沙门氏菌几种检测方法简介与比较

沙门菌常用生化试验
吲哚试验 阴性（液面黄）阳性（液面红）
VP试验 阳性（红色）阴性（不变）
沙门菌常用生化试验
赖氨酸脱羧酶试验 对照 阳性（紫） 阴性（黄）
丙二酸盐试验 阳性（兰） 阴性（不变）
沙门菌常用生化试验
ONPG试验 阳性（黄） 空白
国内外沙门菌检测方法（传统方法）
国家标准 行业标准 FDA （Food & Drug Administration） AOAC (Association of Official Analytical Chemists) FSIS （FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE） ISO 加拿大官方食品微生物分析方法
国内外沙门菌检测方法介绍
中国疾病预防控制中心 营养与食品安全所 郭云昌
沙门菌（Salmonella）
DANIEL ELMER SALMON, (1850-1914) 美国兽医微生物和病理学家。是美国授予的第 一位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局 首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门 氏菌。在医学微生物中通用的沙门菌一词，就 是为纪念他而以 他的名字命名的。
pH6.8±0.2 24±2 h 35℃
TT
RV
43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h
BS & XLD & HE
24±2h 35℃
TSI & LIA
24±2h
42±0.2℃
LIA+
LIA－ TSI K/A
LIA－ TSI A/A
尿素酶，H抗原（多价H抗血清或SpicerEdwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶，
肉类、蛋品
前增菌
直接选择性增菌
缓冲胨水（BPW）
37 ℃ 4h or 20～24h 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC）
亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB）
37 ℃ 24± 2h
42 ℃ 20 ± 2h
BS & DHL
(亚利桑那菌琼脂)
37 ℃
TSI & 赖氨酸脱羧酶
37 ℃ 24～48h
24～48h
TSI & 尿素酶
37 ℃ 24～48h
生化试验 血清学试验（“O”抗原，“Vi”抗原）
结果判定
细菌学分析手册（FDA/BAM）
第五章 沙门菌属
样品（20类）25g
225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）
35± 1℃ 18~24h & 48h
TSI & LIA 血清学试验
商业生化试剂盒或自动鉴定系统 or 传统生化鉴定（AOAC Official Method 967.27 or "Edwards and Ewing's Identification of Enterobacteriaceae"）
报告结果
TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛基质，尿素，KCN，赖氨酸
沙门氏菌血清学试验
H2S＋ 靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋
甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验
H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－
ONPG － 沙门氏菌
非如左述的各种反应结果 非沙门氏菌
检验检疫行业标准
SN 0170－92
出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法
中华人民共和国国家标准
GB/T 4789.4-2003
微生物学检验 沙门氏菌检验
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
前增菌法 25g＋BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
肉制品中沙门菌的分离和鉴定 FDA&USDA/FSIS
乳糖肉汤
缓冲蛋白胨水
TTB肉汤
RV肉汤
TTB肉汤
沙门菌生物学性状
不分解乳糖（亚利桑那菌除外）。分解 葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产 气）。多数产生H2S，不产生靛基质， 不液化明胶，不分解尿素，不产生乙酰 甲基甲醇，多数能利用枸橼酸盐，能还 原硝酸盐为亚硝酸盐，在氰化钾培养基 上不生长。
沙门菌常用生化试验
三糖铁（TSI）
尿素酶试验 阴性（黄）阳性（红）
沙门菌
非沙门菌
USDA/FSIS MLG 4.02
肉、禽和蛋品中沙门菌的分离和鉴定
样品
BPW or BPW（含结晶紫）
35±1℃ 20-24h
0.5 ± 0.05mL ＋10mL TT
0.1 ± 0.02mL ＋10mL mRV
42± 0.5℃ 22~24h
42± 0.5℃ 22~24h
BGS & DMLIA or XLT4
沙门菌（Salmonella）
沙门菌属（Salmonella）是一大群寄生于人 类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的 革兰氏阴性杆菌统称为沙门杆菌。
沙门菌（Salmonella）
目前至少有67种O抗原和2000个以上血清型，所致疾病称沙门菌病。
肠热症：是伤寒病和副伤寒病的总称，主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆 菌引起。
非沙门菌
酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN， 丙二酸盐，吲哚），O抗原
5种商业生化鉴定系统（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI）
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐 &
&O抗原&H抗原
急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、 肠炎杆菌等引起。
败血症：常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。
沙门菌生物学性状
大小0.6～1.0×2～3um，无芽胞， 一般有鞭毛(鸡沙门菌除外)，无荚 膜，多数有菌毛，革兰氏阴性杆菌， 需氧或兼性厌氧，最适生长温度为 35～37℃，最适pH值为6.8～7.8。
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
直接增菌Baidu Nhomakorabea 25g＋灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL
＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
BS
36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h
DHL（或HE、WS、SS）
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h