最新.薄层色谱法在中药检验中的应用及操作要点
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多数药材及部分处方药味较少的中成药采用一种提取方法即可；对于有些成 分复杂的药材及多数中成药，则需要多种提取方法联合。
操作要点及常见问题分析-薄层板的选择
硅胶 正相吸附色谱。具微酸性，适合酸性或中性成分的 鉴别，用于生物碱等碱性成分时，需制成碱板或在展开剂 中加入碱。应用最为广泛。 氧化铝 正相吸附色谱。具碱性，适合中性或碱性成分的 鉴别，不适合用于黄酮等酚酸性物质。 聚酰胺 氢键吸附色谱。适合黄酮类、醌类等的鉴别。
测定。
方法简述
仪器与 材料
支持物与固定相
支持物：玻璃板、塑料板、铝板 固定相：硅胶、键合硅胶、微晶纤维素、聚酰 胺、氧化铝
点样器与展开容器
点样器：微升毛细管（手动、半自动、自动） 展开容器：平底展开缸、双槽展开缸（推荐）
显色与检视ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
显色：玻璃喷雾瓶、空气压缩机 检视：暗箱+摄像设备
方法简述
直观性
薄层方法的优势
在检验中的应用 鉴别
分为以对照品为对照、以对照药材为对照、以对照品和对照药材联合对照三 种方式，在中药及中药材检验中应用广泛。
白芷薄层色谱鉴别（以对照品为对照）： 1、欧前胡素 2、异欧前胡素 3-13、白芷药材
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
在检验中的应用 鉴别
红参薄层色谱鉴别（以对照药材为对照）： 1、红参对照药材 2-11、红参药材
薄层色谱法在中药检验中的应用 及操作要点
目录
CONTENTS
1
薄层色谱方法简述
2
薄层色谱法在中药 检验中的应用
3
薄层色谱操作要点
及常见问题分析
方法简述
定义
薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上， 在展开容器内用展开剂展开，是供试品所 含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物 质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层 色谱仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量
提取溶剂 水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷 （二氯甲烷）、乙醚、正己烷（环己烷）、苯（甲苯）、 石油醚。 提取方法 超声、回流、索式提取、加酸水解、萃取，挥 发油提取法、升华法
操作要点及常见问题分析-供试品的制备
石油醚、正己烷（环己烷）、苯（甲苯） 用于提取油脂、蜡、叶绿 素、挥发油、游离甾体及三萜类化合物。 乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯 用于提取游离生物碱、有机酸、黄 酮、香豆素等的苷元 丙酮、乙醇、甲醇 用于提取苷类、生物碱盐及鞣质等 水 用于提取氨基酸、糖类、无机盐等
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
对照品or对照药材or对照品+对照药材？
乌梅薄层色谱鉴别 （S：熊果酸）
d a b2 f
北柴 胡
大叶 柴胡
锥叶 柴胡
西南 藏柴 柴胡 胡
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
中药材 选择该味药材的主要活性成分，必要的时候要用 多个薄层来鉴别，尽可能全面的反应该味药材的薄层特征。
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在检验中的应用 含量测定
在检验中的应用 指纹图谱
操作要点及常见问题分析
标准物质的选择
展开
供试品的制备
显色
薄层板的选择
影响因素
点样
常见问题分析
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
对照品or对照药材or对照品+对照药材？
对照品 早期。缺点;不能反应药材的整体特征；有 些对照品多种植物中共存，无专属性；对照品的分 离纯化代价高。 对照药材 中国药典1990年版起，开始增加“对照 药材”。 对照品+对照药材 多用。
操作要点及常见问题分析-点样
手动点样 最常用的为定量点样毛细管，规格有0.5μl、1μl、 2μl、3μl、5μl、10μl等。
操作要点及常见问题分析-手动点样要点
可用点状点样及条带状点样两种方式。
要点：1、点样斑点要小，尽量减少溶剂扩散现象。斑点的直径尽量小于
0.5cm。 2、对于点样量大的样品，多次点样，吹干，对于极性较大的溶剂溶解的供试 品（如乙醇、水、含水醇等），每次点样量要少，并及时吹干。 3、对于α-香附酮、桂皮醛、冰片等本身具有挥发性的成分，吹干时不可用热 风。 4、当供试品中斑点较多或目标斑点附近有其他干扰斑点时，宜选用条带状点 样。
中成药 按照制法选择合适的标准物质。
丹参 当丹参为生粉入药时：同中药材，必要时除杂。 当丹参为水提入药时：样品中主要含的为丹参中水 溶性成分，丹参酮ⅡA 的含量会极低，对照制剂选 择丹酚酸B和丹参对照药材。
操作要点及常见问题分析-供试品的制备
一般采用溶剂提取法。根据选定的标准物质（或药材中主 要活性部位）的结构特性，选择合适的提取溶剂。
操作要点及常见问题分析-点样
半自动点样 样品手动吸入，由仪器进行条带状喷雾点样。
优点:定量准确，薄层斑 点大小一致，可控性和重 复性均较好。常和薄层扫 描仪联用，用于含量测定。
谱
在中药检验中的应用
应用
鉴别 含量测定
20世纪60年代，薄层色谱取代纸色谱（纸层析） 技术作为一种快速、简单、灵敏的鉴别手段应用 于中药材及中成药的鉴别
随着仪器设备的不断改进，薄层扫描法作为 一种含测方法应用于中药及中药材的含量测 定中。
指纹图谱 将鉴别和含量测定结合起来，用于某些中药 材与其同属近缘植物的鉴别
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在检验中的应用 鉴别
五味子薄层色谱鉴别（对照品和对照 药材联合对照）： 1、五味子对照药材 2、五味子甲素
3、五味子可醇用甲于药材真伪鉴别、成 样品（6、药1中0、药13材）投：料未检的出辅助鉴别
样品（4、5、8、12）检出 样品（7、9、11）南北五味子混投
灵活性
●薄层色谱独有的特点是 分析结果以直观的彩色图 像表达 ，“一幅图胜过 千言万语"
● 各单元操作相互独 立，分层次进行和中止 ● 点样器材和方法、展
开方式、显色试剂选择、 直观比较或扫描比较可 根据需要灵活变通； ● 离线操作，个人占机 时间短。
时结效果性
● 色谱生成快速 ● 同板可以同时产生 多达16～18个样品色
丹参 丹参酮ⅡA为丹参中的菲醌类成分，具有扩张冠脉的 作用；丹酚酸B为其水溶性的活性成分，具有抗氧化、抗 自由基、对心脑血管缺血-再灌注损伤具有保护作用。为丹 参中主要的活性成分。《中国药典》2015年版一部中，丹 参的鉴别所选用的标准物质为丹参对照药材、丹参酮ⅡA、 丹酚酸B。
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
操作要点及常见问题分析-薄层板的选择
硅胶 正相吸附色谱。具微酸性，适合酸性或中性成分的 鉴别，用于生物碱等碱性成分时，需制成碱板或在展开剂 中加入碱。应用最为广泛。 氧化铝 正相吸附色谱。具碱性，适合中性或碱性成分的 鉴别，不适合用于黄酮等酚酸性物质。 聚酰胺 氢键吸附色谱。适合黄酮类、醌类等的鉴别。
测定。
方法简述
仪器与 材料
支持物与固定相
支持物：玻璃板、塑料板、铝板 固定相：硅胶、键合硅胶、微晶纤维素、聚酰 胺、氧化铝
点样器与展开容器
点样器：微升毛细管（手动、半自动、自动） 展开容器：平底展开缸、双槽展开缸（推荐）
显色与检视ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
显色：玻璃喷雾瓶、空气压缩机 检视：暗箱+摄像设备
方法简述
直观性
薄层方法的优势
在检验中的应用 鉴别
分为以对照品为对照、以对照药材为对照、以对照品和对照药材联合对照三 种方式，在中药及中药材检验中应用广泛。
白芷薄层色谱鉴别（以对照品为对照）： 1、欧前胡素 2、异欧前胡素 3-13、白芷药材
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在检验中的应用 鉴别
红参薄层色谱鉴别（以对照药材为对照）： 1、红参对照药材 2-11、红参药材
薄层色谱法在中药检验中的应用 及操作要点
目录
CONTENTS
1
薄层色谱方法简述
2
薄层色谱法在中药 检验中的应用
3
薄层色谱操作要点
及常见问题分析
方法简述
定义
薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上， 在展开容器内用展开剂展开，是供试品所 含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物 质按同法所得的色谱图对比，亦可用薄层 色谱仪进行扫描，用于鉴别、检查或含量
提取溶剂 水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷 （二氯甲烷）、乙醚、正己烷（环己烷）、苯（甲苯）、 石油醚。 提取方法 超声、回流、索式提取、加酸水解、萃取，挥 发油提取法、升华法
操作要点及常见问题分析-供试品的制备
石油醚、正己烷（环己烷）、苯（甲苯） 用于提取油脂、蜡、叶绿 素、挥发油、游离甾体及三萜类化合物。 乙醚、三氯甲烷、乙酸乙酯 用于提取游离生物碱、有机酸、黄 酮、香豆素等的苷元 丙酮、乙醇、甲醇 用于提取苷类、生物碱盐及鞣质等 水 用于提取氨基酸、糖类、无机盐等
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
对照品or对照药材or对照品+对照药材？
乌梅薄层色谱鉴别 （S：熊果酸）
d a b2 f
北柴 胡
大叶 柴胡
锥叶 柴胡
西南 藏柴 柴胡 胡
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
中药材 选择该味药材的主要活性成分，必要的时候要用 多个薄层来鉴别，尽可能全面的反应该味药材的薄层特征。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
在检验中的应用 含量测定
在检验中的应用 指纹图谱
操作要点及常见问题分析
标准物质的选择
展开
供试品的制备
显色
薄层板的选择
影响因素
点样
常见问题分析
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择
对照品or对照药材or对照品+对照药材？
对照品 早期。缺点;不能反应药材的整体特征；有 些对照品多种植物中共存，无专属性；对照品的分 离纯化代价高。 对照药材 中国药典1990年版起，开始增加“对照 药材”。 对照品+对照药材 多用。
操作要点及常见问题分析-点样
手动点样 最常用的为定量点样毛细管，规格有0.5μl、1μl、 2μl、3μl、5μl、10μl等。
操作要点及常见问题分析-手动点样要点
可用点状点样及条带状点样两种方式。
要点：1、点样斑点要小，尽量减少溶剂扩散现象。斑点的直径尽量小于
0.5cm。 2、对于点样量大的样品，多次点样，吹干，对于极性较大的溶剂溶解的供试 品（如乙醇、水、含水醇等），每次点样量要少，并及时吹干。 3、对于α-香附酮、桂皮醛、冰片等本身具有挥发性的成分，吹干时不可用热 风。 4、当供试品中斑点较多或目标斑点附近有其他干扰斑点时，宜选用条带状点 样。
中成药 按照制法选择合适的标准物质。
丹参 当丹参为生粉入药时：同中药材，必要时除杂。 当丹参为水提入药时：样品中主要含的为丹参中水 溶性成分，丹参酮ⅡA 的含量会极低，对照制剂选 择丹酚酸B和丹参对照药材。
操作要点及常见问题分析-供试品的制备
一般采用溶剂提取法。根据选定的标准物质（或药材中主 要活性部位）的结构特性，选择合适的提取溶剂。
操作要点及常见问题分析-点样
半自动点样 样品手动吸入，由仪器进行条带状喷雾点样。
优点:定量准确，薄层斑 点大小一致，可控性和重 复性均较好。常和薄层扫 描仪联用，用于含量测定。
谱
在中药检验中的应用
应用
鉴别 含量测定
20世纪60年代，薄层色谱取代纸色谱（纸层析） 技术作为一种快速、简单、灵敏的鉴别手段应用 于中药材及中成药的鉴别
随着仪器设备的不断改进，薄层扫描法作为 一种含测方法应用于中药及中药材的含量测 定中。
指纹图谱 将鉴别和含量测定结合起来，用于某些中药 材与其同属近缘植物的鉴别
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
在检验中的应用 鉴别
五味子薄层色谱鉴别（对照品和对照 药材联合对照）： 1、五味子对照药材 2、五味子甲素
3、五味子可醇用甲于药材真伪鉴别、成 样品（6、药1中0、药13材）投：料未检的出辅助鉴别
样品（4、5、8、12）检出 样品（7、9、11）南北五味子混投
灵活性
●薄层色谱独有的特点是 分析结果以直观的彩色图 像表达 ，“一幅图胜过 千言万语"
● 各单元操作相互独 立，分层次进行和中止 ● 点样器材和方法、展
开方式、显色试剂选择、 直观比较或扫描比较可 根据需要灵活变通； ● 离线操作，个人占机 时间短。
时结效果性
● 色谱生成快速 ● 同板可以同时产生 多达16～18个样品色
丹参 丹参酮ⅡA为丹参中的菲醌类成分，具有扩张冠脉的 作用；丹酚酸B为其水溶性的活性成分，具有抗氧化、抗 自由基、对心脑血管缺血-再灌注损伤具有保护作用。为丹 参中主要的活性成分。《中国药典》2015年版一部中，丹 参的鉴别所选用的标准物质为丹参对照药材、丹参酮ⅡA、 丹酚酸B。
操作要点及常见问题分析-标准物质的选择