红掌组培方案二

红掌组培方案2
食品与生物技术系何海慧 1102040220
指导教师：黄峰
一、植物简介：红掌（Anthurium andraeanum）属天南星科，花烛属多年生常绿草本植物，别名花烛、红苞芋、幸运花等，原产中美洲，喜温暖、湿润、阴暗环境，特别适合室内观赏，兼作鲜切花，为当前国际流行的名贵花卉。

在全球热带花卉贸易中，红掌销量居第二位，欧洲、美国、日本是红掌主要消费市场，栽培自动化程度很高，栽培面积不断扩大，我国红掌商业化生产，尤其是工厂化组培快繁，还处于起步阶段。

大理州经济作物科学研究所采用组培快繁技术对红掌进行快繁研究已取得初步成效，为进一步推动我国发展新兴的红掌产业及消费市场奠定理论依据。

二、组织培养
（一）培养基的制备
①初代培养MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+琼脂0.6%+糖3%，PH值为5.8
②继代培养MS+6-BA 2.0mg/L +2,4-D 0.2mg/ L+糖30g/L +琼脂
6.8g/L，PH值为5.8.
③壮苗生根培养1/2MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+糖30g/L +琼脂6.8g/L，PH值为5.8.
④配制量6L
⑤严格按照培养基制作流程的操作进行
⑥将煮制好的培养液,然后分装到培养瓶中。

培养瓶中的分装量为1～1.5公分
⑦将分装好的培养基和无菌水放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌
（二）实验前的准备
一、1.外植体的选择：红掌的茎尖、茎段、幼嫩叶片或叶柄
2.外植体的处理：将材料带回洗涤室进行处理。

①将取回的茎段进行修剪，剪去多余的叶片
②用软毛刷顺着材料的逆生长方向刷洗茎段表面的大颗粒物质
③将刷洗完的茎段剪成3～4㎝的小段
④用洗衣粉溶液将茎段洗涤
⑤再用清水缓慢冲洗
⑥用吸水纸将材料表面的水分吸干后装入无菌瓶中，将材料拿入接种室中的超净工作台上进行一下步骤操作
⑦用75%的酒精浸泡漂洗
⑧用0.1%的升汞溶液浸泡10min
⑨用无菌水冲洗三次，沥干后放入无菌瓶中备用接种
（三）材料的接种
①初代培养：取出灭菌好的材料，切除伤口部分，将切割好的材料接种到初代培养基中，并放到培养室进行培养，直至材料发育成完整植株
②将初代培养成功的材料进行扩繁：待初代培养成功发育成完整植株时进行扩繁。

切除基部老化部位，去除老叶及基部大叶，进行横向分株，纵向分段，以生长点作为分株分段依据，大约每段长0.5～1㎝
③将材料进行壮苗生根培养：将继代培养无根苗从培养瓶中取出，放入无菌的培养皿中，仔细切割成单株，然后插入生根培养基中，每瓶接种5-6株，均匀分布，将接好的培养瓶放回培养室中，正常培养。

7天后观察生根情况，并作记录。

（四）材料的驯化移栽
①驯化：待材料长出比较完整粗壮的根系，对组培苗进行驯化。

通过控水、减肥、增光、降温等措施,使它们逐渐地适应外界环境,从而使生理、形态、组织上发生相应的变化,使之更适合于自然环境,只有这样才能保证试管苗顺利移栽成功。

前期的驯化应前期驯化条件与室内培养条件相似
后期驯化条件与室外移栽条件相似
②移栽：用镊子将红掌苗从培养基中轻轻取出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后涝出，放入干净的小盆中。

用竹签在基质上打孔，将小苗栽入育苗穴盘中，轻轻覆盖、压实。

待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。

最后将育苗盘摆入到驯化室中，试管苗移栽以后要保持一定的温光条件,适宜的生根温度是
18-25℃，为了提高幼苗的成活率，配制800倍的多菌灵进行喷洒，7—10天一次。

五、在实验过程中要认真作数据记录。

（何海慧留言：请问黄老师用这个方案好还是红掌组培研究方案好？）
--还是这个实在些，重点是如何做？。