大蒜素解酒作用的研究

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——广东医学院创新性实验设计
(课题组成员:钟婷婷 钟志英 成京懋 陈思静 陈暖 梁柱铭 温振兴)
【研究背景与研究意义】
★ 【研究内容与研究方法】 ★【创新性与可行性】 【经费预算】
【研究背景与研究意义】
饮用酒,主要成分为酒精,学名叫乙醇。乙醇主要在肝脏进行代谢, 经肝脏代谢的乙醇约80%通过乙醇脱氧酶转化为乙醛,约20%通过微 粒体乙醇氧化酶转化为乙醛,乙醛再经过乙醛脱氢酶转化为乙酸,进 入三羧酸循环,氧化成二氧化碳和水。 正常情况下,机体的氧化抗氧化机制处于平衡状态,当摄入酒精过 多时,氧自由基 产生的速率大于被清除的速率,就会造成活性氧 的蓄积,则对机体产生不利的影响。可通过抗氧化作这一原理进行 解酒药的研究,从而达到 加快酒精体内代谢,达到解酒和 减少肝损伤 的目的,天然膳食抗氧化物大蒜素为本实验组的研 究对象。
用顶空-气相色谱法 测定大鼠血液中 的乙醇含量。
【研究内容与研究方法】
1.将采取到的血液注入顶空瓶内,让血液均匀浇在氯化钠粉末上,不使形成局 部血凝块。 2.用微量注射器分别吸取乙醇0.12、0.29、0.59、0.88、1.17ul注入相应 的顶空瓶(含1gNacl,30mgKF,0.46ul仲丁醇),置于70℃恒温水浴箱120min。 3.抽取顶空气体0.2ml注入色谱仪分析。 4.以乙醇含量与相应的色谱峰面积和内标峰(仲丁醇)面积比值作图。 5.经处理得回归方程,求出线性范围与最小检出限,记录数据,得出结论。
【研究内容与研究方法】
待各组处理后,用普通型度数为56%北京红星二锅头对各组大鼠进行灌 胃,10ml/(kg· d),分别于30min后,1h后,90min后对大鼠进 行采血测量。 采血前进行3%戊巴比妥钠腹腔注射,注射量为40mg/kg。采血方法为大 鼠内眦取血,采血量为0.3ml,先进行单眼采血,采血后包扎,30min 后再取血另一只眼,如此循环。
550元/瓶 0.5*50=24瓶 (250mg/瓶) 24.5元/桶 (1800mL) 720*50 =36000ml 约3瓶
73.5元
500元
ຫໍສະໝຸດ Baidu
49773.5元
【创新性与可行性】
二、可行性
1、原材料:本实验采用向试剂公司购买的大蒜素产品,其试剂质量已经专 业仪器鉴定,且价格低廉、纯度高,大大节省了实验所需经费及操作时间。
2、检测方法:本实验使用实验室气象色谱仪采用顶空气相色谱法测定SD 大鼠血液中的乙醇浓度[4],该方法直接顶空进样,不受进样误差干扰,结果 稳定,操作方便,分析时间段、线性关系好、灵敏度高、适用于全血中乙醇 含量的测定。 3、人员:本小组成员熟悉实验方法步骤,对实验原理有良好的掌握度。且 有多名成员曾参与相关创新实验,科研经验丰富,对相关实验操作熟练掌握, 更加有利于实验的顺利进行。 4、实验经费:本实验的研究费用按400人份计算。包括了大蒜素、SD大 鼠等,总经费为49773.5元,在实验经费上限5,000元人民币之内,在充足的 准备下可保证顺利完成实验。
处理后,用普通型度数为56%北京红星二锅 头对各组大鼠进行灌胃,10ml/(kg· d), 观察各组大鼠的表现以及体态动作改变,观 察翻正反射,记录每只大鼠的睡眠潜伏 时间和睡眠维持时间。
【研究内容与研究方法】
生化检测实验:
待记录之后对大鼠进行正常喂食,隔日后继续进行12h禁 食不禁水处理,处理完结后进行生化测量检测。 在实验前1h对各组大鼠做同样处理,即 低浓度空白组:给与蒸馏水(10mg/(kg· d)灌胃; 中浓度空白组:给与蒸馏水(20mg/(kg· d)灌胃; 高浓度空白组:给与蒸馏水(30mg/(kg· d)灌胃; 低浓度实验组:给与大蒜素(10mg/(kg· d)灌胃; 中浓度实验组:给与大蒜素(20mg/(kg· d)灌胃; 高浓度实验组:给与大蒜素(30mg/(kg· d)灌胃。
【经费预算】
项目
实验动物SD大鼠 编号100384 上海时代生物科技有限公司 大蒜 素标准品(大蒜素含量:98%) 北京红星有限公司 产品标准号:GB/T10781.2 56度桶装红星二锅头 机动费用 (饲料、其他实验材料以及补充) 合计
单价
20元/只
数量
总额
36*50=1800只 36000元 13200元
【创新性与可行性】
一、创新性
(一)实验内容: 目前,大多数对大蒜素研究主要停留在抗菌、抗肿瘤和防治心血管疾病的 药理作用上。据了解,仍未有探讨大蒜素能否解酒的相关研究,仅有研究表明, 大蒜素具有抗氧化护肝作用。此外,我国历来对如人参、葛花等天然解酒制品的 相关研究表明,此类天然药物均具有明显的体内清除自由基作用[2]。因此,本 实验从大蒜素的抗氧化作用的角度探讨其是否具备解酒功能,探求其成为新型解 酒制品的可能性。 (二)实验方法: 1、本实验采用双项检测方法,分别隔日对大鼠 进行体态观察实验、血液中乙醇浓度测定,较好的 平衡和抵消了无关变量的影响,增加了实验的准确 度。 2、经本小组成员多方查阅,当前相关研究实验均 是采取一组空白对照的方法,而本实验设置了三 组不同剂量的空白对照组,更提高了实验的准 确性,使实验结果更具有说服力,增添了实验的可 行性。
【研究背景与研究意义】
大蒜为百合科葱属草本植物,有效成分为大蒜素。大蒜素(Allicin)又 名大蒜新素,化学名为二烯丙基三硫化物,其结构式为:CH2=CH— CH—S—S—S—CH2--CH=CH2。有研究表明: 1.大蒜素能对乙醇所致的各种抗氧化酶的变化有明显的逆转效应, 提示大蒜素对乙醇性肝损伤的保护作用与其增强肝脏抗氧化作用有关。
【研究内容与研究方法】
体态观察实验:
实验前对大鼠进行禁食12h,不禁水。将36只大鼠随机分成六组,即低浓 度空白组、低浓度实验组、中浓度空白组、中浓度实验组、高浓度空白组、 高浓度实验组,每组6只,雌雄各半。在实验前1h分别对各组做以下处理:
低浓度空白组:给与蒸馏水(10mg/(kg· d)灌胃; 中浓度空白组:给与蒸馏水(20mg/(kg· d)灌胃; 高浓度空白组:给与蒸馏水(30mg/(kg· d)灌胃; 低浓度实验组:给与大蒜素(10mg/(kg· d)灌胃; 中浓度实验组:给与大蒜素(20mg/(kg· d)灌胃; 高浓度实验组:给与大蒜素(30mg/(kg· d)灌胃.
2.朱兰香等通过建立的大鼠肝纤维化模型验证大蒜素为强效抗氧化 剂,对肝细胞具有保护作用。
因此,本实验组猜想,可利用大蒜素对乙
醇所致各种抗氧化酶变化的逆转效应即 抗氧化作用,加快乙醇有毒代谢物如乙 醛和氧自由基在体内的代谢,从而达到 解酒的作用。
【研究内容与研究方法】
本实验将使用SD大鼠36只,雌雄各半, 体重200~220g,(由自己饲养或是向 实验动物中心购买)采用两种实验方 法,分别从 体态观察 以及 生化检测 两方面研究大蒜素的解酒作用。
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