棉签擦拭法取样操作规程
微生物表面取样方法
微生物表面取样方法引言：微生物是一类极其微小的生物体，存在于各种环境中，包括土壤、水体、空气中以及生物体的表面等。
研究微生物对于了解生物界的多样性、生态系统的功能以及人类健康等具有重要意义。
然而，微生物的研究面临着一个重要的问题，即如何有效地采集微生物样品。
本文将介绍几种常用的微生物表面取样方法。
一、刷拭法刷拭法是最常用的微生物表面取样方法之一。
该方法适用于采集微生物富集在固体表面的样品，如建筑物、设备表面等。
操作步骤如下：1. 选择一把消毒过的刷子，并将其浸入含有适当缓冲液的容器中。
缓冲液的选择应根据研究的目的而定，常见的有PBS缓冲液、生理盐水等。
2. 将刷子沿着被采样表面来回刷拭，以保证样品的均匀采集。
3. 将刷子放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，以使微生物从刷子上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
二、擦拭法擦拭法是一种适用于平滑表面的微生物采样方法。
常见的应用场景包括医院、实验室等地的台面、玻璃器皿等。
操作步骤如下：1. 选择一块消毒过的无纺布或棉签，并将其浸入含有缓冲液的容器中。
2. 将布或棉签沿着被采样表面来回擦拭，以保证样品的均匀采集。
3. 将布或棉签放入含有缓冲液的试管中，并进行震荡或振荡，使微生物从布或棉签上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
三、粘贴法粘贴法适用于采集微生物富集在不规则表面或微小孔隙中的样品，如土壤、植物叶片等。
操作步骤如下：1. 准备一块消毒过的胶片或胶带，并将其贴在采样区域上。
2. 将胶片或胶带撕下，并放入含有缓冲液的试管中。
3. 进行震荡或振荡，使微生物从胶片或胶带上脱落到缓冲液中。
4. 取出试管，将液体倒入试管中，并进行后续分析。
四、切割法切割法适用于采集微生物富集在固体样品表面的样品，如食品、植物组织等。
操作步骤如下：1. 准备一把消毒过的刀具，并将其切割在需要采样的区域。
2. 将切割下来的样品放入含有缓冲液的试管中。
版药典表面微生物检测操作规程
1.目的：建立表面微生物测试标准操作规程，保证测试人员操作规范化、标准化。
2.范围：适用于洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面的微生物量的测试。
3.责任：表面微生物检测员。
4.内容：4.1基本概念：4.1.1菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表示。
4.1.2表面微生物：4.1.3表面微生物菌落数:规定面积的洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面，用接触平皿法或擦拭法检测的微生物的菌落数目，以个/皿表示。
4.2测试原理:本测试方法利用接触平皿法或擦拭法收集洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面的微生物，经若干时间，在适宜的方法和条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净室（区）表面、设备以及与产品接触表面的微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。
4.3测试方法：4.3.1使用的仪器设备和培养基:高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。
恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。
培养皿:一般采用φ90mm×15mm玻璃培养皿。
使用前将培养皿置于160℃干热灭菌120min。
接触碟：一般采用φ55mm无菌接触碟。
培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。
将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2-8℃的坏境中存放。
4.3.2采样点选择：洁净区微生物测试点选择表面微生物监测的采样点数目及其布局根据以下几个方面设置：空调系统验证的结果房间的用途与产品的距离人流物流方向如何布点：对于同一洁净区，每个相同的取样物体在其不同的地方采2个样。
如墙面2个采样点，地面2个采样点，洁净区主要设备2个采样点。
注：表面微生物监测的取样点数应依下列因素确定：1.洁净区（室）的大小；2.设备、管路等的复杂程度；3.生产活动的重要性；4.易受污染的部位等。
清洁方法验证操作规程
清洁方法验证操作规程1目的建立一个清洁验证管理标准，使清洁验证工作规范化、标准化和科学化。
2范围本标准适用于本公司质量管理体系的清洁方法的验证。
3职责3.1设备直接负责人：起草设备清洁验证方案、报告；参与清洁验证确保设备按照清洗规程的要求进行相关的验证活动；在引入新设备时负责评估其对于清洁验证的影响；确保在符合法规的前提下对系统进行验证和使用；确保系统的终端用户/操作人员接受过相应的培训。
3.2 QC：起草相关分析方法的验证草案和报告；确保按照相关的规程进行分析方法的验证；负责检测清洁验证中的电导率、pH值及Toc。
3.3 QA主管：验证项目主计划和相关验证总结报告的准备和批准；按照验证计划中定义的行为，对相关验证文件批准，例如标记物计算和选择的文件；特别针对产品质量方面的影响，对验证项目提供GMP和法规的支持。
3.4体系维护管理员：确保在清洁验证中出现的偏差、变更、CAPA按照相应的文件执行。
4内容4.1清洁验证的目的：通过试验结果证明所制定的清洗规程能是设备的清洗效果达到洁净的要求，避免产品被残留物料和微生物污染。
防止药品在生产过程中受到污染和交叉污染。
4.2清洁验证的定义：清洁验证是一个需要具有完备证明文件的过程，证明制药行业生产设备的清洁是有效的和一致的。
通常清洁验证包括以下内容：拟定清洁方式，制定清洁规程、制定验证方案（参照物、取样点、验证合格标准、取样方法和检验方法）实施验证、验证的维护及再验证。
4.3拟定清洁方式，制定清洁规程4.3.1选定清洁方法，常见的清洁方法有如下几种：4.3.1.1手工清洗：由操作人员拆、擦洗或用高压水枪清洗，适用于无CIP装置、内部结构复杂的部件，其特点是投入少、但重现性差，可能产生二次污染。
4.3.1.2自动清洗：由自动控制进行冲洗的清洗，有的带干燥功能，适用于工艺复杂的配制罐及管道系统、专门配置的CIP清洗装置，其特点是重现性好，但若设备构成复杂，有存在死角的风险。
表面微生物测定操作规程
文件制修订记录一、目的：建立表面微生物测定操作规程，使操作标准化，规范化。
二、范围：各生产车间、化验室。
三、责任人：质控部检验员。
四、管理内容：1 洁净区微生物监测的动态标准如下：2 检测方法2.1 培养皿接触法培养皿接触法(Rodac Plate法)最为简单，但仅适用于平的表面。
在层流下开启表面接触碟，碟内无菌琼脂培养基 (通常直径为50mm)直接与设备表面接触，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取样点表面均匀接触10秒钟左右，再盖上碟盖；用蘸有75%酒精的棉球擦拭被取样表面，除去残留琼脂。
将取样后的接触碟置于预定时间内和规定温度下(例如30～35℃或20～25℃)进行培养，用肉眼对微生物计数并识别，有疑似控制菌应鉴别菌种。
此方法要求将培养基倒人培养皿中并使之隆起，应防止培养基溢出。
2.2 棉球擦抹法对洁净区消毒结束后，可对洁净室内的机械表面＼内部及缝隙间、墙壁、窗台、试验台等量取25cm2的面积，用事先经过灭菌的生理盐水、精制水或缓冲液(例如磷酸缓冲生理盐水)润湿的适当大小的灭菌纱布或灭菌脱脂棉充分擦拭，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内振摇(或作超声波洗涤)，再对浸出液进行增菌培养。
棉签取样能用于 Rodac 盘无法进行取样的场合，例如角落、缝隙等处。
棉签可以由棉花和涤纶制成。
如果棉签是由海藻酸钙做成的那就最好不过，因为这种材料可溶于稀释液，这样便于将微生物释放在溶液中。
擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的准确性。
对每个擦拭点应详细记录所在房间的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间。
2.3 浸渍法棉签先用灭菌稀释液(如注射用水)湿润，然后擦拭取样区域，最后放入一个装有灭菌稀释液的试管中。
样品应在2小时内进行测试，以免在稀释液中增加微生物数量。
试管经搅动从棉签上释放出微生物，稀释液则注入培养基盘内，经培养，然后计数并鉴别。
根据USP中表面微生物的检测，面积为25～30平方厘米，一个点使用一根棉签，擦拭完毕后将棉签剪断到5ml生理盐水中，分注到5个平皿中。
清洁验证管理规程
题目：清洁验证管理规程编写人目的：规范清洁验证程序，指导清洁验证的操作方法。
防止药品的交叉污染，通过验证确定上批产品残留在设备中的物质减少到不会影响下批产品疗效、质量和安全性的程度。
范围：本规程适用于在公司发生的所有清洁验证行为。
本规程描述了清洁验证的具体方法，包括清洁验证流程、设备的评估、取样点的选择、设备内表面积的计算、参照物质的选择、取样方法、标准要求、清洁剂的残留、检验方法的验证、取样回收率试验、设备清洁有效期等。
责任：验证委员会：负责验证方案、验证报告的审核及批准；负责验证工作的总体策划与协调，为验证提供足够的资源。
验证项目部：负责验证活动的组织与协调；负责起草此规程；负责验证文档的管理；负责验证方案、验证数据及验证报告的审核；负责验证仪器仪表的请购、校准及维护保养。
负责验证仪器及试剂的管理。
验证小组：负责起草验证方案；负责实施相关验证；负责整理验证数据并起草验证报告；验证小组4负责清洁验证。
内容：1.定义清洁：指设备中各种残留物（包括微生物及其代谢）的总量低至不影响下批产品的规定的疗效、质量和安全性的状态。
在线清洁（CIP）：指系统或较大型的设备在原安装位置不作拆卸及移动的条件下的清洁工作。
最终淋洗水：指设备清洁程序最后一步淋洗即将结束时的水样，也指在淋洗完成后在设备中加入一定量的工艺用水，用量需小于生产批量，使其在系统内循环后的水样。
题目：清洁验证管理规程2.清洁验证流程3.设备的评估设备的评估由验证项目部负责进行。
评估内容在验证总计划中体现，根据设备用途的不同，设备评估用来确定哪些设备是多个活性成分共同接触的，即公用设备；哪些设备是题目：清洁验证管理规程和某个产品单独接触的，即专用设备。
设备评估是确定哪些设备包括在清洁验证中，哪些设备不包括在清洁验证中，按照设备接触产品的情况，设备分为三类：与多个产品直接接触的设备（公用设备）、不直接接触产品的设备、仅与1个产品直接接触的设备（即专用设备）。
清洁验证微生物取样
取样用品
取样前准备
用75%酒精对手部消毒后，戴上一次性
口罩，戴上无菌手套或一次性兰薄橡胶 手套。如使用一次性兰薄橡胶手套，带 上手套后需再次用75%酒精对手套消毒， 并自然挥发至干。 (现场示范)
冲洗管口
用75%酒精进行喷洒消毒，然后在放掉 10L水后用微生物取样瓶接取不少于 100ml 水样。
对验证草案规定的取样点进行棉签取样。
在微生物取样棉签试管外标记所取设备
名称和取样点编号。
棉签取样
拔出棉签，一手拿棉签试管，将试管口朝下， 另一手拿棉签在取样点上25cm2 的范围内进行
划线（如下图），先用棉签的一面做平行划线， 再以其另一面垂直于原方向做平行划线，然后 将棉签放回到试管内。
注意：拿棉签的正确方法(演示),棉签或手绝对
不能触碰试管口。
棉签取样
方法----棉签表面擦拭(现场演示)
反转棉签
范围----25cm2 (5cm×5cm)
5cm约棉签试管的一半长度。 当取样表面不规则时如何处理?
Rodac 板取样
对验证草案规定的取样点进行取样，在平
板外标记所取设备名称和取样点编号。
打开Rodac 板使其凸出培养基表面与取样
将样品,检验记录一并交给微生物室有关人员。
注意事项
先进行水样取样，待设备表面晾干后再
进行棉签取样，防止棉签上的溶剂污染 设备。 化学棉签取样应在微生物棉签取样后进 行，且取样位置不得重合。 切勿将棉签碰到试管的外壁以免污染。 取样时避免工衣和取样设备内表面的接 触。
注意事项
同一设备上有多个取样点,需注意取样顺序(先
下后上,先外后内……),尽量减少人为影响.
当取样途中用手接触其他无关物品后,须用酒
清洁验证微生物记录
1.方法概述
用4个无菌棉签分别在下料口处按每个棉签100cm2/棉签擦拭取样，先取无菌棉签1支，用无菌的0.9%的氯化钠溶液5ml浸湿，去演时将棉签头按在取样表面上，以30度角与取样表面接触，平稳而缓慢得擦拭取样表面，在向前移动的同时将其一边移到另一边，每支棉签擦拭过程覆盖100cm2整个表面，翻转棉签，用另一面再进行擦拭，方向与前一次垂直，然后将棉签端用无菌剪刀置于100ml的0.9%无菌氯化钠溶液中，左右振摇5min，做好标识。
作为供试品溶液。
2.合格标准
2.1本品阴性对照组均不得有菌生长。
2.2本品细菌、霉菌和酵母菌总数（cfu/ml），每不得过cfu。
3.试液、仪器准备
仪器名称：电热恒温培养箱仪器型号：DH-500A 仪器编号：QC-SB-013 仪器名称：生化培养箱仪器型号：SHP-150 仪器编号：QC-SB-0134 PH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液配制批号：营养琼脂培养基配制批号：
玫瑰红钠琼脂培养基配置批号：
4. 细菌、霉菌和酵母菌数检查：
4.1供试品制备：取供试品，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至ml。
混匀后，制备稀释级别为稀释液，备用。
4.5检验结果：本品菌落总数数为。
检验人：复核人：年月日。
关于制药设备清洁验证中表面微生物擦拭取样方法和检验方法的验证实验
汇报人：
实验设计：选择不 同的取样和检验方 法，进行对比实验
实验结果：分析实 验数据，比较不同 方法的优劣
结论：根据实验结 果，确定最优的取 样和检验方法
擦拭棒：用于擦拭设备表面，收集微生物样本 培养皿：用于盛放微生物样本，进行培养和观察 稀释液：用于稀释微生物样本，便于计数 显微镜：用于观察微生物形态和数量 培养基：用于培养微生物，观察其生长情况 生物安全柜：用于保护证实验结 果的可靠 性和准确 性
实验设计：描述实验的设计方案，包括取样方法、拭子类型、拭子数量、拭 子擦拭次数等。
数据收集：列出实验中收集的数据，包括微生物数量、拭子擦拭次数、拭子 类型等。
数据分析：对收集到的数据进行统计分析，包括平均值、标准差、置信区间 等。
结果评价：根据数据分析结果，评价取样方法的可靠性和准确性，以及拭子 类型、拭子数量、拭子擦拭次数等因素对实验结果的影响。
准备实验 材料：擦 拭取样器、 培养基、 无菌操作 台等
擦拭取样： 使用擦拭 取样器对 制药设备 表面进行 擦拭取样
培养基制 备：将擦 拭取样器 上的微生 物转移到 培养基中
培养：将 培养基放 入培养箱 中培养， 观察微生 物生长情 况
结果分析： 根据微生 物生长情 况，判断 制药设备 表面的微 生物污染 程度
,a click to unlimited possibilities
汇报人：
目的：验证表面微生物擦拭取样方法的可靠性和准确性 实验设计：选择合适的拭子和培养基，确定取样面积和擦拭次数 数据分析：比较不同拭子和培养基的检测结果，评估取样方法的可靠性和准确性 结论：确定最佳的拭子和培养基组合，为制药设备清洁验证提供可靠的取样方法
通过实验比较不 同取样方法的效 果，如擦拭面积、
清洁验证取样方法
清洁验证取样方法[color=deeppink][/color]取样方法⑴擦拭取样法是在假定污染物均匀分布于设备表面的基础上进行的。
取样时，取样者用一根末端带有一种惰性材料（通常是药棉或类似物）的取样棒进行擦拭。
通常是把取样棉签的一面压在取样点上，按第一步图示缓慢有力地擦拭设备表面。
然后按第二步图示以取样棉签的另一面进行擦拭。
取样点的面积是不固定的，可根据设备的种类不同而有所改变。
通常的擦拭面积是10×10cm²。
优点：可通过物理的擦拭对那些已经干燥的或者不溶的残留取样，可对最难清洁并能触到的地方进行评估。
缺点：有些地方（如管道）无法取样。
假定污染物在表面均匀分布，而实际上污染物分布总是不均匀的。
必须由取样面积推算至整个面积。
必须检查从设备表面到棉签和从棉签到溶液的提取效率，因为擦拭取到的污染物，在实验室里可能不能将其释放到提取溶液中。
取样要求要求设备表面材料的取样回收率已知，且与取样方法之间不存在干扰。
每台设备至少3个取样点，取样点应有代表性。
选择取样点取样点的选择原则是：取样点要能表明污染物的分布，可通过取样点来推断评估设备表面上的残留量。
所以应考虑设备中，不当的清洁操作可能导致不可接受的风险的区域或部位：包括高浓度区域，难以清洁的区域，被污染后可能污染产品的区域，与产品接触的残留物均匀分布的表面，残留物料会均一的分布在下一批产品中的位置。
如关键点、热点、均一表面。
热点：物料会均一的分布在下一批产品中的位置，如搅拌桨，其上的残留物会在生产下一批产品时溶解出来，分布在下一批产品中造成交叉污染。
关键点：不当清洁操作可能导致不可接受的风险的设备区域或部位，包括高浓度区域，难以清洁的区域，被污染后可能污染产品的区域，如压片机的冲头。
均一表面：与产品接触的表面，残留物会均匀的分布于其上。
⑵淋洗取样法是一种间接的取样方法，可以对大面积难以到达的系统或日常不能拆卸的部分进行取样。
可以对清洗液残留进行非专属、简单的测试。
人手及物体表面菌检验方法的验证
人手及物体表面菌检验方法的验证一、验证目的人手及物体表面菌检验采用的是棉签擦拭法和RODAC平板接触法，计算其回收率确定该方法是否适合用于人手及表面菌的检验。
二、适用范围适用于人手及物体表面菌检验方法验证的实施。
三、职责品保部负责验证方案的起草、取样及对样品的检验，及验证记录，并加以分析后，起草验证报告。
品保部主管负责验证数据及结果的审核。
四、参照标准GB/T19973.1-2005五、验证内容1. 仪器设备及试剂15ml试管、洗耳球、酒精灯、灭菌锅、1.0ml移液管、RODAC平板2．验证用菌种金黄色葡萄球菌（ATCC6538）第代大肠杆菌（ATCC25922）第代铜绿假单胞菌（ATCC27853）第代3.操作步骤3.1菌液的制备取经30℃～35℃培养18～24小时的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与铜绿假单胞菌的营养琼脂斜面培养物，用0.03mol/L的磷酸盐缓冲液（PBS）洗下，10倍稀释至10-6~10-7约为50~100cfu/ml的菌悬液备用。
3.2人手及物体表面接种分别向无菌物体表面接种1ml金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的菌悬液，接种面积小于25cm2，并在层流下进行干燥。
验证结束后用75%的酒精擦洗染菌表面。
3.3操作方法3.3.1RODAC平板接触法将无菌的RODAC平板的培养基部分直接平帖试验对象上以一定的力压在测试点上，维持10秒钟后盖上平板。
置于29℃～31℃倒置培养72小时后，置于室温下倒置培养72小时后计数。
用同样的方法重复操作四次。
3.3.2棉签擦拭法将经灭菌的内径为5cm×5cm的灭菌规格板放在试验物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内。
摇匀取1mL倒平板，每次倒三个平板。
在 32℃下倒置培养48小时后计数。
用同样的方法重复操作四次。
4.试验要进行三次独立操作，每次试验的回收率要≥70%方可认为该方法合适。
棉签擦拭取样标准操作规程
范围：作微生物限度检查的擦拭取样法
职责：质量部对本规程的实施负责
正文：
1.取样前的准备
1.1准备取样的器具和相关的试剂
——普通取样瓶500ml
——无菌取样瓶500ml
——无菌药签（15cm）
——带螺旋盖无菌试管（15cm）
——无菌平皿5个
——灭菌生理盐水
1.2计算所要擦试表面的面积，通常可取100cm2。
2.取样
2.1用灭菌生理盐水润湿药签，并将其靠在溶剂瓶内壁上挤压以除去多余灭菌生理盐水。
2.2用药签头按在取样表面上，用力使其稍弯曲，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面,翻转药签，让药签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直。
2.3擦拭完毕，将药签放入无菌试管中，加入4ml无菌生理盐水，用螺旋盖旋紧，轻摇后放置于10分钟，使物质溶出。
2.4对照样品按步骤2.2湿润签后，直接放入试管并旋紧密封。
2.5将浸润擦拭后药签的无菌生理盐水分别注入四个平皿中，混匀，待凝后，置30～35℃生化培养箱中培养48小时，观察结果并记录。
第1 页共1 页。
手消毒采样方法
手消毒采样方法
手消毒采样是一种非常关键的操作，尤其在今时今日病毒肆虐的社会环境下，
正确的手消毒采样方法可以帮助有效防止病毒传播。
本文将介绍一种简单易行的手消毒采样方法，希望能为大家提供一些帮助。
步骤一：准备工作
在进行手消毒采样之前，首先要准备好必要的器材和消毒液。
您需要准备一双
一次性手套、一支棉签以及适量的75%酒精消毒液。
步骤二：佩戴手套
在进行手消毒采样之前，务必要佩戴一双干净的一次性手套，以防止污染样本。
请注意不要触碰手套外部，以免造成污染。
步骤三：湿润棉签
用适量的75%酒精消毒液湿润棉签，确保棉签完全被湿润。
酒精的浓度选择75%是因为这种浓度的酒精对绝大多数细菌和病毒有很好的灭菌效果。
步骤四：采样
用湿润的棉签轻轻擦拭手掌、手背、手指间以及指尖等手部区域，确保充分接
触到每个部位，并确保棉签上有足够的样本。
步骤五：保存样本
采样完成后，将携带样本的棉签置入一个干净的密封袋中，标记上相应的信息，如采样时间和采样者姓名等。
并将密封袋妥善保存，避免样本污染或溢出。
步骤六：处理手套
处理完样本后，摘下手套时要避免手部接触到外层，避免污染。
正确的方法是
从手腕处往手指方向反折手套，避免手部接触到外层，然后将手套放入垃圾袋中。
手消毒采样方法虽然简单，但操作时需要细心和谨慎。
通过正确的手消毒采样
方法，我们可以更好地保护自己和他人，避免病毒传播。
希望通过本文的介绍，您对手消毒采样方法有所了解，能够在实际操作中做到科学规范。
清洁验证管理规程
生产车间、设备部、研发部等其他可提供技术支持的部门组成。
QA：是清洁验证的组织者，主要负责起草清洁验证方案，组织验证过程的实施，以及验证过程出现的偏差处理和变更控制，并负责验证数据的汇总和完成清洁验证报告；QC：负责提供清洁验证中标的物分析方法验证工作，以及不同材质设备取样回收率试验，完成清洁验证的检测工作等；生产技术部：提供清洁验证的技术支持，负责提供生产工艺、审核清洁规程，协助QA完成清洁验证方案、审核清洁验证报告等；设备部：提供清洁验证的技术支持，负责提供设备基本信息，协助QA完成清洁验证方案、审核清洁验证报告等；生产车间：提供设备、容器具等难清洁点，按照批准的清洁规程进行清洁，协助质量部门完成清洁验证；研发部等其他可提供技术支持的部门：提供相应技术支持，协助完成清洁验证。
4清洁验证前准备清洁验证前应汇总一些资料，以便进行充分的风险评估。
4.1产品列表，包括该产品的批量、活性成分及其性状、在清洁剂中的溶解性、日治疗剂量及毒理数据；4.2设备列表，包括设备材质、接触物料的内表面积及共用情况等；4.3清洁SOP，包括详细的清洁方法（手工清洁、自动清洁或者半自动清洁）、清洁剂以及设备的难清洁点。
5风险评估风险评估贯穿于清洁验证的整个周期，清洁验证小组应通过充分的风险评估来确定清洁验证的范围和程度，依此来制定详细的验证策略。
5.1设备的评估药品生产过程中用到各种各样的设备，但并非所有的设备均需要清洁验证，即使该设备需要确清洁验证，但也应通过评估选取那些部位进行清洁验证。
一般情况下清洁验证只对于直接接触产品的设备进行清洁验证。
同时设备的评估还用考虑设备是否专用、设备的材质、设备的构造、设备的功能等方面，例如同一个产品有几条生产线，每条生产线的设备是平行的，那么可以选取一条生产线的生产设备进行清洁验证。
5.1.1根据设备的使用情况不同，分为专用设备和非专用设备，专用设备仅用于生产一个产品，或单一产品线（如同一种API的不同规格）。
清洁验证取样方法和检验方法验证方案及报告
清洁验证取样方法和检验方法验证方案及报告清洁验证取样方法和检验方法验证方案一、目的：通过对清洁验证取样方法（棉签取样法）的回收率试验，来验证该取样方法的回收率和重现性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。
二、范围：适用于本公司设备清洁验证的取样和检验方法。
三、责任人：验证小组取样人员、检验人员。
四、内容:1.概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是棉签擦拭取样，本公司目前所有设备均采用的是棉签擦拭取样方法。
棉签擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。
但取样方法需验证其可行性（回收率和重现性），因此须通过取样方法验证确定清洁验证取样方法的有效性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。
2.验证目的本验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。
3.范围本次验证适合清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）。
4.验证选取的参照物本次验证选用黄芩苷（C21H18O11）来做取样方法回收率试验和检验方法的线性、精密度（RSD）。
5.验证周期及验证进度安排验证由起草人和审核人提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分两个阶段完成。
验证小组成员的培训：试验时间：6.验证小组成员及职责验证小组成员所在部门验证小组职务质量部QA负责本次验证的取样人员，监督本次验证过程的实施，异常情况汇报和处理。
质量部QA主管验证小组组长，验证方案及报告的起草，提供取样方法验证方案；负责本次验证方案的培训与指导。
质量部QC负责进行本次验证过程中的检验、数据记录、分析和报告。
质量部QC主管验证方案及报告的审核，提供检验方法验证方案；负责本次验证实施规程中的指导。
洁净区表面微生物监测标准操作规程
洁净区表面微生物监测标准操作规程用于规范本公司洁净区表面微生物检测的标准操作，确保洁净区表面微生物符合要求适用于本公司洁净区表面为什么的测定职责QC负责表面微生物测定相关材料的准备，培养结果的观察及报告的完成，QA负责洁净区表面微生物的取样并监督本规程的执行。
车间配合监测的完成正文:1洁净区微生物测试点选择表面为什么监测的采样点数目及其布局根据以下几个方面设置:空调系统的验证结果房间的大小和布局房间的用途与产品的距离人流物流方向对于同一洁净区，每个相同取样物体在其不同的地方采2个样。
如墙面2个采样点，地面2个采样点，洁净区主要设备2个采样点。
2洁净区微生物测定频率和限度洁净区表面微生物检测限度按下表进行洁净度级别表面微生物接触碟(Φ55mm) 5指手套2Cfu/碟(cfu/25cm) Cfu/手套A <1 <1B 5 5C 25 -D 50 -洁净区表面为什么监测频率按下表:取样类型取样方法动态生产中A B C D 表面及设备棉签擦拭法/所有点每批结束时所有点每每周一次每周一次监测接触平皿法或每天一次(取频天一次率较大者)- - - 接触产品表棉签擦拭法所有点每批结束时面3洁净区表面为什么测试方法洁净区表面微生物测试必须在动态下监测仪器与材料:如使用自制培养基，须按《中国药典》2010年版制备营养琼脂培养基，灭菌制成rodac的培养皿，也可以在外购买。
取样:表面微生物监测用于表面菌监测表，基本方法包括接触平皿法、棉签取样法等。
取样人员取样前检查平皿，不能使用已被微生物污染、水汽过多的、过于干燥或分装不均的平皿。
每批至少选定3只培养皿做对照培养。
接触平皿法:适用于对于平整，有规则性表面进行取样监测。
培养基充满碟子并形成圆2顶，取样面积一般约为25cm，取样时，打开碟盖，无菌培养基表面与取样面直接接触，时间不少于10秒。
均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取样点表面均匀充分接触，再盖上碟盖。
洁净区表面微生物检测方法标准操作规程
目的：建立检测洁净区的表面微生物污染的检测方法，保证洁净区达到要求。
应用范围：适用于洁净室的质量控制责任人：化验室微生物检验员。
内容：1 仪器与材料灭菌的培养皿及营养琼脂培养基，每个培养皿中倒入20ml培养基、121℃灭菌30分钟，然后30～35℃培养24小时，如无菌生长，则可用于试验。
2 取样检测方法包括：接触平皿法、棉签擦拭法及表面冲洗法。
取样人员于取样前检查琼脂平皿。
不得使用被污染、水汽过多、过于干燥或分装不均的平皿。
同一物体应在其不同的地方采2个样。
2.1 接触平皿法2.1.1 适用于对平整的有规则性表面进行取样。
碟子为直径50～55mm，培养基充满碟子并形成圆顶，取样面积一般约为25cm2。
2.1.2 取样时，打开碟盖，无菌培养基表面与取样面直接接触，均匀按压接触碟底板，确保全部琼脂表面与取样点表面均匀充分接触，再盖上碟盖。
2.2.3 取样后，需要立即用适当的消毒剂擦拭被取样表面，以除去残留琼脂。
2.2 棉签擦拭法2.2.1 适用于平皿接解法不适用的设备和不规则表面取样。
2.2.2 棉签的种类可选棉质、涤纶等。
将100个棉签用无菌生理盐水或0.1%的蛋白胨溶液约50ml浸湿，包上铝箔放入不锈钢饭盒中，121℃灭菌30分钟。
2.2.3 取样时，握住棉签柄，以30角与取样表面接触，缓慢并充分擦拭，取样面积24～30 cm2，然后将取样头折断放入浸湿溶液中，充分振荡，再用平皿涂布法或铺平板法计数。
2.3 表面冲洗法2.3.1需要确定设备内表面的生物载荷或面积较大时采用此法。
2.3.2用经121℃灭菌30分钟无菌水冲洗内表面，刻度吸管吸取淋洗液1ml，膜过滤后，检测。
3 培养 30～35℃培养48小时。
4 采样量每个采样点分别用棉签法取样或使用接触平皿法充分接触。
5 采样结果每个培养皿中的菌落数与限度比较得出最后的评判。
6 偏差纠正发现表现检测结果超标，可以采取以下行动进行调查和评估6.1 检查取样和样品的处理是否正确，包括取样人员的资质等。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
4 内容
4.1 取样准备工作：取样员依据请验单做好取样准备工作。
4.1.1取样工具：笔、剪刀、医用棉签（用具塞三角瓶盛装）、验证方案中规定的溶剂（用具塞三角瓶盛装），样品接收具塞试管（加适量溶剂）、取样标签。
4.1.2用于取样的工具和盛装容器均需灭菌。
4.2.取样方法
4.2.1残留量检查取样：
用溶剂润湿棉签，并将其靠在溶剂瓶上挤压以除去多余的溶剂。
cm2或100cm2，具体参照验证方案。
擦拭时，将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲与擦拭表面成45 o，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时，将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面。
翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直，每支棉签分别擦拭取样25cm2，取样位置应避免与微生物取样点重复）。
塞子塞紧密封。
在所取样品试管上应贴上标签，内容包括：取样地点、取样用途、取样编号、取样人及取样日期。
4.2.2表面微生物检查取样：
4.2.2.1将无菌棉签分别放入盛有无菌生理盐水溶液的瓶中湿润，并将其靠在管口上挤压以挤去多余的溶剂。
cm2。
4.2.2.3擦拭时，将棉签头按在取样表面上，用力使其弯曲与擦拭表面成45 o，平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时，将其从一边移到另一边，擦拭过程应覆盖整个表面。
翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直，每支棉签分别擦拭取样25cm2。
4.2.2.4擦拭完成后，将每个取样点的棉签头剪下集中放入同一支样品接收试管中，立即塞子塞紧密封。
4所取样品瓶上应贴上标签，内容包括：样品名称、批号、样品编号、取样人及取样日期。
取样示意图：
4.3 分样和送样
将微生物检查和残留量检查的样品分开包装并送至化验室检测。
4.4 取样容器具的清洁方法和贮存要求。
取样容器具按照《玻璃器具清洗操作规程》清洗后，于专用的取样器具存放柜内晾干存放。
需要进行微生物检查的取样容器按《器具灭菌和除热原操作规程》灭菌。
5 参考文件及附录
无。
6文件历史
版本号生效日期主要变更描述
01 本文件为新定。