红掌组培
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二、任务分析
在红掌原产地热带雨林,红掌可用种子繁殖,但进入开花时间长。分株繁殖是红掌以前繁殖的主要方式。红掌植株基部长出吸芽,产生根系后可分株,每年可分3~4株,繁殖系数较低,很难满足规模化生产所需的种苗。现在红掌种苗生产主要通过组织培养进行种苗的快速繁殖,也就是红掌的克隆技术。这样可以在比较短的时间内生产整齐一致的优质种苗,供应生产的需要。通过组织培养技术生产红掌种苗主要有再生体系的建立、增殖培养、壮苗生根、移栽和温室育苗等技术环节。
三、相关知识
红掌(Anthurium andraeanum)植物界、被子植物门、单子叶植物纲、天南星科(Araceae),花烛属(Anthurium Schott),多年生常绿草本植物,别名花烛、安祖花、火鹤花、红鹅掌、鹅掌红、红苞芋、幸运花等,原产中美洲,特别适合室内观赏,兼作鲜切花,为当前国际流行的名贵花卉。在全球热带花卉贸易中,红掌销量居第二位,欧洲、美国、日本是红掌主要消费市场,栽培自动化程度很高,栽培面积不断扩大,我国红掌商业化生产,尤其是工厂化组培快繁,还处于起步阶段。
(一)形态特征与生物学习性
红掌为宿根草本,株高30~70cm,叶自短茎中抽生,革质,长心脏形,全绿,叶柄坚硬细长,长30~40厘米,宽约10厘米。花顶生,长约50厘米,佛焰苞心脏形,长10~20厘米,宽8~10厘米,表面波皱,佛焰苞具有明亮蜡质光泽,肉穗花序圆柱形,直立、长约6厘米,黄色,初看好像人造假花,花姿奇特美妍,切花寿命长达30天以上,为插花高级花材。同类品种繁多,花色有红、桃红、朱红、白、红底绿纹、绿、橙等色,花期持久,全年均能开花。
喜空气湿度高而又排水通畅的环境,喜阴、喜温热。在白天温度不高于28℃,夜间不低于20℃的环境中可终年开花结果,高于35℃将产生日灼,低于14℃则生长受影响,低于0℃的持续低温将冻死植株。适宜生长昼温为26~32℃,夜温为21~32℃。光强以16000~20000Lx为宜,空气相对湿度(RH)以70%~80%为佳。要求空气湿度达80%,土壤pH值为5.5,Ec值在1.2为宜。要求土壤疏松、肥沃,最好进行无土栽培。
(二)红掌的组织培养
1.取材和处理
红掌组织培养主要有两条途径:一是利用芽增殖培养的方法,将自然条件下产生的小芽切下,经杀菌处理后接种在芽增殖培养基上,经过一段时间培养后许多不定芽便直接从接种的原始芽的基部产生;二是利用自然条件下生长的红掌植株的幼嫩叶片或叶柄作外植体,通过细胞脱分化和再分化,形成再生芽的途径。
取红掌幼苗刚展开的叶片、叶柄和顶芽,放人一容器内,先用自来水冲洗,再用加0.02%餐洗净的自来水浸泡10min,浸泡过程中经常摇动容器,目的是为了比较彻底地清除材料表面的尘土和菌物。浸泡后,用自来水冲洗10min以上,冲洗后将其转入一干净的三角瓶。以下操作在超净工作台完成。往三角瓶中加入75%酒精,浸泡杀菌30~60s。倒掉酒精,用无菌蒸馏水漂洗1次,将材料转入经高压消毒的三角瓶中,加入0.1%升汞(HgCl2)液,浸泡杀菌8min,浸泡过程中经常摇动三角瓶。倒掉升汞液,用无菌蒸馏水冲洗4~6次。将材料从三角瓶中取出,在灭过菌的滤纸上用解剖刀将顶芽的生长点连同2~3个叶原基切出,将幼嫩叶片和叶柄剪成小块或小段,叶片切成0.5~1.0cm见方的小块,叶柄切成0.3~0.5cm
的小段,分别接种于芽增殖和愈伤组织诱导培养基。
2.接种与培养
(1)配制芽增殖和愈伤组织诱导培养基
芽增殖培养基为MS培养基的四种基本成分+6BA1~1.5mg/L+NAA0.5~l mg /L。
愈伤组织诱导培养基为1/2MS,再附加6BA0.6~1.2mg/L、2,4—D0.1~0.2mg/L,蔗糖20g/L或市售白砂糖30g,用1mol/L的KOH调节pH至5.8,加琼脂粉4.5~5.0g/L或琼脂条8~12g/L,高压灭菌后分装人90mm培养皿中,每皿约25ml,在超净工作台上吹干后加盖防污染。
(2)接种与培养
将已剥离的生长点接种于芽增殖培养基上,将幼叶切块和叶柄切段接种于愈伤组织诱导培养基上。接种时,每皿接种6~8个小块,用封口膜封好,放人培养室内培养,温度(26±2)℃,前期对芽暗培养10d,尔后在光下培养,光照度1500~3000Lx、8~10h/d。对叶片、叶柄可不经暗培养。在芽增殖培养基上,接种的生长点转到光下培养5d就转绿,在基部出现绿色芽点,继续培养2周,许多芽点便分化成小芽,分化率可达80%以上。用于愈伤组织诱导的叶片切块和叶柄切段培养2周左右,在切口处可见愈伤组织产生,再经3~4周,愈伤组织明显长大,但没有芽点形成和芽的分化,必须转入诱导芽分化培养基中方可产生新芽。由于愈伤组织的诱导时间较长,中间需更换1次培养基。
(3)诱导芽分化诱导
芽分化培养基为MS+6BAl.0~2.0mg/L+蔗糖(白糖)30g/L,用l mol/L的KOH调节pH值至5.8,加琼脂粉4.5~5.0g/L,或琼脂条8~10g/L,煮沸后分装于100ml三角瓶中,用羊皮纸封口,高压灭菌20min后备用。将培养皿中愈伤组织长的较好的材料从皿中取出,转人诱导芽再生培养基,培养4周左右,愈伤组织产生不定芽。要想让小芽长大,需把小芽从愈伤组织上掰下,重新接人新的分化培养基。诱导芽分化培养基既可作芽分化用,又可作继代培养,在MS基本培养基上,再附加l/4MS中的NH4NO3,可增加红掌的繁殖速度。
4.生根与移栽诱导
生根培养基采用1/2MS基本培养基附加NAA0.5~1.5mg/L、蔗糖15g/L,用l mol/LKOH调节pH值至5.8~6.0,加琼脂5.5g/L,加热煮沸后分装于100ml 三角瓶中,用羊皮纸封口,高压灭菌20min。将上述培养基中的大苗取出,在无菌滤纸上从基部切去3mm左右,接种到生根培养基中。生根培养期间,增强光照有利于生根。生根培养7~10d就能长出白色突起,三周以后根系长到lcm以上,红掌试管苗可以直接进行瓶外发根培养,既可省去生根阶段的成本费用,又可力繁殖速度。工厂化育苗可考虑采用此法。
5.移栽和温室育苗
将瓶苗取出,用自来水漂洗清苗上的培养基后可进行移栽。移栽基质可用3份泥碳、1份珍珠岩和1份椰糠混配的基质,也有的用河沙、碎插花泥等。种栽后用800~1000倍百菌清淋透。注意喷水保湿,移栽前期适度遮阴。小苗成活后每隔7~10d用叶面肥喷施,促进生长。定期喷多菌灵、百菌清等护苗防病。幼苗期叶茎都较嫩,常有地老虎、蜗牛等危害,要酌情给予防治。