中药化学成分提取分离方法

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红外光谱（IR） 红外光谱（IR）
分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收而测 得的吸收图谱，称为红外光谱。 得的吸收图谱，称为红外光谱。
4000
3600
3000
1500
1000
625cm-1
特征频率区 特征官能团的鉴别
指纹区
29 化合物真伪的鉴别
羟基（酚羟基、醇羟基） 羟基（酚羟基、醇羟基） 3600~3200 cm-1 游离羟基 ~3600 cm-1 氢键缔合羟基 3400~3200 cm-1 羰基 1600~1800 cm-1 酮 ~1710 cm-1 酯1710~1735 cm-1 芳环 1600、1580、1500cm-1 、 、 有2~3个峰 个峰 双键 1620~1680 cm-1
第二章
中药化学成分提取分离方法
1
一、中药化学成分的提取
(一)溶剂提取法 依据：化学成分的溶解性（极性） 依据：化学成分的溶解性（极性） 关键： 关键：提取溶剂的选择 溶剂的选择原则：相似相溶的原则， 溶剂的选择原则：相似相溶的原则， 价廉、易得、无毒、安全等。 价廉、易得、无毒、安全等。 提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、 提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法、 回流提取法、连续回流提取法。 回流提取法、连续回流提取法。
溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发， 丙酮 溶解性能同乙醇，但沸点低、易挥发， 不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 不常于提取溶剂；对色素溶解性好， 常用于分离、精制。 常用于分离、精制。
6
亲脂性有机溶剂
对化合物溶解选择性较强 水溶性杂质少、 水溶性杂质少、易纯化 挥发性大、 挥发性大、易燃烧 有毒、价格昂贵， 有毒、价格昂贵， 对提取设备要求高 穿透力较弱， 穿透力较弱，提取时间长 作为提取溶剂不常用 。
9
具有液体和气体的双重特性， 特点：具有液体和气体的双重特性， 如：密度与液体近似 黏度与气体近似 扩散系数是液体 100倍 的100倍 对很多物质有很强 的溶解能力
中药提取常用的超临界流体 ：二氧化碳
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优点： 优点：
1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 1.临界温度（Tc=31.4）接近室温, 热敏成 临界温度 分稳定. 分稳定. 2.临界压力（ MPa）不高, 易操作. 2.临界压力（Pc=7.37 MPa）不高, 易操作. 临界压力 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 3.本身呈惰性，与化合物不反应. 本身呈惰性 4.价格便宜. 4.价格便宜. 价格便宜
Pa） 压 力（Pa）
> 20.2 ×105
分离规模
1mg左右 1mg左右 > 5mg > 100mg 10mg～ 10mg～1g > 10mg
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葡聚糖凝胶色谱
类 型 原 理 溶胀溶剂 葡聚糖凝胶 分子筛 水 （大→小） 应 用 多糖、多肽、 多糖、多肽、 蛋白质分离
羟丙基 分子筛 水、极性 适于不同类型 糖苷） 葡聚糖凝胶 （糖苷） 有机溶剂 吸附原理 或二者的混合溶剂 苷元） （苷元） 化合物分离
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二．中药化学成分分离与精制方法
分离依据 分 配 系 数 （ ） 差 异 分离方法 分离原理或特点
二相萃取法 逆流分溶法（CCD） 逆流分溶法（CCD） 液滴逆流色谱法（DCCC） 液滴逆流色谱法（DCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 高速逆流色谱法（HSCCC） 液 液分 色谱 相色谱 恪液相色谱法 相色谱 速色谱 恪液相色谱（ C） 恪液相色谱（ C） 中恪液相色谱（ C） 中恪液相色谱（ C） 高恪 液相色谱法（H C） 液相色谱法（ C）
两个化合物完全相同的条件 1、 特征区完全吻合 2、 指纹区也需完全一致 、
1H-NMR（核磁共振氢谱）: （核磁共振氢谱） 信息参数：化学位移（ ）、峰面积、 ）、峰面积 信息参数：化学位移（δ）、峰面积、峰裂分 （s 、d、t、q、m）及偶合常数（） 、 、 、 ）及偶合常数（ ）
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（1）化学位移（δppm）: 化学位移（δppm） 1H核所处的化学环境 1H核周围的 核所处的化学环境（ 与1H核所处的化学环境（1H核周围的 电子云密度） 电子云密度）有关 电子云密度大，处于高场，δ值小 电子云密度大，处于高场， 电子云密度小，处于高场， 电子云密度小，处于高场，δ值大
2
常用提取溶剂性能特点
提取溶剂 性能特点 强极性溶剂 溶解范围广 水 穿透能力强 易得、安全 易得、 适宜提取成分 生物碱盐 苷类 糅质 糖类 氨基酸 蛋白质 提取方法
煎煮法 渗漉法
3
有些苷类成分的酶解 有些脂溶性成分溶解不完全 水提液易发霉、 水提液易发霉、变质 水溶性杂质多， 水溶性杂质多，过滤困难 沸点高， 沸点高，浓缩困难
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~0.9-C-CH3
氧化铝 活性炭
吸附原理 吸附原理
非极性吸附剂 从稀水溶液中富集微量物质 脱色（脂溶性色素） 吸附规律与上相反 脱色（脂溶性色素）
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聚酰胺
酚羟基数目多， 氢键吸附 酚羟基数目多，吸附力强 能形成分子内氢键者， 能形成分子内氢键者，吸附力下降 黄酮、蒽醌的芳香化程度高 黄酮、 吸附力增强 水洗脱力弱
4
亲水性有机溶剂
（和水可任意混溶） 和水可任意混溶） 溶解范围广 水溶性杂质溶出少 乙醇 可抑制酶的活性 提取液不易发霉、变质 提取液不易发霉、 大部分可回收利用 但有挥发性、易燃烧 但有挥发性、 除多糖、 除多糖、 蛋白质外 大多数 化学成分 均可溶解 渗滤法 浸渍法 回流法 连续回流法
5
甲醇 溶解特点与乙醇相似，但有毒 溶解特点与乙醇相似，
碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌） 碱性氧化铝对酚酸类（黄酮、蒽醌）的吸附 酸性硅胶对生物碱的吸附 氢键吸附） 聚酰胺 （氢键吸附） 大孔吸附树脂 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 吸附原理（范德华引力或产生氢键） 原理（ 的） 原理（ 孔性 的性 的）
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分 子 大 小 差 别
透析法 (半透膜膜孔的 分子筛作用) 分子筛作用) 凝胶滤过法 (三维网状 结构的分子筛作用) 结构的分子筛作用) 超滤法 (分子大小不 同引起的扩散速度的 ) 超速离 法 ( 质 超速离 作用 的 )
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（二）四大光谱在结构测定中的应用
可见光谱（ VIS） 紫外 — 可见光谱（UV -VIS）—— 共轭 体系特征 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 分子中电子跃迁（从基态至激发态）。 π*、 n-π*、π-π* 跃迁可因吸收紫外光及 可见光所引起， 可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫 外区和可见区（200～700nm） 外区和可见区（200～700nm）
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离子交换吸附树脂
树脂类型
阳离子交换树脂
原理
离子交换
应 用
从酸水溶液中吸附碱性 成分（生物碱） 成分（生物碱） 除去酸性、 除去酸性、中性成分 从碱水溶液中吸附酸性 成分（有机酸） 成分（有机酸） 除去碱性、 除去碱性、中性成分
强酸性（ 强酸性（R-SO3-H+） 阳离子 ） 弱酸性（-COO-H+） 弱酸性（ ） 阴离子交换树脂 离子交换
90～ 脱脂、 90～120℃ 脱脂、脱色
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适用于挥发性成分（ （二）水蒸气蒸馏法 适用于挥发性成分（主要 是挥发油） 是挥发油）的提取 二氧化碳超临界流体萃取技术（ SFE） （三）二氧化碳超临界流体萃取技术（CO2-SFE） CO2-SFE ：以超临界流体作为萃取 介质的一种提取新技术。 介质的一种提取新技术。 超临界流体：处于临界温度（Tc）、 ）、临界压力 超临界流体：处于临界温度（Tc）、临界压力 Pc）以上， （Pc）以上，介于气体与液体之间 的流体。 的流体。
类 型 正相色谱 固定相 流动相 应 用 BAW系统 水 > BAW系统 极性、 极性、中极性物质分离 PPC为例 为例） （以PPC为例） ODS<甲醇 甲醇乙腈最广泛，非极性、 反相色谱 ODS<甲醇-水 乙腈-水 最广泛，非极性、 中极性各类物质分离
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加压液相色谱
类 型
分析用高压液相色谱（HPLC） 分析用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 制备用高压液相色谱（HPLC） 中压液相色谱 ( MPLC ) 低压液相色谱 ( LPLC ) 快速色谱 5.05～20.2 ×105 5.05～ < 5.05 ×105 约2.02 ×105
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连续回流法 回流法 苷元 某些苷类 游离生物碱
乙醚 氯仿
bp.35℃， bp.35℃，极易燃 bp.61℃、 1.48，不易燃， bp.61℃、d 1.48，不易燃，毒性大 对生物碱溶解性好
苯 bp.80.1℃，毒性大 bp.80.1℃， 沸程30 60℃、60～90℃、 30～ 石油醚 沸程30～60℃、60～90℃、
蛋白质的脱盐精制 蛋白、 蛋白、多糖的分离及 小分子化合物的分离 大分子化合物精制分离 同
17ห้องสมุดไป่ตู้
离 解 程 度 不 同 阳离子交换树脂 阴离子交换树脂 离子交换树脂法 氨基酸、生物碱、 氨基酸、生物碱、 有机酸的分离
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常用色谱分离方法介绍 ：
吸附剂
硅胶
分离原理
吸附原理
吸附色谱 吸附规律
应
用
弱酸性、 广泛（ 弱酸性、极性吸附剂 广泛（酸、碱及 化合物极性越大、 中性成分均可） 化合物极性越大、 中性成分均可） 吸附能力强（难洗脱） 吸附能力强（难洗脱） 溶剂极性越小， 溶剂极性越小，吸附力越强 碱性、 碱性、极性吸附剂 吸附规律同上 碱性、 碱性、中性成分 （酸性成分与铝络合）
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超临界流体萃取中药成分的主要优点： 超临界流体萃取中药成分的主要优点：
可以在接近室温下工作， 1. 可以在接近室温下工作，防止热敏成分 的破坏或逸散。 的破坏或逸散。 萃取过程几乎不用有机溶剂， 2. 萃取过程几乎不用有机溶剂，萃取物中 无溶剂残留，对环境无污染。 无溶剂残留，对环境无污染。 提取效率高，节约能耗。 3. 提取效率高，节约能耗。