沙门氏菌几种检测方法简介与比较
沙门氏菌基本知识及检测方法
沙门⽒菌基本知识及检测⽅法沙门⽒菌基本知识及检测⽅法沙门⽒菌属(Salmonella)是肠杆菌科的⼀个⼤属，有2000多个⾎清型，我国发现的约有100个。
沙门⽒菌⼴泛存在于猪、⽜、⽺、家禽、鸟类、⿏类等多种动物的肠道和内脏中。
1880年Eberth⾸先发现伤寒杆菌，1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌，由于Salmon发现本属细菌的时间较早，在研究中的贡献较⼤，遂定名为沙门⽒菌属Salmonella 。
本属细菌绝⼤多数成员对⼈和动物有致病性，能引起⼈和动物的败⾎症与胃肠炎，甚⾄流产，并能引起⼈类⾷物中毒，是⼈类细菌性⾷物中毒的最主要病原菌之⼀。
根据沙门⽒菌的致病范围，可将其分为三⼤类群。
第⼀类群：专门对⼈致病。
如伤寒沙门⽒菌、副伤寒沙门⽒菌(甲型、⼄型、丙型)。
第⼆类群：能引起⼈类⾷物中毒——⾷物中毒沙门⽒菌群，如⿏伤寒沙门⽒菌、猪霍乱沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌、纽波特沙门⽒菌等。
第三类群：专门对动物致病，很少感染⼈，如马流产沙门⽒菌、鸡⽩痢沙门⽒菌。
致病性最强的是猪霍乱沙门⽒菌(Salmonella cholerae)，其次是⿏伤寒沙门⽒菌(Salmonella typhimurium)和肠炎沙门⽒菌(Salmonella enteritidis)。
⼀、沙门⽒菌属的⽣物学特征：1.形态染⾊特性：G-⽆芽孢杆菌。
⼤⼩通常为0.7～1.5µm ×2.0～5.0µm，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，⽆荚膜，除鸡⽩痢沙门⽒菌和鸡伤寒沙门⽒菌外均有周⾝鞭⽑，能运动，绝⼤多数菌株有菌⽑。
需氧或兼性厌氧菌，⽣长温度范围为10～42℃，最适⽣长温度为37℃，适宜pH为6.8～7.8，对营养要求不⾼，在普通培养基中⽣长旺盛，胆盐可促进其⽣长。
2.培养特性：需氧或兼性厌氧菌；⽣长温度范围为10～42℃，最适⽣长温度为37℃；适宜pH为6.8～7.8；对营养要求不⾼，在普通培养基中⽣长旺盛；胆盐可促进其⽣长。
第五章沙门氏菌的检验ppt课件
血平板：中等大小、灰白色菌落。
生物学特性
生化反应：
不发酵乳糖和蔗糖，不产生吲 哚，不分解尿素，VP试验阴 性，大多产生硫化氢。发酵葡 萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤 寒杆菌产酸不产气外，其他沙 门氏菌均产酸产气。
ONPG －
沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验 沙门氏菌血清学试验
非沙门氏菌
报告
沙门氏菌在BS平板上
沙门氏菌在HE平板上
沙门氏菌的TSI试验
三糖铁（TSI）琼脂试验
本试验可同时观察乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气（变黄）；产生硫化氢 （变黑）。葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸 ，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物， 故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍 保持黄色。
商品化生化鉴定系统
API 20E API 20E 生化鉴定 是根据快速酶促反应 及代谢产物的检测技 术发展的一种细菌编 码鉴定法，广泛应用 于临床、食品中革兰 氏阴性杆菌的快速鉴定。
API 20E
第1位数
O AL N DD P HC G
第2位数 第3位数 第4位数 第5位数
O CI H U T
1、未接种 2、尿素酶阳性 3、尿素酶阴性
KCN生长试验
右：抑制生长
沙门氏菌在TSI和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的结果
斜面 底层 产气 硫化氢 赖氨酸脱羧酶 初步判断
K A ＋(－ ) ＋(－ )
＋
K A ＋(－ ) ＋(－ )
沙门氏菌检测的三种方法比对的结果与讨论
沙门氏菌检测的三种方法比对的结果与讨论
梁先龙 代真真 白莉敏 戚修欢(安徽中青检验检测有次能力验证再次确认实验室检测能力；探 求快速、灵敏、可靠的食品中沙门氏菌的检测方法。方法：采用 沙门氏菌的国标方法、PetrifilmTM 测试纸片法和 VIDAS 免疫法 的定性研究。结果：编号为 CODE 2 和 CODE4 的样品为阳性 结果，其余四个样品均未检出。结论：3 种方法检测沙门氏菌均 取得满意结果；进一步确认了本实验室对本实验的能力；Petri⁃ filmTM 测试纸片法，简单，方便准确率高，在食品检测中应用中 值得推广。
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2018 年 09 月
质量与检测
1.5.3.3 接种与判读:使用无菌接种环(直径 3mm 左右)蘸取每
份样品，打开测试片并快速移动到凝胶上，进行一步划线。将
上层薄膜放下遮住测试片。然后去气泡。在 41.5 C 的田建霞培
养 24h. 将测试片的有色面朝上，最多可叠加 20 个测试片。取出
测试片进行判读，测试片上带黄色圈或有气泡或以上两者都有
ClassⅡBSC 生物安全柜 (中国海尔)、高压灭菌锅(上海博 讯)、生 化 培 养 箱 ( 上 海 博 讯)、、生 物 显 微 镜 、移 液 器（Eppen⁃ dorf）。 1.5 方法
三 种 方 法 ：国 标 方 法 、PetrifilmTM 测 试 纸 片 法 和 酶 标 免 疫法
样品前处理根据 GB4789.4-2016《食品微生物学检验 沙门
氏菌检验》和安徽省食品安全检验机构提供的作业指导书进行 检测。
1.5.1 国标方法 1.5.1.1 前增菌 吸取 5ml 灭菌 BPW 稀释样品作为原液，吸取 4ml 原液至 36ml 缓冲蛋白胨溶液中,为预防及保证样品的准确性，同时在食 药局发的无菌离心管中加入 9ml 缓冲蛋白胨水，漩涡振荡均 匀, 放入生化培养箱中 36℃培养 18 h。取标准菌株肠炎沙门氏 菌 CICC21482 和伤寒沙门氏菌 ATCC14028 一环接种于 10m L 灭菌的 BPW 增菌液同步培养，作为阳性对照。 1.5.1.2 选择性增菌 前增菌样液用移液枪轻吹打均匀，取其增菌液 1 m L 于 10 m L SC 增菌液中,36℃培养 24 h, 同时另取 1 m L 于 10 m L TTB 增菌液中,42℃培养 24 h。 1.5.1.3 选择性分离 取增菌液 1 环, 用接种环分别划线于沙门氏菌属显色平板、 XLD 平板和 BS 平板。XLD 琼脂平板和沙门显色培养基平板 36℃培养 24 h，而 BS 琼脂平板于 36℃培养 48 h, 培养至上述时 间后观察各平板上是否有可疑沙门氏菌属菌落。 1.5.1.4 生化鉴定实验 挑取上述选择性分离中的平板的可疑菌落 2 个或以上, 纯 化至 NA 平板上 36℃培养 18h,而后接种于沙门氏菌干制生化鉴 定盒中进行生化实验。 1.5.1.5 血清学鉴定 将生化实验符合沙门氏菌的菌株做血清凝集实验。采用 玻片凝集法, 在洁净玻片上滴加 1 滴 A-F 群多价 O 抗血清, 用 接种针挑取菌落与血清混合, 并轻碾均匀, 将玻片倾斜摇动混 合 1 min, 观察有无凝集现象, 同时生理盐水作为对照。A-F 群多价 O 抗血清凝集的菌落按 GB 4789.4-2010[2]标准中血清 分型进行 O 抗原的鉴定。将菌落点种于 Swarm 琼脂平板过夜 培养, 取远端菌进行 H 抗原的鉴定。 1.5.2 酶标抗体（ELISA）法
沙门氏菌的检测方法及其原理
沙门氏菌的检测方法及其原理
沙门氏菌的检测方法主要有传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。
以下将分别介绍每种方法的原理。
1. 传统培养法：这是一种常用的检测沙门氏菌的方法。
原理是将样本（如食物、病人体液等）接种在含有适宜营养物质的培养基上，利用沙门氏菌的生长特性进行培养。
经过一定时间的孵育，形成典型的沙门氏菌菌落后，可以通过形态特征和生理生化试验进行鉴定。
2. 分子生物学方法：分子生物学方法主要是利用沙门氏菌特异性的基因或DNA序列来检测其存在。
最常用的方法是聚合酶链反应（PCR），其中利用特异性引物扩增含有沙门氏菌特定序列的DNA片段。
扩增后的产品可以通过凝胶电泳进行检测与鉴定。
此外，还有核酸杂交、测序和引物探针技术等方法也可以用于沙门氏菌的检测。
3. 免疫学方法：免疫学方法利用沙门氏菌的抗原与抗体之间特异性反应进行检测。
其中最常用的方法是酶联免疫吸附测定法（ELISA）。
ELISA基于固相试剂酶标板，将沙门氏菌的抗原固定在试剂酶标板上，然后加入特异性抗沙门氏菌的抗体。
经过洗涤步骤，再加入辅助抗体结合酶标记物。
最后加入底物，沙门氏菌存在时可通过颜色变化来判断阳性反应。
这些方法在实验室或食品安全监测中广泛应用，能够高效、准确地检测沙门氏菌的存在。
沙门氏菌国标检测方法
沙门氏菌国标检测方法一、样本采集在采集样本时，应确保采集的样本具有代表性，且无菌操作。
通常采集食品、动物粪便、环境样本等。
对于食品，应采集不同种类，如肉类、禽类、奶制品等。
对于动物粪便，应采集新鲜样本，避免受到污染。
环境样本应采集可能存在沙门氏菌的表面或水样。
二、增菌培养增菌培养是沙门氏菌检测的重要步骤，目的是增加细菌的数量，使其更容易分离和检测。
常用的增菌培养基有肉汤培养基和缓冲葡萄糖胨水培养基等。
将采集的样本接种到培养基中，在37℃下培养18-24小时。
三、分离培养将增菌培养后的培养物划线接种于选择性培养基（如SS 琼脂、麦康凯琼脂等）上，在37℃下培养18-24小时。
选择性培养基可以抑制其他细菌的生长，有利于沙门氏菌的分离。
四、初步鉴定对分离培养得到的单个菌落进行初步鉴定，包括菌落形态、染色特性、镜下形态等观察。
同时进行革兰氏染色和氧化酶试验，以初步判断是否为沙门氏菌。
五、生化试验生化试验是确定分离菌株是否为沙门氏菌的关键步骤。
常用的生化试验包括赖氨酸脱羧酶试验、尿素试验、靛基质试验等。
根据试验结果，对分离菌株进行初步分类。
六、血清学分型为了确定分离菌株的具体血清型，需要进行血清学分型。
通过与已知抗血清进行反应，确定细菌的特异性抗原，从而确定其血清型。
血清学分型对于追踪沙门氏菌的来源和传播途径具有重要意义。
七、报告结果根据以上各步骤的检查结果，综合分析并得出最终结果。
对于疑似沙门氏菌的样本，应进行复核和确认。
最终结果应以书面形式报告给相关单位或个人，报告应包括样本来源、检测方法、检测结果等内容。
同时，应对检测结果进行解释和说明，提供相应的建议和措施。
沙门氏菌——精选推荐
沙门氏菌1.形态染色特性²G-无芽孢杆菌。
除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛，能运动，绝大多数菌株有菌毛。
2.培养特性²需氧或兼性厌氧菌。
生长温度10～42℃，最适温度为37℃。
适宜pH为6.8～7.8。
胆盐可促进其生长。
普通琼脂：圆形、光滑、无色半透明、边缘整齐或不太整齐的中等大小菌落。
3.生化特性发酵葡萄糖；不发酵乳糖、蔗糖；产生硫化氢；还原硝酸盐；不水解尿素；不液化明；V-P反应阴性；不产吲哚(靛基质试验阴性)；能利用枸橼酸盐（个别菌株不利用）。
动力 + 4、抵抗力•沙门氏菌属不耐热，55℃ 1h、60℃ 15~30min即被杀死。
5．毒素特性•沙门氏菌不产生外毒素，但菌体裂解时，可产生毒性很强的内毒素，此种毒素为致病的主要因素，可引起人体发冷、发热及白细胞减少等病症。
大肠杆菌1 形态与染色特性：²革兰氏阴性；菌体两端钝圆，中等大小，杆状；周生鞭毛，能运动。
不产生荚膜，无芽孢；2 培养特性：²需氧及兼性厌氧菌对营养要求不高，在普通琼脂上生长良好，在15～45℃范围内均可生长，最适生长温度37℃，最适pH为7.2～7.4。
部分菌落可出现β溶血。
²远藤琼脂：带金属光泽的红色菌落；²伊红美兰（EMB）琼脂：紫黑色菌落，有的有金属光泽；²麦康凯琼脂：菌落呈红色。
3 生化特性：不能在KCN培养基上生长，靛基质试验阳性，V-P试验阴性，不利用枸橼酸盐4 血清学特性：大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O) 、鞭毛抗原(H) 、荚膜抗原(K)和菌毛抗原（F）四部分组成。
常见血清型为O157:H7。
5 抵抗力：对一般消毒剂都比较敏感。
对氯尤为敏感。
6 毒素特性： LT和ST志贺氏菌属分类：包括四群 ABCD群仅A群不发酵甘露醇。
D群迟缓发酵乳糖。
志贺氏菌食物中毒实际上就是食源性的菌痢暴发。
中毒的临床症状可分为肠炎型和痢疾型。
食品中沙门氏菌检验
食品中沙门氏菌检验
食品微生物检验技术
1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行时分离出猪霍乱沙门菌，故定名为沙门菌属。 沙门菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌。它是一群抗原结构、生化特性相似的革兰氏阴性杆菌。目前已发现的沙氏菌有2500多个血清型和变种。虽然沙门菌血清型很多，但多数国家从人体、动物和食品中分离出沙门菌仅约40~50 个血清型。而在一个国家中的一定时期只约有10个血清型是比较常见的。分类： •伤寒沙门菌(伤寒、副伤寒)-传染病防治法中规定报告的乙类传染病。 • 非伤寒沙门菌-食品安全标准的检测的主要对象。
一、沙门氏菌概况
培养与生化特性
前增菌
选择性增菌
生物化学筛选
非如上述的各种反应
检样
BS
XLD(或HE ，显色培养基)
挑取可疑菌落
选择性平板筛选
非沙门氏菌
H2S+靛基质-尿素-KCN-赖氨酸+
H2S+靛基质+尿素-KCN-赖氨酸+
H2S-靛基质-尿素-KCN-赖氨酸+/-
甘露醇+ 、山梨醇+
ONPG -
蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄色，中心黑色或几乎全黑色
菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑心中心
按照显色培养基的说明进行判定
葡萄糖+H2S
乳糖+ H2S
乳糖+ H2S
葡萄糖+H2S
SC
TTB
结果报告：综合以上生化试验结果，报告25g（mL）样品中检出或未检出沙门氏菌。前增菌：缓冲蛋白胨水（BPW） 肉汤是基础增菌培养基，不含任何抑制成分，有利于受损伤的沙门菌复苏。鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。增菌：① 四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）含有胆盐，抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌的生长，而伤寒与付伤寒沙门菌仍能生长。②亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）可对伤寒及其他沙门菌作选择性增菌，亚硒酸与蛋白胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸和硫的复合物，影响细菌硫代谢，从而抑制大肠埃希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增殖。
沙门氏菌检测标准方法及实验关键点
沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点．检验沙门氏菌的原因和意义：据统计我国细菌性食物中毒中70%～80%是由沙门氏菌引起的，人一旦摄入含有大量沙门氏菌(105～(106个/g)的动物性产品，就会引起细菌性感染，进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多，肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。
因此对沙门氏菌的检验事关重大。
二、检测及鉴定：沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。
沙门氏菌典型菌落形态：生化鉴定显示：API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法，广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
限值要求：参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定，《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定，具体为n=5，c=0，m=0（即在被检的5份样品中，不允许任一样品检出沙门氏菌）。
三、沙门氏菌传统检测方法的关键控制点1、样品处理尽可能缩短解冻时间，使竟争菌群生长最少，并减小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有代表性（蛋黄蛋清混匀取样）。
2、培养基及培养方面（1）没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌，必须选择多种选择性培养基同时筛选，只能说显色培养基综合选择性更强。
（2）试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置，是否需要高压灭菌，添加剂用量及培养基保存条件。
（3）有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性，为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基，目前BS培养基认为是最适合的。
（4）BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基，特别适用于伤寒类的沙门氏菌，不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌，BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。
沙门氏菌的检验方法与注意事项
沙门氏菌的检验方法与注意事项在日常微生物检验中，沙门氏菌比较常见，是一种致病性细菌，国家规定在每25g的食品样本中不能检测出沙门氏菌，所以在检验沙门氏菌时，对试剂与培养基有很高的要求，下面本文针对沙门氏菌的检验方式和注意事项作出简单介绍！一、沙门氏菌检测的原因和意义根据相关统计显示，我们国家因细菌性食物中毒的人中，有70%-80%左右的人是通过沙门氏菌造成的。
人体倘若含有过多的大量沙门氏菌的动物性食物，就会造成细菌性感染，以此在毒素的影响下产生食物中毒，造成伤寒、胃肠炎及副伤寒。
而且沙门氏菌的传播途径较多，肉、蛋和其他食物，从加工至销售的整个过程当中都极易引发感染情况，所以准确、有效检验沙门氏菌有重大意义。
二、沙门氏菌的检验（一）前增菌(无选择性)BPW（缓冲蛋白胨水）属于一种比较常见的增菌培养基，不包括任何抑制物质，有助于修复受损的沙门氏菌。
促使受损的沙门氏菌细胞复苏至相对平稳的生理状态。
（二）选择性增菌TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）内含有硫代硫酸钠，结合四硫磺酸钠，能够对肠道共生菌进行有效抑制，而包含四硫磺酸钠还原酶的细菌，可以在这一培养基当中生长繁殖；煌绿及胆盐能够控制大肠群菌、革兰氏阳性菌的繁殖，而伤寒沙门氏菌依旧可以生长。
SC（亚硒酸盐胱氨酸增菌液）能够对其他和伤寒沙门氏菌进行选择性增菌，其含有的亚硒酸结合蛋白胨内的含硫氨基酸，促使亚硒酸与硫的复合物生产，对细菌硫的代谢产生干扰，进而减少肠球菌、变形杆菌、大肠埃希氏菌的繁殖生长。
（三）分离培养基(选择性)①BS（亚硫酸铋琼脂）内含亚硫酸铋指示剂，可对大肠菌群、革兰氏阳性菌进行抑制，但不会对沙门氏菌的繁殖产生影响；其他沙门氏菌、伤寒杆菌可以借助葡萄糖，还原亚硫酸铋，使其形成硫酸铋，使黑色菌落附近有黑棕色的环，对光可看到金属光泽。
BS的压力和温度不可过高，避免选择性下降，需在使用前配制，放置阴暗处储存，48小时后丧失选择性，储存不合理会造成色浅，表示效果开始减弱，联合TTB、SC使用能够提高检出率。
沙门氏菌及检验
沙门氏菌及检验人沙门氏菌病有四类综合症：沙门氏菌病；伤寒；非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。
沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致，通常表现为轻度，长久性腹泻。
伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。
未接受过治疗的病人致死率可超过10%，而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%，幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。
这些无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)。
非伤寒型沙门氏菌败血症可由各型沙门氏菌感染所致，能影响全部器官，有时还引起死亡。
幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。
一、致病性沙门氏菌胃肠炎，埋伏期一般6-72小时，主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。
病程一般1-2天或更长。
感染剂量为15-20个菌，死亡率达1-4%。
最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。
污染源主要是人和家畜的粪便，沙门氏菌常存在于动物中，特殊是禽类和猪。
在很多环境中也有存在。
从水，土壤，昆虫中，从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发觉该类细菌。
它们可以存在于多类食品中，包括生肉，禽，奶制品和蛋，鱼，虾和田鸡腿，酵母，椰子，酱油和沙拉调料，蛋糕粉，奶油夹心甜点，顶端配料，干明胶，花生露，橙汁，可可和巧克力。
沙门氏菌属也是嗜温性细菌，在中等温度，中性pH，低盐和高水活度条件下生长最佳。
生长最低水活度为0.94。
兼性厌氧，对中等加热敏感。
同样，该菌属能适应酸性环境。
通过卫生以防止二次污染；蒸煮；巴氏消毒等掌握。
正常家庭烹调，个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染，以及掌握时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌病的发生。
二、检验因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体，因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。
沙门氏菌是食物传播病原菌中讨论最活跃的细菌。
从食品中分别和鉴定沙门氏菌，当前通用的方法学分5个步骤：1.前增菌-第一步使食物样品在含有养分的非选择性培育基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。
沙门氏菌检验
沙门氏菌的检验1. 目的规范沙门氏菌检测方法，使产品检验有据可依。
2. 消毒灭菌要求微生物检测用的玻璃仪器、金属用具及培养基、被污染与接种的培养物等必须经灭菌后方能使用。
注：本实验采用湿热灭菌法，吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度与压力灭菌,一般就是121C （1、5MPa下灭菌20min。
3. 原理沙门氏菌的检验分四个连续阶段：4. 操作步骤4、1准备工作配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。
4、2前增菌在无菌环境下,称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中, 然后放到36±「C的恒温培养箱内进行前增菌4-6h;4、3增菌在无菌环境下，用灭菌好的吸管吸取10ml 前增菌液接种与100ml 亚硒酸盐胱 氨酸培养基中进行二次增菌,恒温培养箱36± 1C ,培养18-24h; 4、4分离培养将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm 的接种环挑取一环，划线于表面 无凝结水的BS 与SS 琼脂平板各一个，于36± 1C 培养18-24h 。
观察各个平板上 有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。
如无典型或可疑菌落 ，应再继续培养24 ± 2h 。
然后观察培养的平板（黄色的菌落就是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢, 菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。
沙门氏菌属各亚属在其她选择性琼脂平板的菌落特征4、5生化实验用灭菌好的接种针在培养平板上挑取可疑的沙门氏菌单菌落，接种到三糖铁 培养基上,恒温培养箱36 ± 1C ,培养18-24h;典型沙门氏菌培养物斜面显红色（碱性）,底端显黄色（酸性），有气体产生，形成硫化氢（琼脂变黑） 三糖铁培养基变化表肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果斜面底层产气硫化氢可能的菌属和种/沙门氏葡属.弗劳地氏柠檬酸杆菌、变形+ + +杆嚙属、缓慢爱徳华氏苗沙门氏菌皿、弗劳地氐拧樣酸杆菌、普通+ + +变形杆菌_ 沙门氏菌属、大肠埃希氏菌*蜂窝哈夫尼+ +■亚曲、摩根氏曲、普罗菲登斯菌属伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏莆、志贺氏葡属S + - - 大肠埃希氏曲、蜂窝哈夫尼亚菌•摩很氏菌"普罗菲登斯菌属大肠埃希氏菌、肠杆菌属、克雷伯氏菌+ +■属.沙雷氏菌属•弟劳地氏拧檬酸杆菌注：+表示阳性；-表示阴件；+/ -表示多数阳性.少数阴性。
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌的检验步骤沙门氏菌是一种常见的食物中毒细菌，它可以引起沙门氏菌属感染。
所谓的沙门氏菌属包括两个物种：Salmonella enterica和Salmonella bongori。
这两个物种又包含了超过2,500种不同的血清型。
为了检测食物或其他样本中是否存在沙门氏菌，通常需要进行以下步骤：1.样本收集：收集来自可疑食物或其他可能被污染的样品，如肉、蛋、奶制品、水果、蔬菜或动物粪便。
确保采集样品的方法是无菌的，以避免污染。
2.前处理：对样本进行适当的前处理，以提高沙门氏菌的检测效果。
这可能包括样品的预处理、样品的培养基中添加抑菌剂等。
3. 培养：将样品接种于适宜的培养基上，如XLD（Xylose Lysine Deo某ycholate Agar）或SS（Salmonella Shigella Agar）等。
这些培养基可以选择性地识别并培养Salmonella属的细菌。
4.孵育：将培养皿放入恒温培养箱，通常是在37℃左右，孵育时间一般为24至48小时。
5.形态特征观察：观察培养基上菌落的形态特征，如形状、颜色、大小等。
沙门氏菌通常形成呈灰白色、圆形、凹陷的菌落。
6.血清型鉴定：对沙门氏菌进行血清学鉴定以确定其血清型。
这通常涉及到使用抗体和相应的血清反应，以确定菌株的亚型。
7.生化测试：对阳性菌落进行生化测试，如甲烷糖发酵试验和硫化氢产生试验，以进一步确认其鉴定。
8.PCR检测：PCR是目前常用的沙门氏菌检测方法之一、它利用聚合酶链反应（PCR）技术，检测样品中的沙门氏菌DNA。
9.分子的子类型分析：通过分子生物学技术，如基因测序、脉冲场凝胶电泳（PFGE）或肽核酸类似程序分析（AFLP），确定沙门氏菌的亚型。
总之，沙门氏菌的检验步骤包括：样本收集、前处理、培养、孵育、形态特征观察、血清型鉴定、生化测试、PCR检测和分子的子类型分析。
这些步骤的目的是确认样品中是否存在沙门氏菌，并确定其类型和亚型，以便采取相应的预防和控制措施。
沙门氏菌检验程序
沙门氏菌检验程序一、引言沙门氏菌是一种常见的细菌，可以引起人类的食物中毒，其检验程序被广泛应用于食品安全监测和疾病防控工作中。
本文将详细介绍沙门氏菌检验程序的流程和方法。
二、沙门氏菌检验程序的流程沙门氏菌检验程序主要包括样品采集、前处理、培养、鉴定和确认等步骤。
以下将逐一详细介绍每个步骤。
1. 样品采集样品采集是沙门氏菌检验程序中非常重要的一步，直接影响到后续的检验结果。
在采集样品时应注意选择合适的容器，并在采集前进行消毒处理，以避免外源性污染。
此外，还应注意采集样品的数量和位置，以保证样品的代表性和准确性。
2. 前处理前处理是为了提高沙门氏菌的检出率，通常包括以下几个步骤：•外消毒：对样品外表面进行消毒处理，可以使用酒精或其他合适的消毒剂。
•清洗：对样品进行充分清洗，以去除表面的杂质和细菌。
•细碎：对于固体样品，可以进行细碎处理，使细菌更易于检测。
3. 培养培养是沙门氏菌检验程序中的核心步骤，主要通过培养细菌来增加其数量。
培养需要使用含有适当营养成分的培养基，常用的培养基有菌落计数法和液体培养基。
在培养过程中，应保持适宜的温度和湿度，并定期观察培养基上的细菌生长情况。
4. 鉴定和确认鉴定和确认是确定培养基上细菌是否为沙门氏菌的重要步骤。
常用的鉴定方法包括生化试验、血清学试验和分子生物学检测等。
通过这些方法，可以检测沙门氏菌的生物学特征和遗传特征，进一步确认其身份。
三、沙门氏菌检验程序的方法沙门氏菌检验程序的方法主要包括传统方法和快速检测方法。
以下将详细介绍这些方法的特点和应用。
1. 传统方法传统的沙门氏菌检验方法包括菌落计数法、血清学试验和生化试验等。
这些方法操作相对繁琐，结果需要较长的时间才能得出，但其结果可靠性较高，被广泛应用于食品安全监测和临床诊断。
•菌落计数法：通过培养菌落来计数菌落的数量，从而估计样品中沙门氏菌的含量。
这种方法可以判断出样品是否存在沙门氏菌，但无法确定具体的种属和品系。
简述沙门氏菌快速检测的方法
别， 以及鉴 定 。 体 的操作 步 骤为 ： 具 取试 料 ２ ｇ 加入 ５，
装 有 ２ ５ ｌ 冲 蛋 白胨 水 的 ５ ０ ｌ的广 口瓶 中 ， ２ｍ 缓 ０ｍ 于 ３ ｃ培 养 １ ￣ ０ 。取 所 获得 的预 增菌 培养 物 ０ １ ｌ ７Ｉ ＝ ６ ２ｈ ．ｍ ，
沙 门 氏菌属 是 一 群 寄生 于 人 和动 物 肠 道 内 的无
芽 孢 直 杆 菌 ， 兰 氏 阴 性 ， 化 特性 和 抗 原 结 构 相 革 生
似 ， 性 厌 氧 。除 极 少 数 外 ， 常 都 以 周 身 鞭 毛 运 兼 通
动 。绝 大 多 数发 酵 葡 萄糖 产 酸 产气 ， 也偶 尔 有 不 产 酸 不 产 气 的 ， 三 糖 铁 琼 脂 上 常 产 生 硫 化 氢 ， 般 在 一 利用 枸 橼 酸盐 。除 亚利 桑那 沙 门 氏菌 外 ， 部 分 沙 大 门氏 菌都 不发 酵 乳 糖 【 通 常 不 利 用 杨 苷 、 醇 、 ｌ 】 ， 肌 蔗 糖 、 金盏 花 醇 和棉 子糖 ， 不 产 生 Ｏ 甲基 葡 萄 糖 侧 也 ｔ 一 苷 。不 产吲 哚 ， 分解 尿素 ， 不 甲基红 试验 阳性 ， Ｖ 但 Ｐ
分离 与鉴 定工 作 同步 进行 ，使 沙 门 氏菌检 测所 需 时 间从 常 规 方法 的 ４ ６ ～ ｄ缩 短 至 ２ ； ｄ 采用 Ｓ ｌ ｓｓ 培 ａ ｙｔ ｍｏ
养基 进 行增 菌 后 ， Ｒ ｍ ａｈ培 养 基 上进 行 分 离培 在 ａ ｂｃ 养 ， 用 于对 沙 门 氏菌 的快 速 检测 ， 大减 少 了检测 可 大
２ 对 传 统 的 沙 门 氏茵 检 测 方 法 的 改进
由于 检测 沙 门 氏菌 的传 统 培养 基选 择性 和 特异 性 不 能达 到今 人满 意 的效果 ，沙 门 氏菌在饲 料 中 的
沙门氏菌检验
3
二、沙门氏菌的生物学特性 1、形态与染色特性：革兰氏阴性短杆菌，无芽孢, 一般无荚膜，周生鞭毛（除鸡白痢沙门氏菌、鸡 伤寒沙门氏菌外），大多数具有菌毛。 2、培养特性：需氧或兼性厌氧；普通营养琼脂上 生长良好，菌落中等大小，无色半透明、圆形、 光滑、湿润。
4
3、生化特性： 大部分发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨酸 产气； 一般不发酵乳糖和蔗糖，不发酵侧金盏花醇； 一般不产吲哚，V-P反应阴性； 不分解尿素，苯丙氨酸不脱氨； 三糖铁琼脂斜面常产生H2S。 赖氨酸脱羧一般阳性 4、抵抗力：较弱，不耐热，最适温度37℃， 最适pH6.8-7.8。 5、毒素特征：不产外毒素，产毒性很强的内 毒素，这是致病的主要原因。
16
17
5、β-半乳糖苷酶（ONPG）的测定
ONPG: 邻硝基酚-β-D-半乳糖苷。具有半乳糖苷酶的 细菌，能使其水解，从而释放黄色的邻硝基酚
ONPG试验 左为阳性（黄） 右为阴性对照
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四、检测方法
19
①
②
③
④ ⑤
从食品中分离和鉴定沙门氏菌，当前通常采用的方 法共分5个步骤： 前增菌：食品样品在含有营养的非选择性培养基中 增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理 状态。加工食品均应经过前增菌。 （选择性）增菌：此培养基允许沙门氏菌持续增菌， 同时阻止大多数其他细菌的增殖。未经加工的食品 不必经过前增菌而直接增菌。 选择性平板分离：采用固体选择培养基，抑制非沙 门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌 落的识别。 生物化学筛选：排除大多数非沙门氏菌，也提供了 沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。 血清学技术鉴定培养物菌种。
食品中沙门氏菌检测方法比对
食品中沙门氏菌检测方法比对摘要：本实验采用国标、VIDAS和快速测试片三种检测方法，对ACAS组织的冻干粉（模拟食品）中沙门氏菌的测定能力验证样品进行检测，证明VIDAS和快速测试片具有检测灵敏度高、特异性强、时耗短和效率高等特点。
关键词：GB 4789.4-2016； VIDAS；快速测试片；沙门氏菌沙门氏菌是一群寄生于人或动物肠道内的革兰氏阴性肠道杆菌，是一种重要的人畜共患病原菌。
主要通过动物的消化道传染致病，可引起伤寒、食物中毒、急性肠胃炎等多种疾患，由于沙门氏菌在自然界广泛存在，且对人类健康具有很大的威胁，故世界各国普遍规定食品中不得检出沙门氏菌。
我实验室在2022年ACAS组织的“冻干粉（模拟食品）中沙门氏菌的测定的能力验证”中应用 VIDAS、快速测试片和GB 4789.4-2016三种不同的检测方法检出了四例沙门氏菌，现报告如下：１．材料和方法1.1供试样品ACAS提供的四份能力验证样品、一份自制阳性质控样品和一份自制阴性质控样品。
1.2仪器VIDAS：购于法国生物梅里埃公司。
生化培养箱：购于上海一恒科技公司。
实验菌株：沙门氏菌标准菌株和粪肠球菌标准菌株，由CICC菌种保藏中心提供。
1.3试剂VIDAS沙门氏菌试剂盒：购于法国梅里埃公司。
沙门氏菌生化鉴定试剂盒：购于北京陆桥技术股份有限公司。
沙门氏菌诊断血清：购于兰州生物制品研究所。
1.4培养基沙门氏菌增菌培养基:BPW、SC、TTB、RVS和M肉汤。
沙门氏菌选择性培养基：BS、XLD和沙门氏菌显色培养基。
沙门氏菌初步鉴别培养基：三糖铁琼脂（TSI）。
沙门氏菌快速测试片，以上培养基均购于北京陆桥技术股份有限公司1.5检测方法1.5.1 VIDAS法：按VIDAS工业试剂培训手册执行1.5.2国标法：GB 4789.4-20161.5.3快速测试片法：快速测试片使用说明1.6检测步骤1.6.1GB 4789.4-2016检测步骤1.6.1.1无菌操作吸取25mL样品于225mL灭菌BPW中，拍打均质1min，36℃培养18h。
沙门氏菌检测操作步骤
沙门氏菌检测操作步骤沙门氏菌是一种常见的细菌，其存在于许多环境中，包括食物、水源和动物体内。
由于沙门氏菌可能引起严重的食物中毒症状，因此对其进行检测和控制非常重要。
在本文中，我将介绍沙门氏菌检测的操作步骤，以帮助您了解如何进行有效的沙门氏菌检测。
1. 选择适当的检测方法在进行沙门氏菌检测之前，首先需要选择适当的检测方法。
常见的检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和免疫学方法。
传统培养法需要将样品在富含营养物的培养基上培养并观察有无沙门氏菌生长。
分子生物学方法利用PCR技术检测沙门氏菌的DNA，而免疫学方法则使用抗体来检测沙门氏菌的存在。
根据您的需求和实验条件，选择合适的检测方法非常重要。
2. 样品采集在进行沙门氏菌检测之前，需要采集样品。
这些样品可以是食物、水源、表面物体或动物组织。
确保在采集样品之前，正确消毒采样工具以避免任何污染。
确保将样品收集到干净、密封的容器中，以避免污染和交叉感染。
3. 样品准备收集样品后，需要进行适当的样品准备以便于后续的沙门氏菌检测。
对于食物样品，可以使用均匀悬浮液方法将样品与适当的缓冲液混合均匀。
对于水样或表面物体样品，可以使用封闭的容器直接收集样品。
对于动物组织样品，需要先将样品进行处理，如挤压、切割或研磨，以获得足够的样品量进行检测。
4. 样品分析根据选择的检测方法，进行相应的样品分析。
如果使用传统培养法，可以将样品转移到含有适当培养基的培养皿中，并进行孵育。
培养过程中，需要注意培养皿的环境条件，如温度、pH值和氧气含量。
如果使用分子生物学方法，可以提取样品中的DNA，并使用PCR技术进行检测。
如果使用免疫学方法，可以使用特定的抗体与样品中的沙门氏菌结合，然后观察是否发生免疫反应。
5. 结果解读根据样品分析的结果，进行结果解读。
对于传统培养法，可以观察培养皿中是否有沙门氏菌的典型形态或颜色变化。
对于分子生物学方法，可以通过PCR扩增的产物的大小和带状图样来判断是否存在沙门氏菌的DNA。
沙门氏菌血清学鉴定方法
沙门氏菌血清学鉴定方法沙门氏菌（Salmonella）是一类革兰氏阴性杆菌，它们可引起人类和动物发生沙门氏菌病，严重时甚至可导致死亡。
对沙门氏菌的血清学鉴定方法至关重要。
血清学鉴定方法是通过对沙门氏菌的抗原与抗体反应，从而进行菌株鉴定，可用于分类和识别不同类型的沙门氏菌。
血清学鉴定方法广泛应用于实验室诊断、食品安全监测以及流行病学调查等领域。
本文将详细介绍沙门氏菌血清学鉴定方法的步骤、原理和应用。
一、血清学鉴定方法的步骤沙门氏菌血清学鉴定方法的步骤一般包括菌种的培养、抗原制备、血清学试验和结果解读。
具体步骤如下：1. 菌种的培养：首先从患者或食品样品中分离到疑似沙门氏菌的菌落，然后进行单菌纯化培养，以获取纯种菌株。
2. 抗原制备：将分离到的沙门氏菌菌株进行培养、培养基发酵，制备成可供血清学试验使用的抗原。
3. 血清学试验：将不同血清反应的抗原与抗体混合，观察凝集、沉淀、变色等反应，并根据反应结果进行鉴定定性和定量。
4. 结果解读：根据血清学试验的结果，结合相关数据库或文献资料，对沙门氏菌进行分类和鉴定。
二、血清学鉴定方法的原理沙门氏菌血清学鉴定方法的原理主要是利用抗原与抗体之间的特异性反应，常用的血清学试验包括凝集试验、沉淀试验、中和试验、血凝素试验等。
这些试验通过观察抗原-抗体复合物的形成与粒子聚集、沉淀等反应来进一步鉴定沙门氏菌的类型和亚型。
三、血清学鉴定方法的应用沙门氏菌血清学鉴定方法在临床诊断、食品安全监测以及疫情调查中有着广泛的应用。
在临床诊断中，可通过血清学鉴定方法迅速鉴定患者感染的沙门氏菌类型，指导临床治疗。
在食品安全监测中，可用于检测食品样品中的沙门氏菌，保障食品安全。
在疫情调查中，可通过血清学鉴定方法对疫情源头进行溯源，帮助制定预防控制措施。
沙门氏菌血清学鉴定方法也为科学研究和学术交流提供了重要的实验手段。
沙门氏菌血清学鉴定方法是一种重要的实验室手段，对于疾病诊断、病原学研究和食品安全监测都具有重要意义。
沙门氏菌几种检测方法简介与比较
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中华人民共和国国家标准
GB/T 4789.4-2003
微生物学检验 沙门氏菌检验
冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品
鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品
前增菌法 25g＋BPW225mL
36 ℃ ± 1 ℃ 一般4h，干蛋品18h～24h
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL
＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
BS
36 ℃ ± 1 ℃ 40h～48h
DHL（或HE、WS、SS）
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
非沙门菌
酚红卫矛醇肉汤，色氨酸肉汤（KCN， 丙二酸盐，吲哚），O抗原
5种商业生化鉴定系统（API 20E, Enterotube II, Enterobacteriaceae II,MICRO-ID, or Vitek GNI）
酚红乳糖肉汤，酚红蔗糖肉汤，MR－VP,西蒙氏柠檬酸盐 &
&O抗原&H抗原
pH6.8±0.2 24±2 h 35℃
TT
RV
43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h
BS & XLD & HE
24±2h 35℃
TSI & LIA
24±2h
42±0.2℃
LIA+
LIA－ TSI K/A
LIA－ TSI A/A
尿素酶，H抗原（多价H抗血清或SpicerEdwards flagellar (H) test ），赖氨酸脱羧酶，
沙门菌生物学性状
不分解乳糖（亚利桑那菌除外）。分解 葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产 气）。多数产生H2S，不产生靛基质， 不液化明胶，不分解尿素，不产生乙酰 甲基甲醇，多数能利用枸橼酸盐，能还 原硝酸盐为亚硝酸盐，在氰化钾培养基 上不生长。
沙门菌常用生化试验
三糖铁（TSI）
尿素酶试验 阴性（黄）阳性（红）
35± 1℃ 18~24h & 48h
TSI & LIA 血清学试验
商业生化试剂盒或自动鉴定系统 or 传统生化鉴定（AOAC Official Method 967.27 or "Edwards and Ewing's Identification of Enterobacteriaceae"）
报告结果
肉制品中沙门菌的分离和鉴定 FDA&USDA/FSIS
乳糖肉汤
缓冲蛋白胨水
TTB肉汤
RV肉汤
TTB肉汤
肉类、蛋品
前增菌
直接选择性增菌
缓冲胨水（BPW）
37 ℃ 4h or 20～24h 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC）
亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB）
37 ℃ 24± 2h
42 ℃ 20 ± 2h
BS & DHL
(亚利桑那菌琼脂)
37 ℃
TSI & 赖氨酸脱羧酶
37 ℃ 24～48h
TSI（排除A/A H2S－结果 ），靛＋ 尿－ KCN－ 赖＋
甘露醇 山梨醇 沙门氏菌血清学试验
H2S－ 靛－ 尿－ KCN－ 赖＋/－
ONPG － 沙门氏菌
非如左述的各种反应结果 非沙门氏菌
检验检疫行业标准
SN 0170－92
出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法
急性肠炎(食物中毒):是最常见的沙门杆菌感染。多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、 肠炎杆菌等引起。
败血症：常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。
沙门菌生物学性状
大小0.6～1.0×2～3um，无芽胞， 一般有鞭毛(鸡沙门菌除外)，无荚 膜，多数有菌毛，革兰氏阴性杆菌， 需氧或兼性厌氧，最适生长温度为 35～37℃，最适pH值为6.8～7.8。
沙门菌
非沙门菌
USDA/FSIS MLG 4.02
肉、禽和蛋品中沙门菌的分离和鉴定
样品
BPW or BPW（含结晶紫）
35±1℃ 20-24h
0.5 ± 0.05mL ＋10mL TT
0.1 ± 0.02mL ＋10mL mRV
42± 0.5℃ 22~24h
42± 0.5℃ 22~24h
BGS & DMLIA or XLT4
国内外沙门菌检测方法介绍
中国疾病预防控制中心 营养与食品安全所 郭云昌
沙门菌（Salmonella）
DANIEL ELMER SALMON, (1850-1914) 美国兽医微生物和病理学家。是美国授予的第 一位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局 首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门 氏菌。在医学微生物中通用的沙门菌一词，就 是为纪念他而以 他的名字命名的。
沙门菌（Salmonella）
沙门菌属（Salmonella）是一大群寄生于人 类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的 革兰氏阴性杆菌统称为沙门杆菌。
沙门菌（Salmonella）
目前至少有67种O抗原和2000个以上血清型，所致疾病称沙门菌病。
肠热症：是伤寒病和副伤寒病的总称，主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆 菌引起。
沙门菌常用生化试验
吲哚试验 阴性（液面黄）阳性（液面红）
VP试验 阳性（红色）阴性（不变）
沙门菌常用生化试验
赖氨酸脱羧酶试验 对照 阳性（紫） 阴性（黄）
丙二酸盐试验 阳性（兰） 阴性（不变）
沙门菌常用生化试验
ONPG试验 阳性（黄） 空白
国内外沙门菌检测方法（传统方法）
国家标准 行业标准 FDA （Food & Drug Administration） AOAC (Association of Official Analytical Chemists) FSIS （FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE） ISO 加拿大官方食品微生物分析方法
24～48h
TSI & 尿素酶
37 ℃ 24～48h
生化试验 血清学试验（“O”抗原，“Vi”抗原）
结果判定
细菌学分析手册（FDA/BAM）
第五章 沙门菌属
样品（20类）25g
225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT）