激活剂和抑制剂对酶活性的影响(修)
实验三抑制剂和激动剂对酶活性的影响
六、思考题：(Questions)
什么叫酶的竞争性抑制作用？举例说明在医 学上的应用。
七.注意事项：(Notices)
1．注意密切观察颜色变化。 2．加入各种试剂要注意看清标签，不能 混用滴管
• 反应模式
竞争性抑制作用
+
I
EI [S]>>[I]：高浓度的底物可解除抑制
竞争性抑制作用特点 1、I结构常与S结构类似 2、I/S与酶的结合部位相同:酶的活性中心 3、[S]↑可以降低甚至消除抑制作用 4、(表观）Km值增大，Vm值不变
1/V
抑制剂↑
1/[S]
• 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶
二、实验原理(Experimental Principles)：
影响酶活性的因素：
温度 pH值 激活剂 抑制剂
对酶活性的抑制作用分类
不可逆性抑制作用
竞争性抑制作用 可逆性抑制作用 非竞争行抑制作用 反竞争性抑制作用
抑制剂(I)与底物(S)的结构相似，能与底 物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复 合物的形成，使酶的活性降低。这种抑制 作用称为竞争性抑制作用。 E+S ES E+P
四、操作步骤（Operating Procedure）
1 酶的提取液的制备：将兔子处死，取出肝 脏，切成碎片后，放入乳钵中，每组取8g 左右，加入1/15mol/L的Na2 HPO4溶液 5ml研成糊状后，再加入10 ml1/15mol/L 的Na2 HPO4溶液，混匀后，倒入离心管中， 2000转/分钟离心4分钟，取上清液转入其 它试管备用。
COOH CH2 CH2
琥珀酸脱氢酶
琥珀酸
FAD
COOH CH2 COOH
丙二酸
酶特性检验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的通过本实验，了解酶的催化作用特性，包括酶的专一性、高效性、温度和pH值对酶活力的影响，以及酶的激活剂和抑制剂对酶活力的作用。
通过对酶特性的研究，进一步掌握酶在生物体内的作用及其调控机制。
二、实验材料1. 实验材料：- 酶提取液（如唾液淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等）- 底物溶液（如淀粉溶液、蛋白质溶液、脂肪溶液等）- pH缓冲液（不同pH值的缓冲液）- 温度控制装置（恒温水浴）- pH计- 显微镜- 试管、试管架、滴管、移液器等2. 试剂：- 碘液- 斐林试剂- 班氏试剂- 激活剂（如金属离子）- 抑制剂（如竞争性抑制剂、非竞争性抑制剂）三、实验方法1. 酶的专一性检验：- 将酶提取液与底物溶液混合，观察酶催化底物反应的现象。
- 使用不同底物进行对比实验，验证酶的专一性。
2. 酶的高效性检验：- 将酶提取液与底物溶液混合，观察酶催化底物反应的现象。
- 使用相同底物，将酶提取液与无机催化剂（如FeCl3）进行对比实验，验证酶的高效性。
3. 温度对酶活力的影响：- 将酶提取液与底物溶液混合，在不同温度下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析温度对酶活力的影响。
4. pH值对酶活力的影响：- 将酶提取液与底物溶液混合，在不同pH值下进行反应。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析pH值对酶活力的影响。
5. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响：- 在酶提取液和底物溶液中分别加入激活剂和抑制剂。
- 观察酶催化底物反应的现象，分析激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
四、实验结果与分析1. 酶的专一性检验：- 通过实验观察，酶提取液在特定底物存在下表现出催化作用，而在其他底物上无催化作用，证明酶具有专一性。
2. 酶的高效性检验：- 通过实验观察，酶提取液在催化底物反应时，反应速度明显快于无机催化剂，证明酶具有高效性。
3. 温度对酶活力的影响：- 通过实验观察，酶催化底物反应的速度随温度升高而加快，在一定温度范围内，酶活力达到最大值，超过此温度，酶活力逐渐降低。
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
激活剂和抑制剂对酶活性影响实验报告
影响酶作用的因素：影响酶促反应的因素常有酶的浓度、底物浓度、pH值、温度、抑制剂、激活剂等。
其变化规律有以下特点：
1、酶浓度对酶促反应的影响：在底物足够，其它条件固定的条件下，反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其它不利于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。
2、底物浓度对酶促反应的影响：在底物浓度较低时，反应速度随底物浓度增加而加快，反应速度与底物浓度近乎成正比，在底物浓度较高时，底物浓度增加，反应速度也随之加快，但不显著，当底物浓度很大且达到一定限度时，反应速度就达到一个最大值，此时即使再增加底物浓度，反应也几乎不再改变。
3、酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂，激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。
注意事项：
激活剂和抑制剂对于酶活性的影响，常常分不清激活剂，因为加入蒸馏水、NaCl、Na2SO4这3支试管的颜色一致，都是黄色。
出现这种现象的原因是酶活性太高了，需要稀释唾液，唾液稀释至加入蒸馏水的试管呈浅红色即可。
这样一来，这3支试管的颜色分别是浅红、黄、浅红，就可以断定Cl-是激活剂。
偶尔也有分不清抑制剂的就是加入蒸馏水、CuSO4、
Na2SO4这三支试管的颜色一致，都是蓝色。
因为酶活性太低，需要提高酶活性，只要重新制备唾液淀粉酶就行（但是新酶的活性不可太高，否则又分不清激活剂）。
最后3支试管的颜色应该是浅红、蓝、浅红，可以断定Cu2+是抑制剂。
浙江大学生物化学实验甲酶的基本性质激活剂与抑制剂对酶活力的影响
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
常见的酶的抑制剂：重金属离子（Ag+，Hg2+等）， CO，氰化物，有机磷农药等。
少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性，而且 它常具有特异性。
一种物质对某种酶是激活剂，对另一种酶则可能 是抑制剂。
有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，在高浓 度时则可能为该酶的抑制剂。
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.2、原理
• 本试验利用淀粉水解不同阶段产物与碘有不同颜 色反应的特点，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应 中激活或抑制的现象。
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉酶
淀粉
紫色糊精
红色糊精
无色糊精
麦芽糖
葡萄糖
H2O
H2O
H2O
H2O
H2O
I2
I2
I2
I2
I2
I2
蓝色
紫色
红色
不显色（碘色） （金黄色）
不显色 （碘色）
不显色 （碘色）
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.3、操作方法
• 操作过程及注意事项参P99。
1.4、实验结果及处理
• 仔细观察并纪录各管颜色，对试验现象进行简要说 明并判断激活剂和抑制剂。
酶的基本性质（4）-激活剂与抑制剂
1.1、激活剂和抑制剂简介
激活剂：凡能使酶活性增加的物质。 抑制剂：凡能使酶活性降低但并不引起酶蛋白变性
的物质。 常见的酶的激活剂： ⑴、无机离子：常为阳离子，如Mg2+，Na+等，但也
有阴离子，如Cl-。 ⑵、中等大小的有机分子：如抗 坏血酸，谷胱苷肽 ⑶、某些蛋白分子：指对某些无活性的酶原起激活作
温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。
3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
生物化学实验
温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响一、实验目的酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。
通过本实验了解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验原理酶的化学本质是蛋白质。
凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性。
此外，温度、pH和抑制剂、激活剂对酶的活性都有显著的影响。
酶的活性通常是用测定酶作用基质在酶作用前后的变化来进行观察的。
本实验用唾液淀粉酶作用的基质—淀粉，被唾液淀粉酶分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物的变化来观察该酶在各种环境条件下的活性。
淀粉被酶水解的变化，可以借遇碘呈不同颜色来观察。
淀粉遇碘呈蓝色;糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色;最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色反应。
三、试剂1.0.5%淀粉溶液称取可溶性淀粉0.5g加蒸馏水少许搅拌成糊状，然后用煮沸的;1%氯化钠溶液稀释至1Ooml。
2.碘化钾一碘溶液取碘化钾2g及碘1.27g溶解于2OOml蒸馏水中，使用前用蒸馏水稀释5倍。
3.1%尿素溶液。
4.奈斯勒试剂(见实验二十二)5.1%CuSO4溶液台秤称取CuSO4•5H2O， 1g用蒸馏水溶解至1OOml。
6.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液pH5.0-8.0:A. 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液称35.62gNa2HPO4·2H2O用蒸馏水溶解后，定容至10OOml。
B. O.lmol/L柠檬酸溶液称取19.21g无水柠檬酸，用蒸馏水溶解后定容10OOml。
用A、B两液，按附录五，配制pH5.O、pH6.2、pH6.8、pH7.4、pH8.0各lOml。
7.0.5%NaCl溶液。
8.唾液淀粉酶制备每人用自来水漱口3次，然后取20m1蒸馏水含于口中，半分钟后吐入烧杯中，纱布过滤，取滤液lOml，稀释至2Oml为稀释唾液，供实验用。
9.脲酶提取液取黄豆粉6g，加30%乙醇250ml，振摇lOmin，过滤，滤液供实验用。
激活剂与抑制剂对淀粉酶
加完摇匀，40℃水浴，同时保温。每隔2min，取1滴置在白瓷板上，用碘 液检验，观察那只试管内液体最先不呈蓝色反应，哪只次之，并解释原因。
六、思考题
1、试说明可逆抑制剂与不可逆抑制剂的作用特点。 2、三种可逆抑制剂的抑制程度与底物浓度有何关系？
1％淀粉溶液、新鲜唾液稀释液、5％氯化钠溶 液、0.1％硫酸铜溶液、稀碘溶液
四、器材
只试管， 取三只试管，按照下表操作 ： 试剂 ml 0.1%淀粉 管号 1 2 3 2.0 2.0 2.0 1%NaCl 1.0 —— —— 1% CuSO4 蒸馏水 —— 1.0 —— —— —— 1.0 1:30唾液 1.0 1.0 1.0
激活剂与抑制剂对淀粉酶 活力的影响
一、实验目的
了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。
二、实验原理
酶的活性受某些物质的影响，能使酶活性增加的 称为激活剂，能使酶活性降低的称为抑制剂。很 少量的激活剂和抑制剂就会影响酶的活性，而且 常具有特异性。本实验中氯离子为唾液淀粉酶的 活化剂，铜离子为其抑制剂。
三、实验试剂
激活剂与抑制剂对酶的影响实验目的
KI-I2溶液（mL） 记录观察结果
2滴
2滴
2滴
从1号试管中用玻棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待 1号试管内的溶液遇碘不再变色后，立即取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶 液颜色的变化。
操作步骤
1. 取3支试管，各加2mL 含0.3％氯化钠的0.5％ 淀粉溶液。 2. 另取3支试管，各加1mL淀粉酶液。 3. 将此 6 支试管分为 3 组，每组中盛淀粉溶液与 淀粉酶液的试管各1支。 4. 三组试管分别置入 0℃ 、 37℃ 与 100℃ 的水浴 中。 5. 等 5min 后，将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶 液中，继续维持原温度条件5min后，立即滴加2 滴碘液，观察溶液颜色的变化。
操作步骤
1、唾液淀粉酶液的准备
实验者用蒸馏水嗽口，除去食物残渣。然后含一口蒸馏 水于口中，轻嗽一分钟，吐入小烧杯中。将其稀释一倍。
2、检查试剂
试剂处理
（取2只试管，按下表操作）
试管编号 #1 3 — 2 #2 － 3 2
含0.3％NaCl的淀粉溶液（mL） 2% 蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 摇匀，沸水浴煮沸3min 记录观察结果
3. 淀粉酶的专一性实验
试管编号
（取2只试管，按下表操作）
#1 1 3
#2 1 －
试剂处理
已稀释的唾液溶液（mL） 含0.3％NaCl的0.5%淀粉溶液 （mL） 2%蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 记录观察结果
—
2
3
2
摇匀，置37℃水浴保温15min 摇匀，沸水浴煮沸2min
二、pH对淀粉酶活性的影响
三、温度对淀粉酶活性的影响
实验目的 了解温度对酶活性的影响及最适温度的定义。 实验原理
酶活性修饰实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究酶活性修饰对酶促反应的影响；2. 理解酶活性修饰的原理和机制；3. 分析不同修饰剂对酶活性的影响。
二、实验原理酶活性修饰是指通过化学或物理方法改变酶的活性，从而影响酶促反应的过程。
酶活性修饰主要分为酶的激活和酶的抑制两个方面。
激活剂可以增强酶的活性，抑制剂可以降低酶的活性。
酶活性修饰的原理主要包括以下几种：1. 共价修饰：通过共价键的形成或断裂，改变酶的结构和活性；2. 非共价修饰：通过非共价键的形成或断裂，改变酶的结构和活性；3. 竞争性抑制：抑制剂与底物竞争酶的活性中心，降低酶的活性；4. 非竞争性抑制：抑制剂与酶结合，但不与底物竞争活性中心，降低酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶（如淀粉酶、蛋白酶等）- 底物（如淀粉、蛋白质等）- 激活剂（如金属离子、有机小分子等）- 抑制剂（如有机小分子、金属离子等）- pH缓冲液- 温度控制装置- 分光光度计- 移液器- 培养皿2. 实验仪器：- 烧杯- 搅拌器- 热水浴- 移液管- 移液器- 计时器- pH计四、实验方法1. 酶活性测定：采用比色法测定酶活性，以酶促反应产生的产物（如淀粉酶催化淀粉水解产生的葡萄糖）的浓度变化来表示酶活性。
2. 激活剂对酶活性的影响：- 将酶和底物加入pH缓冲液中，在特定温度下反应；- 加入不同浓度的激活剂，观察酶活性的变化；- 记录不同激活剂浓度下酶活性的数据。
3. 抑制剂对酶活性的影响：- 将酶和底物加入pH缓冲液中，在特定温度下反应；- 加入不同浓度的抑制剂，观察酶活性的变化；- 记录不同抑制剂浓度下酶活性的数据。
4. 酶活性修饰实验：- 将酶、底物和pH缓冲液加入培养皿中，在特定温度下反应；- 加入不同浓度的激活剂或抑制剂，观察酶活性的变化；- 记录不同修饰剂浓度下酶活性的数据。
五、实验结果与分析1. 激活剂对酶活性的影响：- 随着激活剂浓度的增加，酶活性逐渐升高，在一定范围内呈线性关系；- 当激活剂浓度超过一定范围后，酶活性趋于稳定。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响
1、实验器材： (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 三、试剂和器材 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表 2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶
（二）激活剂对酶反应的影响 激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶 分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分， 也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。 一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起 剂 抑制作用； i ] 对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活 力的影响
一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶 最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应 速度的原理和方法。
二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最 适温度(即 酶促反应速度最 快时的环境温度) 酶的最适温度不是一个常 数，它与作用时间长短有 关。
— 1.5 1.0
1-2滴
1.0 1.5 1.0
1-2滴
— 1.5 1.0
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响
温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响（间接碘量法）（effects of temperature pH activitor and inhibitor to activity of enzyme）一、目的1.了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响2.学习酶活性的判定二、原理酶活性大小可以用反应速度来表示，即在单位时间内，酶所催化底物的消耗量或产物的生成量来衡量。
酶活性大，反应速度就快。
反之则慢。
酶促反应速度受多种因素的影响。
如温度、pH、激活剂、抑制剂等。
本实验是观察在不同温度，pH，以及缺乏激活剂或有抑制剂的条件下唾液淀粉酶的活性大小。
借以验证各种因素对酶活性的影响。
唾液中含有唾液淀粉酶，此酶可以使淀粉逐步水解，最后生成麦芽糖。
麦芽糖具有还原性。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解后产物的生成量（即还原性麦芽糖的多少）判定酶活性的大小。
用碘的反滴定法测定还原物的量，还原物多，酶活性大。
具体反应如下：1、试剂成分（S、H、S试剂）：CuSO4、Na2CO3、NaHCO3、KI、KIO3、酒石酸钾钠、草酸钾。
2、判定酶活性大小的化学反应过程：Na2CO3 ＋2H2O —→2NaOH ＋ H2CO3CuSO4＋2NaOH —→Cu(OH)2↓＋Na2SO45KI ＋KIO3 ＋ 3H2SO4—→3I2＋3K2SO4 ＋3H2O酶淀粉———→麦芽糖麦芽糖＋Cu++—→麦芽糖氧化产物＋Cu+Cu+＋ I2—→Cu++ ＋ 2I-COO- 草酸钾COO-Cu++＋|—————→| >CuCOO- 防止逆反应COO-剩余I2＋Na2S2O3—→2I- ＋Na2S4O6（与淀粉呈兰色) （与淀粉无色)3、判定酶活性大小的标志酶活性大→麦芽糖多→Cu+ 生成量多→I2消耗量多→剩余I2少→Na2S2O3消耗量少酶活性越大，Na2S2O3消耗量越少。
空白实验无酶活性，因此Na2S2O3消耗量最多。
与空白实验进行对比，差值越大，说明此条件下酶活性越大。
实验五影响酶活性的因素
一、目的
影响酶活性的因素
1.了解温度、pH对酶活性的影响； 2.了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
二、原理
酶的催化活性受温度的影响很大。酶促 反应在低温时进行较慢，随着温度升高而加 快，当达到其最适温度时，酶促反应速度最 快，以后又随着温度升高而减慢，以至完全
停止反应。当酶促反应速度达到最大值时的 温度，称为酶作用的最适温度。唾液淀粉酶 的最适温度为37℃。 酶的活性受环境pH的影响极为显著。通 常，各种酶只有在一定的pH范围内才表现它 的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值， 称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时， 酶的活性逐渐降低。唾液淀粉酶的最适pH值 约为6.8。
附: pH 5.0、6.8、8.0三种缓冲液的配制
锥形瓶号 pH值 1 2 5.0 6.8 0.2mol/LNa2HPO4 （mL） 10.30 15.45 0.1mol/L柠檬酸 （mL） 9.70 4.55
3
8.0
19.45
0.55
2. 器材 ：
(1) 试管与试管架 （4）沸水浴 （6）烧杯 （8）滴管 （2）恒温水浴锅 （3）冰浴 （5）吸管 （7）锥形瓶 （9）白瓷板等。
酶的活性常常受某些物质的影响，有 些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂； 有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制 剂。Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，而Cu2+为其 抑制剂。 本实验以唾液淀粉酶为例，此酶只能催 化淀粉的水解，最终产物为麦芽糖和少量的 葡萄糖 ；淀粉水解程度不同，遇碘呈色反应 不同。因此，可以通过呈色反应，了解淀粉 水解的程度，从而间接判断唾液淀粉酶活力
试剂和器材 1. 试剂：
（1）0.2%淀粉溶液（含0.3%氯化钠） 称取0.2g淀粉溶于100mL0.3%氯化钠溶液中，煮沸 2～3min。 （2）碘液 将碘化钾20g及碘10g溶于100mL水中，使用前稀释 10倍。 （3）0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液 （4）0.1 mol/L 柠檬酸溶液 （5）0.1％淀粉溶液 (不含NaCl) （6）0.9％氯化钠溶液 （7）1％硫酸铜溶液
激活剂及抑制剂对酶活性的影响(修)课件
总结词
酶可以根据其催化的反应类型、来源和结构进行分类和命名。
要点一
要点二
详细描述
根据催化的反应类型，酶可以分为氧化还原酶类、水解酶类、转移酶类、裂合酶类和合成酶类等。根据酶的来源，可以分为动物酶、植物酶和微生物酶等。根据酶的结构特征，还可以将酶分为单体酶、寡聚酶和多聚酶等。在命名上，通常采用国际纯粹与应用化学联合会（IUPAC）推荐的命名法，结合反应类型、底物、产物等特征进行命名。
总结词：酶的结构与其功能密切相关，常见的结构域包括催化结构域、底物结合结构域和调节结构域。
激活剂对酶活性的影响
是指能够增强酶促反应速度但不改变酶的活化能的物质。
激活剂
按作用机制可分为共价型和非共价型激活剂。
分类
通过与酶或底物结合，改变反应途径，降低反应所需活化能，从而加速反应速度。
降低反应活化能
竞争性抑制
抑制剂与酶的活性中心以外的结合位点结合，使酶不能同时结合底物，从而降低酶的活性。
非竞争性抑制
抑制剂与酶和底物复合物结合，使底物不能继续结合在酶的活性中心上，从而降低酶的活性。
反竞争性抑制
是一种重金属离子抑制剂，能够与酶活性中心的锌离子结合，从而抑制许多含锌离子的酶的活性。
硫酸铜
能够与酶活性中心的巯基结合，抑制许多含巯基的酶的活性。
激活剂与抑制剂对酶活性影响的实验研究
实验结论
根据实验结果分析得出结论，总结激活剂和抑制剂对酶活性的影响，以及作用机制。
讨论
对实验结果进行深入讨论，分析激活剂和抑制剂对酶活性影响的机制，探讨实际应用中的可能性与局限性。
感谢酶活性中心的钙离子结合，抑制许多含钙离子的酶的活性。
草酸盐
能够与酶活性中心的铁离子结合，抑制许多含铁离子的酶的活性。
生化》实验四影响酶活性的因素
• 2. 器材 恒温水浴锅 电炉 白瓷板
四、实验操作
• 1. 唾液淀粉酶的制备
取干净的水杯，盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水，1-2分钟后，吐入一干净烧杯 中，棉花过滤。
• 2. 温度对唾液淀粉酶活力的影响
取3支试管，按下表操作：
操作项目
1%淀粉溶液(ml) pH6.8磷酸缓冲液(ml) 唾液淀粉酶溶液(ml)
• 4.激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
取试管3支，按下表操作
操作
管号
1
2
0
0
1% CuSO4(ml)
0
1
0
蒸馏水(ml)
0
0
1
唾液淀粉酶溶液(ml)
1
1
1
1%淀粉溶液(ml)
1
1
1
摇匀，37℃水浴反应1min左右即可用碘液检查1号试管淀粉水 解程度，待1号试管的反应液不再变色时取出所有试管。分别向各管 滴加1滴碘液，观察比较各管颜色深浅，并解释。
• 1.试剂
1%淀粉溶液：1g淀粉和0.3g NaCl，用5ml蒸馏水悬浮
，慢慢倒入60ml煮沸的蒸馏水中，煮沸1min，冷却至室 温，加水到100ml，冰箱贮存。
碘液：3g KI溶于5ml蒸馏水中，加1g I2，溶解后再加29
5ml水，混匀贮存于棕色瓶中。
pH4.0、pH6.8、pH8.0磷酸盐缓冲液 1% CuSO4溶液
取试管3支，按下表操作
操作
1
pH4.0磷酸缓冲液(ml)
2
pH6.8磷酸缓冲液(ml)
0
pH8.0磷酸缓冲液(ml)
0
1%淀粉溶液(ml)
1
激活剂及抑制剂对酶活性的影响(修)
激活剂及抑制剂对酶活性的影响酶是一种催化化学反应的生物催化剂。
它可以降低化学反应的活化能，因此可以加速化学反应。
酶在许多生化过程中起着至关重要的作用。
因此，了解酶催化反应的机制以及如何改变酶的活性是非常重要的。
在这篇文章中，我们将讨论激活剂和抑制剂如何影响酶的活性。
激活剂激活剂是一种可以提高酶活性的分子。
它可以通过与酶结合来改变酶的构象，并增强酶的活性。
激活剂通常与酶的活性部位结合，并通过改变酶的构象来影响酶的功能。
激活剂对酶的作用可以是可逆的或不可逆的。
一些激活剂可以增加酶催化反应的速率常数（kcat）。
这意味着，反应的速率可以增加，而反应所需的物质量可以减少。
激活剂可以作用于酶本身或作用于底物。
例如，ATP（三磷酸腺苷）就是一种常见的激活剂，它可以作用于许多酶，并提高它们的活性。
ATP可以通过与酶活性部位结合来影响酶的构象，从而增强酶的催化活性。
抑制剂抑制剂是一种可以减低酶活性的分子。
它可以通过与酶结合来阻碍酶的功能。
抑制剂通常与酶的活性部位结合，并通过改变酶的构象来影响酶的功能。
抑制剂对酶的作用可以是可逆的或不可逆的。
抑制剂可以分为两类：竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂。
竞争性抑制剂可以与底物竞争结合酶的活性部位，并阻止底物结合酶。
这可以减慢酶催化反应的速率。
例如，苯丙氨酸羧化酶具有两个基本底物，苯丙氨酸和乙酰辅酶A。
竞争性抑制剂可以与酶的活性部位结合，并阻止苯丙氨酸结合酶，从而减慢反应的速率。
另一方面，非竞争性抑制剂不结合酶的活性部位，而是结合在其他部位上。
这可能会影响酶的构象，从而降低酶的活性。
例如，草酸可以作为异柠檬酸脱氢酶的非竞争性抑制剂。
草酸的结构与该酶的辅酶结合部分相似，因此可以结合在辅酶-酶复合物上，从而降低酶的活性。
激活剂和抑制剂是可以影响酶活性的分子。
激活剂可以通过改变酶的构象来增强酶的催化活性，而抑制剂通过改变酶的构象来减慢酶的催化活性。
竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂是两种不同类型的抑制剂，它们对酶的构象影响是不同的。
影响酶活性的条件实验报告
一、实验目的本实验旨在探究影响酶活性的条件，包括温度、pH值、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和激活剂等因素，并通过实验验证这些因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，其活性受多种因素影响。
温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等都是影响酶活性的重要因素。
本实验主要探究这些因素对酶活性的影响，并通过观察实验现象，分析实验结果。
三、实验材料与仪器材料：1. 酶制剂（如淀粉酶、蛋白酶等）2. 底物（如淀粉、蛋白质等）3. 抑制剂（如重金属盐、酸、碱等）4. 激活剂（如某些金属离子等）5. pH试纸、pH计6. 温度计7. 移液器8. 试管9. 水浴锅仪器：1. 紫外可见分光光度计2. 热水浴锅3. 冷水浴锅4. pH计四、实验方法与步骤1. 温度对酶活性的影响- 将酶制剂和底物分别置于不同温度的水浴锅中预热。
- 将预热好的酶制剂和底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
2. pH值对酶活性的影响- 使用pH试纸或pH计测定不同pH值下酶的活性。
- 将酶制剂和底物分别置于不同pH值的溶液中，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响- 将酶制剂和不同浓度的底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
4. 酶浓度对酶活性的影响- 将不同浓度的酶制剂与底物按一定比例混合，记录混合时间。
- 使用紫外可见分光光度计测定反应体系中底物的浓度变化，计算酶活性。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响- 将抑制剂和激活剂分别加入酶制剂和底物中，观察酶活性的变化。
五、实验结果与分析1. 温度对酶活性的影响- 随着温度升高，酶活性逐渐增强，在一定温度范围内达到最大值，随后逐渐下降。
2. pH值对酶活性的影响- 酶活性在不同pH值下表现出不同的活性，存在一个最适pH值，酶活性在此pH值下达到最大值。
酶活性大学实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解酶的催化作用原理。
2. 掌握测定酶活性的方法。
3. 探究温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等因素对酶活性的影响。
二、实验原理酶是一种具有催化功能的蛋白质，能够加速化学反应的速率。
酶的活性受到多种因素的影响，如温度、pH值、底物浓度、酶浓度、抑制剂和激活剂等。
本实验通过测定酶催化特定反应的速率，分析不同因素对酶活性的影响。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：试管、烧杯、量筒、胶头滴管、恒温水浴锅、秒表、pH计、温度计、冰箱、显微镜等。
2. 试剂：淀粉酶、淀粉溶液、碘液、氢氧化钠、盐酸、葡萄糖标准液、葡萄糖氧化酶、磷酸盐缓冲液、硫酸铜、氯化钠等。
四、实验步骤1. 温度对酶活性的影响（1）分别配制不同温度（如0℃、20℃、40℃、60℃、80℃）的淀粉酶溶液。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入上述不同温度的淀粉酶溶液，混匀。
（3）观察淀粉溶液在酶作用下的颜色变化，记录所需时间。
2. pH值对酶活性的影响（1）分别配制不同pH值（如2、4、6、8、10）的淀粉酶溶液。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入上述不同pH值的淀粉酶溶液，混匀。
（3）观察淀粉溶液在酶作用下的颜色变化，记录所需时间。
3. 底物浓度对酶活性的影响（1）配制不同浓度的淀粉溶液。
（2）取等量淀粉酶溶液，分别加入上述不同浓度的淀粉溶液，混匀。
（3）观察淀粉溶液在酶作用下的颜色变化，记录所需时间。
4. 酶浓度对酶活性的影响（1）配制不同浓度的淀粉酶溶液。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入上述不同浓度的淀粉酶溶液，混匀。
（3）观察淀粉溶液在酶作用下的颜色变化，记录所需时间。
5. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响（1）分别配制含有不同抑制剂（如硫酸铜、氯化钠）和激活剂（如氢氧化钠、盐酸）的淀粉酶溶液。
（2）取等量淀粉溶液，分别加入上述不同抑制剂和激活剂的淀粉酶溶液，混匀。
（3）观察淀粉溶液在酶作用下的颜色变化，记录所需时间。
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六、思考题
1.什么是激活剂和抑制剂？ 本实验中的激活剂和抑制剂分 别是什么？
2.四支试管中加入1％ Na2SO4的目的是什么？
下次实验： P76页
血糖测定
实验报告明天交，请组长负起责 任。谢谢同学们配合！
实验现象分析
试管1遇碘呈无色，证明Cl-离子对唾液淀粉酶有激活作 用。 试管2遇碘呈红色，证明唾液淀粉酶也能催化淀粉水解， 但比加入激活剂Cl-离子水解慢。 试管3遇碘呈蓝色，证明Cu2+离子对唾液淀粉酶有抑制 作用，使酶活性丧失，淀粉不能水解。 试管4遇碘呈紫色，唾液淀粉酶催化淀粉水解比试管2更 慢扰抑，；制证同剂明时。也Na证+ 、明了SON4a2-+离离子子对不唾是液激淀活粉剂酶、的S催O4化2-离活子性不有是干
等。 必需激活剂 如：己糖激酶必需
激活剂
由Mg2+激活
非必需激活剂 如：Cl-是唾
液淀粉酶的激活剂
加激活剂Cl- (1％NaCl)
淀粉酶催化淀粉逐步水解 加碘呈色
淀粉
蓝色
紫糊精
紫色
红糊精
红色
无色糊精
无色
麦芽糖 还原糖
无色
(二)抑制剂对酶活性影响的原理 能够有选择地使酶的活性降低或 丧失，但不能使酶蛋白变性的物质 称为酶的抑制剂。 抑制剂多与酶活性必需基团结合， 直接或间接的影响酶的活性中心，从 而抑制酶的活性。 根据抑制剂与酶结合的紧密程度不 同，又分可逆性抑制和不可逆抑制剂。
一、实验目的
1.掌握激活剂及抑制剂对酶活 性影响的原理。
2.熟悉实验内容及操作步骤。
3.了解温度对酶活性理
使酶由无活性变为有活性或使酶
活性增加的物质称为酶的激活剂。 激活剂是指无机离子，如金属离子
Mg2+、Zn2+ … 、酸根离子 Cl- 、
PO43- …和小分子有机物胆汁酸盐、VC
激活剂及抑制剂对酶活性影响的意义
很多药物是酶的抑制剂，通过对 病原体内某些酶的抑制作用或改变体 内某些酶的活性而发挥其治疗功效， 了解酶的抑制作用是阐明药物作用机 制和设计研究新药的重要途径。
1. Cl-对唾液淀粉酶具有激活作用。
2.重金属离子，例如Cu2+对唾液淀 粉酶有抑制作用，
三、实验仪器与试剂 1.仪器
综上所述，证明唾液淀粉酶的激活剂是Cl-离 子，抑制剂是Cu2+离子。
四支试管反应速度： 1 > 2 > 4 > 3
放映结束 感谢各位观看！
谢 谢！
让我们共同进步
可逆性抑制剂
抑制剂通过非共价键或酶-底物复
合物可逆性结合，使酶活性降低或
抑制剂
丧失。采用透析或超滤等物理方法 将抑制剂除去，恢复酶活性。
不可逆性抑制剂
抑制剂通常与酶活性中心上的必需基团形成共 价键，使酶失去活性。不能用透析、超滤等方法 将其除去，只能靠某药物才能解除，恢复酶活性。
重金属离子Cu2+对唾液淀粉酶有抑制作用
烧杯、试管、点滴板、滴管、漏 斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴箱 等。
2.试剂 1％淀粉液、 1％ NaCl溶液、
1％CuSO4溶液、 1％NaSO4溶液、 稀碘液、唾液。
四、实验内容及操作步骤
1.收集唾液
用少量（约3～5ml）冷水 漱口约1min，收集唾液至漏 斗中，过滤，备用。
2.加样
试剂（ ml ） 试管1 蒸馏水 1 ml
当点滴板上有一孔呈现无色时， 取出水浴中的4支试管，各管加碘
液1～3滴，摇匀。
观察4支试管的颜色，比较反应速 度。
五、注意事项 1.刻度吸量管不能交叉使用，否则污染 试剂，影响反应现象。 2.实验所用试管冲洗干净；编号1、2、 3、4的烧杯及滴管取淀粉水解液时不能交 叉使用，否则污染试剂，影响反应现象。 3. 做完实验所有试剂摆放好，取淀粉 的刻度吸量管冲洗干净，桌面擦干净，登 记签名。 4.值日生听老师安排，认真打扫，经老 师批准才能离开实验室。
1%NaCl 1 ml
试管2 2 ml
试管3 1 ml
1%CuSO4
1 ml
1%淀粉 1 ml 1 ml 1 ml
1%Na2SO4
唾液
2滴 2滴 2滴
加碘现象
观察、记录实验现象。
试管4 1 ml
1 ml 1 ml 2滴
3. 振荡混匀，同时置于37℃水 浴中，每2min取出一滴，在点滴 板上做碘的呈色反应。