3.回收试验

实验原理
首先用候选方法测定基础样本和回收样本相 应物质的浓度，然后计算回收率。通过回收率 判断该方法比例系统误差的有无或大小，从而 对候选方法的准确性作出可靠评价。
实验器材
微量移液器 吸量管
722型可见光分光光度计
水浴箱
实验试剂
1．正常人混合血清
2．80mmol/L葡萄糖标准液（1.44g无水葡萄糖 +100ml蒸馏水） 3．GOD-POD法测定葡萄糖试剂盒
加入物 空白管 标准管 基础样品 (1,2) 回收Ⅰ (1,2) 回收Ⅱ (1,2)
蒸馏水(ul)
5.5mmol/L糖 标准液(ul)
20 — — 3.0
— 20 — 3.0
— — 20 3.0
— — 20 3.0
— — 20 3.0
样 品(ul) 工作液(ml)
混匀，置水浴箱37℃，15分钟， 722型分光光度计于505nm 波长处测定，空白管调零，分别测各管吸光度A值。 计算：测定浓度＝A测/A标×C标(5.55mmol/L)
基础样品及回收样品制备 （实验准备前工作）
基础样品：混合血清0.9ml + 0.1ml蒸馏水 回收样品Ⅰ：混合血清0.9ml+0.01ml 80mmol/L葡萄 糖标准液+0.09ml蒸馏水 回收样品Ⅱ ：混合血清0.9ml+0.09ml 80mmol/L葡萄 糖标准液+0.01ml蒸馏水
学生按下表操作
3．回收率计算：
回收率=回收浓度/ 加入浓度×100%
Hale Waihona Puke Baidu
结果判断
一般检验方法要求回收率在95%～105%之间，最 理想的回收率应是100%。 如果候选分析方法的回收率位于此区间，那么候 选方法的准确度是可以接受的可以进入临床应用阶段。 注意：试剂的配制和加入量必须准确，考虑到多方面 因素的影响，一般应由技术熟练专业人员多做几次 实验后作出结论。
操作提醒
• 准确加样在本实验中尤其重要，如果吸量稍不 准确就会很大影响结果。
回收试验
回收
• 回收是指分析方法准确测定加入常规分析样品中的纯 分析物的能力，用于反映分析方法的比例系统误差。
实验误差
恒定系统误差 CE：与干扰物有关 系统误差 SE
实验误差 比例系统误差 PE：与被测物浓度有关 随机误差 RE：是由一些偶然的原因造成的
实验目的
1.掌握回收试验的原理。 2.熟悉实验方法和操作过程。 3.掌握实验数据处理的方法。
计算结果请填入表内：
平均吸光度 测定浓度 加入浓度 回收浓度 回收率
基础样品 回收样品Ⅰ
—
—
—
回收样品Ⅱ 平均回收率
—
—
—
—
回收试验数据处理
1．加入浓度计算： 加入浓度(mmol/L)=加入标准液量ml/(混合血清量ml+标准液量ml)× 标准液浓度（80mmol/L） 2．回收浓度计算： 回收浓度＝回收样品测定浓度－基础样品测定浓度