红景天中红景天苷_酪醇_大花红天素及没食子酸提取工艺优选_罗鑫

川等地，是常用藏药“索罗玛布”的主要来源［2］。其 主要化学成分为黄酮类、糖苷类、有机酸类等，其中 红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸是红景天中 的主要有效成分。近年来，文献报道红景天苷及酪 醇具有神经保护、心血管保护［3-4］、抗炎、抗肿瘤和免
［收稿日期］ 2015-01-24 ［基金项目］ 国家“重大新药创制”科技重大专项（ 2013ZX09402203） ［通信作者］ * 萧伟，博士，研究员级高级工程师，研究方向为中药新药的研究与开发，Tel： （ 0518） 81152337，E-mail： kanionlunwen@ 163. com ［作者简介］ 罗鑫，硕士，助理研究员，主要从事中药新药研究工作，Tel： （ 0518） 81152323，E-mail： luo1127xin@ 163. com
2015 年 9 月 第 40 卷第 18 期
Vol. 40，No． 18 September，2015
红景天中红景天苷、酪醇、大花红天素及 没食子酸提取工艺优选
罗鑫1，2 ，王雪晶1，2 ，赵祎武1，2 ，黄文哲1，2 ，王振中1，2 ，萧伟1，2*
（ 1. 江苏康缘药业股份有限公司，江苏 连云港 222001； 2. 中药制药过程新技术国家重点实验室，江苏 连云港 222001）
doi： 10． 4268 / cjcmm20151814
Байду номын сангаас
红景天为景天科植物大花红景天 Ｒhodiola crenulata（ Hook. f. et Thoms） H. Ohba 的干燥根及根茎， 具有益气活血、通脉平喘等功效，常用于治疗气虚血 瘀、胸痹心痛、中风偏瘫、倦怠气喘等［1］。大花红景 天在我国分布较广，贮量较大，主要分布在西藏、四
大花红天素色谱条件： Kromail C18 色谱柱（ 4. 6 mm × 250 mm，5 μm） ； 流动相乙腈（ A） -水（ B） ，洗脱 程序为 0 ～ 20 min，10% ～ 13% A； 流速 1. 0 mL · min － 1 ； 柱温 30 ℃ ； 蒸发光检测器，以氮气为载气，漂 移管温度 45 ℃ ，流速 2. 0 L·min － 1 ； 进样量 20 μL。 2. 1. 2 对照品及供试品溶液的配制 对照品溶液 的配 制： 分 别 精 密 称 定 红 景 天 苷 16. 12 mg、酪 醇 12. 92 mg、大花红天素 11. 71 mg 和没食子酸 13. 96 mg 至 10 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即为 对照品溶液。
红景天药材经南京中医药大学吴启南教授鉴定 为景天科植物大花红景天 Ｒ. crenulata 的干燥根及 根茎； 对照品红景天苷 （ 批号 110818-200404） ，酪醇 （ 批号 111676-200602） ，大花红天素 （ 批号 110818201005） ，没食子酸 （ 批号 110831-200803） 购自中国 食品药品检定研究院； 甲醇、乙腈（ 色谱纯，Tedia，美 国） ； 水（ 重蒸馏，自制） ； 甲醇、冰醋酸、药用 95% 乙 醇（ 南京化学试剂有限公司） ； Agilent 1100 高效液 相色谱仪（ 美国 Agilent 公司） ，配自动进样器、四元 泵、ELSD 检测器、MWD 检测器； AE240 电子分析天 平（ 瑞士 Mettler 公司） 。 2 方法与结果 2. 1 红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸的含 量测定 2. 1. 1 色谱条件 红景天苷、酪醇及没食子酸色谱 条件： Kromail C18 色谱柱（ 4. 6 mm × 250 mm，5 μm） ； 流动相甲醇（ A） -0. 3% 冰醋酸溶液（ B） ，洗脱程序为 0 ～ 25 min，15% A； 检测波长 275 nm； 流速 1. 0 mL ·min － 1 ； 柱温 30 ℃ ； 进样量 20 μL。
供试品溶液的配制： 精密称定大花红景天提取 物 18 mg 于 25 mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇
匀，过 0. 22 μm 微孔滤膜，滤液即为供试品溶液。 2. 1. 3 线性范围考察 精密量取红景天苷、酪醇、 大花红 天 素 及 没 食 子 酸 对 照 品 溶 液 各 0. 1，0. 2， 0. 4，0. 6，1. 0 mL，分别置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀 释至刻度，摇匀。按 2. 1. 1 项下色谱条件进样，以进 样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程 Y = 4 544. 3X + 6 227 （ r = 0. 999 7） ，线性范围 16. 12 ～ 161. 2 mg · L － 1 ； Y = 128 822X － 148 578 （ r = 0. 999 5） ，线 性 范 围 12. 92 ～ 129. 2 mg · L － 1 ； Y = 12 914X － 7 505 （ r = 0. 999 7 ） ，线 性 范 围 11. 71 ～ 117. 1 mg·L － 1 ； Y = 40 504X － 86 636（ r = 0. 999 6） ， 线性范围 13. 96 ～ 139. 6 mg·L － 1 。 2. 1. 4 精密度试验 取红景天苷、酪醇、大花红天 素及没食子酸对照品溶液按 2. 1. 1 项下色谱条件重 复进样测定 6 次，每次进样 20 μL，测定峰面积，红 景天苷 ＲSD 1. 6% ，酪 醇 ＲSD 1. 5% ，大 花 红 天 素 ＲSD 1. 5% ，没食子酸 ＲSD 1. 9% 。 2. 1. 5 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别放置 0，2，4，8，12，24 h 后，按 2. 1. 1 项下色谱条件测定峰 面积，测得红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸 峰 面 积 的 ＲSD 分 别 为 1. 1% ，0. 84% ，0. 87% ， 0. 79% ，表明供试品在 24 h 内稳定。 2. 1. 6 重复性试验 精密称定大花红景天样品 5 份，平行制备 5 份供试品溶液，按 2. 1. 1 项下色谱条 件测定其峰面积，测得红景天苷、酪醇、大花红天素 及没食子酸峰面积的 ＲSD 分别为 0. 97% ，0. 88% ， 0. 54% ，0. 61% ，表明重复性良好。 2. 1. 7 加样回收率试验 精密称取大花红景天提 取物 5 份，分别加入适量的红景天苷、酪醇、大花红 天素及没食子酸对照品溶液，按 2. 1. 1 项下色谱条 件测定，计算各平均加样回收率，红景天苷、酪醇、大 花红天素、没食子酸的加样回收率分别为 98. 72% ， 101. 4% ，100. 0% ，97. 69% ，红景天苷、酪醇、大花红 天素 及 没 食 子 酸 的 ＲSD 分 别 为 0. 76% ，0. 94% ， 1. 4% ，0. 58% 。 2. 2 正交试验设计
2. State Key Laboratory of Pharmaceutical Process New-tech for Chinese Medicine，Lianyungang 222001，China）
［Abstract］ The extracting technology of salidroside，tyrosol，crenulatin and gallic acid from Ｒhodiolae Crenulatae Ｒadix et Ｒhizoma was optimized. With extraction rate of salidroside，tyrosol，crenulatin and gallic acid as indexes，orthogonal test was used to evaluate effect of 4 factors on extracting technology，including concentration of solvent，the dosage of solvent，duration of extraction，and frequency of extraction. The results showed that，the best extracting technology was to extract in 70% alcohol with 8 times the weight of herbal medicine for 2 times，with 3 hours once. High extraction rate of salidroside，tyrosol，crenulatin and gallic acid were obtained with the present technology. The extracting technology was stable and feasible with high extraction rate of four compounds from Ｒhodiolae Crenulatae Ｒadix et Ｒhizoma，it was suitable for industrial production. ［Key words］ Ｒhodiolae Crenulatae Ｒadix et Ｒhizoma； salidroside； tyrosol； crenulatin； gallic acid； extracting technology
［摘要］ 优选大花红景天中红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸的提取工艺。采用正交试验，以红景天苷、酪醇、大花红 天素及没食子酸 4 种化合物的提取率为指标，选取乙醇体积分数、料液比、提取时间及提取次数为考察因素，优选 4 种化合物 的最佳提取工艺。结果表明，以药材质量 8 倍量的 70% 乙醇回流提取 2 次，每次提取 3 h 为最佳提取工艺。该工艺所得红景 天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸的提取率均较高。优选的提取工艺稳定可行，4 种化合物的收率高，可用于工业生产的 放大。 ［关键词］ 大花红景天； 红景天苷； 酪醇； 大花红天素； 没食子酸； 提取工艺
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罗 鑫等： 红景天中红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸提取工艺优选
疫调节作 用［5］。 大 花 红 天 素 对 大 鼠 肺 微 血 管 内 皮 细胞的凋 亡 有 很 好 的 抑 制 作 用［6］。 没 食 子 酸 具 有 抗炎、抗 突 变、抗 氧 化、抗 自 由 基 等 多 种 生 物 学 活 性［7］。目前文献中大多报道的为 4 种化合物中单个 或 2 个化合物的提取工艺［8-9］或单个化合物的合成 工艺［10-11］，但均存在提取率低、成本较高等缺点，红 景天中没食子酸的提取工艺更是鲜有报道。本实验 以红景天苷、酪醇、大花红天素及没食子酸的提取率 作为指标，采用正交试验法优选 4 种化合物的提取 工艺，为大花红景天的工业生产提供试验依据。 1 材料
Optimization of extraction technology for salidroside，tyrosol，crenulatin and gallic acid in Ｒhodiolae Crenulatae Ｒadix et Ｒhizoma with orthogonal test
选取乙醇体积分数（ A） 、料液比（ B） 、提取时间 （ C） 、提取次数（ D） 为考察因素，称取大花红景天粗 粉 9 份，每份 200 g，在平行条件下按照 L9 （ 34 ） 正交 表安排进行试验，见表 1。每份样品提取完毕后，滤 过，合并 滤 液，准 确 量 取 滤 液 量，取 滤 液 适 量 按 2. 1. 1 项下色谱条件测定红景天苷、酪醇、大花红天
LUO Xin1，2 ，WANG Xue-jing1，2 ，ZHAO Yi-wu1，2 ，HUANG Wen-zhe1，2 ，WANG Zhen-zhong1，2 ，XIAO Wei1，2* （ 1. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co. ，Ltd. ，Lianyungang 222001，China；