中成药中有效成分含量测定的研究进展

快速发展时期已经来临。当前，中药要进入世界市场，实现中药现代化，首当其冲是其质量的控制，而含量测定是质量控制最关键的部分。中成药在剂型、品种、产量及应用范围等方面均有迅速的发展。1985年版《中国药典》中收载达207个，为使中成药的内在质量具有客观的评价方法,逐步制订切实可行的质量指标,我国药学工作者在这方面做了不少工作，到2010年版《中国药典》中共收载中成药标准1069个品种，新增各项鉴别2165项，其中显微鉴别259项、簿层色谱鉴别1818项、液相色谱鉴别25项、气相色谱鉴别9项等，2010年版《中国药典》大幅度增加收载品种和检测项目，能多药物多成分检测，更标准科学有效等等。

一、中成药在国内外的情况

（一）国外中成药情况。

到目前为止，进入国外市场并且得到消费者广泛认可的我国中成药品种主要有几大类：第一类是传统中成药品种，这部份中成药曾随着历史上华人迁入国外和外国人回途时进入外国市场；第二类是通过贸易渠道进入国外市场的中成药产品，这类品种主要以新特药或制剂技术先进的中成药品种为主；第三类为通过电视广告或媒体影响而进入外国市场的中成药品种，如六味地黄丸、乌鸡白凤丸、神奇止咳糖浆、消遥丸、西瓜霜含片、金嗓子、湿毒清等产品；第四类是通过边贸或其它非正常渠道进入外国的中成药品种，这类品种以大路货产品为主，价格低，疗效好，适合国外消费市场的需求，以颗粒剂如板兰根颗粒、夏桑菊颗粒、罗汉果颗粒等和片剂清火栀麦片、穿心莲片、咳特灵片、Vc银翘片等以及部份外用类中成药产品。

（二）简述国内中成药情况。

我国中药资源极为丰富，是世界上最大的药材生产国。全国药用资源共12807种，其中药用植物

11146种，药用动物1500余种，药用矿物80种；用量较大的药材均能人工栽培；中成药在应用上品种繁多，为新药、保健食品的开发提供了得天独厚的来源；特别是中药在临床上表现出来的相应毒副作用小或无毒副作用、无耐药性，对一些疑难病、慢性病和老年病有独特疗效等优势，引起了世界许多国家的重视。

天然植物提取物目前被广泛应用于药品、保健品和化妆品，促使世界植物药市场的需求进一步增加。我国从中药与天然药物中开发的新的单体化合物达几十种之多，如强心灵、葛根总黄酮、延胡索乙素、喜树碱、秋水仙碱、青蒿素等。特别是绿茶提取物、青蒿素、芦荟提取物、银杏叶提取物等比较热销，多数产品出口平均单价均有不同程度上涨。

二、中成药有效成分含量测定检测方法

近年来,中成药在剂型,品种,产量及应用范围等方面均有迅速的发展。《中国药典》(1985年版。下称《药典》)一部中收载达207个。为使中成药的内在质量具有客观的评价方法,逐步制订切

实可行的质量指标,我国药学工作者在这方面做了不少工作。现将1980年以来,有关中成药含量测定方法的研究概况。

（一）化学定量法

化学定量法是一种古老的方法，适用于单味中药制剂或处方中无机成分的含量测定。主要包括重量法和滴定法。此类方法在复杂的处方中仅能测定出某类成分的总量, 专属性不强。

（二）比色法

中药的有效成分与特定显色试剂呈色后，比色测定。本法可直接测定未经分离的中药中黄酮类、蒽醌类、皂甙类、生物碱、酚性化合物等成分。（三）紫外分光光度法

中药的有效成分在紫外区有特征性吸收者，不需加显色剂就能在特定的波长有最大吸收，通过测定其吸收度计算含量。该法灵敏度可达10-4～10-7g/ml，精密度为0.5%，适用于微量和痕量组分分析，较比色法应用更广泛。该法可测定中药中黄酮类、香豆素类、皂甙类、二苯乙烯苷类等化合物的含量。

（四）红外光谱法（FTIR）

红外光谱[1]专属性强，重现性好，操作方便，

能够提供极其丰富的分子结构信息。随着傅里叶变换红外光谱仪的普及，红外光谱法在中药有效成分的含量测定中也具独特的作用。有报道采用红外光谱测定中药酸枣仁和补骨脂中磷脂的含量，并与比色法测定结果比较，认为该法操作简便，结果稳定[2]。红外光谱对于中成药有效成分测定有较大的帮助。

（五）柱层析或纸层析一紫外分光光度法

柱层析或纸层析一紫外分光光度法中成药中所含成分通过氧化铝层析柱, 用溶剂洗脱后, 根据成分的性质可于一定的波长处测定。例如: 左金丸、戊己丸、香连丸、万氏牛黄清心丸和三黄片中的小檗碱, 按上法处理后, 可于345-350 nm波长测定,[3-4]柱层析由手吸附剂、溶剂和决脱剂的选择不易而纸层析由于影响因素多, 误差大。所以这些方法已很少应用。

（六）薄层扫描法(TLCS)

薄层扫描法指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱有吸收紫外光或可见光的斑点或对经照射能激发产生荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于药品分析的鉴别，杂质检查和含量测定。基于被测成分的光谱特征分

为紫外吸收光谱法、荧光法测定、分光光度法。因其分离结果直观，方法简便，灵敏度高，稳定性好，在中药复方制剂有效成分含量测定中占相当的比例。该法可用于测定绿原酸、淫羊藿苷、猪去氧胆酸、靛玉红等的含量[5]。

（七）气相色谱法（GC）

气相色谱法具有高效能，高选择性，高灵敏度，速度快，用样量少，重现性好的特点。但受样品蒸汽压的限制，只能测定挥发性成分的含量。GC 以其高效的分离能力常用于中药挥发性成分（如芳香醇、蒎烯等）的测定，中药的其他成分（如酚类、生物碱、内酯类等）经衍生化反应后也可用GC分析。《中国药典》2005年版一部中有47项采用气相色谱法测定中药成分的含量。中药制剂中丹皮酚、麻黄碱、麝香酮、察香酮、冰片、斑鳌素等成分均可用此法进行含量测定[6]。（八）高效液相色谱法（HPLC）

高效液相色谱法[7]主要是利用要测定的指标成分与其他组分在流动相与固定相中的分配系数不同而把指标成分分离出来并进行含量测定。具有分离效率高，准确性和重现性好，分析速度快，选择性优和灵敏度高的特点。其与气象色谱法比

不受样品挥发性的限制，对于氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、类脂等挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物尤为适合。因此在中药含量测定中，高效液相色谱法使用得最为广泛，但该法对设备要求高，建立色谱条件也较薄层扫描法麻烦一些。该法检测的中药有效成分主要有生物碱类、甙类、黄酮类、蒽醌类、香豆素类、萜类、有机酸类、甾酮及甾醇类等。《中国药典》2005年版一部采用高效液相色谱法对中药成分进行含量测定多达518项。中药新药申报中，含量测定绝大部分也都采用高效液相色谱法。高效液相色谱法可同时测定中药中多种成分。

三、薄层扫描法。

（一）薄层扫描法的原理和特点

1938年，俄国人Izmailov和Schraiber首次发表了一篇利用薄层色谱法技术作为药物分析方法的文章。此后的几十年里，薄层色谱法作为一种好的分离方法迅速发展起来，并在此基础上建立起了一种现代定量分析检测技术—薄层扫描法。该法检测灵敏度高，检测速度快，检测范围广，分辨率高，样品不易被破坏，可以从薄层