临床酶学检验技术

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临床生物化学检验 （第二版）
第四章 临床酶学检验技术
概述
临床酶学的历史：
1908年Wohlgemuth用尿淀粉酶（AMY）诊断急性胰腺炎 1930s，LPS、ALP、ACP开始用于临床——定时法 1950s，Karmen、La Due、Wroblewski等人建立了分光光
第四章 临床酶学检验技术
一 酶的结构和分类
（二）
酶 的 分 子 形 式
单体酶：只有单一的三级结构蛋白质构成
（monomeric enzyme)
寡聚酶：由两个以上具有三级结构的亚基聚合而成
(oligomeric enzyme)
多酶复合体：由几个功能相关的Hale Waihona Puke Baidu嵌合而成的复合体
(multienzyme system)
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第四章 临床酶学检验技术
概述
酶的研究历史：
1926年J.B.Sumner首次从刀豆制备出脲酶结晶，证 明其为蛋白质，并提出酶的本质就是蛋白质的观点
1982年T.Cech发现了第1个有催化活性的天然 RNA——ribozyme（核酶），以后Altman和Pace等又 陆续发现了真正的RNA催化剂
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第四章 临床酶学检验技术
第一节 酶学基本知识
一 酶的结构和分类 二 酶的特性和应用 三 酶促反应动力学
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第四章 临床酶学检验技术
一 酶的结构和分类
（一）
人卫第七版
生物体内的酶（enzyme）是对其特异底物起高效 催化作用的蛋白质和核糖核酸，前者是是机体内催化 各种代谢反应最主要的催化剂。
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第四章 临床酶学检验技术
概述
酶促反应表示为：
S E K 1 E S K P E P K 2
度法，ALT、AST、CK、LD等酶活性测定应用于肝胆 疾病、心脏疾病的诊断——连续监测法 1970s， 同工酶和酶蛋白质量测定 1980s，同工酶亚型
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第四章 临床酶学检验技术
目录
1 酶学基本知识 2 血清酶变化的生理病理机制 3 酶含量的表示方法 4 酶催化活性浓度测定的理论基础 5 酶活性测定的影响因素与最适条件的确定 6 同工酶检测技术 7 目前常用诊断酶的酶活性测定 8 小结与展望
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一 酶的结构和分类——活性中心
牛 胰 蛋 白 酶
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第四章 临床酶学检验技术
二 酶的特性和应用
酶的特性
（一）化学本质：除核酶、脱氧核酶以外，为蛋白质 （二）高效催化性 （三）高度特异性 （四）可调节性 （五）不稳定性
原理和评价
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第四章 临床酶学检验技术
教学目标与要求——熟悉
1.酶动力学参数的含义 2.电泳法和免疫抑制法测定同工酶的原理 3.AMY、CHE的测定原理
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1 乳酸脱氢酶同工酶
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第四章 临床酶学检验技术
一 酶的结构和分类
（三）
酶 的 结 构
“非”必需基 团
必需基团
结合基团： 决定酶的专一性 (Binding site)
第四章 临床酶学检验技术
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第四章 临床酶学检验技术
教学目标与要求——掌握
1.酶活性的国际单位定义 2.酶活性测定的连续监测法和定时法的概念 3.连续监测法的计算和方法设计 4.酶活性测定最适条件的概念和意义 5.ALT、AST、ALP、GGT、LD、CK测定参考方法
酶 的 组 成
单纯酶：脲酶、蛋白酶、淀粉酶、核糖核酸酶等
酶蛋白（apoenzyme）
结合酶
辅酶（coenzyme)
辅因子
全 酶
（cofacter) 辅基(prosthetic group)
全酶(holoenzyme）= 酶蛋白 + 辅因子
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教学目标与要求——了解
1.酶蛋白质量测定的优点 2.定时法测定临床常用诊断酶的原理和评价 3.同工酶的其他检测方法
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第四章 临床酶学检验技术
概述
酶的概念：
人卫第六版
酶（enzyme）是由活细胞合成的、对其特异底物 起高效催化作用的蛋白质，是机体内催化各种代谢反 应最主要的生物催化剂(biocatalyst)。
1995年，Jack W. Szostak 研究室首先报道了具有 DNA连接酶活性的DNA片段，称之为脱氧核酶 (deoxyribozyme)
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第四章 临床酶学检验技术
概述
临床酶学
高诊断灵敏度 高诊断特异性
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酶活性测定 酶蛋白质量测定
底物：Subestrate：S 产物：Product：P 酶 ：Enzyme：E
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第四章 临床酶学检验技术
概述
酶的化学本质：
绝大多数的酶是蛋白质，称这类酶为enzyme 具有催化功能的RNA被称为核酶(ribozyme) 具有催化功能的DNA被称为脱氧核酶(deoxyribozyme)
（活性中心） 催化基团： 决定酶所催化反应的性质
(Catalytic site)
活性中心：酶分子中直接和底物结合并起催化反 应的空间局限（部位）
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第四章 临床酶学检验技术
一 酶的结构和分类——结合基团
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