中草药中各类化学成分提取分离方法
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CH2 CH CH2 CH CH2 CH
2.影响因素:
a.一般非极性化合物在水中易被非极 性树脂吸附,极性化合物在水中易 被极性树脂吸附。
b.物质在溶剂中的溶解度大,树脂对 此物质的吸附力就小,反之就大。
c.分子量小、极性小的化合物与非极 性大孔吸附树脂吸附作用强;反之, 与极性大孔吸附作用强。能与大孔 吸附树脂形成氢键的化合物易吸附。
极性强弱是支配物理吸附过程的主要因素
极性就是指分子中电荷的不对称程 度,并大体上和分子的偶极距、极 化度及介电常数等概念相对应。
1.主要官能团的极性由弱到强排序为: —CH2—CH2— < —CH2=CH2— < —OCH3 <—COOR < >C=O(CHO) <—NH2 <—OH < —COOH
4.应用:
a.特别适合于酚类、黄酮类化合物的 制备和分离
b.对生物碱、萜类、甾体、糖类、氨 基酸等其它极性与非极性化合物的 分离也有着广泛应用。
c.用于提取物的脱鞣质处理。
大孔吸附树脂法 分为极性和非极性 1.原理:吸附和分子筛 以苯乙烯为母体,二乙烯苯为交联剂
(非极性) CH2 CH CH2 CH CH2 CH
被溶解物质也有亲水性及亲脂性之 分。溶质在溶剂当中的溶解遵循相 似相溶的原理,亲水性的化学成分 易溶于水或亲水性的有机溶剂中, 亲脂性的成分易溶于亲脂性的有机 溶剂中。
石油醚→油脂、蜡、叶绿素、挥发 油、游离甾体及三萜类化合物
氯仿或醋酸乙酯→游离生物碱、有 机酸及黄酮、香豆素的苷元
丙酮或乙醇、甲醇→苷类、生物碱 盐、鞣质等
中草药有效成分的分离与精制
根据物质的溶解度差别进行分离
根据物质在两相溶剂中的配比不同 进行分离
根据物质的吸附性能差别进行分离 根据物质分子大小差别进行分离 根据物质离解程度不同进行分离
一、根据物质的溶解度差别进行分离
1.结晶及重结晶法:利用温度变化引 起溶解度的改变使物质得以分离。
2.溶剂分离法:
a.通过加入另一种溶剂以改变溶剂的 极性,使一部分物质沉淀析出,从 而实现分离。如:水提醇沉法
b.酸性、碱性或两性化合物,通过加 入酸或碱来调节溶剂的PH值,改变 分子的存在状态(游离型或离解 型),从而改变溶解度而实现分离。
3.沉淀法:酸性或碱性化合物通过加 入某种沉淀试剂使之生成水不溶性 的盐类等沉淀析出而实现分离。如 生物碱加入有机酸可生成不溶于水 的有机酸盐沉淀,酸性化合物可加 入钙盐、铅盐、钡盐等生成不溶性 的沉淀。
3.分配比与PH:溶剂系统PH的变化影 响酸性、碱性、及两性有机化合物 的存在状态(游离型或离解型), 从而影响在溶剂系统中的分配比。
游离型——极性小的溶剂
离解型——极性大的溶剂
一般PH<3,酸性物质多呈非离解状 态(HA)、碱性物质则呈离解状态 (BH+);PH>12,则酸性物质呈离 解状态(A-)、碱性物质以非离解 状态(B)存在。
中草药有效成分的提取 一、溶剂提取法 二、水蒸汽蒸馏法 三、升华法
一、溶剂提取法
是根据天然药物中各种成分在溶剂 中的溶解性质,选用对有效成分溶 解度大,而对不需要溶出成分溶解 度小的溶剂,将有效成分从药材组 织中溶解出来的办法。
溶剂可分为: 水、亲水性和亲脂性有机溶剂 常用溶剂:极性由弱到强依次排序为 石油醚<四氯化碳<苯<二氯甲烷< 氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙 酮<乙醇<甲醇<水
2.化合物的极性则由分子中所含官能 团的种类、数目及排列方式等综合 因素所决定。
3.溶剂极性大小则大体上由介电常数 决定,常用溶剂介电常数及其极性 由弱到强排序为:
环己烷(1.88),苯(2.29),无水 乙醚(4.47),氯仿(5.20),乙酸 乙酯(6.11),乙醇(26.0),甲醇 (31.2),水(81.0)
OH
>
HO
OH
OH
OH
>
OH
b.成键位置对吸附也有影响。易形成
分子内氢键的化合物,其吸附性能
减弱。
OH
OH
>
OH
>
OH
OH
HO
> COOH
O
C OH
HO
c.分子中芳香化程度越高,则吸附性 能越强。
OH
OH
>
3.各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力 由弱至强排序为:
水→甲醇→丙酮→氢氧化钠水溶液→ 甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
2.化学吸附:如黄酮等酚酸性物质被 碱性氧化铝吸附,生物碱被酸性硅 胶吸附等。
3.半化学吸附:如聚酰胺与黄酮类、 蒽醌类等化合物之间的氢键吸附。 介于物理吸附与化学吸附之间。
物理吸附基本规律→相似者易吸附 固液吸附三要素:吸附剂、溶质、 溶剂
1.极性吸附剂(氧化铝、硅胶)特点: a.对极性强的物质吸附能力强 b.溶剂极性减弱,则吸附剂对溶质的 吸附能力增强;反之,则减弱。
流动相:氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极 性有机溶剂
洗脱顺序:极性小的化合物先出柱,极 性大的后出柱。
应用:适用于水溶性或极性较大的化合 物,如生物碱、苷、糖类、有机酸等。
反相色谱:
固定相:石蜡油,化学键合相(如 十八烷基硅胶键合相)
流动相:水、甲醇、乙腈等强极性 有机溶剂
洗脱顺序:极性大,先出柱;极性 小,后出柱。
4.中性化合物: 分子结构中既无碱性基团也无酸性 基团的化合物,如萜类和挥发油、 甾体等。
二、无效成分
1.脂溶性 蜡-高级不饱和脂肪酸(16-30碳)和
高级一元醇结合的酯
脂肪油-不饱和脂肪酸(链长短不一)与 丙三醇形成的甘油酯,通常称为混合甘 油酯。
叶绿素及胡萝卜素
2.水溶性 多糖类-淀粉、纤维素、树胶、果 胶、粘液质 多元酚类化合物-鞣质
c.溶质即使被硅胶、氧化铝吸附,一 旦加入极性较强的溶剂时,又可被 置换洗脱下来。
OH
A
ⅠCHCl3: MeOH(7:3) ⅡCHCl3: MeOH(3:7)
OH
B
HO
OH
2.非极性吸附剂(活性炭):
对非极性物质亲和能力强,溶剂极 性降低,则活性炭对溶质的吸附能 力也随之降低;反之,则提高。
极性及其强弱判断:
中草药中各类化学成分提取分 离方法
2.酸性化合物: 结构中含有酚羟基的化合物 ——黄酮、醌类、苯丙素(香豆素、
木脂素)及其苷类 结构中含有羧基的化合物 ——有机酸、葡萄糖醛酸
HO
O
OH OH
OH OH O
黄酮
HO
OO
香豆素
O
OH O
蒽醌
OH
OH
木脂素
3.两性化合物: 结构中既有碱性基团也有酸性基团 氨基酸、蛋白质
通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄 酮类化合物的酚羟基,或酰胺键上 的游离胺基与醌类、脂肪酸上的羰 基形成氢键缔合而产生吸附。
H2C NH
OC CH2
H2C CH2
HN CO
H2C
CH2 OC
NH H2C
CH2 H2C
CO HN
CH2
固定相
O
O
HO
移动相
2.吸附强弱规律(含水溶剂中)
a.形成氢键的基团数目越多,则吸附 能力越强。
2.回流提取法:是用有机溶剂作为提取溶 剂,在回流装置中对药材进行加热回流 提取,该方法提取效率较高,但因为长 时间加热,所以不适合受热易破坏分解 的成分。
3.连续回流提取法:是回流提取法的发展, 具有消耗溶剂量更小,提取效率更高的 优点。常用索氏提取器或连续回流装置。
水-是一种强极性溶剂。无机盐、糖类、 分子不太大的多糖、鞣质、氨基酸、蛋 白质、有机酸盐、生物碱盐和极性苷类 等都能被水溶出。以水作为提取溶剂的 缺点是:提出的杂质多。
3.应用: 广泛应用于天然化合物如苷、糖类、 生物碱、多糖、黄酮、三萜类化合物 的分离和富集工作。 4.洗脱液的选择:最常用的水、乙醇, 此外甲醇、丙酮、乙酸乙酯也被应用。
二、根据物质在两相溶剂中的分 配比不同进行分离
液-液分配的基本原理 1.分配系数 K值:一种溶质在两相溶剂
中的分配比。K值在一定的温度和压 力下为一常数。
K=CU/CL
2.分离因子β:两种溶质在同一溶剂系 统中分配系数的比值。
β=KA/KB (KA>KB) β≥100,一次萃取就可实现基本分离 100 ≥β≥10,需萃取10~12次 β≤2,需萃取100次以上 β≌1,无法实现分离
应用:适合于脂溶性成分,如高级 脂肪酸、油脂、游离甾体等
目前液-液分配柱色谱中的固定相主 要为化学键合相。
反相液-液分配柱色谱法是当前应用 最为广泛的一种柱色谱分离、分析 方法。
三、根据物质的吸附性差别进行分离
固-液吸附应用的最多
吸附类型:
1.物理吸附(溶液分子与吸附剂表面 分子的分子间作用力):硅胶、氧 化铝及活性炭为吸附剂的吸附色谱。
3. 为避免化学吸附,酸性物质宜ຫໍສະໝຸດ Baidu 硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸 附剂进行分离。通常在分离酸性 (或碱性)物质时,洗脱溶剂中常 加入适量的醋酸(或氨、吡啶、二 乙胺),以防止拖尾,改善分离效 果。
聚酰胺吸附色谱法:属于氢键吸附 (半化学吸附)特别适合分离酚类、 醌类、黄酮类化合物。
1.聚酰胺的吸附原理:
水→氨基酸、糖类、无机盐等
常用的溶剂提取法
(一)冷提法 1.浸渍法 2.渗漉法 (二)热提法 1.煎煮法 2.回流提取法 3.连续回流提取法
冷提法
1.浸渍法:是用水或醇浸渍药材一定 时间,然后合并提取液,并将其减 压浓缩的方法。该法因为一般都是 在低温下进行的,不用加热,所以 适合于挥发性成分及受热易分解成 分的提取。但提取的时间较长,效 率低。用水浸提时还要注意提取液 的防腐问题。
二、水蒸汽蒸馏法
适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸 馏而不被破坏、难溶或不溶于水的 成分的提取,如挥发油、小分子的 香豆素类、小分子的醌类成分。
三、升华法
固体物质受热不经过熔融,直接汽 化,遇冷后又凝固为固体化合物, 称为升华。中草药中有一些成分具 有升华的性质,可以利用升华法直 接自中草药中提取出来。如樟脑、 咖啡因。
极性不完全等同于亲水性
亲水性强,则极性强;极性强,则亲水 性并不一定强。
OH
OH
HO
O
OH
HO
O
OH
A
OH
OH O
B
OH
OH O
亲水性A>B
极性 B>A
吸附柱色谱用于物质的分离:
1.选用极性小的溶剂装柱和溶解样品 或用极性稍大的溶剂溶解样品后, 以少量吸附剂拌匀挥干,上柱。
2.溶剂系统可用TLC进行筛选。以TLC 展开时使组分Rf值达到0.2~0.3的溶 剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。
冷提法提出的杂质少且对热不稳定的成 分较适宜,提取效率低;而热提法的效 率高,但对热不稳定的成分不适宜,特 别不适于挥发性成分和淀粉、粘液质多 的药材的提取。
亲水性有机溶剂-也就是一般所说 的与水能混溶的有机溶剂,如乙醇、 甲醇、丙酮等,其中以乙醇最为常 用。具有经济、安全、无毒;对细 胞的穿透能力强;大多数天然成分 都可溶解等优点,常称为万能溶剂。
当β>50时,简单萃取即可,β<50 时,则需采用逆流分溶法。
主要分离方法
1.简单的液-液萃取法 2.逆流分溶法(CCD) 3.液滴逆流色谱法(DCCC) 4.高速逆流色谱法(HSCCC) 5.纸色谱法(PC) 6.气-液分配柱色谱法(GLC) 7.液-液分配柱色谱法(LLC)
纸色谱法
支持剂:纤维素 固定相:纤维素上吸附的水 展开剂:与水不相混溶的有机溶剂或水饱
2.渗漉法:是将药材装入渗漉筒中, 先用水或醇浸渍数小时,然后从渗 漉筒的下口使提取液流出,上口不 断地加入新的溶剂,此方法因为药 材与溶剂之间能够始终保持较大的 浓度差,因此提取效率较高。该法 同样适用于挥发性及受热易破坏分 解的成分的提取。但是有溶剂耗费 量较大的缺点。
热提法
1.煎煮法:该方法是我国中医中药 最早使用的传统的提取方法。是将 药材用水加热煮沸提取,在提取过 程当中大部分成分可被不同程度的 提取出来,但是对于挥发性成分及 加热易被破坏的成分不宜使用。
和的有机溶剂 Rf值:极性大, Rf值小;极性小, Rf值大。 应用:适合于亲水性较强的物质。
液-液分配柱色谱法 柱色谱:在色谱管中完成的化合物之
间的分离过程称为柱色谱。 柱色谱分:常压柱色谱、加压柱色谱 载体(支持剂):硅胶、硅藻土及纤
维素等 按洗脱顺序分:正相色谱、反相色谱
正相色谱:
固定相:水、缓冲溶液
4.液-液萃取与纸色谱 纸色谱与液-液萃取的分离原理都是 分配。 Rf值与K值之间有下列关系
Kor/w=1/r(Rf/1-Rf)
当层析滤纸湿重(W湿)为干重(W 干)的1.5倍时,r=2
设A、B两种(或两组)物质的Rf值 分别为 Rfa 及 Rfb 。
β=Rfa(1-Rfb/1-Rfa) ( Rfa > Rfb)
2.影响因素:
a.一般非极性化合物在水中易被非极 性树脂吸附,极性化合物在水中易 被极性树脂吸附。
b.物质在溶剂中的溶解度大,树脂对 此物质的吸附力就小,反之就大。
c.分子量小、极性小的化合物与非极 性大孔吸附树脂吸附作用强;反之, 与极性大孔吸附作用强。能与大孔 吸附树脂形成氢键的化合物易吸附。
极性强弱是支配物理吸附过程的主要因素
极性就是指分子中电荷的不对称程 度,并大体上和分子的偶极距、极 化度及介电常数等概念相对应。
1.主要官能团的极性由弱到强排序为: —CH2—CH2— < —CH2=CH2— < —OCH3 <—COOR < >C=O(CHO) <—NH2 <—OH < —COOH
4.应用:
a.特别适合于酚类、黄酮类化合物的 制备和分离
b.对生物碱、萜类、甾体、糖类、氨 基酸等其它极性与非极性化合物的 分离也有着广泛应用。
c.用于提取物的脱鞣质处理。
大孔吸附树脂法 分为极性和非极性 1.原理:吸附和分子筛 以苯乙烯为母体,二乙烯苯为交联剂
(非极性) CH2 CH CH2 CH CH2 CH
被溶解物质也有亲水性及亲脂性之 分。溶质在溶剂当中的溶解遵循相 似相溶的原理,亲水性的化学成分 易溶于水或亲水性的有机溶剂中, 亲脂性的成分易溶于亲脂性的有机 溶剂中。
石油醚→油脂、蜡、叶绿素、挥发 油、游离甾体及三萜类化合物
氯仿或醋酸乙酯→游离生物碱、有 机酸及黄酮、香豆素的苷元
丙酮或乙醇、甲醇→苷类、生物碱 盐、鞣质等
中草药有效成分的分离与精制
根据物质的溶解度差别进行分离
根据物质在两相溶剂中的配比不同 进行分离
根据物质的吸附性能差别进行分离 根据物质分子大小差别进行分离 根据物质离解程度不同进行分离
一、根据物质的溶解度差别进行分离
1.结晶及重结晶法:利用温度变化引 起溶解度的改变使物质得以分离。
2.溶剂分离法:
a.通过加入另一种溶剂以改变溶剂的 极性,使一部分物质沉淀析出,从 而实现分离。如:水提醇沉法
b.酸性、碱性或两性化合物,通过加 入酸或碱来调节溶剂的PH值,改变 分子的存在状态(游离型或离解 型),从而改变溶解度而实现分离。
3.沉淀法:酸性或碱性化合物通过加 入某种沉淀试剂使之生成水不溶性 的盐类等沉淀析出而实现分离。如 生物碱加入有机酸可生成不溶于水 的有机酸盐沉淀,酸性化合物可加 入钙盐、铅盐、钡盐等生成不溶性 的沉淀。
3.分配比与PH:溶剂系统PH的变化影 响酸性、碱性、及两性有机化合物 的存在状态(游离型或离解型), 从而影响在溶剂系统中的分配比。
游离型——极性小的溶剂
离解型——极性大的溶剂
一般PH<3,酸性物质多呈非离解状 态(HA)、碱性物质则呈离解状态 (BH+);PH>12,则酸性物质呈离 解状态(A-)、碱性物质以非离解 状态(B)存在。
中草药有效成分的提取 一、溶剂提取法 二、水蒸汽蒸馏法 三、升华法
一、溶剂提取法
是根据天然药物中各种成分在溶剂 中的溶解性质,选用对有效成分溶 解度大,而对不需要溶出成分溶解 度小的溶剂,将有效成分从药材组 织中溶解出来的办法。
溶剂可分为: 水、亲水性和亲脂性有机溶剂 常用溶剂:极性由弱到强依次排序为 石油醚<四氯化碳<苯<二氯甲烷< 氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙 酮<乙醇<甲醇<水
2.化合物的极性则由分子中所含官能 团的种类、数目及排列方式等综合 因素所决定。
3.溶剂极性大小则大体上由介电常数 决定,常用溶剂介电常数及其极性 由弱到强排序为:
环己烷(1.88),苯(2.29),无水 乙醚(4.47),氯仿(5.20),乙酸 乙酯(6.11),乙醇(26.0),甲醇 (31.2),水(81.0)
OH
>
HO
OH
OH
OH
>
OH
b.成键位置对吸附也有影响。易形成
分子内氢键的化合物,其吸附性能
减弱。
OH
OH
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OH
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OH
OH
HO
> COOH
O
C OH
HO
c.分子中芳香化程度越高,则吸附性 能越强。
OH
OH
>
3.各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力 由弱至强排序为:
水→甲醇→丙酮→氢氧化钠水溶液→ 甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液
2.化学吸附:如黄酮等酚酸性物质被 碱性氧化铝吸附,生物碱被酸性硅 胶吸附等。
3.半化学吸附:如聚酰胺与黄酮类、 蒽醌类等化合物之间的氢键吸附。 介于物理吸附与化学吸附之间。
物理吸附基本规律→相似者易吸附 固液吸附三要素:吸附剂、溶质、 溶剂
1.极性吸附剂(氧化铝、硅胶)特点: a.对极性强的物质吸附能力强 b.溶剂极性减弱,则吸附剂对溶质的 吸附能力增强;反之,则减弱。
流动相:氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极 性有机溶剂
洗脱顺序:极性小的化合物先出柱,极 性大的后出柱。
应用:适用于水溶性或极性较大的化合 物,如生物碱、苷、糖类、有机酸等。
反相色谱:
固定相:石蜡油,化学键合相(如 十八烷基硅胶键合相)
流动相:水、甲醇、乙腈等强极性 有机溶剂
洗脱顺序:极性大,先出柱;极性 小,后出柱。
4.中性化合物: 分子结构中既无碱性基团也无酸性 基团的化合物,如萜类和挥发油、 甾体等。
二、无效成分
1.脂溶性 蜡-高级不饱和脂肪酸(16-30碳)和
高级一元醇结合的酯
脂肪油-不饱和脂肪酸(链长短不一)与 丙三醇形成的甘油酯,通常称为混合甘 油酯。
叶绿素及胡萝卜素
2.水溶性 多糖类-淀粉、纤维素、树胶、果 胶、粘液质 多元酚类化合物-鞣质
c.溶质即使被硅胶、氧化铝吸附,一 旦加入极性较强的溶剂时,又可被 置换洗脱下来。
OH
A
ⅠCHCl3: MeOH(7:3) ⅡCHCl3: MeOH(3:7)
OH
B
HO
OH
2.非极性吸附剂(活性炭):
对非极性物质亲和能力强,溶剂极 性降低,则活性炭对溶质的吸附能 力也随之降低;反之,则提高。
极性及其强弱判断:
中草药中各类化学成分提取分 离方法
2.酸性化合物: 结构中含有酚羟基的化合物 ——黄酮、醌类、苯丙素(香豆素、
木脂素)及其苷类 结构中含有羧基的化合物 ——有机酸、葡萄糖醛酸
HO
O
OH OH
OH OH O
黄酮
HO
OO
香豆素
O
OH O
蒽醌
OH
OH
木脂素
3.两性化合物: 结构中既有碱性基团也有酸性基团 氨基酸、蛋白质
通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄 酮类化合物的酚羟基,或酰胺键上 的游离胺基与醌类、脂肪酸上的羰 基形成氢键缔合而产生吸附。
H2C NH
OC CH2
H2C CH2
HN CO
H2C
CH2 OC
NH H2C
CH2 H2C
CO HN
CH2
固定相
O
O
HO
移动相
2.吸附强弱规律(含水溶剂中)
a.形成氢键的基团数目越多,则吸附 能力越强。
2.回流提取法:是用有机溶剂作为提取溶 剂,在回流装置中对药材进行加热回流 提取,该方法提取效率较高,但因为长 时间加热,所以不适合受热易破坏分解 的成分。
3.连续回流提取法:是回流提取法的发展, 具有消耗溶剂量更小,提取效率更高的 优点。常用索氏提取器或连续回流装置。
水-是一种强极性溶剂。无机盐、糖类、 分子不太大的多糖、鞣质、氨基酸、蛋 白质、有机酸盐、生物碱盐和极性苷类 等都能被水溶出。以水作为提取溶剂的 缺点是:提出的杂质多。
3.应用: 广泛应用于天然化合物如苷、糖类、 生物碱、多糖、黄酮、三萜类化合物 的分离和富集工作。 4.洗脱液的选择:最常用的水、乙醇, 此外甲醇、丙酮、乙酸乙酯也被应用。
二、根据物质在两相溶剂中的分 配比不同进行分离
液-液分配的基本原理 1.分配系数 K值:一种溶质在两相溶剂
中的分配比。K值在一定的温度和压 力下为一常数。
K=CU/CL
2.分离因子β:两种溶质在同一溶剂系 统中分配系数的比值。
β=KA/KB (KA>KB) β≥100,一次萃取就可实现基本分离 100 ≥β≥10,需萃取10~12次 β≤2,需萃取100次以上 β≌1,无法实现分离
应用:适合于脂溶性成分,如高级 脂肪酸、油脂、游离甾体等
目前液-液分配柱色谱中的固定相主 要为化学键合相。
反相液-液分配柱色谱法是当前应用 最为广泛的一种柱色谱分离、分析 方法。
三、根据物质的吸附性差别进行分离
固-液吸附应用的最多
吸附类型:
1.物理吸附(溶液分子与吸附剂表面 分子的分子间作用力):硅胶、氧 化铝及活性炭为吸附剂的吸附色谱。
3. 为避免化学吸附,酸性物质宜ຫໍສະໝຸດ Baidu 硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸 附剂进行分离。通常在分离酸性 (或碱性)物质时,洗脱溶剂中常 加入适量的醋酸(或氨、吡啶、二 乙胺),以防止拖尾,改善分离效 果。
聚酰胺吸附色谱法:属于氢键吸附 (半化学吸附)特别适合分离酚类、 醌类、黄酮类化合物。
1.聚酰胺的吸附原理:
水→氨基酸、糖类、无机盐等
常用的溶剂提取法
(一)冷提法 1.浸渍法 2.渗漉法 (二)热提法 1.煎煮法 2.回流提取法 3.连续回流提取法
冷提法
1.浸渍法:是用水或醇浸渍药材一定 时间,然后合并提取液,并将其减 压浓缩的方法。该法因为一般都是 在低温下进行的,不用加热,所以 适合于挥发性成分及受热易分解成 分的提取。但提取的时间较长,效 率低。用水浸提时还要注意提取液 的防腐问题。
二、水蒸汽蒸馏法
适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸 馏而不被破坏、难溶或不溶于水的 成分的提取,如挥发油、小分子的 香豆素类、小分子的醌类成分。
三、升华法
固体物质受热不经过熔融,直接汽 化,遇冷后又凝固为固体化合物, 称为升华。中草药中有一些成分具 有升华的性质,可以利用升华法直 接自中草药中提取出来。如樟脑、 咖啡因。
极性不完全等同于亲水性
亲水性强,则极性强;极性强,则亲水 性并不一定强。
OH
OH
HO
O
OH
HO
O
OH
A
OH
OH O
B
OH
OH O
亲水性A>B
极性 B>A
吸附柱色谱用于物质的分离:
1.选用极性小的溶剂装柱和溶解样品 或用极性稍大的溶剂溶解样品后, 以少量吸附剂拌匀挥干,上柱。
2.溶剂系统可用TLC进行筛选。以TLC 展开时使组分Rf值达到0.2~0.3的溶 剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。
冷提法提出的杂质少且对热不稳定的成 分较适宜,提取效率低;而热提法的效 率高,但对热不稳定的成分不适宜,特 别不适于挥发性成分和淀粉、粘液质多 的药材的提取。
亲水性有机溶剂-也就是一般所说 的与水能混溶的有机溶剂,如乙醇、 甲醇、丙酮等,其中以乙醇最为常 用。具有经济、安全、无毒;对细 胞的穿透能力强;大多数天然成分 都可溶解等优点,常称为万能溶剂。
当β>50时,简单萃取即可,β<50 时,则需采用逆流分溶法。
主要分离方法
1.简单的液-液萃取法 2.逆流分溶法(CCD) 3.液滴逆流色谱法(DCCC) 4.高速逆流色谱法(HSCCC) 5.纸色谱法(PC) 6.气-液分配柱色谱法(GLC) 7.液-液分配柱色谱法(LLC)
纸色谱法
支持剂:纤维素 固定相:纤维素上吸附的水 展开剂:与水不相混溶的有机溶剂或水饱
2.渗漉法:是将药材装入渗漉筒中, 先用水或醇浸渍数小时,然后从渗 漉筒的下口使提取液流出,上口不 断地加入新的溶剂,此方法因为药 材与溶剂之间能够始终保持较大的 浓度差,因此提取效率较高。该法 同样适用于挥发性及受热易破坏分 解的成分的提取。但是有溶剂耗费 量较大的缺点。
热提法
1.煎煮法:该方法是我国中医中药 最早使用的传统的提取方法。是将 药材用水加热煮沸提取,在提取过 程当中大部分成分可被不同程度的 提取出来,但是对于挥发性成分及 加热易被破坏的成分不宜使用。
和的有机溶剂 Rf值:极性大, Rf值小;极性小, Rf值大。 应用:适合于亲水性较强的物质。
液-液分配柱色谱法 柱色谱:在色谱管中完成的化合物之
间的分离过程称为柱色谱。 柱色谱分:常压柱色谱、加压柱色谱 载体(支持剂):硅胶、硅藻土及纤
维素等 按洗脱顺序分:正相色谱、反相色谱
正相色谱:
固定相:水、缓冲溶液
4.液-液萃取与纸色谱 纸色谱与液-液萃取的分离原理都是 分配。 Rf值与K值之间有下列关系
Kor/w=1/r(Rf/1-Rf)
当层析滤纸湿重(W湿)为干重(W 干)的1.5倍时,r=2
设A、B两种(或两组)物质的Rf值 分别为 Rfa 及 Rfb 。
β=Rfa(1-Rfb/1-Rfa) ( Rfa > Rfb)