糖类药物

（二）多糖的纯化
（1）乙醇沉淀法
此法是制备粘多糖最常用的方法。供乙醇沉淀的多糖溶 液浓度以1%-2%为佳。同时向溶液中加入一定浓度（如5%） 可有助于多糖的析出。
（2）分级沉淀法
不同多糖在不同浓度的甲醇、乙醇或丙酮中的溶解度不 同，因此可用不同浓度的有机溶剂分级沉淀分子大小不同的 粘多糖。 （3）季铵盐络合法（p388） 利用粘多糖与一些表面活性剂络合成难溶季铵盐。 （4）离子交换层析法 主要利用阴离子交换剂。
第三节 重要糖类药物生产工艺
一、D-甘露醇
（一）结构与性质 又名己六醇，为白色针状晶体，略有甜味，不潮解；易溶于 水。
（二）生产工艺
1、提取法 （1）工艺路线
（2）工艺过程 ①浸泡提取、碱化、中和 自来水室温浸泡2-3h，浸泡 液用30%NaOH调pH10-11，静置8h，凝集沉淀多糖类粘性 物；虹吸上清液，用1∶1 H2SO4中和至pH6-7，进一步除去 胶状物，得中性提取液。 ②浓缩、沉淀 浓缩中性提取液，除去NaCl和胶状物，直 到浓缩液含甘露糖30%以上，冷至60-70℃加入2倍体积95% 乙醇，搅拌均匀，冷至室温离心收集灰白色松散沉淀物。 ③精制 沉淀物悬于8倍体积95%乙醇中，搅拌回流半小 时，冷却过夜，离心得粗品甘露醇，含量70%-80%。重复 一次，经乙醇重结晶后，含量＞90%，氯化物含量＜0.5%。 重溶于蒸馏水中，加入1/8-1/10活性炭，80℃保温0.5h，滤 清。清液冷却至室温得结晶，抽滤，洗涤得精品甘露醇。 ④干燥、包装 结晶甘露醇于1 糖类药物
糖类药物主要有：
单糖 如葡萄糖、果糖、氨基葡萄糖和维生素C等； 低聚糖 如蔗糖、麦芽糖乳糖、乳果糖，多糖如右 旋糖苷、香菇多糖、茯苓多糖等； 糖的衍生物 如6-磷酸葡萄糖磷酸肌醇等。 糖类药物研究的最多的是多糖类药物，一般都是天 然动植物组织内直接提取，如黄芪多糖、人参多糖、 麦麸多糖、银耳多糖、灵芝多糖、云芝多糖、酵母多 糖、硫酸软骨素、透明质酸、几丁质、胎盘脂多糖等。
（2）工艺过程 ①FDP产生菌的培养：菌株为啤酒酵母 ②固定化细胞制备：菌液与加热熔化的卡拉胶混匀，冷却成型， 切块即可。 ③活化固定化细胞：用含底物的表面活性剂于35℃浸泡活化。
④酶促转化：活化的固定化细胞装柱，30℃底物溶液流过活化。
⑤离子交换：反应液经除蛋白后过滤，滤液通过DEAE-C阴离 子交换柱，经洗涤、洗脱，收集洗脱液，加入适量CaCl2使生 成FDPCa沉淀。 ⑥转酸：FDPCa悬于无菌水中，用732-[H+]树脂将其转成 FDPH4，用2M NaOH调pH5.3-5.8，经活性炭脱色，超滤冻干， 得FDPNa3H精品。 （三）检验方法：酶分析法 （四）作用与用途
多糖类具有多种生理活性：
（1）调节免疫功能 影响补体活性，促进淋巴细胞增殖等
（2）抗感染作用
提高身体免疫力
（3）促进细胞DNA、蛋白质的合成，促进细胞增殖、生长 （4）抗辐射损伤作用 （5）抗凝血作用 抗氧化、防辐射作用
如肝素是天然的抗凝剂 如类肝素硫酸软骨素等
（6）降血脂、抗动脉粥样硬化作用
粘多糖：是指含有氨基己糖与糖醛酸的多糖，也叫酸性粘多糖。 粘多糖基本上是由特殊的重复双糖单位构成，在此双糖中， 包含一个N-乙酰氨基己糖。 两种糖醛酸：D-葡萄糖醛酸和L-艾杜糖醛酸；两种氨基己糖： 氨基-D-葡萄糖和氨基-D-半乳糖。
二、1，6 -- 二磷酸果糖
（一）结构与性质 钠盐为白色晶型粉末，易溶于水，4℃较稳定。 （二）生产工艺 1、酶转化工艺 （1）工艺路线
（2）工艺过程 ①取经多代发酵应用过的酵母渣，悬于适量蒸馏水，反复冻融3 次，加入底物（8%蔗糖，4%NaH2PO4，30mM MgCl2，pH6.5） 于30℃反应6h。
3、粘多糖 由于粘多糖与蛋白质结合在一起，需用酶解法或碱解法使糖 -蛋白间的结合键断裂，促使多糖释放。一般组织中有多种粘多 糖，还需要进一步分离不同粘多糖，方法有乙醇分级沉淀法或 层析法。 （1）碱解法 用0.5M NaOH在40℃溶解组织并提取，提取液以盐酸中和， 透析后用高岭土等吸附剂除去蛋白，再用乙醇沉淀多糖。此法 一般不破坏多糖分子中的硫酸基。 （2）酶解法 比较常用。而且常与碱解法联用。
用于治疗急性心肌梗塞、心功能不全、冠心病、心肌缺血发 作休克等症的急救药物；对各类肝炎引起的深度黄疸、转氨酶 升高及低白蛋白血症也有较好的治疗作用。
三、肝素
（一）结构与性质 是三硫酸双糖与二硫酸双糖以2∶1的比例在分子中交替联结 而成的。其分子结构有一个六糖重复单位（p515）；整个分子呈 螺旋形纤维状。分子量不均一，平均分子量12000±6000。肝素 及其钠盐为白色或灰白色粉末。分子中含有硫酸基和羧基，呈强 酸性；肝素具有聚阴离子性质，能与多种阳离子反应成盐。肝素 与碱性染料如天青A、甲苯胺蓝等反应可使染料的光吸收向短波 方向移动。 肝素可被肝素酶降解为三硫酸双糖单位和二硫酸双糖单位。 硫酸化程度高的肝素具有较高的降脂和抗凝血活性；高度乙 酰化的肝素，抗凝血活性降低甚至完全消失，而降脂活性不变。 小分子量肝素（4K—5K）具有较低的抗凝活性和较高的抗血栓 形成活性。
（二）生产工艺 肝素在组织内和其他粘多糖一起与蛋白质结合成复合物， 因此，肝素制备过程包括肝素蛋白质复合物的提取、解离和肝 素的分离纯化两大步。解离可以用盐解离法和酶解离法。 1、盐解-离子交换生产工艺 （1）工艺路线
②除杂蛋白：煮沸5min，离心去除杂蛋白，收集清液。
③阴离子交换柱层析：转化液通过DEAE-C交换柱，先用蒸馏水 洗涤至pH7.0，然后进行分步洗脱。 ④转酸：FDPCa悬于水中，用732-[H+]树脂将其转成FDPH4，用 2M NaOH调pH5.3-5.8，除菌过滤后，冻干。
2、固定化细胞制备工艺 （1）工艺路线
2、发酵法 （1）工艺路线
（2）工艺过程 ①菌种选育 ②种子培养 ③发酵 ④除杂质、分离结晶
⑤浓缩、结晶、烘干、包装
3、制剂 （三）检验方法 1、pH值：注射用pH值应为4.5-6.5； 2、含量测定：碘量法测定甘露醇含量。 （四）作用与用途 治疗脑水肿引起的休克、防止肾脏衰竭、治疗青光眼、中毒性 肺炎等。