网状纤维染色液(改良Gomori银氨法)
网状纤维染色的影响因素分析
网状纤维染色的影响因素分析摘要】网状纤维是网状结缔组织的一种纤维，为分支交织成网的纤细纤维，由含有糖蛋白的胶原蛋白组成。
在一定病理条件下，可能转变为胶原纤维。
网状纤维染色在病理诊断中意义显著，染色方式诸多，极易受到多种因素影响，结合实际情况，本文首先阐述了网状纤维染色在病理诊断中的意义，后对影响网状纤维染色的相关因素以及解决方式进行全面分析，旨意为相关人员的研究工作提供参考资料。
【关键词】网状纤维染色；影响因素；解决方式；质量提升【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）25-0134-02在对患者开展临床病理检查过程中，切片内网状纤维（下称纤维）以及糖类物质显示对于癌瘤组织来源以及多种疾病鉴别诊断有着相当重要的现实意义。
在通常情况下，除了要进行嗜银染色以显示网状纤维以外，也要开展PAS染色，以显示出糖类物质。
流程相对繁琐、费时费力，这在很大程度上影响了诊断时间[1]。
结合实际情况，本文全面分析了影响网状纤维染色的因素，以寻求合适染色方式，提升工作效率。
现将具体结果汇报如下。
1.网状纤维染色在病理诊断中的意义网状纤维染色应用广泛，在病理诊断中意义显著，组织内的网状纤维多寡以及分布特征，预示着不同的病理诊断结果。
网状纤维染色基本原理[2]为组织内的蛋白质和银化合物结合，再经过还原成为金属银沉淀于组织内及其表面，因此得以着色，该染色能够全面显示病理组织网状支架受损详情。
纤维多寡、疏密、是否存在断裂等，对于判别疾病性质以及病情发展、预后来讲，均存在相当重要的现实意义[3]。
这一点重点体现在肿瘤疾病诊断中，如用此染色方法鉴别上皮性还是非上皮性来源恶性肿瘤、血管内皮细胞瘤或外皮细胞瘤、恶性淋巴瘤或组织细胞肉瘤、粘液纤维瘤与粘液肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤等，还可用于判断肝组织的网状支架塌陷破坏或增生情况。
2.影响网状纤维染色的相关因素以及解决方式2.1 切片厚度我们科室切片厚度为3～5微米。
乳腺纤维上皮肿瘤性病变中不同纤维分布特点
乳腺纤维上皮肿瘤性病变中不同纤维分布特点丁桂龄;章亚琴;邢宏宇;徐光;郑唯强【摘要】目的探讨乳腺纤维上皮性肿瘤间质中不同纤维成分的分布特点.方法利用组织学三联特殊染色法检测26例乳腺纤维腺瘤和14例乳腺分叶状肿瘤中不同纤维的染色分布.结果乳腺纤维腺瘤和分叶状肿瘤中肿瘤间质均以网状纤维与胶原纤维两种成分为主,前者主要分布于导管的基膜,后者在导管周围间质中最丰富,二者在不同肿瘤中的分布有明显差异.结论乳腺纤维上皮性肿瘤中纤维分布的特点及其不同纤维的分布差异,为探索乳腺纤维上皮性肿瘤的发生、发展、鉴别诊断提供基础理论依据.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2013(029)011【总页数】3页(P1184-1186)【关键词】乳腺纤维上皮性肿瘤;胶原纤维;网状纤维;弹力纤维;特殊染色【作者】丁桂龄;章亚琴;邢宏宇;徐光;郑唯强【作者单位】第二军医大学附属长海医院病理科,上海200433;第二军医大学附属长海医院病理科,上海200433;第二军医大学附属长海医院病理科,上海200433;第二军医大学附属长海医院病理科,上海200433;第二军医大学附属长海医院病理科,上海200433【正文语种】中文【中图分类】R737.9正常乳腺导管的周围间质中主要由纤维母细胞、颗粒状基质、胶原纤维束和偶见的弹力纤维构成，从内向外作交替同心层状排列[1]。
最常见的乳腺纤维上皮性肿瘤包括乳腺纤维腺瘤和乳腺分叶状肿瘤。
乳腺纤维腺瘤是由乳腺上皮和纤维组织按不同比例增生构成;乳腺分叶状肿瘤有良恶性之分，也是由纤维、上皮两种成分共同组成的一型肿瘤。
二者基本组织相似，除分叶状肿瘤因良恶性不同而其纤维含量的丰富程度不同外，其间质的纤维成分是否相似，尤其是不同纤维成分的比例分布情况，尚未见文献报道[2]。
目前对弹力纤维和网状纤维的染色有不同的改良方法[3，4]。
本文现利用三联染色法观察[5]乳腺纤维腺瘤和分叶状肿瘤中胶原、网状和弹力纤维的分布情况。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法Mallory三色染色法可用于胶原和网状纤维的染色，其中蓝色代表胶原和网状纤维，淡蓝色代表软骨、粘液和淀粉样变物质，红色代表神经胶原纤维、肌纤维和酸性颗粒，橘红色代表髓鞘和红细胞。
图表A1.1展示了Mallory三色染色法的效果，其中A组排列规则。
1.2 Masson三色染色法Masson三色染色法可用于胶原纤维和肌纤维的染色，其中绿色代表胶原纤维，红色代表肌纤维，橘红色代表红细胞。
图表B1.2和C1.2展示了Masson三色染色法在胃癌组织和血管平滑肌中的应用。
1.3 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法三联染色法可用于显示胶原、网状和弹性纤维，其中红色代表胶原纤维，黑色代表网状纤维，绿色代表弹性纤维，淡黄色代表肌肉和红细胞。
图表D展示了Weigert间苯二酚法的效果。
胶原纤维染色法2.1 天狼星红苦味酸染色法天狼星红苦味酸染色法可用于胶原纤维的染色，其中红色代表胶原纤维，绿色代表细胞核，黄色代表其他物质。
天狼星红苦味酸染色法在偏光显微镜下观察，Ⅰ型呈强双折光性，呈黄色或红色纤维，Ⅱ型呈弱双折光，呈多种色彩疏网状分布，Ⅲ型呈弱双折光，呈绿色的细纤维，Ⅳ型呈弱双折光的基膜，呈淡黄色。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
2.2 Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法可用于胶原纤维的染色，其中鲜红色代表胶原纤维，黄色代表肌纤维、细胞质和红细胞，蓝褐色代表胞核。
图表E展示了胶原纤维的染色效果，以及XXX.)苦味酸-酸性品红法在心肌梗塞后2个月的应用。
三、网状纤维染色3.1 XXX-Sweets银氨染色法XXX-Sweets银氨染色法可用于网状纤维的染色，其中黑色代表网状纤维，红色代表胞核（核固红复染），黄棕色代表胶原纤维，淡红色代表细胞质（红液复染）。
病理学 (2)
病理学1. 优质切片的先决条件是（） [单选题] *A. 固定(正确答案)B. 染色C. 透明D. 切片E. 脱水2. 下列哪种溶液被推荐为病理标本的首选固定液（） [单选题] *A. 10%福尔马林液B. 10%中性缓冲甲醛液(正确答案)C. 酒精D. Zenker固定液E. 甲醇3. 脂肪染色最好的标准封固剂是什么？（） [单选题] *A. 中性树脂B. 甘油明胶封固剂(正确答案)C. 液体石蜡D. 松节油E. 二甲苯4. 以下哪种是幽门螺杆菌的染色法（） [单选题] *A. PAS染色法B. Warthin-starry染色法(正确答案)C. 过碘酸雪夫反应法D. Gridley染色法E. 奥辛蓝染色法5. 固定的目的下列哪项正确（） [单选题] *A. 增加组织硬度B. 防止细胞自溶C. 凝固细胞内物质D. 以上都对(正确答案)E. ABC都不对6. 最常用的石蜡切片机是（） [单选题] *A. 骨组织切片机B. 冰冻切片机C. 旋转式切片机(正确答案)D. 超薄切片机E. 螺旋式切片机7. 具有剧毒作用的固定剂是（） [单选题] *A. 重铬酸钾(正确答案)B. 四氧化锇C. 铬酸D. 苦味酸E. 高锰酸钾8. 常用于脱钙的酸类是（） [单选题] *A. 硝酸(正确答案)C. 醋酸D. 磷酸E. 甲酸9. 以下哪种不是细胞质染料?（） [单选题] *A. 美蓝(正确答案)B. 橙黄-GC. 伊红D. 苦味酸E. 光绿SF(lght green SF)10. HE染色中呈蓝色的成份是（） [单选题] *A. 红细胞B. 细胞核(正确答案)C. 嗜酸性颗粒D. 细胞质E. 细胞膜11. 常规HE制片固定的目的？（） [单选题] *A. 保持离体组织细胞与生活时的形态相似B. 保持细胞内组织抗原，DNA及RNA，便于进一步的特殊检查。
C. 硬化组织有利于切片D. 有利于染色反应，便于光镜下对细胞内不同成分进行区别。
Gomori银染色法
[试剂配置]
氨性银溶液甲液:硝酸银10.2g，蒸馏水 100ml，乙液：氢氧化钠3.1g，蒸馏水 100ml。 取甲液5ml，滴加氨水至溶解清亮为止。 再加入5ml乙液，此时该溶液突然变为黑 色，在滴加氨水至清亮为止。补加4滴氨 水，用蒸馏补足50ml。
染色步骤
（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片5um，常规脱蜡至水 （2）高锰酸钾氧化液（高锰酸钾0.5g，蒸馏水95ml，在加入5ml 3%硫酸）5min。再用自来水洗1min。 （3）2%草酸漂白2min，水洗2min （4）2%硫酸铁氨媒染2min （5）水洗1min，蒸馏水洗2次 （6）加入氨性银溶液内1min。 （7）蒸馏水洗2次后。用20%甲醛液还愿5min。 （8）蒸馏水浸洗2次 （9）0.2%氯化金液1min，蒸馏水洗2次 （10）用丽春红S苦味酸染色液复染3-5min。 （11）直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
结果：
网状纤维呈黑色，胶原纤维呈红色，背景 呈黄色。
注意事项：
()
Gomori银染色法
主讲：李磊
姜明星
概述：
网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维， 由交错排列的纤维组成，还有大量堆积时 则形成致密的网状，固有网状纤维之称。 若用银氨液浸染能使纤维变成黑色，固又 称为嗜银纤维（argentaffin fibres）
原理：
由于组织蛋白质与银化合物的结合，在经 过甲醛还原成为金属银而沉淀于组织内及 表面的物质。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
一、网状纤维染色 ——氢氧化银氨法（Gomori法）
5
（一）网状纤维的形态结构
较细的纤维组织、短、分支多，交织成网状
（与胶原纤维共同为细胞丰富的器官起到支撑作用）
HE呈淡红色，银氨液浸染、甲醛还原后呈黑色
（嗜银性/嗜银纤维：黑色）
主要由Ⅲ型胶原蛋白构成，表面被覆糖蛋白
（PAS染色：淡紫红色）
6
＋蒸馏水，洗涤沉淀（50-100ml蒸馏水） <反复/3次，沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液（4ml）
<保留沉淀物质>
逐滴＋氢氧化铵（一次1-2滴加入）
<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴＋10%硝酸银，至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴，使沉淀消失
＋蒸馏水至40ml，2-8°C冰箱
<浑浊状态>
2
四、淀粉样物 刚果红法（甲醇刚果红、碱性刚果红）、甲基紫法 五、色素 含铁血黄素（Perls）、黑色素（Masson-Fontana）铜（罗 丹明、红氨酸） 六、糖类物质 糖原（PAS）、黏液物质（AB-PAS、AB） 七、脂内物质 中性脂肪（苏丹Ⅲ、Ⅳ、油红O）
3
八、神经组织 尼氏体（硫瑾、甲苯胺蓝）、神经髓鞘（变色酸2R、砂罗 铬花青） 九、肝脏穿刺 Masson、网状纤维、含铁血黄素、PAS、铜等。 十、肾脏穿刺组织 Masson、六胺银、PAS、刚果红等
1.氧化（KMnO4）：使网状纤维内羟基转变为醛基。<选择性> 2.漂白（H2C2O4）：棕色变为无色。 3.媒染（铁明矾）：增加网状纤维对银氨液的选择性。 4.浸银（氢氧化银氨）：银氨液中Ag（NH3）2+被组织吸附后与醛基结合。 5.还原（甲醛）：与网状纤维结合的银氨配位化合物还原成黑色的金属 银。
各种组织染色方法大全主要内容结缔组织多色染色法胶原纤维染色
各种组织染色方法大全主要内容：结缔组织多色染色法胶原纤维染色法网状纤维染色法弹力纤维染色法第一节结缔组织多色染色法一、Mallory三色染色法1. 试剂配制（1）重铬酸钾液重铬酸钾2.5g，醋酸5ml，蒸馏水95ml （2）苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml（3）酸性复红液酸性复红0.5g，蒸馏水100ml2.染色步骤（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
（2）重铬酸钾液10min。
（3）蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。
（4）酸性复红液2min，蒸馏稍洗。
（5）苯胺蓝液20min，95%乙醇快速分化。
（6）直接用无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果胶原和网状纤维呈蓝色，软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒呈红色，髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项（1）酸性复红液易溶解于水，肉眼观察切片上保留一定的红色。
（2）苯胺蓝液染色后，用95%乙醇分化时，须用显微镜观察掌握。
（3）对陈旧的固定标本，其染色效果较差，可增加染色时间。
（4）另张切片，可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。
二、Masson三色染色法1.试剂配制（1）Masson复合染色液酸性复红1g，丽春红2g，桔黄G2g，0.25%醋酸300ml。
（2）亮绿染色液高绿SF0.1g，0.2%醋酸100ml。
2.染色步骤中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。
（1）Masson复合染色液5min。
（2）0.2%醋酸水溶液稍洗。
（3）5%磷钨酸5-10min。
（4）0.2%醋酸水溶液浸洗2次。
（5）亮绿染色液5min，0.2%醋酸水洗2次。
（6）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
3.结果胶原纤维呈绿色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色。
4.注意事项（1）Masson复合染色液，经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
（2）亮绿染料可用苯胺蓝替换，可用来作为对比观察染色的效果。
改良Gomori网状纤维染色减少背景染色的体会
例、 丙型肝炎 ２ ０例 、 内胆 管细 胞癌 ５ ０ 肝 ０例 、 内胆 管结石 肝 １５例 、 发性 胆汁性肝硬化 ６例 、 ０ 原 自身免疫性肝炎 １ ０例 、 肝 局 灶性结 节性 增生 ４例 。其 中 ４０例 用改 良 Ｇ ｍ ｒ 染色 ， ０ ｏ ｏｉ
４ ７例标本做经典 Ｇ ｍ ｒ染色 。 ０ ｏ ｏｉ
・
１５ ・ ２４
『 与 实验病理学杂志 临床
ＪＵｉ Ｅ ｐＰ ｔｏ ０ １Ｎ ｖ２ （ １ ｎ ｘ ａｈｌ ２ １ ｏ ；７ １ ）
改 良 Ｇ ｍ ｒ 网状纤维染色减少 黄 熊喜 生 ， 郑智 勇
关 键 词 ： ｏ ｏ 染 色 ； 状 纤 维 ； 组 织 ； 良 Ｇｍ ｆ ｉ 网 肝 改 中 图分 类 号 ： ４ Ｒ４ ６ 文 献 标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ： ０ —７９ （ ０ １ １ １ １ ３ ９ ２ １ ） １—１５ ０ ０ ２ ４— ２
０ ０ 冰醋 酸 ０ ５ｍ ＋双 蒸馏水 ５ 混匀 、 解 、 ．５ｇ＋ ． ｌ ０ｍｌ 溶 过滤 ， 室温保存 待用。所用试剂均为 国产分析提纯 。 １ ３ 染色方法 ． 改 良 Ｇ ｍｏ 染色法 ：１ 石蜡切片常规脱 ｏ ｆ ｉ （）
郑智勇 ， ， 男 教授 ， 主任医师 ， 硕士生导师 ， 通讯作者 。Ｅ ．
作者单位 ： 南京军区福州总医院病理科 ， 福州
３０ ２ ５０ ５
作 者 简 介 ： 育 连 ， ，技 师。 Ｔ ｌ ０ ９ ）２ ９ ７ ９ ，Ｅｍａ ： 朱 女 ｅ：（ ５ １ ４ ３ ０ ５ ． ｉ ｌ
ｘ ５ ７ ８ ＠ ｓｎ ． ｏ ｌ３ ０ ９１ ｉ ａ ｃ ｍ
匀、 溶解 、 过滤 ， 室温保 存待 用。 （ ） ． ％ 固绿 染色液 ： ４０１ 固绿
钙盐染色液配方及使用方法
钙盐染色液，钙盐染色产品编码产品名称产品规格保存条件北京华越洋5NF061 钙盐染色液(茜素红S法) 2×50ml 室温,避光,6个月北京华越洋5NF062 钙盐染色液(改良茜素红S法)3×50ml 4℃,避光,6个月北京华越洋5NF063 钙盐染色液(硝酸银法) 2×50ml 4℃,避光,6个月用途：钙盐染色注意事项：钙沉积物成橘红色,染色时间取决于钙的含量,检测少量钙时更有效。
复染液为固绿。
MTT溶液过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色试剂盒过碘酸-雪夫（快速）染色试剂盒糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒Bennhold刚果红染色试剂盒钙盐染色液（FeH）染色试剂盒Gordon-Sweets银氨溶液100ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维网状纤维染色试剂盒(改良Gomori氨银法) 5×100ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维网状纤维染色试剂盒(改良Gomori氨银法) 5×50mlGomori氨银溶液500ml 结缔染色网状纤维染色,可区分胶原纤维羟胺溶液(1.5mol/L,pH8.5) 100ml 135 室温,3个月细胞其他青霉素-链霉素混合溶液(100×双抗) 100ml 68 —20℃,12个月抗生素青霉素-链霉素-庆大霉素混合溶液(100×三抗) 100ml 195 —20℃,12个月抗生素秋水仙碱溶液(Colchicine,10mg/ml) 5ml 143 4℃,避光,6个月药物去离子甲酰胺100ml 120 4℃,避光,12个月RNA溶液任氏液500ml 128 4℃,3个月细胞其他溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml) 5ml 90 —20℃,12个月核酸提取鞣酸/单宁酸水溶液(5%) 100ml 68 室温,12个月结缔染色乳酸酚棉蓝染色液100ml 180 室温,避光,12个月微生物染色乳酸脱氢酶染色液(H型,四唑盐法) 2×50ml 375 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸脱氢酶染色液(M型,四唑盐法) 2×50ml 375 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸脱氢酶染色液(四唑盐法) 2×50ml 360 4℃,避光,6个月酶类染色乳酸银显影液100ml 105 室温,避光,6个月免疫组化瑞氏-姬姆萨复合染色液2×100ml 188 室温,12个月微生物染色瑞氏-姬姆萨复合染色液2×500ml 630 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain) 2×50ml 75 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,) 2×100ml 113 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,) 2×500ml 390 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,即用型) 100ml 105 室温,12个月微生物染色瑞氏染色液(Wright stain,即用型) 500ml 375 室温,12个月微生物染色弱磷酸盐缓冲液(LoPBS,pH7.0) 100ml 120 4℃,12个月蛋白其他噻嗪红染色液(0.1%) 100ml 90 室温,避光,12个月染色其他噻嗪红染色液(0.2%) 100ml 105 室温,避光,12个月染色其他三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L) 10ml 75 —20℃,12个月PCR相关三氯化铁水溶液(10%) 100ml 53 室温,12个月常规其他三羟甲基甘氨酸加样缓冲液(2×) 10ml 75 4℃,6个月蛋白电泳沙黄/藏红T水溶液(2%) 100ml 83 室温,避光,6个月微生物染色山梨醇-磷酸盐溶液(1.2mol/L,pH7.5) 100ml 68 室温,6个月细胞组分分离山梨醇-磷酸盐溶液(1.2mol/L,pH7.5,无菌) 100ml 128 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1.1mol/L,无菌) 100ml 113 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1mol/L) 100ml 60 室温,6个月细胞组分分离山梨醇溶液(1mol/L,无菌) 100ml 105 室温,6个月细胞组分分离神经HRP示踪显色液(DAB法) 50T 165 4℃,避光,6个月神经染色神经HRP示踪显色液(TMB法) 50T 165 4℃,避光,6个月神经染色生理盐水(1×NS,无菌) 500ml 45 室温,12个月常规其他生理盐水(10×NS,无菌) 500ml 53 室温,12个月常规其他石碳酸复红染色液100ml 135 室温,避光,18个月微生物染色双链DNA变性缓冲液100ml 75 室温,12个月核酸杂交双缩脲法蛋白定量试剂盒500T 150 4℃,12个月蛋白检测双缩脲法蛋白定量试剂盒1000T 255 4℃,12个月蛋白检测双缩脲总蛋白试剂100ml 75 4℃,12个月蛋白检测水饱和酚(Phenol Water) 100ml 90 4℃,避光,3个月核酸提取顺丁稀二酸缓冲液(MAB,pH7.5) 500ml 90 室温,36个月核酸电泳苏丹Ⅲ酒精饱和溶液100ml 120 室温,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅲ脂肪染色液3×50ml 240 室温,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅳ染色液3×50ml 225 4℃,避光,12个月脂类染色苏丹Ⅳ染色液-A液100ml 120 室温,避光,12个月脂类染色酸性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 2×50ml 885 4℃,避光,6个月酶类染色酸性磷酸酶染色液(硝酸铅法) 2×50ml 300 4℃,避光,6个月酶类染色酸性乙醇分化液(0.5%) 500ml 75 室温,12个月染色其他。
组织学技术Gomori染色法
组织学技术Gomori染色法醛品红染色法（弹性纤维）⑴组织用10%甲醛液、甲醛酒精液或Bouin液，避免用含铬盐的固定液。
常规脱水，石蜡包埋、切片。
⑵切片脱蜡，经酒精下行至蒸馏水。
⑶0.5%高锰酸钾（Potassium permanganate）水溶液1~2分钟，流水洗。
⑷1%草酸（Oxalic acid）水溶液1分钟，水洗1分钟。
⑸50%酒精1~2分钟。
⑹醛品红液染色5~15分钟（冬天37℃温箱染10分钟），蒸馏水速洗。
醛品红液：碱性品红（Basic fuchsin）0.5克溶于蒸馏水100毫升，加热煮沸过滤。
取滤液加浓盐酸（hydrochloric acid）1毫升和三聚乙醛（Paraldehyde）1毫升，将溶液倒入锥形瓶加塞，放室温3~4天，经常摇动，再过滤，将滤纸和沉淀物置温箱烘干。
将烘干的沉淀染料粉0.5克加70%酒精100毫升。
醛品红的配制另一法：碱性品红0.5克溶于70%酒精100毫升，加浓盐酸及三聚乙醛各1毫升，静置24小时，溶液呈深紫色，保存于冰箱备用。
⑺95%酒精分色至背景无色。
⑻蒸馏水洗30~60秒。
⑼1%亮绿（Brilliant green）水溶液染2~5分钟，蒸馏水速洗。
⑽95%酒精分色至纤维颜色分明，无水酒精脱水。
⑾二甲苯透明，中性树胶封片。
结果：弹性纤维紫色，胶原纤维绿色，核紫红色。
本法能很好显示血管壁、肺泡壁和皮肤等组织中的弹性纤维。
醛品红染色不能过染，否则不易分色。
Gomori染色法（网状纤维）方法：⑴新鲜组织固定于10%甲醛液、Zenker液或Susa液，常规脱水、石蜡包埋切片。
可作冰冻切片。
⑵石蜡切片经二甲苯脱蜡，各级酒精下行至蒸馏水。
⑶0.5%或1%高锰酸钾水溶液2分钟，流水洗。
⑷3%亚硫酸钾（Potassium sulfite）或草酸2分钟，流水洗。
⑸2%铁明矾（Ammonium iron (III) sulfate dodecahydrate）水溶液3分钟，蒸馏水洗2~3次约2分钟。
组织化学染色
方法步骤：
结果：网状纤维呈黑色，胶原纤维呈黄色或 黄褐色，细胞核呈灰褐色或灰黑色。
3、Foot染色法 原理同Gomori染色法，用Foot碳酸银溶液着
色。
较复杂，所需时间长，易脱片，但染色结果较 稳定。
方法步骤：
结果：网状纤维呈黑色或黑褐色，其他组织 呈复染颜色。
网状纤维染色的应用
染色剂 （溶解或吸收） 组织、细胞
例如脂肪染色:
苏丹类染色剂在脂质中的溶解度＞酒精 中的溶解度
溶解于酒精的苏丹类染色剂与组织中 的脂质接触时，染色剂就从溶液中“转 移”到脂质中，从而使脂质着色。
2 、化学机制（Chemical mechanism):
染色剂和组织细胞的化学结合
（1）
染料 ﹤ 阳性离子 ﹥ 组织 阴性离子
网状纤维染色方法
1 、氢氧化银氨染色法Ⅰ（改良GordonSweets）
原理：胺银液被组织吸附，与组织的蛋白质结合，经甲
醛作用后还原成黑色或棕黑色的金属。
结果：网状纤维呈黑色，细胞核呈红色，胶原纤 维呈黄色至棕黄色，胞质呈淡黄色。
2、氢氧化银氨染色法Ⅱ（改良Gomori） 原理：
此法简单可靠，染色时间短，常用于活检病理 组织检查。
苏木素是一种天然染料，是由中、南美洲等地产 的一种称为“洋苏木树”的树芯木抽提出来。
苏木素本身无染色能力，只有经过氧化，使其分 子结构失去两个氢原子，将一个苯环转化成具有 醌型结构的苯环而成为苏木红（hematein）。
苏木素的化学结 构已为大家熟悉， 但其染色机制还 不很明确。
1、苏木素经过氧化转 化成苏木红染料
ห้องสมุดไป่ตู้还原剂
银盐溶液附着于嗜银颗粒
金属银
例如：类癌的嗜银反应。
病理学技术中级(师)专业实践能力模拟试卷4(题后含答案及解析)
病理学技术中级（师）专业实践能力模拟试卷4(题后含答案及解析) 题型有：1. A1型题1．Gomori银染色法中，网状纤维呈A．红色B．绿色C．黑色D．黄色E．蓝色正确答案：C 涉及知识点：常用的特殊染色技术2．关于Gomori醛复红染色法的描述中，错误的是A．醛复红染液配制后需在室温下静置1～2日B．醛复红是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成C．醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色D．可用Gornori醛复红染色使胃主细胞着色E．醛复红染液在室温下保存正确答案：E解析：醛复红染液应放置在冰箱内保存。
知识模块：常用的特殊染色技术3．Mowry阿尔辛蓝过碘酸希夫(ABPAS)染色法常用于显示A．结缔组织B．糖原C．黏多糖D．纤维素E．肌肉正确答案：C 涉及知识点：常用的特殊染色技术4．胃肠道上皮内镜活检组织使用Schiff阿尔辛蓝地衣红染色法观察酸性黏多糖呈A．蓝色B．棕色C．红色D．蓝色E．黄色正确答案：B 涉及知识点：常用的特殊染色技术5．显示淀粉样蛋白最常用的方法是A．甲紫法B．硫酸钠爱尔森蓝法C．刚果红法D．氧化苏木红法E．诱导荧光法正确答案：C 涉及知识点：常用的特殊染色技术6．采用Warthin-Starry进行胃幽门螺杆菌染色时，胃幽门螺杆菌呈A．黄色B．黑色C．绿色D．红色E．蓝色正确答案：B 涉及知识点：常用的特殊染色技术7．维多利亚蓝染色法的注意事项不包括A．维多利亚蓝染色液需放置3周后使用B．维多利亚蓝染色液储存于暗处可反复使用C．核固红染色液使用时不能摇动，用饱和上清液D．初次染色，最好使用HBsAg阳性组织切片做对照E．在维多利亚蓝染液中需放置1～2小时正确答案：E解析：维多利亚蓝染液中需放置12～24小时。
知识模块：常用的特殊染色技术8．碱性重氮反应法是显示哪个部位嗜银细胞颗粒的较好方法A．小肠和类癌B．大肠和类癌C．结肠和类癌D．直肠和类癌E．胃和类癌正确答案：A 涉及知识点：常用的特殊染色技术9．用于显示胶原纤维、网状纤维和弹性纤维的三联染色法，下列结果正确的是A．胶原纤维呈绿色，网状纤维呈黑色，弹性纤维呈红色，肌肉和红细胞呈淡黄色B．胶原纤维呈红色，网状纤维呈黑色，弹性纤维呈绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色C．胶原纤维呈黑色，网状纤维呈绿色，弹性纤维呈红色，肌肉和红细胞呈淡黄色D．胶原纤维呈黑色，网状纤维呈绿色，弹性纤维呈黄色，肌肉和红细胞呈红色E．胶原纤维呈绿色，网状纤维呈黄色，弹性纤维呈黑色，肌肉和红细胞呈红色正确答案：B解析：维多利亚蓝将弹性纤维染成绿色，胶原纤维被丽春红S染成红色，Gomori氨性银改良染色液将网状纤维着染成黑色，并称三联染色法。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
＋蒸馏水，洗涤沉淀（50-100ml蒸馏水） <反复/3次，沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液（4ml）
<保留沉淀物质>
逐滴＋氢氧化铵（一次1-2滴加入）
பைடு நூலகம்<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴＋10%硝酸银，至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴，使沉淀消失
＋蒸馏水至40ml，2-8°C冰箱
<浑浊状态>
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3.高锰酸钾氧化时间不可过长，过长容易影响组织细胞形态的观 察。 4.原法中甲醛还原后用0.2%氯化金调色、5%硫代硫酸钠固定及VG 液复染，实际工作中可省略。（不进行复染结果对比同样清晰） 5.根据诊断的需要，可进行与其他（如+Masson）染色套染。
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（七）染色结果
网状纤维—黑色 胶原纤维—黄色至棕黄色 胞核—褐色
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（五）染液的配制及保存
①0.25%高锰酸钾：（定期更换）
②2%草酸：
③2%硫酸铁铵： ④Gomori银氨液：（使用、保存几周）
棕色瓶 2-8°C冰箱保存
（染色成败的关键）
⑤4%中性甲醛：（定期更换）
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Gomori银氨液-1
10%硝酸银(3ml)+10%氢氧化钾(1ml)
<出现棕黑色颗粒沉淀>
（溶解度0.4%），溶于酒精（溶解度7.6%）。
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（四）染液的配制及保存
①5%苯酚水溶液：（临时配制）
先在恒温箱中加热溶解，吸取5ml与95ml蒸馏水混合配制。
②苯酚碱性品红液：（保存期1年）
碱性品红 无水乙醇 5%苯酚水溶液
0.5-1g 溶解
gomori银染色法
Gomori银染色法1. 简介Gomori银染色法是一种常用于组织学研究中的染色技术，用于观察和分析细胞和组织中的特定结构和成分。
该方法利用化学反应将目标物质转化为可见的颜色，从而使其在显微镜下更容易观察和分析。
2. 原理Gomori银染色法的原理基于物质与还原剂之间的化学反应。
在染色过程中，还原剂（如氨水）与目标物质（如核酸或蛋白质）发生反应，生成可见的沉淀物。
这种沉淀物具有黑褐色至棕褐色的颜色，可以在显微镜下清晰地观察到。
3. 步骤Gomori银染色法通常包括以下步骤：3.1 样本制备首先，需要准备待染色的组织样本。
样本可以是活体组织切片、固定组织切片或细胞悬液等。
3.2 固定样本对于活体组织切片，需要先进行固定以保持其形态和结构。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醛等。
3.3 去脂化接下来，需要将样本进行去脂化处理以去除细胞和组织中的脂肪物质。
这可以通过浸泡样本于氯仿、醇或氨水等溶液中来实现。
3.4 银染色在样本去脂化后，开始进行银染色步骤。
具体操作如下：1.将样本浸泡于含有还原剂（如氨水）的染色溶液中，使其与目标物质发生反应。
2.在适当的时间内（通常为几分钟至几小时），观察目标物质是否已经被还原并形成沉淀物。
3.如果需要增强染色效果，可以重复上述步骤。
4.染色完成后，用水洗涤样本以去除多余的染料和化学试剂。
3.5 固定和封片最后，为了保护和保存已染色的样本，需要进行固定和封片处理。
这通常包括使用透明胶片或覆盖玻璃将样本封装，并使用合适的固定剂固定样本。
4. 应用Gomori银染色法在生物医学研究中有广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：4.1 组织学研究Gomori银染色法可以用于观察和分析组织的形态、结构和成分。
它可以帮助研究人员了解组织中不同类型的细胞、细胞器和其他结构之间的关系，并揭示出一些特定病理变化。
4.2 神经科学研究在神经科学领域，Gomori银染色法常被用来染色神经元和神经突起。
经典和改良胺银染液配制方法比较
经典和改良胺银染液配制方法比较解立武常芳DOI ：10.3969/j.issn.0253⁃9926.2020.17.045作者单位：030013太原，山西省肿瘤医院病理科通信作者：常芳，Email ****************网状纤维染色在病理诊断中应用非常广泛。
网状纤维在组织内形态以及分布特征，预示着不同的病理诊断结果，尤其在鉴别间叶组织和上皮组织来源的恶性肿瘤具有重要意义［1］。
网状纤维的染色方法较多，Gomori 银氨染色法是最常用的染色方法。
其中的氨银染色液是网状纤维染色的关键染液，高质量的胺银染液是染色成败的关键。
我们对经典的配制方法进行了改良，结果是网状纤维清晰，和背景对比分明，配制方法简单有效，而且保存期大大延长。
1材料与方法1.1材料硝酸银、氢氧化钠、氢氧化钾、氨水。
1.2仪器磁力搅拌器、滴定管、烧杯。
1.3配制方法1.3.1经典的配制方法［1］：①10%的硝酸银3m L ，加入10%的氢氧化钾3m L ，立即生成棕黑色颗粒沉淀。
②加入10倍以上的蒸馏水洗涤沉淀物，倾去上清液，再加入蒸馏水，反复洗涤3次。
③然后逐滴滴入氨水，并轻轻不断摇晃，直至沉淀物恰好完全溶解。
④再加入10%硝酸银数滴至溶液稍变浑浊，再小心加入氨水使溶液恰好又变清。
⑤按照原来总量蒸馏水稀释10倍。
配制好的氨银溶液装入棕色试剂瓶中，放入4°C 冰箱保存，可以使用4~8周。
1.3.2改良的配制方法：①10%的硝酸银10m L ，加入10%的氢氧化钠10m L 的烧杯中，立即生成棕黑色颗粒沉淀。
②将烧杯置于磁力搅拌器上，磁力棒放入杯内溶液中，开启旋转。
转速调至低速转动溶液。
③将注入了氨水的滴定管加盖，滴速调为每分钟3滴，形成最小液滴自行滴入转动的溶液中，棕黑色慢慢溶解，滴加至所形成的沉淀物恰好溶解为清亮液为止，用蒸馏水补足200m L 。
配制好的氨银溶液装入棕色试剂瓶中放置4°C 冰箱保存，可以使用5~6个月。
Bielschowsky氏染色改良法显示网状纤维
Bielschowsky氏染色改良法显示网状纤维
杨壮来
【期刊名称】《解剖学杂志》
【年(卷),期】2011(034)001
【摘要】@@ 显示网状纤维最常用的方法是银浸染法[1].银浸染技术早在1904年由Bielschowsky氏用于神经原纤维的研究,后经多次改良,发展为各种氨银液浸染法.例如:改良Bielschowsky氏法,Perdrau氏法,Foot氏法,Gomori氏法,Wilder氏法,Gorden-Sweets氏法,James氏法等十多种.
【总页数】2页(P135-136)
【作者】杨壮来
【作者单位】江汉大学卫生技术学院解剖学与组织学胚胎学教研室,武汉430016【正文语种】中文
【相关文献】
1.一种改良Bielschowsky染色法显示触觉小体和游离神经末梢的方法 [J], 杨壮来
2.介绍一种网状纤维染色改良法 [J], 杨世峰;程国平
3.Foot氏网状纤维染色改良法 [J],
4.改进的Bielschowsky氏法对神经末梢的显示 [J], 王京景
5.Bielschowsky氏改良法(摘要) [J], 孟群
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5.免疫组织化学染色直接法的原理是A、用已知的补体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的抗原反应B、用已知的特异性抗体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的抗原反应C、将凝集素与荧光素或酶结合，直接与组织中的抗原反应D、用已知的特异性抗体直接与待测组织中的抗原结合E、用已知的配体与荧光素或酶结合，直接与待测组织中的受体反应正确答案：B6.免疫酶组织化学中的阳性对照是指A、用已知补体阳性的切片做对照与待检标本同时进行免疫组织化学染色，对照切片应呈阳性结果B、_用已知抗体阳性的切片做对照与待检标本同时进行免疫组织化学染色，对照切片应呈阳性结果C、用已知抗原阳性的切片做对照与待检标本同时进行免疫组织化学染色，对照切片应呈阳性结果D、用已知过氧化物酶阳性的切片做对照与待检标本同时进行免疫组织化学染色，对照切片应呈阳性结果E、用已知DAB阳性的切片做对照与待检标本同时进行免疫组织化学染色，对照切片应呈阳性结果正确答案：C7.伊红Y 0.5～1g、蒸馏水100mlA、乙醇伊红液B、水溶性伊红C、Mayer苏木精D、Harris苏木精E、Gill改良苏木精正确答案：B8.与胶原纤维染色比较Van Gieson(V．G)法的缺点是A、易褪色和对比度差B、受固定液限制C、染料造价高D、染色后必须经过水洗E、着色慢，染色时间长正确答案：A9.要制备电镜的半薄切片，可用的组织固定方法是A、可先用戊二醛固定，然后再用锇酸进行二次固定B、乙醇固定C、中性甲醛液体D、先用甲醛固定，然后再用戊二醛进行二次固定E、丙酮正确答案：A10.对组织固定的定义，下面的描述正确的是A、将组织浸入某些化学试剂，使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置，这一过程称为“固定”B、将组织浸入某些化学试剂，使生活的细胞迅速死亡，这一过程称为“固定”C、将组织浸入某些化学试剂，使已经停止代谢的细胞快速分解，这一过程称为“固定”D、将组织浸入某些化学试剂，使生活的细胞迅速死亡并分解，这一过程称为“固定”E、将组织浸入某些化学试剂，使生活细胞的代谢迅速停止并分解，这一过程称为“固定”正确答案：A11.显示黑色素常用的方法是A、刚果红法B、甲基紫法C、Masson Fontana银浸染色法D、普鲁士蓝法E、醛品红法正确答案：C12.可不引起组织收缩和硬化，但其价格较高的脱水剂是A、还氧己环B、正丁醇C、环己酮D、异丙醇E、乙醇正确答案：A13.是免疫组织化学最常用的固定液,对组织穿透性好,组织收缩小A、甲醛一钙液B、乙醇一甲醛液C、乙醚一乙醇液D、丙酮E、中性缓冲甲醛液正确答案：E14.关于胃幽门螺杆菌的描述错误的是A、短杆状，两端微弯的革兰阴性杆菌B、与慢性胃炎和消化性溃疡的发生有关C、具有嗜银性，经硝酸银染色呈棕黑色D、含有蛋白和多糖等物质E、是胃幽门部所独有的致病菌正确答案：E答案解析：胃幽门螺杆菌是存在于胃幽门等部位的一种细菌，在慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡内镜活检标本中均可检到，因此不是胃幽门部所独有的。
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网状纤维染色液(改良Gomori 氨银法)
简介：
网状纤维(Reticular fiber)是网状结缔组织内的一种纤维，由网状细胞所产生，直径多在0.2～1.0μm ，有韧性而没有弹性。
网状纤维的染色方法很多，但染色原理基本一致，大都采用氨银浸法。
改良Gomori 网状纤维染色原理是利用氨银液易被组织吸附与组织的蛋白质结合，经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银，沉积于组织内及其表面。
传统方法中还原后先采用氯化金调色，再用硫代硫酸钠溶液洗去组织上未还原的银盐，本改良法省略该步骤，使网状纤维对比得更清晰。
Leagene 网状纤维染色液(改良Gomori 银氨法)主要经过氧化、漂白、媒染、浸银、还原步骤，与改良Gordon-Sweets 法不同之处在于后者采用酸性氧化剂和核固红复染液。
冰冻切片、低温切片和火棉胶切片均可用于网状纤维染色，各种固定液均可采用，重金属汞盐或锇盐固定液偶尔会产生一些非特异性银背景。
常用于鉴别肿瘤的性质和来源、癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤、血管内皮瘤与血管外皮瘤、骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等。
组成：
自备材料：
1、10%福尔马林固定液
2、染色架
3、蒸馏水
操作步骤(仅供参考)：
1、组织固定福尔马林固定液，常规脱水包埋。
2、切片厚，常规脱蜡至水。
3、把切片平置在染色架上，滴加Gomori 氧化剂，氧化。
编号 名称
DC0021 5×50ml
Storage 试剂(A): Gomori 氧化剂 50ml RT
试剂(B): 草酸溶液 50ml RT 试剂(C): 硫酸铁铵溶液 50ml RT 试剂(D): Gomori 银氨溶液 50ml
4℃ 避光 使用说明书
1份
4、稍水洗
5、入草酸溶液漂白。
6、流水冲洗，蒸馏水稍洗。
7、硫酸铁铵溶液媒染。
8、稍水洗，蒸馏水稍洗。
9、滴加Gomori银氨溶液染色。
10、蒸馏水稍洗。
11、Gomori还原剂还原。
12、流水冲洗。
13、常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
网状纤维黑色
胶原纤维黄色至黄棕色
胞核褐色至褐黑色
注意事项：
1、玻璃器皿必须用洗涤液浸泡1天，自来水冲洗干净，蒸馏水冲洗2次。
2、10%福尔马林固定液是较为适合的固定液，不宜采用含汞的固定剂如Zenker液，否则易导致切片非特异性沉淀。
3、Gomori氨银溶液不太稳定，对光的敏感性强，应4℃避免保存，恢复至室温后使用。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
DC0032 Masson三色染色液
DD0002 EDTA脱钙液
DE0001 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法)
DH0006 苏木素伊红(HE)染色液
PW0053 Western抗体洗脱液(碱性)
TE0002 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)。