活细胞工作站的操作
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活细胞工作站的操作
1、打开电脑与仪器,让其热机3小时以上,降低焦距的变动概率
2、将准备好的24孔板放入小培养箱中
3、软件使用流程图解
打开xcellence rt 程序,进入以下界面
如下图,先点Acquire,再点Camera Control,导出Camera Control模块。
以下是Camera Control模块
然后再分别点以下图标:从左到右分别是Illumination Settings , Microscope Settings , Motorized Stage ,Experiment Manager.
然后可以导出以下几个模块
让活细胞工作站按自己想法运行拍照记录还需要在Experiment Manager模块上做简单的编程,下图是一个示例:
一、实验结果的分析(示例)
如图所示,打开数据库,打开记录保存的文件
打开定义ROIs模块。如下图
在视频中画两个ROIs,一个是整个画面,一个是在没有细胞的地方当作背景值然后如下图,在Process菜单栏里找到Background Subtraction,进行对背景荧光值的扣除。
然后就会弹出以下窗口,选择要扣除的ROIs
点击OK,可得已扣除背景的视频。如下图
然后如下图,点Measure菜单栏,然后点Kinetics动力学?,对视频中的荧光值进行测量。得出如下图,两个图表数据和自生成两个曲线(分别是绿色荧光和红色荧光的值)???????????????????????????????????????????????????????????????????
数据表格可以导成EXCEL格式,然后再用EXCEL的图表进行统一分析。
视频的导出:如下图,点File菜单栏,然后点Export to A VI
弹出如下图的窗口
点OK后进入下图窗口
再点OK即可导出视频。