【发酵工程】第七章_发酵工业中氧的供给

合集下载

072发酵工业中氧的供需精品PPT课件

072发酵工业中氧的供需精品PPT课件

(一)耗氧速率
单位体积发酵液每小时的耗氧量叫做耗氧速 率,以r表示。耗氧速率与菌体浓度成正比:
dc
r dt
Qo2 •X
式中: r——耗氧速率(mmolO2/l.h) QO2 ——比耗氧速率(mmolO2/g.h) X ——菌体浓度(g/l)
20.10.2020
18
耗氧速率随微生物的种类、代谢途径和菌 体浓度的不同而不同,其大致范围为:25100mmol/l.h,某些耗氧速率特别高的微生物, 则远远超过此数值。另外,微生物生长和产物 形成阶段的好氧速率有时并不一致,某些发酵 中过高的溶氧浓度反而对产物的形成不利。
事实上并不需要发酵液中氧的浓度达到饱和 浓度,只要维持在氧的临界浓度以上即可。因此, 应尽可能了解发酵过程中菌的临界氧浓度和达到 最高发酵产物的临界氧浓度,即菌的生长和发酵 产物形成过程中的最高需氧量,以便分别合理地 供给足够氧气。
20.10.2020
11
二、微生物的有氧呼吸
1、比生长速率和氧浓度的关系
20.10.2020
20
(二)比耗氧速率及其与比生长速率与溶氧浓 度的关系
1、比耗氧速率:单位菌体浓度的好氧速率,又 称呼吸强度 。
Qo2
r X
1•(dc) X dt
(6-3)
式中: r——耗氧速率(mmolO2/l.h) QO2 ——比耗氧速率(mmolO2/g.h) X ——菌体浓度(g/l)
第四章 传氧与通气搅拌
20.10.2020
1
本章主要内容
一、概述 二、微生物有氧呼吸 三、传氧理论 四、影响传氧速率的因素 五、溶氧系数及其测定 六、溶氧控制工艺手段及异常分析
20.10.2020
2
一、 概述 1、生化反应器通气与搅拌有两个目的: ①使发酵液充分混合,以便形成均匀的微生物悬 浮液,促使底物从发酵液向菌体内及代谢产物从 菌体内向发酵液的传递。 ②供给微生物生长和代谢所需的氧气。

大学发酵工程试题及答案

大学发酵工程试题及答案

大学发酵工程试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 发酵工程中常用的微生物是()。

A. 细菌B. 酵母C. 霉菌D. 以上都是答案:D2. 下列哪种不是发酵工程中常用的培养基类型?()A. 液体培养基B. 固体培养基C. 半固体培养基D. 气体培养基答案:D3. 发酵过程中,控制pH值的目的是什么?()A. 提高微生物的生长速度B. 增加产物的稳定性C. 抑制微生物的生长D. 促进产物的生成答案:D4. 在发酵罐中,通入无菌空气的目的是()。

A. 增加罐内压力B. 调节温度C. 提供氧气D. 调节pH值5. 发酵工程中,常用的灭菌方法不包括()。

A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 化学灭菌D. 辐射灭菌答案:C6. 下列哪种物质不是发酵产物?()A. 酒精B. 乳酸C. 抗生素D. 维生素答案:D7. 发酵过程中,温度控制的重要性在于()。

A. 影响微生物的代谢速率B. 影响产物的稳定性C. 影响微生物的生长速度D. 以上都是答案:D8. 发酵工程中,接种量的大小对发酵过程的影响是()。

A. 无影响B. 影响发酵速度C. 影响产物产量D. 影响发酵周期答案:D9. 发酵工程中,常用的发酵罐类型包括()。

B. 静态罐C. 气升式罐D. 以上都是答案:D10. 发酵过程中,微生物的代谢类型包括()。

A. 厌氧代谢B. 好氧代谢C. 兼性代谢D. 以上都是答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)1. 发酵工程中,影响微生物生长的因素包括()。

A. 温度B. pH值C. 氧气供应D. 营养物质答案:ABCD2. 发酵过程中,常用的检测方法包括()。

A. 光学显微镜检测B. 电子显微镜检测C. 酶联免疫吸附测定D. 气相色谱分析答案:ABCD3. 发酵工程中,常用的控制策略包括()。

A. 温度控制B. pH值控制C. 氧气供应控制D. 营养物质供应控制答案:ABCD4. 发酵工程中,产物的提取方法包括()。

发酵工程技术概论

发酵工程技术概论

二、自然育种
※定义:不经人工处理,利用微生物的自然突变进
行菌种选育的过程。
自然状态下,碱基对发生自然突变的机率为10-8~ 10-9,一种是我们生产上所不希望看到的,表现为 菌株的衰退和生产质量的下降,这种突变成为负突 变。 另一种是我们生产上希望看到的,对生产有利,这 种突变成为正突变。
问题:高产菌株是正突变还是负突变?
第七章 发酵工程技术概 述
本章重点:优良菌种的选育 发酵工艺的控制
内容
第一节 概述 第二节 优良菌种的选育 第三节 发酵的基本过程 第四节 发酵方式 第五节 发酵工艺控制 第六节 发酵产物的提取 第七节 发酵设备 第八节 发酵工程产品的制造实例 第九节 基因工程在发酵中的应用 第十节 发酵工程的发展展望
融合子进一步试验、保藏。 (6)生产性能筛选。
2.影响因素 (1)菌龄:一般采用对数前期的菌体进行酶解。 (2)培养基组分:限制性培养基上比在完全培养
种保藏部门索取或购买; 从大自然中分离筛选新的微生物菌种。
从自然界筛选
菌株选育、分子改造
目的
防止菌种退化 解决生产实际问题
提高生产能力
提高产品质 量 开发新产品
菌种选育方法有: 自然选育、诱变选育、杂交育种等,还包括控制
杂交育种、原生质体融合、基因工程育种等。
一 、菌种选育的物质基础
生素是链霉素。
青霉素工业化成功推动了发酵工业的发展,主 要标志有:深层发酵、生产大规模化、多种抗 生素、氨基酸、核酸发酵成功,甾体的微生物 转化。
谷氨酸发酵的生产实例
谷 氨 酸 钠 是 味 精 的
谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途 径
在工厂里是 怎样应用谷氨酸 棒状杆菌来生产 谷氨酸的?

发酵工程重点总结

发酵工程重点总结

第一章发酵:通过微生物的生长繁殖和代谢活动,产生和积累人们所需产品的生物反应过程发酵工程:利用微生物(或动植物细胞)的特定性状,通过现代工程技术,在生物反应器中生产有用物质的技术体系。

该技术体系主要包括菌种选育与保藏、菌种扩大生产、代谢产物的生物合成与分离纯化制备等技术。

发酵工业的特点?(7点)1.发酵过程一般是在常温常压下进行的生化反应,反应安全,要求条件较简单。

2.可用较廉价原料生产较高价值产品。

3.反应专一性强。

4.能够专一性地和高度选择性地对某些较为复杂的化合物进行特定部位的生物转化修饰。

5.发酵过程中对杂菌污染的防治至关重要。

6.菌种是关键。

7.发酵生产不受地理、气候、季节等自然条件限制。

工业发酵的类型?厌氧发酵1. 按微生物对氧的不同需求需氧发酵兼性厌氧发酵液体发酵(包括液体深层发酵)2.按培养基的物理性状浅盘固体发酵深层固体发酵(机械通风制曲)分批发酵按发酵工艺流程补料分批发酵单级恒化器连续发酵连续发酵多级恒化器连续发酵带有细胞再循环的单级恒化器连续发酵发酵生产的基本工业流程?1. 用作种子扩大培养及发酵生产的各种培养基的配制;2. 培养基、发酵罐及其附属设备的消毒灭菌;3. 扩大培养出有活性的适量纯种,以一定比例接种入发酵罐中;4. 控制最适发酵条件使微生物生长并形成大量的代谢产物;5. 将产物提取并精制,以得到合格的产品;6. 回收或处理发酵过程中所产生的三废物质。

工业发酵的过程的工艺流程图?第二章1、发酵工业菌种分离筛选的一般流程?调查研究(包括资料查阅)试验方案设计含微生物样品的采集(如何使样品中所含微生物的可能性大?)样品预处理(如何在后续的操作中使这种可能性实现)菌种分离根据目的菌株及其产物特点分选择性分离方法随机分离方法(定向筛选←选择压力) (用筛选方案- 检测系统进行间接分离)富集液体培养固体培养基条件培养(初筛)菌种纯化复筛菌种纯化初步工艺条件摸索再复筛生产性能测试较优菌株1-3株保藏及进一步做生产试验某些必要试验和或作为育种的出发菌株毒性试验等2、菌种选育改良的具体目标。

7 微生物工程 第七章 发酵工业中氧的供给

7 微生物工程 第七章 发酵工业中氧的供给

温度→影响酶活及溶氧:T ↑, CL ↓

代谢类型(发酵类型)的影响 若产物通过TCA循环获取,则QO2高,耗氧量大 谷氨酸、天冬氨酸 若产物通过EMP途径获取,则QO2低,耗氧量小 苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸
(4)溶解氧控制的意义

重点1
溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不
同的(发酵不同阶段需氧要求不同)。
* w * m * w * nj
Cm*—氧在混合溶液中的溶解度, mol/m3
溶质↑ , Cm*↓
(3)溶剂

通常溶剂为水;
氧在一些有机化合物中溶解度比水中为高。

可合理添加有机溶剂降低水的极性,增加溶解
氧浓度。
(4)氧分压

一、提高空气总压(增加罐压),从而提高了氧
分压,对应的溶解度也提高,但增加罐压是有一 定限度的(CO2 浓度↑,不利于发酵)。
t—温度,℃
Cw*: 与空气平衡时水中的氧浓度
T ↑ ,Cw* ↓ ,推动力↓
(2)溶质 A、电解质
1)对于单一电解质
C lg KCE C
* w * e
(CE , C )
* e
Ce*—氧在电解质溶液中的溶解度,mol/m3 Cw*—氧在纯水中的溶解度, mol/m3
CE—电解质溶液的浓度,kmol/m3
B. 非电解质
C lg KCN C
* w * n
(CN , C )
* n
Cn*—氧在非电解质溶液中的溶解度, mol/m3 CN—非电解质或有机物浓度, kg/m3 K—非电解质的Sechenov常数, m3/kg
C. 混合溶液(电解质+非电解质):叠加
C C lg hi I i lg C C i j

第七章 发酵工业中氧的供需

第七章 发酵工业中氧的供需
KLa受两种 趋势影响
低浓度表面活性剂时,以a为主, KLa↑
添加至一定量时, kL降至最低, KLa下降显著 再继续增加时,kL维持最低水平不再下降,而a↑↑,此时 KLa从最低点有所回升
B. 离子强度对KLa的影响 • 电解质溶液浓度↑,则气泡变小↓,a↑, KLa↑;
• 有机溶质浓度↑,则气泡变小↓,a↑, KLa↑
C. 通气、搅拌的关联对KLa的影响
当通气量超过一定上限时, 搅拌器就不能有效地将空气泡分散
到液体中去, 而在大量气泡中空转, 发生“过载”现象, 此时搅拌
功率PG会大大下降, KLa也会大大下降
只有Q↑,N↑同时提高,PG才不会大大下降,KLa↑
A. 表面活性剂的影响
表面活性剂的浓度↑ 气液界面厚度↑, 1/kL↑, kL↓ 气泡变小↓, a↑
2. 气体溶解过程的双膜理论
3. 氧传递方程 4. 发酵过程中溶氧与耗氧的变化 5. 影响氧传递的因素
一、 供氧的实现形式
摇瓶水平:摇床转速慢,装量多 需氧量小 发酵罐水平 搅拌缓和,通气缓和 表面通气,膜透析(扩散)
摇瓶水平:转速快,装量少 需氧量大
发酵罐
通无菌空气并搅拌
气升式
1.氧的传递途径与传质阻力
液膜传递阻力 液相传递阻力 气膜传递阻力
细胞或细胞 团表面的液 细胞团内 膜阻力 传递阻力
气液界面 传递阻力
固液界面 传递阻力
细胞内反 应阻力 细胞膜细 胞壁阻力
供氧方面阻力
耗氧方面阻力
2.气体溶解过程的双膜理论

供氧方面主要阻力是气膜和液膜阻力 耗氧方面主要阻力是细胞团内与细胞膜阻力

双膜理论的基本前提(三点假设)
γ
2、 影响微生物耗氧的因素

第七章发酵工业中氧的供需

第七章发酵工业中氧的供需

(QO2 )m K La C*
x
1x
B
Da
1
1x
2
(1
,
为常数
2
)
y亦x的函数,有形式
y 1x 2 ax2 bx c

对于一个培养物来说,最低的通气条件可由式
KLa
QO2 x C* CL
求得。
▪ kLa亦可称为“通气效率”, 可用来衡量发酵罐的通 气状况,高值表示通气条件富裕,低值表示通气条
2) 溶质
C. 混合溶液(电解质+非电解质):叠加
lg
Cw* Cm*
i
hi Ii
j
lg
Cw* Cn*j
Cm*—氧在混合溶液中的溶解度, mol/m3
溶质↑ , Cm*↓
3) 溶剂
通常溶剂为水; 氧在一些有机化合物中溶解度比水中为高。
4) 氧分压
提高空气总压(增加罐压),从而提高了氧分 压,对应的溶解度也提高,但增加罐压是有一 定限度的。
2) 溶质
A. 电解质
1)对于单一电解质
lg
C*w C*e
KCE
(CE , C*e )
Ce*—氧在电解质溶液中的溶解度,mol/m3 Cw*—氧在纯水中的溶解度, mol/m3 CE—电解质溶液的浓度,kmol/m3
K—Sechenov常数,随气体种类,电解质种类和温度变 化.
2) 溶质(续)
细胞呼吸的本征要求: x QO2
氧传递特征(发酵罐传递性能)
若需氧量>供氧量,则生产能力受设备限制,需进一步提高 传递能力;
若需氧量<供氧量,则生产能力受微生物限制,需筛选高产 菌:呼吸强,生长快,代谢旺盛。
供氧与耗氧至少必须平衡,此时可用下式表示:

发酵工程电子版

发酵工程电子版

发酵工程电子版(总53页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--发酵工艺原理(发酵工程)讲义适用生物工程、生物技术、制药工程及生物科学专业用王莘第一章绪论发酵工业应用:生物生物学一、发酵定义:从工业微生物角度的发酵:利用培养微生物来获得产物的有氧或厌氧的任何过程,现在有扩大到培养生物细胞(含有动物、植物和微生物)获得产物的所有过程。

从发酵工业角度的发酵:借助微生物在有氧和无氧条件下的生命活动来制备微生物体本身,或共同直接代谢产物或次级代谢产物的过程统称为发酵。

传统发酵:酱油、醋、酒、长毛豆腐。

新兴发酵:有机酸、酶制剂、抗生素。

发酵工业的划分:食品工业(酿造工业)和非食品工业(发酵工业)发酵工业:利用生物的生命活动生产的酶对无机或有机原料进行酶加工获得产品的工业。

二、发酵工业具备的条件:①要有某种适宜的微生物。

②要保证或控制微生物进行代谢的各种条件(培养基组成,温度,溶氧浓度,酸碱度等)。

③要有进行微生物发酵的设备。

④要有将菌体或代谢产物提取出来精制成产品的方法和设备。

三、发酵工业的改革1.天然发酵阶段特点:1)家庭作坊式生产;2)容易感染细菌; 3)厌氧发酵;4)非纯种培养;5)凭经验传授技术; 6)产品质量不稳定。

2.纯培养技术的建立阶段纯培养阶段特点:(1).多为好氧产品;(2)、均为表面培养;(3)、产品生产过程简单;(4)、设备要求不高;(5)、生产规模不大。

3.通气搅拌发酵技术的建立阶段第二次世界大战爆发,1929年英国人费莱明发现青霉素,迅速形成工业大规摸生产。

1940年英国人费洛里精制分离青霉素医治战伤药物。

发酵工业新篇章:发酵现象→酿造食品工业→非食品工业→青霉素→抗菌素发酵工业→氨基酸,核酸发酵(代谢控制发酵)→基因工程菌→动物细胞大规模培养→植物细胞大规模培养→藻类细胞大规模培养→转基因动物。

发酵工程产业化发展:发酵工程技术给人类社会生产力的发展带来了巨大的潜力,涉及到解决人类所面临的食品与营养、健康与环境、资源与能源等重大问题。

发酵工程工艺原理思考题

发酵工程工艺原理思考题

《发酵工程工艺原理》复习思考题第一章思考题:1.什么是初级代谢产物?什么是次级代谢产物?次级代谢产物主要有哪些种类?2.典型的发酵过程由哪几个部分组成?3.发酵工程的特点及微生物的共性.第二章思考题:1.发酵工业用菌种应具备哪些特点?2.什么叫自然突变和诱发突变?诱变育种的实质是什么?3.何为转化、转导、DNA体外重组技术?举例说明在发酵工业中的应用。

4.什么是选择性培养基?它在菌种筛选中有何应用价值?举例说明。

5.何为营养缺陷型?举例说明营养缺陷型的筛选方法。

6.如何筛选抗性突变株?7.设计一个从自然界中筛选高温淀粉酶产生菌的实验方案,并说明主要步骤。

8.菌种保藏的目的与核心是什么?产孢子的微生物适宜用何种保藏方法?9.造成菌种退化的原因是什么?生产中如何防止菌种的退化?10.何为菌种的复壮?11.培养基有哪些类型?各有何种用途?发酵工业上使用最广的是哪种类型?12.如何确定培养基的组成和进行培养基优化?13.淀粉糖的制备方法?哪种方法制备的淀粉糖质量好?14..糖蜜可直接用作发酵原料吗?为什么?第三章复习思考题1.试述消毒和灭菌的区别。

2.灭菌的方法主要有哪几种?其灭菌原理何在?发酵工业中为何应用最广的是湿热灭菌?3.何谓微生物的热阻?高温短时灭菌法(HTST)的理论基础是什么?4.在工业生产中,影响培养基灭菌的因素有哪些?为什么?5.比较分批灭菌与连续灭菌的优缺点,两种灭菌方法各适用于何种场合?6.工业上空气除菌所用过滤介质(如棉花、玻璃纤维、活性炭等)的滤孔远大于菌体,为何也能达到除菌的目的?7.过滤效率受哪些因素影响?如何提高除菌效率?第四章复习思考题1.试述分批、补料分批和连续发酵三种培养方式的优缺点。

2.在分批培养中,按细胞生长和产物生成的关系可分为哪几种类型?举例说明。

3.何为补料分批发酵?该法主要适用在哪些场合?4.什么叫连续培养?为什么连续培养不能无限期地连续下去?5.在单级连续培养中,μ=D意味着什么?6.什么叫比生长速率?什么叫细胞(生长)得率系数?什么叫产物得率系数?什么叫转化率?7.什么是Monod方程?请说明各参数的意义。

7-微生物工程-第七章-发酵工业中氧的供给全文

7-微生物工程-第七章-发酵工业中氧的供给全文

由式
nO 2
KG (P
P*)
KG
nO2 P P*
1 P P* P Pi Pi P* P Pi H (Ci CL )
KG
nO2
nO2
nO2
nO2
nO2
nO2
P Pi 1 kG
1 kG
P Pi nO2
no2
Ci CL 1/ kL
1 Ci CL
kL
nO2
1 1 H KG kG kL
Cw*
t
14.6 31.6
t—温度,℃ Cw*: 与空气平衡时水中的氧浓度 T ↑ ,Cw* ↓ ,推动力↓
(2)溶质 A、电解质
1)对于单一电解质
lg
Cw* Ce*
KCE
(CE , Ce* )
Ce*—氧在电解质溶液中的溶解度,mol/m3 Cw*—氧在纯水中的溶解度, mol/m3 CE—电解质溶液的浓度,kmol/m3 K—Sechenov常数,随气体种类,电解质种类和温度变化.
2、KLα的影响因素
影响比表面积α的因素 影响液膜传递系数kL的因素
1、影响推动力C*-CL的因素
(1)温度 (2)溶质 (3)溶剂 (4)氧分压
(1)温度
氧在水中的溶解度随温度的升高而降低,在 1.01×105Pa和温度在4~33℃的范围内,与空气平 衡的纯水中,氧的浓度可由以下经验公式计算:
溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不 同的(发酵不同阶段需氧要求不同)。
氧传递速率已成为许多好气性发酵产量的限制因素。 提高传氧效率,能大大降低空气消耗量, 降低设备费
和动力消耗,以及减少泡沫形成和染菌的机会, 提高 设备利用率。
二、发酵过程中氧的传递

第七章 发酵过程控制

第七章   发酵过程控制

一、初级代谢的变化 二、次级代谢的变化 三、发酵过程的主要控制参数
初级代谢变化的根本原因在于菌体的代谢活 动引起环境的变化,而环境的变化又反过来影 响菌体的代谢。 在初级代谢中,菌体生长仍显示适应期、对 数生长期、静止期和衰亡期的特征。 由于菌体的生理状态与培养条件不同,各个 时期时间长短也不尽相同,且与接种微生物的 生理状态有关。
生物热的大小随培养时间的不同而不同。 实验发现抗生素高产量批号的生物热高于低产 量批号的生物热。说明抗生素合成时微生物的新陈 代谢十分旺盛。
生物热的大小与菌体的呼吸强度有对应关系,呼 吸强度越大,所产生的生物热也越大。
在四环素发酵中,还发现 生物热和菌的呼吸强度的 变化有对应关系,特别是 在80小时以前。从此实验 中还可看到,当产生的生 物热达到高峰时,糖的利 用速度也最大。另外也有 人提出,可从菌体的耗氧 率来衡量生物热的大小。
• 蒸发热的计算: Q蒸发=G(I2-I1) G:空气流量,按干重计算,kg/h I1 、I2 :进出发酵罐的空气的热焓量,J/kg (干空气)
• 辐射热:由于发酵罐内外温度差,通过罐 体向外辐射的热量。
• 辐射热可通过罐内外的温差求得,一 般不超过发酵热的5%。
发酵热的测定
(1)通过测定一定时间内冷却水的流量和 冷却水进出口温度,由下式求得这段时间内 的发酵热。


影响酶的活性,当pH值抑制菌体中某些酶 的活性时,会阻碍菌体的新陈代谢;
H+或OH-在细胞内改变了胞内原有的中性状 态,影响到酶蛋白的解离度和电荷情况,从而 改变酶的结构和功能。

影响微生物原生质膜所带电荷的状态。改变 细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸 收和代谢产物的排泄。

发酵工程期末复习重点

发酵工程期末复习重点

《发酵工程》第二章发酵工程菌种1、发酵工程菌:发酵工业的微生物种类很多,可分为两二类,即可培养微生物和未培养微生物。

其中,可培养微生物包括四大类:1)细菌:单细胞原核微生物,分布最广、数量最多,工业上常用的有枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等,用于各种酶制剂、有机酸、氨基酸等; 2)放线菌:单细胞原核,因菌落呈放线状而得名,最大的经济价值在于能产生多种抗生素,常用的放线菌主要来自链霉菌属、小单孢菌属和诺卡菌属,如链霉素、红霉素、金霉素;3)酵母菌:一类单细胞,兼性厌氧,出芽生殖真核微生物,啤酒酵母、假丝酵母、类酵母用于生产啤酒、制造面包、生产脂肪酶和可食用、药用和饲料用酵母菌体蛋白; 4)霉菌:发霉的真菌,根霉、毛霉、红曲霉、青霉,它们广泛用于生产酶制剂等。

2、发酵工程菌种的分离筛选:发酵工业对菌种的要求:1)能在廉价原料制成的培养基上生长,目的产物产量高、易回收;2)生长快,发酵周期短;3)培养条件易于控制;4)抗噬菌体和杂菌污染能力强;5)菌种不易变异退化;6)对放大设备的适应性强;7)菌种不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素。

菌种的获得途径:1)从菌种保存机构直接购买(CCCCM中、A TCC美);2)从自然届分离筛选;3)从发酵水平高的批号中重新进行分离筛选。

菌种的分离筛选过程:样品的采集(土壤、海洋、空气、极端环境微生物、动植物中,总原则是来源越广泛,获得新菌种的可能性越大)------材料的预处理(热处理、膜过滤、离心法、添加几丁质分离放线菌)--------富集培养(控制营养成分和条件筛选目的菌)------菌种分离(平板划线分离法、涂布分离法)见P18-------菌种的初筛和复筛----菌种鉴定,确定菌种类型。

3、菌种的代谢:1)初级代谢产物:把微生物产生的对自身生长和繁殖必需的物质称为初级代谢产物。

2)次级代谢产物:由生物体合成,但对其自身的生长、繁殖和发育并没有影响的一类物质,如抗生素、生物碱、色素、毒素等。

生物技术制药第七章发酵工程技术ppt课件

生物技术制药第七章发酵工程技术ppt课件
酵液预处理 提取 精制
第四节 发酵方式
第六节 发酵产物的提取
吸附法、沉淀法、溶剂萃取法、离子交换法
第七章 发酵工程技术
第一节 概 述
一、发酵工程 的概念
发酵工程又成为微生物工程,是利用微生物制造工业原料与工业产品
并提供服务的技术 微生物发酵工程是一个十分复杂的自催化工程,是生物技术的基础工程,用
于:如基因工程、细胞工程、酶工程都与发酵工程相关
二、发酵工程的发展历程
第一阶段 20C以前时期,利用传统的微生物发酵技术(酿造技术)生产酒、 醋、酱、奶酪等食品
制造原料)等
第三阶段 第二次世界大战爆发至1953年,本阶段是发酵工业的大发 展时期,青霉素实现工业化生产推动了发酵工业的发展;特点是: 纯菌培养、大规模、产品多为抗生素、氨基酸、核酸、甾体等次级 代谢产物
第四阶段 1953年至今,基因工程等高新技术应用阶段;如DNA双螺 旋结构模型的提出、质粒载体的发现及成功应用、分子杂交、克隆 技术等
并置于0-4℃冰箱(库)中
二、种子的制备
种子制备在在摇瓶或小罐内进行,种子要经过两次扩大培养才能进入 发酵罐
三、发酵
注意:通气(一般0.3-1m3/m3)、搅拌(一般搅拌消耗功率12KW/m3)、温度(26-37℃)、罐压(一般0.3-0.5kg/cm3);发酵 时间因不同品种而异,大多数微生物的发酵周期为2-8d
1675年,荷兰人列文虎克发明了显微镜,并首次观察到了微生物体, 为人类对微生物的深入研究提供了可能
19C中叶,法国葡萄酒的酿造工艺出现问题,巴斯德经研究发现时由 于传统“酿造”技术环境中的杂菌(乳酸杆菌)干扰了酿酒的正常生化反应 过程;指出对酿造原料进行灭菌,可解决问题
第二阶段 1900—1940年,准“纯菌培养”阶段,规模增大,产品主要 有酵母、甘油、乳酸、柠檬酸、丁醇、丙酮(第一次世界大战弹药

工业发酵中氧的供需

工业发酵中氧的供需


发酵液粘度的改变还会影响到液体的湍流性以及界面
或液膜阻力,从而影响到氧传递系数KL。当发酵液浓
度增大时,粘度也增大,氧传递系数KL就降低。

发酵液中泡沫的大量形成会使菌体与泡沫形成稳定的
乳浊液,影响到氧传递系数。
表面活性剂
培养液中消泡用的油脂等具有亲水端和
疏水端的表面活性物质分布在气液界面, 增大了传递的阻力,使氧传递系数KL等 发生变化,
发酵过程中氧的需求
几个重要基本参数
需氧速率 指单位体积培养液在单位时间内的消需氧的量, 以 r 表示,单位为[mmolO2/L· 。 h]
发酵过程中氧的需求
几个重要基本参数
r=Qo2· X
式中: r ---需氧速率mmolO2/L· h; Qo2---菌体呼吸强度 mmolO2/(g干细胞· ) ; h X ---发酵液中菌体浓度,(g/L)
根据发酵液中的溶解氧浓度的变化来判断微生物生
长代谢是否正常,工艺控制是否合理,设备供氧能力 是否充足等问题,有助于查找发酵不正常的原因和控
制好发酵生产。
五、制定计划:如何提高溶氧水平
1、改变气体成份 2、提高搅拌速度 3、增加挡板 4、增加通气量 5、提高罐压


增加罐压 但是要注意的是增加罐压虽然提高了氧的分压,从而 增加了氧的溶解度,但其他气体成分(如CO2)分压 也相应增加,且由于CO2的溶解度比氧大得多,因此 不利于液相中CO2的排出,而影响了细胞的生长和产 物的代谢,所以增加罐压是有一定限度的。 增加空气中氧的含量,进行富氧通气操作。 即通过深冷分离法、吸附分离法及膜分离法制得富氧 空气,然后通入培养液。目前由于这三种分离方法的 成本都较高,富氧通气还处于研究阶段。

发酵工业中氧的供需

发酵工业中氧的供需

发酵工业中氧的供需
氧是发酵工业中的基础和重要物质。

氧是动物体和植物体呼吸的必需
气体,也是发酵工业许多过程中的重要物质。

因此,对氧的需求越来越大,氧的供应也成为发酵工业的关键。

淀粉、酒精和乳酸发酵等,都需要大量的氧来进行发酵,大量的氧供
应可以提高发酵效率,从而大大提高发酵产品的质量和产量。

此外,氧的
质量也会影响发酵过程,因此氧的高质量供应也是发酵工业运营的需求之

在发酵工业中,氧的供应可以从两方面考虑,一是气体氧供应,二是
溶液氧供应。

在气体氧供应方面,通常以空气为气源,采用压缩机或活塞
压缩机进行压缩,然后经过冷凝,把空气中的氧提取出来,用于发酵反应
器的加氧。

在溶液氧供应方面,通常以电解水的氧溶液为主,通过氧枪、
针型氧枪和氧柱等进行氧源输送,用于发酵反应器的氧添加。

由于氧在发酵工业中发挥重要作用,近年来,发酵行业对氧供应采用
了更加完善的管理措施,用于保证氧质量的稳定性和安全性,特别是对气
体氧的质量进行特别检查,以确保气体氧的安全性并保证发酵过程的有效性。

精选发酵工程07第七章发酵生产的设备

精选发酵工程07第七章发酵生产的设备

一、发酵罐
发酵罐的定义:是为一个特定生物化学过程的操作提供良好而满意的环境的容器。对于某些工艺来说,发酵罐是个密闭容器,同时附带精密控制系统;而对于另一些简单的工艺来说,发酵罐只是个开口容器,有时甚至简单到只要有一个开口的坑。
发酵罐系统
一个优良的发酵罐装置和组成(1)应具有严密的结构(2)良好的液体混合特性(3)好的传质相传热速率(4)具有配套而又可靠的检测、控制仪表
发酵罐容积
发酵罐采用圆柱形器身,底和顶为锥形盖,选取结构尺寸的比例关系如下:
由发酵罐的基本结构尺寸,可确定全罐表面积.罐体圆柱部分表面积F1和罐底罐顶表面积F2,F3分别为:
2.冷却面积和冷却装置主要结构尺寸
假定罐壁不包扎保温层,壁温最高可达35t,生产厂所在地区的夏季平均温度可查阅有关资料,现假定为32℃。
第四阶段:1960-1979年,机械搅拌通风发酵罐的容积增大到80-150m3。由于大规模生产单细胞蛋白的需要,又出现了压力循环和压力喷射型的发酵罐,它可以克服—些气体交换和热交换问题。计算机开始在发酵工业上得到广泛应用。第五阶段:1979年至今。生物工程和技术的迅猛发展,给发酵工业提出了新的课题。于是,大规模细胞培养发酵罐应运而生,胰岛素,干扰素等基因工程的产品走上商品化。
Q3=全罐总表面积× ac ×(t2-t1)
主发酵控制发酵液温度tw为30℃,按题意冷却水进出口温度分别为t1=20℃,t2=25℃
(4)传热总系数K值的确定选取蛇管为水煤气输送钢管,其规格为53/60mm,则管的横截面积为
考虑罐径较大,设罐内同心装两列蛇管,并同时进入冷却水,则水在管内流速为:
啤酒发酵容器的变迁过程
(2)开放式发酵容器向密闭式转变。小规模生产时,一般用开放式,对发酵的管理、泡沫形态的观察和醪液浓度的测定等比较方便。随着啤酒生产规模的扩大,发酵容器大型化,并为密闭式。从开放式转向密闭发酵的最大问题是发酵时被气泡带到表面的泡盖的处理。可用吸取法分离泡盖。

第七章 发酵过程的控制

第七章    发酵过程的控制
• 1温度对微生物的影响 各种微生物都有自己最适的生长温度范围,在此范围 内,微生物的生长最快。同一种微生物的不同生长阶 段对温度的敏感性不同 • 2温度对微生物酶的影响 温度越高,酶反应速度越快,但酶的失活也越快,表 现出微生物细胞容易衰老,使发酵周期缩短,从而影 响发酵过程最终产物的产量。
1、发酵温度
4、CO2和呼吸商的影响及控制
• 三.发酵过程中CO2的控制 • CO2浓度受到许多因素的影响,如细胞的 呼吸强度、通气搅拌程度、设备规模、罐 压大小、温度等。通气搅拌程度越大,体 系中CO2浓度越低。 • 工业发酵中,CO2的影响远比溶解氧的影 响要小得多,因此,一般不单独进行控制。
5、基质浓度的影响及补料控 制
压力法
覆膜氧电极 法
极普法
4、CO2和呼吸商的影响及控制
• 一.二氧化碳对发酵过程的影响 CO2影响发酵液的酸碱平衡,使发酵液的 pH值下降,或与其他化学物质发生化学反 应,或与生长必需金属离子形成碳酸盐沉 淀等原因,造成间接作用而影响菌体生长 和产物合成。
4、CO2和呼吸商的影响及控制
• 二.呼吸商与发酵的关系 • 微生物的耗氧速度常用单位质量的细胞(干 重)在单位时间内消耗氧的量,即呼吸商或 比耗氧速率(或呼吸强度)。单位体积培养液, 在单位时间内消耗的氧量称为摄氧率。 • Q氧气 = γ/ Cc 在菌体浓度一定的情况下,摄氧率越大, 呼吸商越大,发酵就越旺盛。
主要内容
由于发酵过程的复杂性,使得发酵过程的控制较为复杂, 目前生产中较常见的参数主要包括:温度、pH值、溶解氧、 空气流量、基质浓度、泡沫、搅拌速率、罐压、效价等。
9 发酵参数和发酵终点的监测与控制 10 发酵过程的计算机控制 设备及管道清洗与消毒的控制
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

/jpkc
Da
(QO2 ) m K LaC
*
x 1x
β为常数,则
B Da 1 1x 2 (1, 2为常数)
K L k L ,说明这一过程液膜阻力是主要因素。
/jpkc
3.氧传递方程


在气液传质过程中,通常将KLa 作为一项处理,称为体积 溶氧系数或体积传质系数。 在单位体积培养液中,氧的传质速率(气液传质的基本方 程式)为
1 OTR K L a(C C L ) K G a( P P ) K L a ( P P* ) H
最大耗氧量与最大供氧量之比。 当Da <1时,细胞的耗氧量<最大供氧量,存在耗 氧限制,整个过程受呼吸速率控制; 当Da >1时,细胞的耗氧量>最大供氧量,存在供 氧限制,整个过程受氧传递速率控制。 对于一个给定的发酵设备和微生物,C*、k0、(QO2)m 已知,假定呼吸只与氧的限制有关,则,
/jpkc
二、发酵过程中氧的传递
(一)供氧的实现形式 (二)发酵过程中氧的传递 1. 氧的传递途径与传质阻力 2. 气体溶解过程的双膜理论 3. 氧传递方程 4.发酵过程耗氧与供氧的动态关系
/jpkc
(一) 供氧的实现形式
酵母的呼吸强度与溶氧浓度的关系
/jpkc
疣孢漆斑霉在分批培养时呼吸强度的变化
/jpkc
气液接触面
氧 在 空 气 中 的 分 压
气膜 液膜 p p-pi pi CL Ci- CL Ci
氧 溶 解 于 液 相 的 浓 度
菌龄的影响:一般幼龄菌QO2大,晚龄菌QO2小

/jpkc
4. 影响微生物耗氧的因素(续)

发酵条件的影响 pH值→ 通过酶活来影响耗氧特征;
温度→ 通过酶活及溶氧来影响耗氧特征:T ↑, DO2 ↓

代谢类型(发酵类型)的影响 若产物通过TCA循环获取,则QO2高,耗氧量大 若产物通过EMP途径获取,则QO2低,耗氧量小
/jpkc
微生物对氧的需求
一般对于微生物: CCr: =1~15%饱和浓度 例:酵母 4.6*10-3 mmol.L-1, 1.8% 产黄青霉 2.2*10-2 mmol· -1, 8.8% L 定义:氧饱和度=发酵液中氧的浓度/临界溶氧溶度 所以对于微生物生长,只要控制发酵过程中氧饱和度>1.
P Pi 1 P Pi nO2 1 kG kG nO2
Ci CL no2 1/ kL
1 1 H KG kG kL
/jpkc
1 Ci CL kL nO2
同理:
1 1 1 K L HkG k L
1 kL
1 由于氧气难溶于水,H值很大, G << Hk
/jpkc
由式 n O 2 K G ( P P ) K G
*
nO2 P P*
1 P P* P Pi Pi P* P Pi H(Ci CL ) KG nO2 nO 2 nO 2 nO 2 nO2
K C* , y CL C*

1 y y y 2 ( Da 1) y 0 Da y
B 2 4 B y 2 2 B Da 1
/jpkc
无因次数Da为Damkö 准数,物理意义是细胞的 hler
(一)氧在微生物发酵中的作用 (二)可利用氧的特征 (二)微生物的耗氧特征 (四)溶解氧控制的意义
/jpkc
(一)氧在微生物发酵中的作用 (对于好气性微生物而言)

呼吸作用 直接参与一些生物合成反应
CH3CH 2OH CH3COOH
O2
/jpkc
OTR K L a(C * CL ) QO2 x (QO2 ) m
传递
消耗
CL x K CL
/jpkc
变换
(QO2 ) m x CL CL (1 * ) * C K L aC K CL

Da
(QO2 ) m x K La C *
/jpkc
(四)溶解氧控制的意义


溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不同 的,所以须了解长菌阶段和代谢产物形成阶段的最适 需氧量。 氧传递速率已成为许多好气性发酵产量的限制因素。 目前,在发酵工业上氧的利用率很低,因此提高传氧效 率,就能大大降低空气消耗量,从而降低设备费和动力 消耗,且减少泡沫形成和染菌的机会, 大大提高设备利 用率。
/jpkc
本章内容
一、细胞对氧的需求(为什么要供氧?为什么要 控制溶氧?) 二、发酵过程中氧的传递(如何实现供氧?如何 控制溶氧?) 三、影响氧传递的因素 四、摄氧率、溶解氧、KLa的测定
/jpkc
一、细胞对氧的需求
D. 对数生长期末:S↓, OTR↓, QO2 ↓ 而γ∝(QO2 , x , OTR), 虽然x=xm,但 QO2、 OTR 占主导地位,所以 γ↓ E. 培养后期:S→0,QO2 ↓↓, γ↓↓
/jpkc
4. 影响微生物耗氧的因素

微生物本身遗传特征的影响,如 k0↑,QO2↓ 培养基的成分和浓度 碳源种类 耗氧速率:油脂或烃类>葡萄糖> 蔗糖> 乳糖 培养基浓度 浓度大, QO2 ↑; 浓度小, QO2↓

不同微生物的k0特征值不一样,可以此作为通气操 作的依据。
/jpkc
(3) Ccr的定义


微生物的比耗氧速率受发酵液中氧的浓度的影 响,各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最 低要求,即不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度, 称为临界氧浓度,以Ccr表示。 CL> Ccr,QO2 保持恒定 CL< Ccr, QO2 大大下降
需氧量小
摇瓶水平:摇床转速慢,装量多 搅拌缓和,通气缓和 发酵罐水平 表面通气,膜透析(扩散)
摇瓶水平:转速快,装量少 需氧量大 通无菌空气并搅拌 发酵罐 气升式
/jpkc
1.氧的传递途径与传质阻力
氧从气泡到细胞的传递过程示意图
/jpkc
/jpkc
若改用总传质系数和总推动力,则在稳定状态时,
nO2 KG (P P ) KL (C CL )
* *
mol KG—以氧分压差为总推动力的总传质系数, (m2 s Pa)
KL —以氧浓度差为总推动力的总传质系数,m/s P*—与液相中氧浓度C相平衡时氧的分压,Pa
(二)可利用氧的特征

只有溶解状态的氧才能被微生物利用。
/jpkc
1.微生物需氧量的表示方式
(1)呼吸强度(比耗氧速率) QO2 :单位质量干菌体在 单位时间内消耗氧的量。 单位:mmolO2/(kg干菌体· h)。 (2) 摄氧率γ (耗氧速率):单位体积培养液在单位时间 内消耗氧的量。单位:mmolO (m3 h) 2
γ=QO2· x x——细胞浓度,kg(干重)/m3
/jpkc
2. QO2与溶氧浓度CL关系
(1) 当CL>Ccr时, QO2= (QO2)m
(2) 当CL< Ccr时, Q O 2
(Q O 2 ) m C L k 0 CL
k0: 亲和常数(半饱和常数), 单位:mol/m3 k0特征: k0越大,亲和能力越小, QO2越小。
扩散方向
双膜理论的气液接触
/jpkc
稳态过程中,在KLa一定时,细胞浓度对呼吸强度的影响
/jpkc
1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9)
气膜传递阻力1/kG 气液界面传递阻力1/kI 供氧方面的阻力 液膜传递阻力1/kL 液相传递阻力1/kLB 细胞或细胞团表面的液膜阻力1/kLC 固液界面传递阻力1/kIS 细胞团内的传递阻力1/kA 耗氧方面的阻力 细胞膜、细胞壁阻力1/kW 反应阻力1/kR
4. 发酵过程耗氧与供氧的动态关系

细胞呼吸的本征要求: x QO2 氧传递特征(发酵罐传递性能)



若需氧量>供氧量,则生产能力受设备限制,需进一步提高 传递能力; 若需氧量<供氧量,则生产能力受微生物限制,需筛选高产 菌:呼吸强,生长快,代谢旺盛。 供氧与耗氧至少必须平衡,此时可用下式表示:
C*—与气相中氧分压P达平衡时氧的浓度,mol/m3
/jpkc
根据亨利定律,与溶解浓度达到平衡的气体分压与该气体 被溶解的分子分数成正比,即:
P HC*
P HCL
*
Pi HCi
H——亨利常数,表示气体溶解于液体的难易程度,与气体、 溶剂种类及温度有关。
/jpkc
பைடு நூலகம்

在双膜之间界面上,氧分压与溶于液体中氧 浓度处于平衡关系 :
Pi Ci
Pi HCi

氧传递过程处于稳定状态时,传质途径上各 点的氧浓度不随时间而变化。
/jpkc
(2) 传质理论

传质达到稳态时,总的传质速率与串联的各步传质速 率相等,则单位接触界面氧的传递速率为 :
* *
/jpkc
OTR—单位体积培养液中氧的传递速率, kmol (m3 h) KLa—以浓度差为推动力的体积溶氧系数, h-1,s-1 KGa—以分压差为推动力的体积溶氧系数,
kmol (m3 h MPa)
/jpkc
/jpkc
3. 培养过程中细胞耗氧的一般规律
A. 培养初期: QO2逐渐增高,x较小。 B. 在对数生长初期:达到(QO2 )m,但此时x较低, γ并不高。 C. 在对数生长后期:达到γm, 此时 QO2< (QO2 )m , x<xm
/jpkc
/jpkc
供氧方面主要阻力是气膜和液膜阻力 耗氧方面主要阻力是细胞团内与细胞膜阻力
相关文档
最新文档