蛋白电泳-轻链病

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• 类似于原发性淀粉样变，只是沉积的轻链片
段主要是κ链，而且以轻链的恒区为主，并
不具有形成淀粉样变纤维所必备的生化特性。 • LCDD引起肾小球硬化的机制亦未完全清楚， 有研究发现LCDD病人的肾小球系膜细胞通 过自分泌机制产生TGF-β，反过来又促进系 膜细胞过度产生基质蛋白，如胶原Ⅳ、层黏 蛋白和纤维连接蛋白
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2、免疫荧光检查：免疫组化单克隆轻链抗体染色可见κ/λ轻 链(80%为κ轻链)沉积于肾小球系膜区(结节内)肾小管基底 膜和血管壁补体成分染色常阴性κ/λ轻链弥漫性地沿肾小管 基底膜呈点状或颗粒状沉积是LCDD)的特点 3、电镜检查：肾小球基底膜内稀疏层和系膜区有颗粒状物质 沉积系膜基质增宽和肾小球基底膜增厚；肾小管基底膜和 肾间质血管基底膜可见密集颗粒电子致密物。 4、X线检查：常见骨骼局限性骨质疏松，溶骨破坏和病理性 骨折。 5、相关检查：尿凝溶蛋白尿氮巨球蛋白、白细胞计数白蛋白 碱性磷酸酶肌氨酸酐蛋白定量（尿）血小板
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免疫固相电泳
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免疫球蛋白重链、轻链及其结构域
• Ig轻链的分子质量约25kD，轻链有两 种：κ链和λ链，κ链：λ链比值约为 2：1。 • Ig重链的分子质量为50-75 kD，重链 有5种，分别是 μ、δ、γ、α、ε链，这五种重链决 定了Ig的类别，即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
免疫球蛋白电泳及轻链沉积病
2015年
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首先澄清“蛋白及电泳”几个概念
• 血清蛋白：白蛋白（A）+ 球蛋白（G）
• 血清球蛋白定量：分为IgG、A、D、E、M五带。
• 血清蛋白电泳：分为A、α1、α2、β、γ五带。 • 如果出现单克龙蛋白γ –(M带-姚明），则需做免疫固相蛋白 电泳(见下文)。----否则不做！！！！！！！ • 免疫球蛋白由4个肽链组成：2个轻链、2个重链（M带5个）。 • 免疫球蛋白包括重链包括： μ、δ、γ、α、ε链 和 免疫球蛋白 轻链包括： κ、λ链
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轻链病与轻链沉积病
• 轻链病(LCD)与轻链沉积病(LCDD)是一种浆
细胞异常增生性疾病。本病多发于中、老年
人(＞45岁)。本病起病多缓慢。
• 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引 起相应的临床表现即为轻链沉积病。 • 约2/3的LCDD患者合并MM。
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轻链病与轻链沉积病-发病机制
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并发症
• 约2/3 LCDD患者合并多发性骨髓瘤，在组织中沉
积的轻链类型与骨髓中异常浆细胞产生相一致，肾
脏损害并发症主要有肾病综合征、慢性间质性肾炎 和急慢性肾功能不全。 • LCDD病人预后一般较差，死亡原因主要是心脏病、 心力衰竭、身功能衰竭或并发感染，一般其1年和5 年生存率分别为90%和70%；而1年和5年的肾存 活率分别为67%和37%。
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轻链病与轻链沉积病-实验室检查
一、实验室检查： 1、血液检查：常见严重贫血、白细胞计数可以正常、增多或减少。 血小板计数大多减低并发骨髓瘤的患者可出现少数骨髓瘤细胞。 患者可出现巨球蛋白血症，多数骨髓瘤患者本-周蛋白可阳 性。 2、其他检查：高钙血症，晚期尤其是肾功能不全的患者血磷可显 著升高，由于骨髓瘤主要是骨质破坏，而无新骨形成，血清碱 性磷酸酶大多正常或轻度增高此与骨转移癌有显著区别。 3、慢性肾功能不全时可出现肾功能异常，BUN＞10.71mmol /L(30mg/dl)，血清Cr＞176.8μmol/L(2mg/dl)。 4、尿液检查：伴或不伴有镜下血尿但尿蛋白较少，但病人尿中可 排出单克隆轻链蛋白尿蛋白电泳上白蛋白较少，而球蛋白显著 增多。
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二、辅助检查
肾活检病理改变可有以下三个特点。 1、光镜检查：肾小球可有多种表现，从正常肾小球到不同程度系膜 增宽硬化以及系膜结节状改变等都可在LCDD患者中见到，其中 系膜结节状改变较为特异，与糖尿病肾病患者典型的 Kimmelstiel-Wilson系膜结节硬化类似，不同在于LCDD的系膜 结节PAS染色更强而银染较弱刚果红染色阴性，后者结节不均一， 有糖尿病史及与抗轻链κ/λ抗血清反应阴性，以及有入球微动脉 管壁透明变性等。另外与糖尿病肾病不同之处还表现在于光镜下 LCDD的肾小球基底膜无增厚，其他肾小球可以完全正常或只有 轻度系膜硬化。肾小球尚可有毛细血管微血管瘤改变。有些肾小 球可有膜增生性特征肾小管表现基膜增厚，值得注意的是MM合 并LCDD时骨髓瘤管型很少见到。
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轻链病与轻链沉积病-疾病治疗
• LCDD与多发性骨髓瘤相似，一般对化疗较敏感， 使用泼尼松加氧芬胂(马法兰)联合化疗可使LCDD 所致肾功能不全得以稳定或得到改善，但已有明显
肾功能不全(血清Cr＞4mg/dl)时才开始治疗是无
效的。 • 另外患者应摄入充足水分防止脱水，以减少游离轻 链在肾内沉积而引起肾小管损害。
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轻链病与轻链沉积病-临床表现
• 轻链病与轻链沉积病起病多缓慢，临床可 表现贫血、发热、周身无力、出血倾向， 浅表淋巴结及肝、脾大，继而出现局限性 或多发性骨痛，病理性骨折或局部肿瘤。 X线检查有局限性骨质破坏或缺损。
• 部分LCDD发展为骨髓瘤，有的存在淋巴 浆细胞性B细胞病变，如淋巴瘤或原发性 巨球蛋白血症。
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2球蛋白：肾上腺不 足、肾上腺皮质类固 醇治疗、糖尿病 、肾 病综合征 球蛋白： 转铁蛋白(Tf) C-反应蛋白 营养不良
球蛋白： 补体C3、C4 IgG、A、M、D、E
深蓝色柱为典型肾病电泳图，方块内文字是与肾病相关电泳增高的意义
正常血清蛋白电泳图形状及其意义 正常血清蛋白电泳图形及意义
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1.50m
正常球蛋白高度
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【醋酸纤维素膜法】[参考值范围] A 白蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白 β 球蛋白 γ 球蛋白 0.62~0.71(62%~71%) 0.03~0.04(3%~4%) 0.06~0.10(6%~10%) 0.07~0.11(7%~11%) 0.09~0.18(9%~18%) 60-5-9-12-20
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2.06m
多克隆球蛋白（M带）
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如果出现单克隆球蛋白（M带） 必须做免疫固相蛋白电泳
• 为了精确识别单克隆区带，样品同时在六条泳道
上进行测试。经电泳后，ELP作为参考泳道以显示 电泳后的蛋白质。 • 其余五条泳道用于鉴定单克隆成分，通过它与抗 血清，γ(IgG)、α(IgA)、μ(IgM)、 重链和κ、λ轻链 （游离和非游离）反应与否进行鉴别。
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பைடு நூலகம்
二、鉴别诊断
1、LCDD与原发性淀粉样变（AD）鉴别要点： (1)LCDD其沉积轻链中约80%为κ链，而AD沉积轻链中约75%为λ 轻链。 (2)典型LCDD中轻链片段是免疫球蛋白的恒区，其典型的单克隆轻 链免疫荧光呈强阳性；而AD沉积的轻链片段是免疫球蛋白的可变区 所以其抗κ和λ轻链抗体免疫荧光只呈现弱阳性。 (3)LCDD的轻链沉积呈颗粒状而非纤维样或β片层结构，不能结合刚 果红和硫黄素；而AD的轻链沉积在电镜下呈纤维样或β片层结构， 能与刚果红结合在偏光显微镜下呈现绿色双折光与硫黄素结合产生 黄绿色荧光。 (4)LCDD常并发于多发性骨髓瘤或其他疾病如淋巴瘤或原发性巨球 蛋白血症等导致单克隆轻链过度产生。 2、LCDD与糖尿病肾病鉴别，根据糖尿病肾病典型的病史及上述肾 活检病理特点不难鉴别。
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哪些病多克隆（Gamma）增高： 1、风湿、免疫性疾病 2、慢性肝病 3、慢性感染、炎症
多克隆典型电泳图
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1.85m
多克隆球蛋白
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哪些病M带增高：
1、骨髓瘤
2、轻链病、重链病、 淋巴瘤、某些白血病。 3、原发巨球蛋白血症
单珠峰电泳图（M带）