白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化
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后，用浓氨水处理，取出，晾干，同样条件下检视。
（4）未使用氨水：吸取以上 3 种溶液各 2 μL，
分别点于同一硅胶 G 板上，展开剂展开，取出，晾
干，同样条件下检视。
1.2.4.2 秦皮鉴别 （1）先用氨水，后展开：取 3.5
mL 白头翁汤，加 10 mL 乙醇，摇匀，作为供试品溶
液。取秦皮对照药材 1 g，加 10 mL 乙醇，加热回
黄柏+秦皮
黄连+秦皮
黄连+黄
平均值
9
4
8
7.5
11
8.5
7
6
8.3
表4
经过称量计算，全
方煎煮产生的沉淀量百分比为 6%。
3
组方沉淀总百分比
14
全方合煎沉淀量结果
氨水添加顺序对黄连、秦皮鉴别的影响结果
总结如表 4。
两两药合煎沉淀量比较
序号
2.2.3
2.3
12
6
黄柏
沉淀百分比为 8.3%。
81
结论
3.1
提取的影响，以沉淀量为考察对象研究白头翁汤最佳配伍方式，从改变氨水添加顺序的角度对方中黄连、秦皮的薄层色谱鉴
别结果的影响进行研究。结果白头翁汤提取 4 次时得膏率最多为 29.47%；全方提取时沉淀量最少为 6%；秦皮的鉴别不需要
用浓氨水预饱和处理，
而黄连鉴别则需要浓氨水预饱和处理后进行展开。
关键词：白头翁汤 ；提取工艺 ；薄层鉴别 ；浓氨水
药物有效成分、优化鉴别方法成为研究热点。本
文旨在通过单煎、两两合煎和全方合煎来比较不
口服液中的君药。黄连苦寒，泻火解燥湿厚肠，
为治痢要药；黄柏清下焦湿热，2 药共助君药清热
解毒，尤能燥湿治痢，共为臣药 [1] 。秦皮为木犀科
同配伍对沉淀量产生的影响来优化煎煮方法，通
白蜡树植物的干燥树皮，味苦，性寒，用于热痢泄
证干燥，称量备用；容器编号；清洗滤布；将硅胶 G
板分割成长宽为 10×5 cm 的小板；校正 pH 计；仪
器的清洗烘干等。
1.2.2 提取次数对出膏率的影响 按处方量称取药
物，加 8 倍量水浸泡 30 min，煎煮，每次 0.5 h，提取
次数分别设定为 2 次、3 次和 4 次。4 层纱布过滤提
取液，合并滤液，冷却后于 4 ℃冰箱过夜，过滤，浓缩
泻，目生翳膜等 [2] ，为白头翁口服液中的佐药。该
顺序，以优化药物薄层鉴别方法 ，进一步推动白
[3]
方证原为治湿热痢疾的首选方剂 。近年来随着
研究者对白头翁汤的深入研究，在兽医临床上也
逐渐广泛应用。肖琛闻等 [4] 曾采用白头翁汤治疗
鸭疫里默氏菌病，结果该方能改善症状并减少死
收稿日期：2013-11-25
cussed the influence of the adding order of ammonia to coptis chinensis，cortex fraxini on TLC identification result. The pulsatilla de⁃
coction extract yielding rate was 29.47% for four times extraction，holo-formula extraction gets the least precipitation amount 6%，cor⁃
冷却至室温，摇匀后取 10 mL 加入刻度离心管，离心
5 min（4 000 r/min），观察计算各药沉淀百分比（沉淀
百分比=沉淀干重/药材干重）。求和计算占取全方
剂含量的沉淀百分比。
1.2.3.2
两两药合煎
将 4 味药按处方量两两混
合，共搭配 3 组，分别加入 8 倍量水，以下操作同
上，计算两两药沉淀百分比后 ，求取每组全方剂
Chinese Journal of Veterinary Medicine
表2
药材
白头翁
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
单味药水煎沉淀量比较
单药沉淀百分比 / %
27
组方沉淀总百分比 / %
3
秦皮
12
黄连
表3
混合药材
1
白头翁+黄连
2
白头翁+黄柏
3
白头翁+秦皮
沉淀百分比 / %
流 10 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。吸取以
上两种溶液各 2 μL，分别点于同一硅胶 G 板上，
先用浓氨水饱和蒸气处理，再以正丁醇-三氯甲
烷-甲苯-甲酸（8∶1∶1∶1）为展开剂展开，取出，晾
干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
（2）氨水与展开剂同置：方法同 2.4.1.2。
（3）先展开，后用氨水：方法同 2.4.1.3。
coction TLC identification condition. The experiment evaluated the influence of extraction times for dry extract yielding rate，re⁃
searched on the pulsatilla decoction best compatibility mode by investigating precipitation amount as the inspection object，and dis⁃
公司）；DS-671 型电子称（上海金山亭林工业开发
区）；HC-3018 型普通高速离心机（安徽科大创新
股份有限公司）；5.0 μL 微量进样器（上海安亭微
量进样器厂）；KMD 型控温电热套（鄄城华鲁电热
仪器有限公司）。
1.2
1.2.1
方法
试验前准备
药材预处理：将秦皮、黄连、
黄柏 3 种药材分割成长约 0.5 cm 左右的块段，保
Chinese Journal of Veterinary Medicine
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
氨 水 添 加 顺 序 对 黄 连 、秦 皮 薄 层 鉴 别 的
影响
1.2.4.1 黄连鉴别 （1）先氨水处理，后展开：取 1.5
mL 白头翁汤，加 10 mL 甲醇，摇匀，作为供试品溶
tex fraxini identify do not need preliminary saturation treatment by using ammonia，but coptis chinensis requires preliminary satura⁃
tion treatment and expansion.
剂，始出于张仲景的《伤寒论》。该方由白头翁 15
g、黄 连 6 g、黄 柏 12 g、秦 皮 12 g 4 味 药 组 成 。 其
中，白头翁为毛莨科多年生草本植物白头翁的干
燥根，具有清热解毒，凉血止痢之功效，为白头翁
亡率。祝国强等 [5] 试验证明，白头翁汤对沙门菌
接种的鸡胚有较好的保护作用。
随着该药的广泛生产使用，进一步充分提取
中图分类号：S859.3
文献标志码：
A
文章编号：
0529-6005（2014）10-0079-03
Research on the extraction process and optimization of
TLC identification of the pulsatilla decoction
ZHANG Qi-di ，ZHANG Hui ，ZOU Ming ，SHAN Hu
提取次数对出膏率的影响
不同提取次数
对出膏率有一定影响，本试验最佳提取次数为 4
次，出膏率最高为 29.47%。
3.2
药材配伍对沉淀量的影响
药材配伍不同，
沉淀量大小有所差异。结果显示，药物两两合煎
沉淀量较各药单煎沉淀量少，而全方煎煮产生的
沉淀百分比最少，且操作简单。
氨水添加顺序对黄连、
（4）未使用氨水：方法同 2.4.1.4。
2
2.1
结果与分析
提取次数对出膏率的影响
表1
不同提取次数
提取次数对得膏率的影响
加水量 / 倍
提取时间 / h
提取次数 / 次
出膏率 / %
8
0.5
3
26.75
8
8
0.5
0.5
2
4
21.30
29.47
下所得的出膏率值，结果见表 1。
通过称量、计算，得出提取次数为 4 次时出膏
液。取 0.2 g 黄连对照药材，加 10 mL 甲醇，加热回
流 15 min，过滤，滤液作为对照药材溶液。取盐酸
小檗碱对照品 2.5 mg，加 5 mL 甲醇，作为对照品溶
液。吸取以上 3 种溶液各 2 μL，分别点于同一硅
胶 G 板上，先用浓氨水饱和蒸气处理，后以苯-乙酸
乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12∶6∶3∶3∶1）为展
头 翁 汤 在 临 床 上 的 应 用 ，来 更 好 地 适 应 市 场 的
需求。
1
1.1
材料与方法
1.1.1
试验材料
药材与试剂
黄连对照药材（批号：Z00107
04）、秦 皮 对 照 药 材（批 号 ：Z0070607）、盐 酸 小 檗
碱对照品（批号：Z0220712）、白头翁皂苷 B4 对照
品（批号：111766-200601），均购自中国兽医药品
（College of Animal Science and Veterinary，
Qingdao Agricultural University，
Qingdao 266109，
China)
Abstract: This study is aimed to improve the extraction of pulsatilla decoction effective constituent and optimize pulsatilla de⁃
的沉淀比例，并对 3 组处方沉淀百分比求平均。
1.2.3.3 全方合煎 按处方量称取药物，加水360 mL，
浸泡 30 min 后合煎水提 3 次，每次 0.5 h，过滤，合并
滤液，浓缩至 45 mL，摇匀后取 10 mL 于刻度离心管，
4 000 r/min 离心 5 min，计算沉淀百分比。
1.2.4
Chinese Journal of Veterinary Medicine
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
79
白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化
张启迪 ，张
慧 ，邹
明 ，单
虎
（青岛农业大学动物科技学院 ，山东 青岛 266109）
摘要：为了提高白头翁汤有效成分的提取，优化白头翁汤薄层色谱鉴别条件。本试验以出膏率来评价提取次数对该方
Key words: Pulsatilla decoction ；extracting process ；TLC identification ；concentrated ammonia
Corresponding author: SHAN Hu
白 头 翁 汤 为 清 热 解 毒 、凉 血 止 痢 的 中 药 汤
监察所；药材白头翁、黄柏、黄连和秦皮，均购自
80
安徽广印堂制药有限公司；乙醇、甲醇、苯、甲苯、
甲酸、三氯甲烷、乙酸乙酯、异丙醇、正丁醇、浓氨
水、浓硫酸等均为分析纯。
1.1.2
仪器设备
CB10-UV6E1 型多功能暗箱式
来自百度文库
紫 外 分 析 仪（北 京 赛 百 奥 科 技 有 限 公 司）；GZX-
9146MBE 型数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限
至约 60 mL 后倒入垫有锡纸的托盘，105 ℃烘箱烘至
恒重，称量干膏重量并计算出膏率（出膏率=干膏重
量/全方药物干重×100%）。
1.2.3
药材配伍对沉淀量的影响
1.2.3.1 单味药水煎 遵照处方中药物含量称取各
药材，每种药各加入 8 倍量水，浸泡 30 min 后均煎煮
3 次，每次 0.5 h，水提液滤过后合并，浓缩至 25 mL，
率最高为 29.47%。
2.2 药材配伍对沉淀量的影响
2.2.1 单味药水提取沉淀量结果 结果见表 2。
经称量计算单味药水提所得沉淀量占全方剂
的百分比为 12%。
2.2.2 两两药合煎沉淀量结果 结果见表 3。
经过称量计算，三组两两合煎的全方剂沉淀
百分比分别为 9%、7.5%、8.5%，对其求平均，最终
开剂展开，取出，晾干，检视（365 nm 紫外光灯下）。
（2）氨水与展开剂同置：吸取以上 3 种溶液各
2 μL，分 别 点 于 同 一 硅 胶 G 板 上 ，将 浓 氨 水 和 展
开剂同置，展开，取出，晾干，同样条件下检视。
（3）先展开，后氨水处理：吸取以上 3 种溶液
各 2 μL，分别点于同一硅胶 G 板上，展开剂展开
基金项目：十二五国家科技支撑计划（2011BAD34B03）
作者简介：张启迪（1975-），男，副教授，主要从事兽医药理与毒
理学研究，E-mail: zqdcau@163.com
通讯作者：单虎，E-mail: shanhu67@163.com
过不同提取次数得到的出膏率筛选最佳提取工
艺，对各药材进行薄层色谱鉴别时改变氨水添加
（4）未使用氨水：吸取以上 3 种溶液各 2 μL，
分别点于同一硅胶 G 板上，展开剂展开，取出，晾
干，同样条件下检视。
1.2.4.2 秦皮鉴别 （1）先用氨水，后展开：取 3.5
mL 白头翁汤，加 10 mL 乙醇，摇匀，作为供试品溶
液。取秦皮对照药材 1 g，加 10 mL 乙醇，加热回
黄柏+秦皮
黄连+秦皮
黄连+黄
平均值
9
4
8
7.5
11
8.5
7
6
8.3
表4
经过称量计算，全
方煎煮产生的沉淀量百分比为 6%。
3
组方沉淀总百分比
14
全方合煎沉淀量结果
氨水添加顺序对黄连、秦皮鉴别的影响结果
总结如表 4。
两两药合煎沉淀量比较
序号
2.2.3
2.3
12
6
黄柏
沉淀百分比为 8.3%。
81
结论
3.1
提取的影响，以沉淀量为考察对象研究白头翁汤最佳配伍方式，从改变氨水添加顺序的角度对方中黄连、秦皮的薄层色谱鉴
别结果的影响进行研究。结果白头翁汤提取 4 次时得膏率最多为 29.47%；全方提取时沉淀量最少为 6%；秦皮的鉴别不需要
用浓氨水预饱和处理，
而黄连鉴别则需要浓氨水预饱和处理后进行展开。
关键词：白头翁汤 ；提取工艺 ；薄层鉴别 ；浓氨水
药物有效成分、优化鉴别方法成为研究热点。本
文旨在通过单煎、两两合煎和全方合煎来比较不
口服液中的君药。黄连苦寒，泻火解燥湿厚肠，
为治痢要药；黄柏清下焦湿热，2 药共助君药清热
解毒，尤能燥湿治痢，共为臣药 [1] 。秦皮为木犀科
同配伍对沉淀量产生的影响来优化煎煮方法，通
白蜡树植物的干燥树皮，味苦，性寒，用于热痢泄
证干燥，称量备用；容器编号；清洗滤布；将硅胶 G
板分割成长宽为 10×5 cm 的小板；校正 pH 计；仪
器的清洗烘干等。
1.2.2 提取次数对出膏率的影响 按处方量称取药
物，加 8 倍量水浸泡 30 min，煎煮，每次 0.5 h，提取
次数分别设定为 2 次、3 次和 4 次。4 层纱布过滤提
取液，合并滤液，冷却后于 4 ℃冰箱过夜，过滤，浓缩
泻，目生翳膜等 [2] ，为白头翁口服液中的佐药。该
顺序，以优化药物薄层鉴别方法 ，进一步推动白
[3]
方证原为治湿热痢疾的首选方剂 。近年来随着
研究者对白头翁汤的深入研究，在兽医临床上也
逐渐广泛应用。肖琛闻等 [4] 曾采用白头翁汤治疗
鸭疫里默氏菌病，结果该方能改善症状并减少死
收稿日期：2013-11-25
cussed the influence of the adding order of ammonia to coptis chinensis，cortex fraxini on TLC identification result. The pulsatilla de⁃
coction extract yielding rate was 29.47% for four times extraction，holo-formula extraction gets the least precipitation amount 6%，cor⁃
冷却至室温，摇匀后取 10 mL 加入刻度离心管，离心
5 min（4 000 r/min），观察计算各药沉淀百分比（沉淀
百分比=沉淀干重/药材干重）。求和计算占取全方
剂含量的沉淀百分比。
1.2.3.2
两两药合煎
将 4 味药按处方量两两混
合，共搭配 3 组，分别加入 8 倍量水，以下操作同
上，计算两两药沉淀百分比后 ，求取每组全方剂
Chinese Journal of Veterinary Medicine
表2
药材
白头翁
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
单味药水煎沉淀量比较
单药沉淀百分比 / %
27
组方沉淀总百分比 / %
3
秦皮
12
黄连
表3
混合药材
1
白头翁+黄连
2
白头翁+黄柏
3
白头翁+秦皮
沉淀百分比 / %
流 10 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。吸取以
上两种溶液各 2 μL，分别点于同一硅胶 G 板上，
先用浓氨水饱和蒸气处理，再以正丁醇-三氯甲
烷-甲苯-甲酸（8∶1∶1∶1）为展开剂展开，取出，晾
干，置紫外光灯（365 nm）下检视。
（2）氨水与展开剂同置：方法同 2.4.1.2。
（3）先展开，后用氨水：方法同 2.4.1.3。
coction TLC identification condition. The experiment evaluated the influence of extraction times for dry extract yielding rate，re⁃
searched on the pulsatilla decoction best compatibility mode by investigating precipitation amount as the inspection object，and dis⁃
公司）；DS-671 型电子称（上海金山亭林工业开发
区）；HC-3018 型普通高速离心机（安徽科大创新
股份有限公司）；5.0 μL 微量进样器（上海安亭微
量进样器厂）；KMD 型控温电热套（鄄城华鲁电热
仪器有限公司）。
1.2
1.2.1
方法
试验前准备
药材预处理：将秦皮、黄连、
黄柏 3 种药材分割成长约 0.5 cm 左右的块段，保
Chinese Journal of Veterinary Medicine
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
氨 水 添 加 顺 序 对 黄 连 、秦 皮 薄 层 鉴 别 的
影响
1.2.4.1 黄连鉴别 （1）先氨水处理，后展开：取 1.5
mL 白头翁汤，加 10 mL 甲醇，摇匀，作为供试品溶
tex fraxini identify do not need preliminary saturation treatment by using ammonia，but coptis chinensis requires preliminary satura⁃
tion treatment and expansion.
剂，始出于张仲景的《伤寒论》。该方由白头翁 15
g、黄 连 6 g、黄 柏 12 g、秦 皮 12 g 4 味 药 组 成 。 其
中，白头翁为毛莨科多年生草本植物白头翁的干
燥根，具有清热解毒，凉血止痢之功效，为白头翁
亡率。祝国强等 [5] 试验证明，白头翁汤对沙门菌
接种的鸡胚有较好的保护作用。
随着该药的广泛生产使用，进一步充分提取
中图分类号：S859.3
文献标志码：
A
文章编号：
0529-6005（2014）10-0079-03
Research on the extraction process and optimization of
TLC identification of the pulsatilla decoction
ZHANG Qi-di ，ZHANG Hui ，ZOU Ming ，SHAN Hu
提取次数对出膏率的影响
不同提取次数
对出膏率有一定影响，本试验最佳提取次数为 4
次，出膏率最高为 29.47%。
3.2
药材配伍对沉淀量的影响
药材配伍不同，
沉淀量大小有所差异。结果显示，药物两两合煎
沉淀量较各药单煎沉淀量少，而全方煎煮产生的
沉淀百分比最少，且操作简单。
氨水添加顺序对黄连、
（4）未使用氨水：方法同 2.4.1.4。
2
2.1
结果与分析
提取次数对出膏率的影响
表1
不同提取次数
提取次数对得膏率的影响
加水量 / 倍
提取时间 / h
提取次数 / 次
出膏率 / %
8
0.5
3
26.75
8
8
0.5
0.5
2
4
21.30
29.47
下所得的出膏率值，结果见表 1。
通过称量、计算，得出提取次数为 4 次时出膏
液。取 0.2 g 黄连对照药材，加 10 mL 甲醇，加热回
流 15 min，过滤，滤液作为对照药材溶液。取盐酸
小檗碱对照品 2.5 mg，加 5 mL 甲醇，作为对照品溶
液。吸取以上 3 种溶液各 2 μL，分别点于同一硅
胶 G 板上，先用浓氨水饱和蒸气处理，后以苯-乙酸
乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液（12∶6∶3∶3∶1）为展
头 翁 汤 在 临 床 上 的 应 用 ，来 更 好 地 适 应 市 场 的
需求。
1
1.1
材料与方法
1.1.1
试验材料
药材与试剂
黄连对照药材（批号：Z00107
04）、秦 皮 对 照 药 材（批 号 ：Z0070607）、盐 酸 小 檗
碱对照品（批号：Z0220712）、白头翁皂苷 B4 对照
品（批号：111766-200601），均购自中国兽医药品
（College of Animal Science and Veterinary，
Qingdao Agricultural University，
Qingdao 266109，
China)
Abstract: This study is aimed to improve the extraction of pulsatilla decoction effective constituent and optimize pulsatilla de⁃
的沉淀比例，并对 3 组处方沉淀百分比求平均。
1.2.3.3 全方合煎 按处方量称取药物，加水360 mL，
浸泡 30 min 后合煎水提 3 次，每次 0.5 h，过滤，合并
滤液，浓缩至 45 mL，摇匀后取 10 mL 于刻度离心管，
4 000 r/min 离心 5 min，计算沉淀百分比。
1.2.4
Chinese Journal of Veterinary Medicine
中国兽医杂志 2014 年（第 50 卷）第 10 期
79
白头翁汤提取工艺的研究及薄层鉴别优化
张启迪 ，张
慧 ，邹
明 ，单
虎
（青岛农业大学动物科技学院 ，山东 青岛 266109）
摘要：为了提高白头翁汤有效成分的提取，优化白头翁汤薄层色谱鉴别条件。本试验以出膏率来评价提取次数对该方
Key words: Pulsatilla decoction ；extracting process ；TLC identification ；concentrated ammonia
Corresponding author: SHAN Hu
白 头 翁 汤 为 清 热 解 毒 、凉 血 止 痢 的 中 药 汤
监察所；药材白头翁、黄柏、黄连和秦皮，均购自
80
安徽广印堂制药有限公司；乙醇、甲醇、苯、甲苯、
甲酸、三氯甲烷、乙酸乙酯、异丙醇、正丁醇、浓氨
水、浓硫酸等均为分析纯。
1.1.2
仪器设备
CB10-UV6E1 型多功能暗箱式
来自百度文库
紫 外 分 析 仪（北 京 赛 百 奥 科 技 有 限 公 司）；GZX-
9146MBE 型数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限
至约 60 mL 后倒入垫有锡纸的托盘，105 ℃烘箱烘至
恒重，称量干膏重量并计算出膏率（出膏率=干膏重
量/全方药物干重×100%）。
1.2.3
药材配伍对沉淀量的影响
1.2.3.1 单味药水煎 遵照处方中药物含量称取各
药材，每种药各加入 8 倍量水，浸泡 30 min 后均煎煮
3 次，每次 0.5 h，水提液滤过后合并，浓缩至 25 mL，
率最高为 29.47%。
2.2 药材配伍对沉淀量的影响
2.2.1 单味药水提取沉淀量结果 结果见表 2。
经称量计算单味药水提所得沉淀量占全方剂
的百分比为 12%。
2.2.2 两两药合煎沉淀量结果 结果见表 3。
经过称量计算，三组两两合煎的全方剂沉淀
百分比分别为 9%、7.5%、8.5%，对其求平均，最终
开剂展开，取出，晾干，检视（365 nm 紫外光灯下）。
（2）氨水与展开剂同置：吸取以上 3 种溶液各
2 μL，分 别 点 于 同 一 硅 胶 G 板 上 ，将 浓 氨 水 和 展
开剂同置，展开，取出，晾干，同样条件下检视。
（3）先展开，后氨水处理：吸取以上 3 种溶液
各 2 μL，分别点于同一硅胶 G 板上，展开剂展开
基金项目：十二五国家科技支撑计划（2011BAD34B03）
作者简介：张启迪（1975-），男，副教授，主要从事兽医药理与毒
理学研究，E-mail: zqdcau@163.com
通讯作者：单虎，E-mail: shanhu67@163.com
过不同提取次数得到的出膏率筛选最佳提取工
艺，对各药材进行薄层色谱鉴别时改变氨水添加