头部血液循环不良处理方法:改姜以后就不再痛17、好转现象:耳鸣原因:血液循环不佳,耳不神经传导不良处理方法:改善以后渐渐消失18、好转现象:体重增加原因:1 、对于瘦者,这是指肪分解后,肌肉含量增加2 、食用者可能是肾脏排毒功能不佳,食用产品后大量排毒,造成暂时性积水处理方法:1 、继续食用产品,保持三餐正常,就可维持标准体重2 、多运动、少吃盐,促进排毒代谢功能,过一阵子就会好转19、好转现象:体重下降原因:多余脂肪代谢掉处理方法:恭喜你20、好转现象:体重没有显著下降原因:若有甲状腺( 新陈代谢) ,肾脏( 排尿) ,肝脏( 解毒) 等功能不好者,或吃过减肥药( 含泻剂及人工化合利尿剂) ,伤害肾脏功能至巨,食用草本植物,正在整健功能处理方法:只要耐心食用产品,体重自然会达到标准21、好转现象:晕眩虚弱、肚子略感饥饿原因:此现象通常发生于血糖较低者,因草本植物是属于高营养低热量,故食用时,会消耗体内多余的脂肪,而使血糖降处理方法:可吃些食物,如蔬菜水果或能量饼干,来补充体力22、好转现象:大便份量减少原因:因产品完全吸收,没有杂物排泄的正常现象处理方法:维持正常饮食习惯23、好转现象:头皮痒原因:新细胞生长快,被细菌破坏的头皮细胞不断脱落处理方法:好现象24、好转现象:眼屎多原因:眼睛内循环改善,滞留物排出处理方法:好现象25、好转现象:饭量少原因:细胞吃饭后,不再吃太多东西处理方法:好现象26、好转现象:心跳加速原因:心脏不好或贫血处理方法:好现象27、好转现象:眩晕原因:中耳不平衡或贫血也会处理方法:继续食用,可稍减量,多忍耐28、好转现象:青春痘原因:皮脂腺阻塞,停留在皮脂腺之脂肪或毒素被活化的细胞排除后,渐渐改善处理方法:两三周就过了29、好转现象:小便白浊原因:肾脏丝球体有感染,蛋白质流失处理方法:请作蛋白检验,一个月以后再比较改善程度30、好转现象:出汗原因:食用者正在排除体内废物及毒素的正常现象处理方法:可多喝酵傲人生產品31、好转现象:便血原因:有痔疮或大肠长瘤者处理方法:若持续二周请看医生32、好转现象:内脏有疼痛感原因:食用者本身内脏有毛病,产品正在整健内脏功能,可能要持续几天处理方法:忍耐一下,继续食用,等整健好就不痛33、好转现象:月经不停原因:子宫内之血管脆弱或有长瘤,考虑有感染处理方法:若持续两周请看妇产科34、好转现象:子宫痛原因:若剧烈疼痛不停,可能内膜异位或长东西处理方法:若持续两周请看妇产科35、好转现象:肥胖原因:肾脏不好,等免疫力提升后改善处理方法:需要持续增加万大酵素用量36、好转现象:手脚末端麻刺痛,触电感原因:末稍神经传导或血液循环改善的好现象处理方法:改善后渐正常37、好转现象:抽筋原因:神经系统较差或障碍已开始改善处理方法:随神经传导改善而改善38、好转现象:尿酸高原因:体内之尿酸正排出处理方法:改善后渐正常39、好转现象:血糖高原因:细胞内残余糖份正在排出处理方法:几天后渐渐改善40、好转现象:中性脂防原因:血管壁之脂肪正在排出处理方法:几天后渐渐改善41、好转现象:血压高原因:血液循环改善,但血管阻力未消失,待体内巨噬细胞( 垃圾车) 活化排出血管壁的中性脂肪酸,血压就下降处理方法:继续服用血压药,但应每天量血压注意其下降青形,由医师减少药之使用42、好转现象:沒有感觉原因:服用天数及用量过少,以及针对个人体质而定。
农药残留及其检测方法
农药残留及其检测方法
农药残留是指农药在农产品中残留的量，农药残留的存在会对人体健康和环境产生潜在的危害风险。
因此，及时准确地检测农药残留是非常重要的。
常见的农药残留检测方法包括以下几种：
1.色谱法：色谱法是一种常用的农药残留检测方法，可以通过
气相色谱（GC）和液相色谱（LC）来分离和定量农药。
色谱
法具有灵敏度高、选择性好等优点。
2.质谱法：质谱法可以通过测量农药分子的质量来进行定性和
定量分析。
常用的农药残留检测质谱方法包括气质联用（GC-MS）和液质联用（LC-MS）等。
3.免疫分析法：免疫分析法是利用农药与抗体之间的特异结合
反应进行分析的方法，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免
疫层析法等。
免疫分析法具有灵敏度高、操作简便等特点。
4.生物传感器法：生物传感器法是利用生物体（如细胞、酵素）对农药进行特异识别和反应的方法。
常用的生物传感器包括电化学生物传感器、光学生物传感器等。
5.微生物方法：微生物方法利用某些微生物对农药进行降解或
转化的能力，通过测量微生物生长或产物生成来定量分析农药残留。
需要注意的是，不同的农药具有不同的化学性质和残留特点，因此在农药残留检测中需要选择适当的方法进行分析，并根据不同的农产品和农药设置相应的残留限量。
正规的农产品检测机构或实验室都会使用科学、准确的方法对农产品进行农药残留检测。
食品中蛋白质的测定方法
食品中蛋白质的测定方法食品中蛋白质的测定是一项重要的分析工作，因为蛋白质是构成生物体的重要组成部分，具有多种生理功能。
在食品分析中，蛋白质的测定可以帮助确定食品的营养价值、质量和安全性。
目前常用的食品中蛋白质测定方法主要包括化学方法、生物方法和光谱法等。
化学方法是常用的测定蛋白质含量的方法之一。
常见的化学方法有碱式溴酸法、Lowry法、比色法和生物素-亲和素ELISA法等。
碱式溴酸法是一种常用的测定蛋白质含量的方法，其原理是根据蛋白质与碱式溴酸反应产生溴化物，通过溴离子与物质之间的比色测定来确定蛋白质的含量。
此方法操作简便、操作范围较宽，但其并不是选择性很高的方法，也不能区分不同的蛋白质。
Lowry法是一种常用的反应性蛋白质测定方法，其基本原理是根据酚与蛋白质或肽链中的酰化基团的反应，在碱性条件下生成一种可变色的络合物，并使用多肽键和酰化基团的浓度作为测定蛋白质含量的依据。
该方法具有较高的选择性和灵敏度，广泛应用于食品中蛋白质含量的测定。
比色法是一种常用的定量分析方法，可以通过测定浓度与溶液的吸光度之间的关系来确定溶液中蛋白质的含量。
其中一种常用的比色法是布拉德福德法，原理是将蛋白质与染料交换的方式，根据染料与蛋白质之间的作用力来测定蛋白质的含量。
这种方法需要一定量的标准蛋白质作为参照物，但是不同的蛋白质可能对染料的亲和力不同，因此需要根据具体情况进行一定的修正。
生物素-亲和素ELISA法是近年来发展起来的一种新的测定蛋白质含量的方法，其原理是利用免疫学的方法来检测样品中的蛋白质含量。
这种方法需要特异性抗体与特定蛋白质结合，然后用辣根过氧化物酶二抗体与结合的抗体结合，最后根据酶的活性来测定蛋白质的含量。
这种方法可以用于测定食品中特定蛋白质的含量，并且具有较高的选择性和敏感性，但需要较长的实验时间和昂贵的试剂。
除了化学方法外，生物方法也可以用于食品蛋白质的测定。
生物方法主要指的是生物学指标法，根据生物体内生物学分子的活性来测定样品中物质的含量。
巴斯德四价流感疫苗
(4) 罕見於24個月兒童
(5) 曾發生於<24個月兒童
6個月-8歲兒童VaxigripTetra接種第一劑及第二劑後的安全性相當且6-35個月的兒童接種第
二劑後的不良反應發生率比第一劑接種後的發生率要低。
c. 潛在不良事件 VaxigripTetra無上市後的安全性資料。 然而，Vaxigrip在臨床試驗期間或上市後經驗曾有下列之不良反應報告，這有可能發生在 VaxigripTetra的接種者身上。 免疫系統疾病
尚無與人類生育能力相關資料。根據一項動物研究結果顯示，VaxigripTetra不會損害雌性動物 的生育能力。
肌肉骨骼及結締組織疾病 肌痛 關節痛(2)
極常見 不常見
4.7對開車及操作機械的影響 VaxigripTetra 對開車及操作機械沒有影響，或其影響可忽略不計。 4.8 不良反應 a. 安全性摘要 VaxigripTetra的安全性在6項臨床試驗中進行評估，其中接種VaxigripTetra 一劑的受試者包括 3040名18-60歲的成人、1392名大於60歲者，以及429名9-17歲的兒童，另外884名年齡介於3-8 歲的兒童接種VaxigripTetra一劑或兩劑，乃視其流感疫苗接種史來決定，以及1614名6-35個月 的兒童接種兩劑VaxigripTetra (各0.5毫升)。 大部分的反應通常在疫苗接種後的3天內發生，發生後的1-3天內會自動消失，且大部分的反
典型抗磷脂抗体综合征(aps)的诊断标准 概述说明
典型抗磷脂抗体综合征(aps)的诊断标准概述说明1. 引言1.1 概述典型抗磷脂抗体综合征（APS）是一种自身免疫性疾病，主要与体内出现异常的抗磷脂抗体相关。
这些抗体会导致血液中的凝血过程紊乱，进而引发广泛的血管栓塞和胚胎-胎儿发育障碍等多种临床表现。
APS是一种相对罕见的疾病，但其严重后果以及确诊和治疗的复杂性使其备受关注。
1.2 文章结构本文将从以下几个方面介绍典型APS的诊断标准：首先，我们将详细阐述APS 的定义、概念和历史发展，为读者提供相关背景知识。
接着，我们将探讨抗磷脂抗体在该综合征中的作用和影响，并讨论APS的流行病学特征。
随后，我们将重点介绍典型APS的临床表现与分类，并与其他相关疾病进行鉴别诊断比较。
然后，我们将讨论实验室检查方法和诊断标准，包括抗磷脂抗体检测方法以及国际诊断标准的介绍和应用情况概述。
最后，我们将总结和归纳各个方面的内容，并探讨APS诊断标准在临床实践中的应用价值与局限性。
此外，我们还展望未来关于APS诊断标准的研究方向和临床转化前景。
1.3 目的本篇文章旨在全面概述典型抗磷脂抗体综合征（APS）的诊断标准。
通过对相关背景知识、临床表现、分类、实验室检查和诊断标准等方面进行详细论述，读者将对APS的诊断有更清晰、全面的了解。
同时，我们也希望能够探讨当前诊断标准存在的问题，并为未来研究和临床实践提供一些建议和展望。
2. 典型抗磷脂抗体综合征（APS）的定义与背景2.1 APS的概念和历史发展典型抗磷脂抗体综合征（Antiphospholipid Syndrome，APS）是一种自身免疫性疾病，主要特征为持续存在的抗磷脂抗体阳性及反复发生血栓事件。
该综合征最早由Hughes博士于1983年首次描述，并在之后的研究中逐渐得到了确认和界定。
2.2 抗磷脂抗体的作用与影响抗磷脂抗体是APS的重要诊断标志之一，它们对凝血系统、免疫系统以及血管内皮细胞等多个方面具有直接或间接的影响。
退伍军人病(Legionellosis)-1
退伍軍人病（Legionellosis）一、疾病概述（Disease description）退伍軍人病是一種急性細菌性疾病，會引起二種流行病學上完全不同的臨床症狀，即退伍軍人病（Legionnaires’ disease）以及龐提亞克熱（Pontiac fever）。
此二種疾病開始時皆有下列共同的明顯症狀：即厭食、身體不適、肌痛與頭痛等症狀。
通常在1天之內會快速發燒且伴隨畏寒，出現乾咳、腹痛及下痢等症狀，體溫通常高達39.0～40.5℃。
退伍軍人病患者胸部Ｘ光會出現肺部堅質化且可發展至肺兩側，最後則出現呼吸衰竭，死亡率可高達15.0％，若患者免疫能力有障礙，死亡率會更高。
龐提亞克熱不會引起肺炎或死亡，病人通常在1週內會自癒，臨床症狀多半因吸入病原菌而產生。
退伍軍人病之確定病例，須符合下列任一項實驗室診斷結果：（一）由肺組織、呼吸道分泌物、胸膜液、血液或其他正常無菌的部位，分離出退伍軍人桿菌（Legionella）。
（二）直接免疫螢光抗體試驗，在肺組織、呼吸道分泌物或胸膜液檢驗出嗜肺性退伍軍人桿菌（L. pneumophila）。
（三）以間接免疫螢光抗體試驗檢測血清抗體效價，恢復期（3～8週）比發病初期效價有4倍以上增加，且≧128。
（四）以酵素連結免疫分析法或快速免疫呈色膜法檢驗出尿中有嗜肺性退伍軍人桿菌血清型第一型（L. pneumophila serogroup Ⅰ）之抗原。
二、致病原（Infectious agent）退伍軍人桿菌不易染色，為革蘭氏染色陰性桿菌，培養時需要半胱胺酸（L-cysteine ）及其他營養素。
到目前為止共發現15種嗜肺性退伍軍人桿菌（Legionella pneumophila）的血清型，其中以血清型第一型最常引起退伍軍人病。
其他還包括L. micdadei, L. bozemanii, L. longbeachae以及L. dumoffii常從免疫能力較差之肺炎病人體內發現。
肿瘤坏死因子和介白素在肺炎病童的变化
腫瘤壞死因子和介白素在肺炎病童的變化Tumor Necrosis Factor-α and Interleukin-6 Profiles in Children with PneumoniaCM Wang;RB Tang;RL Chung;BT Hwang小兒學科期刊名稱(journal):微免與感染雜誌卷(vol.):vol.32期(issue.):Issue. 4年代(year.):1999摘要:肺炎是最常造成兒童住院的原因之一。
TNF-α及IL-6是造成發炎反應的初步因子並且常與感染和非感染的發炎反應有關。
我們利用酵素免疫分析法（ELISA）來測量12位細菌性肺炎病人急性期和恢復期，15位呼吸道融合病毒(RSV)肺炎病人和15個健康對照組人的血中TNF-α和IL-6的濃度。
實驗結果顯示TNF-α在細病性肺炎病人急性時期的濃度比在恢復期是有意義的升高，也比RSV肺炎病人及健康對照組來得高（p<0.005）。
RSV肺炎病人和健康對照組的TNF-α濃度並沒有差異。
比較細菌性肺炎病人急性期，恢復期，RSV肺炎病人和健康對照組發現細菌性病人急性期血中IL- 6濃度均有意義的高於其他三組（p<0.005），RSV肺炎病人血中的IL-6濃度亦比健康對照來得高（p<0.005）。
綜合以上結果，比較細菌性肺炎急性期和恢復期的TNF-α及IL-6的血清濃度的變化，發現血清中早期TNF-α濃度和血清中IL-6濃度可做為細菌性肺炎的一個指標。
但需要更多的研究來建立TNF-α和IL-6在診斷上判別預後的可用生。
Abstract:Pneumonia is a common cause of hospitalization and is associated with high morbidity in children. Tumor necrosis factor- α (TNF-α) and Interleukin-6 (IL-6)are primary mediators of inflammation, and have been implicated in a large number of infectious and non- infectious inflammatory diseases. The serum concentrations of TNF-α and IL-6 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in 27 patients with bacterial pneumonia (n=12) or respiratory syncytial virus (RSV) pneumonia (n-15) and in 15 healthy control subjects. TNF-α concentrations of patients with bacterial pneumonia in acute stage (16.94 ±5.70 ng/L) were significantly higher than those in convalescent stage (5.80 ± 0.75 ng/L), in patients with RSV pneumonia (5.06 ± 0.44 ng/L) and in healthy control subjects (5.39 ± 0.68 ng/L) (p < 0.005). TNF-αconcentrations of patients with RSV pneumonia were not significantly different from those of the control group. IL-6 concentrations of patients with bacterial pneumonia in acute stage (465.94 ± 290.30 ng/L) were significantly higher than those in convalescent stage (22.04 ± 15.08 ng/L), in patients with RSV pneumonia (7.65 ± 2.58 ng/L), and in healthy control subjects (0.84 ± 0.08 ng/L) (p<0.0005). There was significant difference between patients with RSV pneumonia and the healthy control group (P<0.005). In summary, there were significant differences in TNF-α and IL-6 concentrations between acute stage and convalescent stage in patients with bacterial pneumonia, making them useful as markers for bacterial pneumonia. Further studies are needed to establish the potential diagnostic and prognostic value of TNF-α and IL-6.。
食品中的致癌物检测方法
食品中的致癌物检测方法在今天的食品市场中，我们无法保证所购买的每一个食品都是100%安全的。
尽管许多国家的政府机构都已经实施了严格的安全标准，但是如果没有可靠的检测方法，这些标准就没有任何意义。
在这篇文章中，我们将探讨现代食品中的致癌物检测方法，以寻找可靠的方式来确保食品的安全性。
一、什么是致癌物？致癌物是能够引起癌症的物质。
它们可以在许多食品中被发现，如蔬菜、肉类、乳制品等。
许多致癌物是通过食物链进入我们的食品中的，例如农药、肥料、浸润剂等。
此外，许多原料在加工过程中会产生致癌物，例如苯并芘和多环芳烃。
这些物质在我们的身体中蓄积并最终会导致癌症发生。
人们需要确保食品中的致癌物水平低于安全标准。
检测食品中的致癌物已经成为食品安全重要的部分。
下面我们将介绍几种常用的致癌物检测方法。
二、高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种常见的化学分析方法，现在被广泛应用于食品中致癌物的检测。
它能检测残留在食品中的很小量的致癌物。
这种方法使用色谱柱分离目标化合物，首先将食品样品中的化合物与其他化学品混合，然后将混合物通过色谱柱，目标化合物随后被分离出来。
最后，目标化合物被收集并分析。
这种方法的优点是，它可以用于检测多种不同类型的致癌物，因为不同的化合物需要不同的色谱参数进行分离。
此外，这种方法的灵敏度很高，可以检测到极小量的致癌物。
三、质谱法质谱法是将化学品的化学结构简单化，然后对化学品进行分析的一种方法。
它在分析化学、环境科学、医药保健和制药、砂岩油和芳香化学等领域都有广泛应用。
在食品中的致癌物检测中，质谱法被广泛应用。
在这种方法中，首先将化学物质转化为离子，然后将离子注入一种仪器中。
该仪器可将化学结构的质量表示为一个电压值，称为质量/电荷比（m/z）。
一旦质量信息被存储在电脑中，就可以通过识别化学物质的质谱图样来确定化学物质的身份。
这种方法的优点是，它可以检测一些其他方法不能检测的新型致癌物。
此外，样品中有许多其他的化学成分，质谱法可以选择性的检测到致癌物，无需特别处理。
水果酵素的保健功能与应用研究进展
固醇ꎬ 增加肠道益生菌ꎬ 改善脂质代谢酶的活性ꎬ 具
磷、 钾和微量元素铁、 锌等物质ꎮ 仁果类酵素具有维
有降血脂、 抗氧化、 增强免疫力等功能ꎮ
护心脏血管的正常运作ꎬ 促进肾功能ꎬ 调理肠胃ꎬ 以
３ 水果酵素的发酵工艺
及排除体内毒素等功效 [７] ꎮ
１ ４ 其他类水果酵素
水果酵素传统的制备方法主要依赖于自然发酵的
进而防止皮肤变黑ꎬ 达到美白的效果ꎮ
５ 展望
水果酵素工艺和相关产品的研发对于探索新型保
健酵素种类ꎬ 增加酵素产品丰富性ꎬ 提高我国农产品
附加值ꎬ 创新医学和生物技术以及解决环境问题等方
面具有重要的意义ꎮ 在实际生产过程中ꎬ 水果酵素品
质、 功能和安全性受到发酵过程中微生物群落结构与
代谢物变化规律的严重影响ꎮ 因此ꎬ 发酵时间的选择
酵素的降脂性能分析 [ Ｊ] . 中国食品ꎬ ２０２２ (２４) : １５２－１５４.
[１３] 吴慧ꎬ 周亚娟ꎬ 马双双. 梨酵素制备及其品质影响因素分析
[ Ｊ] . 现代食品ꎬ ２０２０ (２３) : ８７－９２ꎬ １０２.
[１４] 尚琪ꎬ 苏小育. 浅谈酵素抗氧化活性成分———多酚 [ Ｊ] . 企
除上述典型水果酵素以外ꎬ 近年来ꎬ 各地积极探
过程ꎮ 在这个过程中ꎬ 利 用 水 果 蔬 菜 本 身 所 含 的 酵
索延长水果产业链的方法ꎬ 许多水果产区根据自身产
母、 乳酸菌等微生物来发酵ꎮ 与此相比ꎬ 传统制备方
业特点ꎬ 还陆续研发了一些特殊的水果酵素产品ꎬ 如
法并不对果蔬原料进行巴氏杀菌处理ꎬ 这样就能够有
３５－４０.
性质、 生物活性及感官的影响 [ Ｊ / ＯＬ] . 食品工业科技: １－ １３
免疫物质化学染色诊断单独温控法
免疫物质化学染色诊断单独温控法一、介绍免疫组织化学染色是一种常用的组织学检测技术，通过发现组织中特定的抗原，用抗体与其结合，并通过染色方式对其进行标记，从而实现对组织中特定抗原的检测。
免疫组织化学染色在病理学、临床医学和生物医学研究中具有重要意义。
而免疫物质化学染色诊断单独温控法是其中的一种重要技术。
二、免疫物质化学染色诊断单独温控法的原理1. 抗原获取：首先需要获取样本组织中的目标抗原。
2. 抗体结合：将特异性抗体与目标抗原结合，形成抗原-抗体复合物。
3. 标记：将标记物标记在抗体上，通常使用酵素或荧光物质进行标记。
4. 染色：将标记后的抗体与组织样本反应，形成颜色或荧光信号，从而显示出目标抗原在组织中的分布和强度。
5. 观察：根据染色结果进行光学或荧光显微镜观察，并通过图像分析系统进行定量分析。
三、全面评估免疫物质化学染色诊断单独温控法1. 技术优势：- 高灵敏度：能够检测组织中的微量抗原，并在显微镜下清晰显示出来。
- 特异性：能够区分不同类型的抗原，对于病理学诊断具有重要意义。
- 定量分析：通过图像分析系统，能够对染色结果进行定量分析，为研究和临床诊断提供客观数据支持。
- 彩色标记：染色结果可以呈现出不同的颜色，方便对多种抗原同时进行检测和比较。
2. 技术挑战：- 样本处理：需要对组织样本进行严格的脱水、嵌入和切片处理，以保证染色效果和信号清晰度。
- 试剂选择和配比：选择和配比不当可能会影响染色效果。
- 染色条件：温控是影响免疫组化染色结果的重要因素之一，适当的温控有助于保证染色的稳定性和重复性。
3. 个人观点和理解：免疫物质化学染色诊断单独温控法在临床医学和研究领域具有重要意义，通过对特定抗原的检测，可以帮助医生进行病理诊断，指导临床治疗，并且对于疾病的发病机制研究也有着重要的作用。
其中，温控是保证染色效果和信号稳定性的重要因素，单独温控法的使用可以更为准确地控制染色条件，提高染色质量和可重复性。
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PCR機器與結果
引子 ( PRIMERS )設計
引子 ( primers )設計引子時要注意的事項有: (1) 引子長度通常為 18 – 25 個鹼基長。 (2) GC含量約在 40 – 60 %。 (3) 同一反應中的引子序列不可互補，以免造成自相
黏合的情況。 (4) 引子黏合溫度盡量不要相差 5 ℃以上。 (5) 注意模板中所有可能和引子互補的區域，設計時
3. Primer黏合，通常 primer 與模版 DNA 黏合的溫度 大約是 『Tm 減 5℃』1~2分鐘。
4. 延展，約在70~75 ℃。Taq DNA polymerase 合成速 率每分鐘合成 2 kb 左右。若 DNA 過大，合成速率約每 分鐘5~35次循環就足夠了
避免含有這些區域。 (6) 如果引子變性了，則至少在 3’ 端有 3 個鹼基
以上存在才可能使反應進行。
PCR溫度循環設定
1. 起始高溫分離兩股 DNA，溫度應設定在 95 ℃，時間 在5分鐘。時間可隨著 GC 在模版上的比例調升至10分鐘 。
2. 高溫分離兩股 DNA通常 94-95℃進行1~2分鐘即可將 兩股 DNA 分離，如果 GC 含量過高，可將時間提高至 3~4分鐘。
引子煉合及引子廷伸作用。
A.DNA 分開：利用高溫加熱而將雙股 DNA分開。 當溫度降低，二股DNA便有機會再結合在一起。
B. 引子的煉合：引子是經由 DNA 合成儀合成的， 其序列是對應互補於欲進行放大之 DNA片段的序列 。通常 PCR 技術所用的引子均為一對寡核甘酸小片 段，每個引子各自與一股 DNA 互補。當進行煉合時 ，藉著溫度的降低，二個引子各自互補性地結合至其 單股的 DNA 模板上。
主宰生長、發育、自動調節 (homeostasis)、行為及 疾病的發生等錯綜複雜、迂迴曲折的現象，大大地受 同源的基因所編譯之核醣核酸及蛋白質所支配，也受 到基因的複雜性及基因與周遭環境動態的交互反應所 主宰。
蛋白質染色分析
蛋白質染色分析
基因晶片
微陣列系統 操作流程
酵素免疫分析法
Enzyme-linked immunosorbent assay(簡稱ELISA ）利用抗原-抗體之間專一性鍵結之特性，對檢體進 行檢測；配合酵素呈色反應，即可顯示特定抗原或抗 體是否存在，並可利用呈色之深淺進行定量分析。
6. 最後延展步驟，循環結束後，樣本通常會在 70 – 75 ℃延展5~15分鐘，用意在於填補最後幾次循環的產物。
探索基因的功能及其間的交互作用，是為後染色體組 世紀的最重要工作之一，也是從事分子生物及遺傳學 研究的基礎。近年來基因晶片技術的崛起，不僅提供 了解決上述基因研究上的問題，也帶動了全球基因功 能分析自動化的風潮，加速了功能基因研究的進度。
腸病毒檢測晶片
腸病毒並非一種病毒，而是一群病毒的總稱。由於這些病 毒都可經由腸道感染，因此統稱為「腸病毒」。「腸病毒 」又可分為五大亞族群：
小兒麻痺病毒 (Polioviruses)：type 1 ~3。 柯沙奇病毒 A 型 (Coxsackieviruses type A)：A1 ~
分子生物技術原理與基本應用(二)
PCR Biochip Norten, Southen, Westen blotting ELISA IFA
PCR(POLYMERASE CHAIN REACTION)
利用PCR方法可以人工合成一段特定基因的DNA片 段，其原理完全仿照自然界 DNA 合成的步驟，並加 以自動化。基本上，這個技術主要包含三個步驟： DNA 分開(denaturation)
根據待測樣品與鍵結機制的不同，ELISA可設計出各 種不同類型的檢測方式，主要以三明治法（ sandwich）、間接法（indirect）、以及競爭法（ Competitive）三種為主，以下為各種方法之介紹。
間接法常用於檢測抗體，一般將抗原固定在盤底
三明治法 三明治法常用於檢測大分子抗原，將抗體固定於盤底
C. 引子廷伸作用：第三步就是藉著 DNA聚合脢進行 合成。由引子處，開始由 5‘向3’ 方向，將 dNTP (dATP, dTTP, dGTP, dCTP) 依照模板上的序列，以 其互補的核甘酸，逐一接上去，合成了一條新的雙股 DNA。其中引子自己亦包含在新合成的 DNA片段上 。
PCR機器與結果
，再加入撿體反應在加 上競爭性抗原及呈色
競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制，一般用於 檢測小分子抗原
將具有專一性之抗體固定於盤底，加入待測檢體，使 檢體中的待測抗原與抗體進行專一性鍵結。
再加入帶有酵素之抗原，此抗原也可與盤底的抗體進 行專一性鍵結；由於盤底的抗體有限，因此當檢體中 抗原的量越多，則帶有酵素之抗原可鍵結的固著抗體 就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵 結，即所謂競爭法之由來。洗去檢體與帶有酵素之抗 原，加入酵素受質使酵素呈色，當檢體中抗原量越多 ，代表塑膠孔盤內留下之帶有酵素的抗原越少，顯色 也就越淺。