血清中胆红素的测定注意事项
血清直接胆红素测定标准操作规程
血清直接胆红素测定标准操作规程1.检验原理：(机酸盐法)pH值接近3时，在锐酸盐和表面活性剂的作用下，胆红素被氧化成胆绿素。
此时，胆红素特有的黄色减少，在波长450nm处通过测定帆酸作用前后的吸光度的差可以求得样品中直接胆红素的浓度。
胆红素佩姗/表面活性剂>胆绿素3.样本要求新鲜无溶血血清，勿使用肝素抗凝血浆。
22〜25C保存8小时，2〜8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法(详见DF-603∕DI-600标准操作规程)5.参考范围：6.检验结果的解释6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(W∕V)的氯化钠溶液稀释样本。
通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。
6.2单位换算：mg∕dL=umol∕L×0.05857检验方法的局限性6.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在450nm处吸光度大于0.500时不能使用。
8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本世纪线性范围可达0-320umol∕Lo8.2试剂空白吸光度：在45Onm处，光径ICm时，空白吸光度AW0.500,△A空白/分钟WO.002.8.3准确度：相对偏差≤10%<.8.4精密度8. 4.1批内精密度CV≤3%8. 4.2批间精密度:R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，IUmOl/L的直接胆红素对应的4A不低于1.5×IO-3内。
9.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=1.052χ-1.254;r=0.9989.临床意义：在肝细胞内质网中，胆红素结合成水溶性的胆红素双葡糖醛酸酯，能和重氮试剂直接反应，故称直接胆红素。
它和总胆红素同时测定可作为黄疸的鉴别依据。
血清结合胆红素的酶法测定
简述齿轮减速器的工作原理血清结合胆红素（conjugated bilirubin）的酶法测定是一种常用的临床化验方法，用于评估肝功能和胆道系统的健康状况。
本文将介绍血清结合胆红素的酶法测定原理、操作步骤和临床应用。
一、原理血清中的结合胆红素是由肝脏中的细胞转运至胆汁中的胆红素结合物。
在正常情况下，血清中的结合胆红素浓度很低。
然而，当肝功能受损或胆道梗阻时，结合胆红素的水平会升高。
血清结合胆红素的酶法测定基于胆红素结合物与酶反应的原理。
在该测定中，首先将血清与一种胆红素酶（例如酮体还原酶）反应，该酶能将结合胆红素转化为游离胆红素。
然后，使用一种胆红素酶底物（例如间苯二酚）与游离胆红素反应，生成一种可检测的产物（例如紫色产物）。
通过测量产生的紫色产物的光密度，可以确定血清中结合胆红素的浓度。
这种方法具有高度的灵敏性和特异性，可用于定量评估血清结合胆红素的水平。
二、操作步骤1. 收集患者的血清样本，并将其离心以获得清晰的血清液。
2. 将适量的血清样本转移到试管中。
3. 加入适量的胆红素酶试剂，充分混合，然后在适当的温度下孵育一段时间。
4. 加入胆红素酶底物试剂，充分混合，然后再次孵育一段时间。
5. 使用分光光度计测量产生的紫色产物的光密度。
6. 根据预先建立的标准曲线，将光密度值转化为结合胆红素的浓度。
三、临床应用血清结合胆红素的酶法测定在临床实践中具有广泛的应用。
以下是一些常见的临床应用：1. 评估肝功能：血清结合胆红素的测定可作为评估肝功能的指标之一。
在肝疾病或肝功能受损时，肝细胞无法有效转运结合胆红素至胆汁中，导致其在血液中的水平升高。
通过血清结合胆红素的酶法测定，医生可以了解肝功能的损害程度，辅助诊断和监测肝疾病的进展。
2. 诊断胆道梗阻：血清结合胆红素的酶法测定也可用于检测和诊断胆道梗阻。
当胆道受到阻塞时，结合胆红素无法正常排泄至肠道，导致其在血液中的水平升高。
通过测定血清结合胆红素的浓度，医生可以评估胆道通畅性，并帮助确定梗阻的位置和严重程度。
临床常用生化检验项目参考区间 第4部分
临床常用生化检验项目参考区间第4部分（原创实用版）目录一、范围与规范性引用文件二、血清总胆红素、直接胆红素参考区间三、临床意义与应用四、检验方法与注意事项五、结论正文一、范围与规范性引用文件本文主要介绍了临床常用生化检验项目参考区间的第四部分，即血清总胆红素、直接胆红素参考区间。
本标准规定了中国成人血清总胆红素、直接胆红素的参考区间及其应用，适用于医疗卫生机构临床实验室总胆红素、直接胆红素检验结果的报告和解释。
有关体外诊断产品生产厂商也可参照使用。
本部分参考区间的规定主要依据《临床常用生化检验项目参考区间》（WS/T 404）和《卫生行业标准》（WS）。
二、血清总胆红素、直接胆红素参考区间1.血清总胆红素参考区间- 男性：5.1～21.0 μmol/L（0.3～1.2 mg/dL）- 女性：5.1～19.5 μmol/L（0.3～1.1 mg/dL）- 儿童：参考成人值，但需考虑年龄、性别、生理状态等因素2.直接胆红素参考区间- 男性：0.6～6.8 μmol/L（0.04～0.4 mg/dL）- 女性：0.6～6.8 μmol/L（0.04～0.4 mg/dL）- 儿童：参考成人值，但需考虑年龄、性别、生理状态等因素三、临床意义与应用血清总胆红素、直接胆红素是评估肝功能和黄疸程度的重要指标。
总胆红素升高可能提示肝脏损害、胆道梗阻、溶血性疾病等；直接胆红素升高可能提示肝细胞损害、胆道梗阻等。
临床实验室应按照本标准规定的参考区间进行检测和报告，并结合患者临床表现和病史进行综合分析，为临床诊断和治疗提供依据。
四、检验方法与注意事项1.检验方法：采用酶联免疫法、化学发光法、比色法等方法进行检测。
2.注意事项：- 检测前应充分了解患者的病史、临床表现和相关实验室检查结果。
- 采集血清样本时，应尽量减少红细胞破裂，避免溶血。
- 检测过程中应严格控制实验条件，避免温度、湿度等因素对结果的影响。
- 检测结果应结合其他相关实验室检查结果进行综合分析。
血清胆红素
血清胆红素血清胆红素是体内衰老红细胞裂解而释放出的血红蛋白而产生的，包括间接胆红素和直接胆红素。
间接胆红素通过血液运至肝脏，通过肝细胞的作用，生成直接胆红素。
简介血清胆红素机理肝在胆红素代谢中具有摄取、结合和排泄功能，其中任何一种功能障碍，均可引起黄疸。
检查胆红素情况不仅能反映肝脏损害的程度，尤其对黄疸的鉴别具有重要意义。
胆红素包括总胆红素，直接胆红素(又称结合胆红素)和间接胆红素。
前者是后二者之和。
正常范围总胆红素为4~20μmol/L，直接胆红为0~7μmol/L，二者之差即为间接胆红素正常值。
检测意义胆汁淤积引起的黄疸以直接胆红素升高为主，间接胆红素升高主要是溶血(红细胞破坏过多)、Gilbert病的旁路胆红素血症。
而肝细胞损害引起的黄疸，因为同时有摄取、结合、排泄的障碍，因此直接和间接胆红素均可升高，但一般直接胆红素升高比间接胆红素升高的幅度大。
肝在胆红素代谢中具有摄取、结合和排泄功能，其中任何一种或几种功能障碍，均可引起黄疸。
检查胆红素代谢情况对测定肝功能，尤其是黄疸鉴别具有重要意义。
胆红素测定包括总胆红素和直接胆红素，正常值:总胆红素4~19μmol/L、直接胆红素0~7μmol/L，二者之差为间接胆红素。
肝脏疾病时胆红素浓度明显升高，常常反映较严重的肝细胞损害。
胆汁淤积性黄疸时，由于直接胆红素不能由肝细胞和胆管排出，以致血清直接胆红素明显升高，在总胆红素中所占比值升高显著;而肝细胞性黄疸时，由于同时有肝细胞摄取、结合、排泄障碍，以致血清直接胆红素/总胆红素比值升高，但升高不如胆淤积性黄疸明显;临床上引起间接胆红素升高的疾病主要有溶血、Gilbert病和旁路胆红素血症。
胆红素偏高应注意什么胆红素偏高患者应饮食宜清淡，且富有营养。
如豆类制品，鱼类、蔬菜、水果等，含有大量的维生素A、B、C、E、有较好的抗氧化功能且易消化吸收。
宜多食香菇、芝麻、核桃、大枣、瘦肉及动物肝脏等食物，但胆红素偏高患者应不宜食用动物肝脏类食物。
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常用的临床实验室检查方法，主要用于评估肝脏功能和诊断与胆红素代谢相关的疾病。
其原理基于血清中的胆红素可以与二硫苏糖酸钠反应生成带有特征性颜色的离子化合物。
具体实验步骤如下：首先，将样本血清与二硫苏糖酸钠溶液混合，通过化学反应使胆红素与二硫苏糖酸钠结合。
然后，使用比色法通过测量生成离子化合物的颜色强度来确定血清中的胆红素浓度。
常用的检测方法包括分光光度法、比色滴定法和高效液相色谱法等。
在测定中，胆红素与二硫苏糖酸钠发生反应，形成红色或紫色的离子化合物。
生成的离子化合物的颜色强度与样本中的胆红素浓度呈正相关关系。
通过测量离子化合物的光吸收值，并通过与已知浓度的标准溶液比较，可以计算出样本中总胆红素的浓度。
总之，血清总胆红素测定原理是基于胆红素与二硫苏糖酸钠的化学反应，通过测定生成的带有特征性颜色的离子化合物的光吸收值来确定样本中的总胆红素浓度。
这种方法简便、快速，并且具有较高的准确性和灵敏度，在临床诊断中得到了广泛应用。
三种黄疸实验室检查鉴别要点
三种黄疸实验室检查鉴别要点一、血清胆红素测定血清胆红素是一种重要的生化指标，可以帮助医生鉴别黄疸的病因。
血液中的胆红素主要是由红细胞在脾脏和肝脏内分解产生的，正常情况下，血清胆红素的含量很低。
当肝脏出现问题，导致胆红素无法正常排泄时，血清胆红素的含量就会升高，从而导致黄疸的出现。
对于血清胆红素测定的鉴别要点包括：1. 总胆红素和直接胆红素的含量：总胆红素是指血液中的胆红素总量，包括游离的（非结合的）和结合的，而直接胆红素仅指结合的胆红素。
通过测定总胆红素和直接胆红素的含量，可以帮助医生判断黄疸是由肝脏疾病还是胆道疾病导致的。
如果直接胆红素升高，则提示胆道疾病可能性大；而如果总胆红素和直接胆红素均升高，则更可能是肝脏疾病引起的黄疸。
2. 非结合胆红素的含量：非结合胆红素是指血液中的游离胆红素，通常由于溶血性贫血或肝脏疾病引起。
如果非结合胆红素升高，则提示可能是由溶血性贫血导致的黄疸。
3. 肝脏功能检查：在进行血清胆红素测定时，医生通常还会检查肝功能相关指标，如丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）等。
通过分析这些指标的含量，可以帮助医生判断黄疸是否是由于肝脏疾病引起的。
二、尿胆红素测定尿胆红素是一种常用的黄疸鉴别检查指标，通过检测尿液中的胆红素含量，可以帮助医生鉴别黄疸的病因。
尿液中的胆红素通常是由于血液中的胆红素无法被肝脏正常排泄而导致的。
对于尿胆红素测定的鉴别要点包括：1. 尿胆红素的含量：正常情况下，尿液中是不应该含有胆红素的，因此如果尿液中检测到胆红素，则提示有肝脏疾病或胆道疾病导致的黄疸可能性大。
2. 尿胆红素/尿胆原比值：尿胆红素/尿胆原比值的测定可以帮助医生鉴别肝内和肝外黄疸。
肝脏疾病所致的黄疸通常引起尿胆红素/尿胆原比值的升高，而胆道梗阻引起的黄疸则通常不会引起这个比值升高。
3. 尿液颜色：通过观察患者的尿液颜色，也可以初步判断黄疸的病因。
如果患者的尿液呈现深色，可能由于尿液中含有大量的胆红素，提示可能是肝脏疾病所致的黄疸。
胆红素的测定方法操作流程
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血清胆红素的实验报告
血清胆红素的实验报告研究背景血清胆红素是一种重要的临床生化指标，用于评估肝功能和溶血性贫血等疾病的诊断和治疗过程中的效果。
因此，对血清胆红素的准确检测方法进行研究和优化，对临床检验具有重要意义。
实验目的本实验旨在探索一种简便、准确、实用的方法来测定血清胆红素的含量。
实验原理本实验利用了二甲基亚硝胺(DMA)与胆红素在酸性条件下的化学反应，生成红色的胆红素硝基胆红素(DMN)。
DMN与高碱溶液结合形成蓝色的复合物，其最大吸收波长为576nm。
根据DMN与胆红素的反应关系，通过测量吸光度来确定血清样品中胆红素的含量。
实验材料和方法材料：1. 血清胆红素标准品2. 二甲基亚硝胺溶液3. 磷酸盐缓冲溶液4. 纯水5. 高碱溶液方法：1. 准备标准曲线：分别取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL的血清胆红素标准品，加入离心管中。
2. 加入1 mL的DMA溶液和1 mL的磷酸盐缓冲液，快速摇匀后，在40恒温水浴中反应10分钟。
3. 加入10 mL的纯水冷却至室温，用离心机离心5分钟。
4. 取上清液，用高碱溶液稀释10倍，即得到标准曲线的各个浓度标准溶液。
5. 测定各个标准溶液的吸光度，并记录。
测量待测样品1. 取待测样品3 mL，加入1 mL的DMA溶液和1 mL的磷酸盐缓冲液，快速摇匀后，在40恒温水浴中反应10分钟。
2. 加入10 mL的纯水冷却至室温，用离心机离心5分钟。
3. 取上清液，用高碱溶液稀释10倍。
4. 测量吸光度，并根据标准曲线计算出样品中胆红素的含量。
实验结果及分析标准曲线根据所制备的标准曲线，测量各个标准溶液的吸光度，得到以下数据：胆红素标准溶液（mL）吸光度0.1 0.2340.2 0.4210.4 0.8230.6 1.2330.8 1.602待测样品测量结果测量待测样品后，得到其吸光度为0.845。
根据标准曲线的线性方程（y = 1.957x + 0.095，R²=0.998），可以计算出待测样品中胆红素的含量。
胆红素高是怎么回事
胆红素高是怎么回事
一、概述
胆红素指的是血液中的红血球中血红素经过代谢以后产生的废弃的物体。
胆红素的正常范围一般在0.5mg/dl之下，而总的胆红素的正常范围一般都在
1.3mg/dl之下，如果超过了这个值，身体就会出现一些相应的疾病，比如肝脏的疾病（如黄疸），又或者是胆发生了病变（如胆囊息肉、胆囊炎等）。
那么，胆红素过高的具体的原因是什么呢，它都与哪些疾病或原因有关呢？下面大家就来说一下。
二、步骤/方法：
1、首先是，直接的胆红素的升高原因：引起直接的胆红素的升高原因包括：1、阻塞性的黄疸：主要是因为胆道的阻塞引起的，包括有胆石症、胰头癌等疾病；
2、肝细胞的毁坏过多：包括急慢性的肝炎、肝硬化、肝细胞性的黄疸等疾病。
2、其次是，间接的胆红素的升高的原因：引起间接的胆红素的升高原因包括：1、溶血性的黄疸：由于红细胞的毁坏特别的多所引起；2、肝细胞性的黄疸：肝细胞发生病变时引起；
3、输血错误：由于血型不符，引起溶血导致。
3、再就是，总的胆红素的升高的原因：引起总的胆红素升高的原因包括：1、血清中的总的胆红素过高可能是：由于肝脏的损伤所导致；2、血清中的胆红素的过高的第二种原因可能就是：由于胆管的阻塞所导致。
三、注意事项：
胆红素过高的患者一定要注意：不能喝酒，不能抽烟；再就是一定要养成良好的生活规律:晚上不要熬夜，注意休息；还有就是注意平时一定要加强营养，以增加身体的抵抗力等等。
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常见的临床实验室检测，主要用于评估肝脏功能和胆道系统的健康状况。
该测定的主要原理基于胆红素在血液中的化学特性和其与特定试剂的反应。
首先，我们要了解胆红素的基本性质。
胆红素是血红蛋白分解的终产物之一，它在血液中主要以结合（直接）胆红素和未结合（间接）胆红素两种形式存在。
这两种形式的胆红素在450nm波长处有吸收峰，因此，我们可以通过测量该波长下的吸光度来间接测定血清中胆红素的浓度。
在化学法中，我们通常使用一种或多种特定的试剂与血清中的胆红素发生反应。
这些试剂与胆红素反应后，会生成带有颜色的化合物，这种化合物的颜色深浅与胆红素的浓度成正比。
因此，我们可以通过比色法或光谱法测量这种颜色变化的程度，从而推算出血清中胆红素的浓度。
在实际操作中，我们需要注意一些可能影响测定结果的因素。
例如，样本的保存条件、测定时的温度、试剂的质量和有效期等。
此外，由于胆红素在光照下可能会分解，因此，我们在处理样本和进行测定时，应尽量避免长时间的暴露于光线下。
总的来说，血清总胆红素测定的原理主要基于胆红素在特定波长下的吸收特性和其与特定试剂的反应。
通过精确控制实验条件，我们可以得到准确可靠的测定结果，从而为临床诊断和治疗提供重要参考。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是一种重要的生化指标，它对人体健康具有重要的影响。
因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。
本文将介绍几种常见的胆红素测定方法，帮助读者更好地了解这一领域的知识。
首先，最常见的胆红素测定方法之一是血清胆红素测定。
这种方法通过采集患者的血清标本，利用化学分析或光度法来测定血清中的胆红素水平。
这种方法简单、快捷，广泛应用于临床实践中。
但是，需要注意的是，血清胆红素测定受到很多因素的影响，如血清样本的保存和处理，以及化学试剂的质量等，因此在进行测定时需要严格控制这些因素。
其次，尿胆红素测定也是一种常见的方法。
尿液中的胆红素来自于肝脏排泄的胆红素，因此通过测定尿液中的胆红素水平可以间接反映肝脏的功能状况。
尿胆红素测定方法简单易行，常用于一些肝功能检测中。
但是，需要注意的是，尿液样本的采集和保存也会对测定结果产生影响，因此在进行测定时需要严格按照操作规程进行操作。
此外，还有一种比较新颖的胆红素测定方法是基于光学技术的无创测定。
这种方法通过光学传感器等设备，可以在不需要采集血液或尿液样本的情况下，通过皮肤表面的光学信号来测定胆红素水平。
这种方法无创、方便，可以有效减少患者的痛苦，因此在临床应用中具有广阔的前景。
但是，需要注意的是，这种方法目前还处于研究阶段，其准确性和稳定性还需要进一步验证。
总的来说，胆红素测定方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在临床实践中，需要根据具体情况选择合适的胆红素测定方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保测定结果的准确性和可靠性。
同时，随着科学技术的不断发展，相信在未来会有更多更准确、更方便的胆红素测定方法出现，为临床诊断和治疗带来更多的便利和效益。
血液透析患者血清总胆红素结合胆红素比值检测及临床意义
结果展示与解读
结果展示
通过表格、图表等形式展示血清总胆红素和结合胆红素 的检测结果，以及相关性分析和回归分析的结果。
结果解读
根据统计结果，分析血清总胆红素和结合胆红素之间的 关系，探讨其在血液透析患者中的临床意义。例如，高 血清总胆红素水平可能提示患者存在肝功能异常或胆汁 淤积等问题，而高结合胆红素水平则可能与溶血性疾病 或肝细胞损伤有关。通过监测这些指标的变化，可以及 时了解患者的病情变化和治疗效果，为临床诊断和治疗 提供有力支持。
血液透析过程
将患者的血液引出体外，通过透析器 与透析液进行物质交换，清除体内的 代谢废物、维持电解质和酸碱平衡； 同时清除体内过多的水分，并将经过 净化的血液回输。
血液透析对患者胆红素的影响机制
血液透析对胆红素的清除
血液透析可以清除血液中的小分子物质，包括胆红素。在透析过程中，胆红素 通过透析膜与透析液中的成分进行交换，从而降低血清中的胆红素水平。
该比值能够反映血液透析患者的肝功能状态，对于评估患 者的病情和预后具有重要意义。
要点二
探讨该比值在血液透析患者中的 临床意义
通过检测血清总胆红素和结合胆红素的比值，可以及时发 现血液透析患者可能出现的肝功能异常，为临床诊断和治 疗提供依据。
血液透析患者现状
血液透析患者数量不断增加
随着人口老龄化和慢性肾脏病发病率的上升，需要进行血液透析治疗的患者数量也在不断 增加。
调整透析方案
根据该比值的动态变化，医生可及时调整 透析方案，如增加透析频率、调整透析液 成分等，以提高透析治疗效果和患者生活 质量。
指导临床治疗策略调整
个体化治疗
血清总胆红素结合胆红素比值可为血液透析 患者的个体化治疗提供指导。针对不同患者 的具体情况，医生可制定针对性的治疗方案 ，如调整药物剂量、选择更合适的透析方式 等。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解时产生的一种黄色的代谢产物。
正常情况下，胆红素会通过肝脏代谢后排泄出体外，但是当人体内胆红素代谢发生异常时，就会导致黄疸等症状的出现。
因此，准确测定胆红素的含量对于诊断和治疗相关疾病具有重要意义。
一、胆红素测定方法的原理。
胆红素的测定方法主要包括间接测定法和直接测定法两种。
间接测定法是通过测定血液中总胆红素的含量来间接反映胆红素的含量，而直接测定法则是直接测定血液中胆红素的含量。
二、胆红素测定方法的步骤。
1. 间接测定法的步骤：a. 采集患者静脉血标本；b. 用适当的试剂将血液标本中的胆红素转化为测定所需的产物；c. 通过光度法或比色法测定产物的吸光度；d. 根据吸光度值计算出胆红素的含量。
2. 直接测定法的步骤：a. 采集患者静脉血标本；b. 将血液标本中的蛋白质沉淀，得到清澈的血清；c. 通过高效液相色谱法或其他特定仪器测定血清中胆红素的含量。
三、胆红素测定方法的注意事项。
1. 采集血液标本时要注意无菌操作，避免污染；2. 试剂的选择和使用要严格按照说明书进行，避免试剂变质影响测定结果；3. 测定过程中要注意标本的保存和处理，避免因为外界因素导致结果出现偏差；4. 操作人员要熟练掌握测定方法，避免因为操作不当而导致结果不准确。
四、胆红素测定方法的应用。
胆红素测定方法主要应用于临床诊断和治疗过程中，可以帮助医生判断患者是否存在胆红素代谢异常，及时进行诊断和治疗。
此外，胆红素测定方法也可以用于科研领域，帮助科研人员深入了解胆红素的代谢规律及相关疾病的发病机制。
总结，胆红素测定方法是一项重要的生化检测方法，通过测定血液中胆红素的含量可以帮助医生进行诊断和治疗。
在实际操作中，要严格按照操作规程进行，避免因为操作不当导致结果不准确。
希望本文对于胆红素测定方法有所帮助。
实验7 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素20151116
一. 目的要求
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掌握本法测定血清胆红素的基本原理。
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熟悉本法测定血清胆红素的基本操作步骤及参考值。
了解临床测定血清胆红素的主要方法及意义。
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二．实验原理
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血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素； 在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与 重氮试剂反应。
UDP-葡糖醛酸基 转移酶
胆红素葡糖醛酸一酯 + UDP
七．相关知识与临床意义
3.胆红素在肝细胞中转变为结合胆红素并泌入胆小管
（2）胆红素在内质网结合葡糖醛酸生成水溶性结合胆红素
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两种胆红素理化性质的比较
理化性质 未结合胆红素 未结合 小 大 大 结合 大 小 小 结合胆红素
同义名称 与葡糖醛酸结合 水溶性 脂溶性 透过细胞膜的能力及毒性
2. 试述胆红素代谢的基本过程以及血清胆红素测定在黄疸鉴 别诊断中的意义。
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七．相关知识与临床意义
3.胆红素在肝细胞中转变为结合胆红素并泌入胆小管
（2）胆红素在内质网结合葡糖醛酸生成水溶性结合胆红素
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部位：滑面内网质 反应：结合反应(主要结合物为UDP葡糖醛酸, UDPGA) 催化酶：葡糖醛酸基转移酶 产物：主要为双葡糖醛酸胆红素，另有少量单葡萄糖醛酸胆红素、硫酸胆红 素，统称为结合胆红素。
四．操作步骤
1．标准曲线的绘制：按下表配制5种不同浓度的胆红素标准液
试剂(ml)/管别 0 0.0 1.0 — — 1 0.2 0.8 2 0.4 0.6 3 4 5 1.0 0.0 171 10
胆红素标准液(171μmol/L)
稀释血清 相当于胆红素浓度 μmol/L mg/dl
总胆红素(TBIL)测定的标准操作程序
总胆红素（TBIL）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆总胆红素浓度测定。
【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。
【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。
【方法学原理】在PH2.9环境中,表面活性剂和偏钒酸盐与胆红素作用形成胆绿素，胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降,吸光度的变化与总胆红素的含量成正比。
【试剂】1.在测定时各组分和浓度试剂1（R1）：L-丙氨酸、LDH（乳酸脱氢酶）试剂2（R2）：α-酮戊二酸、NADH试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
2.校准品：DiaSys TruCal U。
3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2。
【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。
血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。
【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L Dilutio LL Dilutio L Min OD Max ODLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。
3.校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。
校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。
血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释
血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述在文章的引言部分，我们将对血清总胆红素测定化学法进行概述。
血清总胆红素是评估肝功能和胆汁排泄功能的一个重要指标。
通过测定血清中胆红素的浓度，可以获得有关患者肝功能和胆红素代谢状态的信息。
血清总胆红素测定化学法是一种常用的测定方法，它基于血液中胆红素的化学反应原理。
这种方法的主要原理是利用特定的试剂与血清中的胆红素发生反应，形成带有颜色的化合物，并利用光谱法或比色法测定其吸光度，从而计算出血清中总胆红素的浓度。
在测定过程中，我们使用了一系列化学试剂，并根据反应原理和步骤进行相应的操作。
通常情况下，测定血清总胆红素的化学方法需要经过样本处理、试剂添加、反应、数据测量及结果计算等多个步骤。
这些步骤的设计和操作对于测定的准确性和可靠性至关重要。
化学法测定血清总胆红素具有许多优势。
首先，它是一种简单、快速、经济的测定方法，适用于大规模样本的处理。
其次，它对于血清中胆红素的测定范围较宽，可以满足不同浓度范围内的测定需求。
此外，该方法的可重复性和稳定性较高，能够提供较为准确的测定结果。
然而，化学法测定血清总胆红素也存在一些局限性。
首先，可能会受到其他血液成分的干扰，如血红蛋白和脂质等。
其次，该方法对于某些特殊类型的胆红素可能不够敏感，导致测定结果的偏差。
此外，部分化学试剂可能对环境和人体健康有一定的危害，需要注意操作的安全性。
尽管存在一些局限性，但血清总胆红素测定化学法在临床实验室中仍然得到广泛应用。
未来的研究和发展将致力于改进该方法的准确性和特异性，以满足临床医学对于胆红素测定的更高要求。
总的来说，血清总胆红素测定化学法在评估肝功能和胆红素代谢方面具有重要的应用价值。
1.2 文章结构文章结构部分的内容如下:文章结构部分旨在简要介绍整篇文章的结构和组织方式，为读者提供一个整体的概览。
本篇文章共分为引言、正文和结论三大部分。
在引言部分，我们将对本文的主题进行概述，并介绍文章的结构和目的。
总胆红素检测标准操作规程
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
3.42-20.5umol/l
13.性能指标
线性范围：在（3.4-684）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（3.4-100）umol/L范围内，线性偏差应≦10umol/L;（100-684）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
准确度：相对偏差≦10.0%。
精密度：批内CV≦4.0%;批间相对极差<5.0%。
8.校准程序
8.1校准品来源
美康生物
8.2校准品名称
多项生化校准品
8.3校准品规格：
1×5ml
8.4用途
校准品与宁波美康生物科技有限公司生产的总胆红素检测试剂盒及全自动生化分析仪配套使用，用于上述检测系统进行项目的校准。
8.5主要组成成分
校准品组成成分为非人源性。
校准品中总胆红素的活性成分浓度具有批特异性，准确浓度见随附的数值表或说明书反面。
分析灵敏度：样本浓度为90umol/L时，吸光度差值不小于0.0400。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
辅助波长
546nm
反应方法
终点法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
180ul
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血清中胆红素的测定注意事项：
病人准备：病人准备除了特殊检验有专门规处定外，一般需求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前已公认过度空腹、饮食、饮酒、吸烟、及姿势体味等可影响某些检验结果，现分述如下：
1、运动：肌肉活动的影响可分短暂性的持续性的两
类，短暂性影响为血浆脂肪酸含量，可因运动而
暂时减少，而后渐渐增加而恢复。
丙氨酸可因运
动暂时增加达180%,受到持续性影响主要是一些
与肌肉有关的酶，如肌酸激酶，乳酸脱氢酶等，
据称一场60min的手球训练赛后11h,肌酸激酶活
性比赛前仍增加达125%，长期坚持体育锻炼还
会提高性激素水平，因此采血前亦安静，不宜过
大的活动。
2、食物：进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。
有人研究于高脂餐2—4 h采血多数人碱性磷酸酶
含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有
密切关系，O型或B型兼为le+分泌型者增高更
明显。
一般认为高蛋白质餐使血浆尿素增加，但
不影响肌酐含量，高比列不饱和脂，酯酸食物，
可降低胆固醇含量，可引起粪隐血假阳性。
故在
做相应检验时，应对食物有一定的控制。
3、过度空腹：一般血液生化检验要求病人晚餐后禁
食，至次日晨采血，空腹约8—12h ，但过度空
腹，某些检验含有异常结果。
例如血清胆红素可
因空腹48h而增加240%；血糖可因空腹过长而
减少为低血糖；血脂空腹过度，甘油三酯，游离
脂肪酸有增加，故空腹并非越长越好。
4、饮酒：饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐增加。
长期饮
酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高，平均红细胞体积
增加，甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。
5、吸烟：瘾烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达
8%，而不吸烟者含量在1%以下。
血液学方面亦
有变化，白细胞数增加，嗜酸粒细胞减少，中性
粒细胞及单核细胞增多，血红蛋白偏高，平均红
细胞体积偏高。
6、药物：药物对检验的影响非常复杂，15000多种
药物对检验有干扰作用。
众所周知，抗生素、磺
胺类药物，对肝功能有大小不一的影响，甚至几
片常用药物可以引起严重的药物反应，故在采样
检查之前，暂停各种药物是为上策，如不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。
7、体位：体位影响血液循环，由于血浆和组织间液
因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物
质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆
白蛋白可因此而浓度增大，总蛋白、酶、钙、胆
红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加；
比容、红细胞计数亦于站位时增加。
8、其他：病人准备还应考虑病人的生物钟规律，因
此复查以在大体相同的时间采样为好。
采血时止
血带结扎过久也是一种误差因素，如以结扎1min
的样品结果为基数，则结扎3 min，可使血浆总蛋
白增加5%胆固醇增加5%，铁增加6%,胆红素增
加8%。
学期和ph值测定的血液以动脉血为原则，切不可漏气。
细菌培养的样品需采用无菌技术，
防止污染。
9、注意事项：（1）在10~37℃范围内，重氮法不受
环境温度影响呈色在两小时内稳定。
（2）严重溶血时，可导致测定结果偏低。
（3）血脂可影响测定结果，故应尽量取空腹血。
（4）胆红素对光敏感，胆红素标准液及血清样本均应避光。
一、胆红素氧化酶法的原理：胆红素氧化酶（BOD）
催化胆红素氧化，生成胆绿素，后者一步氧化生
成淡紫色化合物，在450nm波长比色，吸光度
的下降值（△A）与血清胆红素浓度呈正比。
二、重氮法的原理：血清中结合胆红素可直接与重氮
试剂产生偶氮胆红素，所以称为直胆，又称1min
胆红素测定，非结合胆红素测定时需以咖啡因、
苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试
剂反应，抗坏血酸破坏剩余重氮试剂，加入碱性
酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm，
非胆红素的黄色素及其它红色与棕色色素产生
的吸光度将之可忽略不计，使灵敏度和特异性升
高，最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素
和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素
混合而成。
三、钒酸氧化法的测定原理:在PH3附近,表面活性剂
和钒酸作用于血清TBi1,使之氧化成胆绿素，使
胆红素所特有的黄色减少，由此测定钒酸作用前
后450nm吸光度的变化求出血清中TBi1的浓
度。
在PH3附近，当试剂中缺少表面活性剂时，
钒酸只与血清中结合胆红素作用，使之氧化成胆
绿素，此时测定450nm吸光度下降值求出血清
中TBi1的浓度。