第6章 自由基清除剂总结
自由基清除剂及其加工技术
粗酶溶液中加入一些弱极性有机溶剂（丙酮），改变溶液的介电常数，使不同种类的蛋白质的溶解度产生不同程度的下降；
可以把超氧化物歧化酶和其他的杂蛋白分开。
02
STEP4
STEP3
STEP2
STEP1
离子交换层析法
离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行。
等电点在4~6之间，pH>7.0时带负电，能被阴离子交换剂吸附，
清除自由基、增强机体免疫力 当L-表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为0.006mg/ml，对超氧阴离子消除率达98%；当浓度为0.1mg/ml，对羟自由基消除率达99.9%。
01
04
02
03
抗衰老作用 提高SOD活性，减低细胞的脂质过氧化物，延缓肌脂褐素形成，起抗衰老延寿作用。
抗辐射作用
抗癌作用
消炎、抑菌及抗病毒作用 没食子酸酯有抑制伤寒、副伤寒、霍乱和痢疾
2.847
2
1
2
2
5.002
3
1
3
3
5.616
4
2
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4.963
6
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7
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5.313
8
3
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3.119
9
3
3
2
6.123
K1
15.586
12.630
10.726
K2
12.753
15.145
16.059
K3
16.843
17.407
18.395
极差
4.090
4.778
自由基清除剂及其对延缓衰老的影响
沂 源县 人 民 医 院 （ 东 沂 源 ２ ６ ０ ） 山 ５ １０
【 摘要】 本 文就 目 常用的 自由基清除剂及其对延缓 衰老 的影响 机制做 一综 述 ， 在 提 高人 们 对 自由基 引发 疾病 、 前 旨 自由基 清除
剂 及 其 对延 缓 衰 老 的 影 响机 制 的 进 一 步 认 识 。
维 生 素 Ｅ又称 生 育 酚 ， 脂 溶 性 化 合 物 ， 要 存 在 于 麦 胚 油 、 是 主 豆 类 和蔬 菜 中 。维 生 素 Ｅ有 Ｏ、 、 种 ， 中 以 ０ 的 活 力 最 ｔｐ、 ８四 其 【
强 。维生素 Ｅ在体 内外 均有很 强 的抗 氧化 作用 ， 够 清除 ０ 能 、
３ 超 氧化 物 歧 化 酶
维 牛 素 Ｃ又 名 抗 坏 酸 ， 一 种 水 溶 性 化 合 物 。新 鲜 蔬 菜 和 是 水 果 如 柑 橘 、 、 椒 、 茄 及 有 叶 蔬 菜 等 均 含 维 生 素 Ｃ， 食 中 枣 辣 番 膳 每 日如 能 供 给 １ ｇ维 生 素 Ｃ， ０ｍ 即可 防 止 其 缺 乏 症 发 生 。 维 生 素 Ｃ是 一种 很 晕 要 的 自由 基 清 除 剂 ， 能够 有效 的 清 除 ０－ Ｉ Ｏ 、 Ｈ ２、 ： Ｏ ｔ 和 Ｏ 等 多 种 活 性 氧 。此 外 维 生 素 Ｃ 参 与 氨 基 酸 代 谢 、 经 递 质 ， 神
【 关键 词】 自由基 ； 自由基清 除剂 ； 延缓衰老 的机制
自由基 化 学 上 也 称 为 “ 离 基 ” 是 含 有 一 个 不 成 对 电 子 的 游 ， 原 子 团 。 由于 原 子 形 成 分 子 时 ， 学 键 中 电 子 必 须 成 对 出 现 ， 化 因
透性 ， 有抗组胺和阻止致癌物 （ 硝胺 ） 具 亚 的生 成 作 用 。
(整理)氧自由基与氧自由基清除剂依达拉奉
氧自由基与氧自由基清除剂依达拉奉山东大学齐鲁医院麻醉科（250012）于金贵一、氧自由基（一）自由基的概念自由基（freeradical，FR）是指外层轨道上有未配对电子的原子、原子团、分子或离子的总称。
因其含有未配对的电子，故化学性质非常活泼，极易与其生成部位的其他物质发生反应，而这种反应的最大特点是以连锁反应的形式进行。
氧原子上有未配对电子的自由基称为氧自由基。
人体吸入的分子氧，在正常状态下绝大多数（98%）都连接4个电子，它们最终与H+结合，代谢还原为H2O。
但有极少数氧（1~2%）在代谢过程中被夺去或接受一个电子而形成活性氧，即氧自由基。
（二）氧自由基的生理作用氧自由基在生理上是必需的物质，如合成ATP 和前列腺素、中性粒细胞杀灭细菌、酸性粒细胞杀灭寄生虫等过程都必须有氧自由基参与。
氧自由基在体内的生成与清除保持动态平衡，且在体内存在时间甚短。
由于其化学性极强，反应剧烈，过量产生会对机体造成极大危害。
（三）氧自由基的种类及其作用1. 超氧化物阴离子：氧自由基连锁反应的启动者，使生物膜、激素和脂肪酸过氧化。
2. 羟自由基（OH∙）：作用最强的自由基，可破坏氨基酸、蛋白质、核酸和糖类。
3. 过氧化氢（H2O2）：过渡型氧化剂，主要使巯基氧化，可氧化不饱和脂肪酸。
4. 单线态分子氧（1O2）：氧分子的激发状态，亲电子性强，在光作用下可由O2直接产生，对细胞有杀伤作用。
5.其他含氧的自由基如脂质过氧化物（ROOH）：易于分解再产生自由基，腐化脂肪，破坏DNA，可与蛋白质交联使之形成变性交聚物。
（四）机体抗氧化机制机制一：直接提供电子，以确保氧自由基还原；机制二：增强抗氧化酶的活性，以有效地消除或抵御氧自由基的破坏作用如酶类抗氧化剂超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）；非酶类抗氧化剂如维生素E、维生素C、辅酶Q、还原型谷胱甘肽（GSH）、葡萄糖、含硫氨基酸和不饱和脂肪酸等。
清除羟基自由基原理
清除羟基自由基原理
清除羟基自由基是一种常用的有机化学试剂，常用于氢氧化反应中。
它的主要原理是通过与羟基自由基发生化学反应，将其转化为其他化合物，从而清除其活性。
羟基自由基是一种高度活性的化学物质，它在氧化还原反应中起着重要的作用。
然而，在某些情况下，羟基自由基的活性可能会带来负面影响，比如会引发链反应，产生不必要的氧化副产物。
为了避免这种情况的发生，可以使用清除羟基自由基的试剂。
常用的清除羟基自由基试剂包括如下几种：
1. 氢化物试剂：例如氢气（H2）、硼氢化钠（NaBH4）、亚磷酸盐（H3PO2）等。
这些试剂可以发生还原反应，将羟基自由基转化为相应的醇或醚化合物。
2. 氧化物试剂：例如过氧化氢（H2O2）、臭氧（O3）、过氧化苯甲酰（PhCOO2H）等。
这些试剂可以发生氧化反应，将羟基自由基转化为相应的羟基化合物。
3. 金属试剂：例如锌粉（Zn）、亚锡酸钠（Na2SnO3）等。
这些试剂可以与羟基自由基发生还原反应，将其转化为相应的金属醇醚化合物。
需要注意的是，选择合适的清除羟基自由基试剂并不是一成不
变的，需要根据实际情况进行选择。
同时，使用试剂时应注意安全操作，并严格控制试剂的用量，以避免不必要的副反应。
自由基及其清除剂
1. 自由基的产生机理及来源 2. 自由基对机体活动的影响 3. 自由基清除剂的基本概念
•
随着生命科学的飞速发展，英国人Harman于1956年提出了自 由基学说。该学说认为，自由基攻击生命大分子造成组织细胞损伤， 是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因， 其中的观点被越来越多的实验所证明。
看出，它含有未配对的电子，是一类具有高度化学活性的
物质。在正常的情况下，体内自由基处于不断产生与清除 的动态平衡之中，并在代谢中发挥着重要作用，参与一些
酶和前列腺素的合成，增强白细胞吞噬活性，提高杀菌效
果等。但是，如果自由基过多或清除过慢，则会对人体造 成严重危害。
（一）自由基积极的生物学功能
• 自由基作为人体正常的代谢产物，对维持机体的正常代谢 有特定的促进作用。这种促进作用主要表现在对机体危害 物的防御作用。
水的均裂作用或经金属催化过程由内源的过氧化氢分子形
成。紫外线能将过氧化氢分子分裂成两个羟自由基分子。 • 过氧基自由基的半衰期比较长，可达数秒，在生物系统中
扩散的途径相当长。在脂质过氧化过程中，从多不饱和脂
肪酸去掉一个氢原子开始，能形成过氧基自由基。羟自由 基能启动这一反应过程。
• 脂质过氧化作用进一步产生烷氧自由基（RO· ）和有机氢 过氧化物（ROOH），后者可能重排成为内过氧化物中间 产物，然后分裂产生乙醛。
第一节 自由基理论
• 一、自由基的产生机理及来源
• 自由基又叫游离基，它是由单质或化合物的均裂（ Homdytic Fission）而产生的带有未成对电子的原子或 基团。它的单电子有强烈的配对倾向，倾向于以各种方式 与其他原子基团结合，形成更稳定的结。
• 自由基反应包含3个阶段，即引发、增长和终止阶段。 • 反应之初，引发阶段占主导地位，反应体系中的新生自由
(5)自由基清除剂
5．参与肝脏的解毒作用 肝脏对外来毒物解毒的实质是在肝微粒体细胞色素 P450催化下对各类毒物的羟化作用。 P450催化下对各类毒物的羟化作用。一定剂量范围内的外 催化下对各类毒物的羟化作用 来毒物可被羟化并排出体外而完成解毒作用。 来毒物可被羟化并排出体外而完成解毒作用。 在肝解毒过程中，连接于细胞色素上的O2 自由基是真正 在肝解毒过程中，连接于细胞色素上的O2－·自由基是真正 起羟化作用的物质。 起羟化作用的物质。 6．参加凝血酶原的合成 凝血酶原是凝血酶的前体。 凝血酶原是凝血酶的前体。 在凝血酶原合成过程中， 前体蛋白质氨基端的10个谷氨 在凝血酶原合成过程中，其前体蛋白质氨基端的10个谷氨 羧化作用转变为10个 羧基谷氨酸残基， 酸残基经过酶促羧化作用转变为10 酸残基经过酶促羧化作用转变为10个γ-羧基谷氨酸残基， 形成凝血酶原。 形成凝血酶原。 该羧化过程与氧自由基密切相关，没有氧自由基的参加， 该羧化过程与氧自由基密切相关，没有氧自由基的参加， 就不能形成凝血酶原。 就不能形成凝血酶原。
第一节 自由基理论
自由基的概念：是由单质或化合物的均裂而产生 的带有未成对电子的原子或基团。它的单电子有 强烈的配对倾向，倾向于以各种方式与其他原子 基团结合，形成更稳定的结构，因而自由基非常 活泼，成为许多反应的活性中间体。
人体内的自由基分为氧自由基和非氧自由基。 人体内的自由基分为氧自由基和非氧自由基。 氧自由基 氧自由基占主导地位，约占自由基总量的 氧自由基占主导地位，约占自由基总量的95%。 。
二、自由基积极的生物学功能
自由基作为人体正常的代谢产物， 自由基作为人体正常的代谢产物，对机体危害物有 积极的防御作用。 积极的防御作用。 增强白细胞的吞噬功能， 1．增强白细胞的吞噬功能，提高杀菌效果 白细胞在吞噬细菌的过程中，对氧的消耗量激增， 白细胞在吞噬细菌的过程中，对氧的消耗量激增，会产生 大量的O 和 两者通过Haber Haber大量的O2－·和H2O2，两者通过Haber-Weiss 反应还会进一 步产生OH 这些活性氧对病原菌都有很强的杀灭效果。 OH·， 步产生OH ，这些活性氧对病原菌都有很强的杀灭效果。 OH·还可引发被吞噬细菌的不饱和脂肪酸降解 还可引发被吞噬细菌的不饱和脂肪酸降解， OH 还可引发被吞噬细菌的不饱和脂肪酸降解，降解终产 物丙二醛也是一种强力杀菌剂，足以致细菌死亡。 物丙二醛也是一种强力杀菌剂，足以致细菌死亡。 2．促进前列腺素的合成 前列腺素是人体内的一种重要的激素， 前列腺素是人体内的一种重要的激素，它以花生四烯酸为 前驱物质，经膜上多酶系统催化氧化生成， 前驱物质，经膜上多酶系统催化氧化生成，其生物合成途 径中必须有氧自由基（OH·或 径中必须有氧自由基（OH 或O2－·）的参与。 ）的参与。
第六章 自由基清除剂及其加工技术
帕金森病
帕金森病（Parkinson's disease）又称" 震颤麻痹"，巴金森氏症或柏金逊症。该病 是一种常见于中老年的神经系统变性疾病， 多在60岁以后发病。主要表现为患者动作 缓慢，手脚或身体的其它部分的震颤，身 体失去了柔软性，变得僵硬。最早系统描 述该病的是英国的内科医生詹母· 帕金 森， 当时还不知道该病应该归入哪一类疾病， 称该病为“震颤麻痹”。
喷雾干燥
应用于物料干燥的一种方法。于干燥室中 将稀料经雾化后，在与热空气的接触中， 水分迅速汽化，即得到干燥产品。 该法能直接使溶液、乳浊液干燥成粉状或 颗粒状制品，可省去蒸发、粉碎等工序。
• •
•
（四）碱提取酸沉淀法 黄酮苷类不溶于酸性水，易溶于碱性水; 采用碱液提取，再在提取液中加酸，黄 酮苷类即可沉淀析出。 简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的 提取。
心脏病
心脏病（heart disease）是心脏疾病 的总称，包括风湿性心脏病、先天性心脏 病、高血压性心脏病、冠心病、心肌炎等 各种心脏病。 加拿大研究人员20日发表报告说，全球 大约35%的心脏病发作与油炸食品、盐渍 零食和肉类有关。这再次表明，食用垃圾 食品和动物脂肪能诱发心脏病。
老年痴呆症
老年痴呆症(Alzheimer‘s disease,AD) 是 发生在老年期及老年前期的一种原发性退 行性脑病，指的是一种持续性高级神经功 能活动障碍，即在没有意识障碍的状态下， 记忆、思维、分析判断、视空间辨 认、情 绪等方面的障碍。、 生活方式是导致该病的原因之一。如吸烟 酗酒、不合理饮食、缺乏锻炼、与社会交 流少。
2 种类-包括氢自由基（H· ）、超氧阴离子
自由基清除剂(益长素)及应用新技术-2011
断奶当天
断奶后1周
断奶后6周
0.3 0.25
0.2 0.15
0.1 0.05
0
小肠MDA
35 30 25 20 15 10 5 0
小肠GSH-Px
8 7 6 5 4 3 2 1 0
小肠MT
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断奶仔猪血清与肝脏组织中自由基变化
35
断奶当天
30
25
20
15
1058 6 4 2 0氧化处理组 益长素80
T-SOD
益长素20
正常对照组 益长素40
1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
0
氧化处理组 益长素80
MDA
益长素20
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2、益长素对肝脏细胞抗氧化力的影响
正常对照组：细胞间相 互连接，细胞结构完整
来源：外源性自由基和内源性自由基。 – 内源性自由基：在机体新陈代谢过程中由体内生化反应所产生。 – 外源性自由基：由外界因素如光化学因素、化学因素（药物、重 金属等）、高能辐射等引发共价键断裂而生成的自由基。
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自由基与机体氧化应激
自由基（Free Radical ，FR）的危害：
0 血清MDA
断奶后1周 肝脏MDA
70
断奶当天
断奶后1周
60
50
40
30
20
10
0 血清T-SOD 肝脏T-SOD
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氧化应激对猪生长性能的影响
利用Diquat（二吡啶基除草剂）诱导产生氧化应激，观察对生长 猪生长性能的影响（处理35天后测定结果）。
自由基清除剂
自由基清除剂随着生命科学的飞速发展，英国人Harman于1956年提出了自由基学说。
该学说认为，自由基攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因，其中的观点被越来越多的实验所证明。
自由基（Free radical）是人体生命活动中各种生化反应的中间代谢产物，具有高度的化学活性，是机体有效的防御系统，若不能维持一定水平则会影响机体的生命活动。
但自由基产生过多而不能及时地清除，它就会攻击机体内的生命大分子物质及各种细胞器，造成机体在分子水平、细胞水平及组织器官水平的各种损伤，加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。
近年来，国内外对自由基及自由基清除剂的研究十分活跃，在各类食品科学、生命科学及医学书籍上都有许多关于自由基及其清除剂的研究报道，自由基清除剂作为功能性食品的重要原料成分之一，通过人们日常消费的食品来调节人体内自由基的平衡，已受到食品营养学家的广泛重视。
第一节自由基理论一、自由基的产生机理及来源自由基又叫游离基，它是由单质或化合物的均裂（Homdytic Fission）而产生的带有未成对电子的原子或基团。
它的单电子有强烈的配对倾向，倾向于以各种方式与其他原子基团结合，形成更稳定的结构，因而自由基非常活泼，成为许多反应的活性中间体。
人体内的自由基分为氧自由基和非氧自由基。
氧自由基占主导地位，大约占自由基总量的95%。
氧自由基包括超氧阴离子（O2－·）、过氧化氢分子（H2O2）、羟自由基（OH·）、氢过氧基（HO2－·）、烷过氧基（ROO·）、烷氧基（RO·）、氮氧自由基（NO·）、过氧亚硝酸盐（ONOO－）、氢过氧化物（ROOH）和单线态氧（1O2）等，它们又统称为活性氧（reactive oxygen species，ROS），都是人体内最为重要的自由基。
非氧自由基主要有氢自由基（H·）和有机自由基（R·）等。
《自由基清除剂》课件
自由基的来源与危害
自然来源
正常代谢过程，紫外线辐射，空气污 染物。
危害
细胞损伤，基因突变，加速衰老，引 发疾病。
自由基清除剂的作用与重要性
作用
中和自由基，防止细胞氧化损伤。
重要性
维持细胞健康，预防疾病，延长寿命。
02
自由基清除剂的种类与特 性
天然抗氧化剂
01
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ02
03
维生素C
具有水溶性，能够清除体 内的自由基，具有抗氧化 的作用。
未来研究方向与展望
深入研究自由基的生成机制和清除机 理，为开发更高效的自由基清除剂提 供理论支持。
加强自由基清除剂与其他保健品或药 物的协同作用研究，以实现更好的健 康效益。
针对特定疾病或特定人群，开展自由 基清除剂的个性化应用研究，提高其 在疾病预防和治疗中的效果。
拓展自由基清除剂在美容行业和其他 领域的应用，满足更多消费者的需求 。
02
能够催化过氧化氢分解为水和氧气，从而降低过氧化氢的浓度
。
谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）
03
能够催化氢离子和过氧化氢结合生成水，同时还原谷胱甘肽。
合成抗氧化剂
丁基羟基茴香醚（BHA）
一种酚类抗氧化剂，能够淬灭自由基和单线态氧，延缓油脂氧化 。
二丁基羟基甲苯（BHT）
一种酚类抗氧化剂，主要在食品工业中用作油脂的抗氧化剂。
自由基清除剂在人体健康维护中具有重要作用，能够有效清除体内多余自由基，减 轻氧化应激反应对细胞的损伤，从而延缓衰老、预防慢性疾病。
自由基清除剂在医学领域具有广泛的应用前景，可用于治疗多种与氧化应激相关的 疾病，如心血管疾病、糖尿病、神经退行性疾病等。
自由基清除剂在美容行业也受到青睐，被认为具有抗衰老、美白、保湿等功效，成 为护肤品的重要成分之一。
酶类自由基清除剂
酶类自由基清除剂自由基清除剂陈伯伦编辑自由基清除剂的种类一.酶类自由基清除剂1.超氧化物歧化酶(Super oxide dismutase “SOD”)存在于几乎所有靠氧呼吸的生物体内。
SOD生理功能及应用:(1) 清除体内过量的超氧阴离子自由基，保护DNA、蛋白质和细胞免遭超阴离子的破坏作用，延缓衰老。
(2) 提高人体对对自由基外界诱发因子的抵抗力。
(3) 增强人体自身的免疫力和修复能力。
(4) 降血脂、降血压、降血糖、延缓衰老、淡化黄褐斑、抗炎症、减轻风湿症和类风湿关节炎症状、改善皮肤质地、抗疲劳、预防前列腺炎及痴呆症、抗肿瘤和抗辐射。
改善睡眠、逆转亚健康、提高免疫力。
其抗氧化能力是VE的1000倍、Vc的500倍，原花青素的20倍。
-----------------------------------------------------------------------------------------“,,,” 是清除过氧化阴离子自由基的一类重要的活性金属酶类。
(含铜锌SOD、含铁SOD、含锰SOD) (1) SOD是.经中国卫生部批准的具有抗衰老的自由基清除剂保健品，法定编号为，ECI.15.1.1;CAS【905489】 (2) SOD是氧自由基的天敌，机体内氧自由基的头号杀手，是生命健康之本。
(3) 全球118位科学家发表联合声明:自由基是百病之源，SOD是健康之本。
体内的SOD活性越高，寿命越长。
(4) SOD是对抗自由基的第一防线、战胜疫病与衰老的钥匙。
-------------------------------------------------------------------------------------------SOD与目前市场上其他抗衰老制剂有何不同,SOD清理人体内自由基其保健理念是:“先清理、再修复、到还原、后健康”即先解决人体自由基造成的伤害，然后调整和修复人体脏器、组织和皮肤机能。
清除自由基
清除自由基摘要：自由基这种强氧化性物质，可损害机体的组织和细胞，进而引起慢性疾病及衰老效应，而清除这些自由基则能有益作用于我们的身体。
众多权威研究表明，负离子能够消减自由基，减缓人体衰老，增强人体免疫力。
关键词：自由基医学在生命质量越来越受重视的今天，预防治疗各种隐患和疾病已是迫切需要，随着自由基医学、生物学等的出现，人们对自由基的认识也越来越深刻，清除自由基方面的研究也更加全面具体。
现在已经研究出了各式各样的自由基清除剂，应用这些自由基清除剂清除体内多余的自由基，防止机体受损而导致疾病的产生。
一、对自由基的认识自由基又称游离基，是具有非偶电子的基团或原子，它有两个主要特性：一是化学反应活性高；二是具有磁矩。
一般情况下，生命是离不开自由基活动的。
我们的身体每时每刻都从里到外的运动，每一瞬间都在燃烧着能量，而负责传递能量的搬运工就是自由基。
当这些帮助能量转换的自由基被封闭在细胞里不能乱跑乱窜时，它们对生命是无害的。
但如果自由基的活动失去控制，超过一定的量，生命的正常秩序就会被破坏，疾病可能就会随之而来。
所以说自由基是一把双刃剑。
认识自由基，了解自由基对人体的作用，对健康十分必要。
自由基是无处不在的，自由基对人体攻击的途径是多方面的，既有来自体内的，也有来自外界的。
当人体中的自由基超过一定的量，并失去控制时，这些自由基就会乱跑乱窜，去攻击细胞膜，去与血清抗蛋白酶发生反应，甚至去跟基因抢电子，对我们的身体造成各种各样的伤害，产生各种各样的疑难杂症。
二、自由基清除剂自由基清除剂也称为抗氧化剂，可清除体内多余的自由基，减轻它们对机体的损伤。
目前常用超氧阴离子自由基体系（O2-·）、羟基自由基体系（·OH）、二苯代苦味酰基自由基体系（DPPH·）对某抗氧化剂的体外清除自由基能力进行了研究。
其中 ESR法和气相色谱法、HPLC 法对自由基的检测灵敏度高，但对设备要求较高，操作复杂，无法在一般实验室普及。
清除自由基研究方法汇总
清除⾃由基研究⽅法汇总电⼦⾃旋共振法（ESR）、⾼效液相⾊谱法、化学发光法、⽐⾊法、分光光度法⾃由基清除剂也称为抗氧化剂，可清除体内多余的⾃由基，减轻它们对机体的损伤。
⽬前常⽤超氧阴离⼦⾃由基体系（O2-·）、羟基⾃由基体系（·OH）、⼆苯代苦味酰基⾃由基体系（DPPH·）对某抗氧化剂的体外清除⾃由基能⼒进⾏了研究。
其中ESR法和⽓相⾊谱法、HPLC 法对⾃由基的检测灵敏度⾼，但对设备要求较⾼，操作复杂，⽆法在⼀般实验室普及。
⽽其中的分光光度法、化学发光法、荧光分析法等不需要昂贵的仪器，易于被⼀般实验室所采⽤，但测定过程中的⼲扰因素较多，容易对测定的准确性和灵敏度造成影响。
分光光度法最常⽤。
原理部分：1.DPPH·法测试机理DPPH·（⼆苯代苦味脐基⾃由基）的甲醇溶液呈深紫⾊，可见光区最⼤吸收峰为492nm。
当⾃由基清除剂加⼊到DPPH·溶液中时，DPPH·的单电⼦被配对⽽使其颜⾊变浅，在最⼤吸收波长处的吸光度减少，⽽且颜⾊变浅的程度与配电⼦数成化学计量关系，因此，可通过吸光度减弱的程度来评价⾃由基被消除的情况。
2. 羟基⾃由基（·OH）1）邻⼆氮菲法[70]实验原理：邻⼆氮菲可与Fe2+形成络合物，此络合物在510nm 处有最⼤吸收峰，是⼀常⽤的氧化还原指⽰剂，其颜⾊变化可敏锐地反映溶液氧化还原状态的改变。
H2O2/ Fe2+体系可通过Fenton 反应产⽣羟⾃由基，邻⼆氮菲－Fe2+⽔溶液被羟⾃由基氧化为邻⼆氮菲－Fe3+后，其510nm 最⼤吸收峰消失。
如果反应体系中同时存在羟⾃由基清除剂，则Fenton 反应产⽣的羟⾃由基将被此清除剂全部或部分清除，邻⼆氮菲－Fe2+络合物受到的破坏将会随之减少。
根据这⼀原理，可建⽴以A510变化反映⾃由基清除剂对羟⾃由基清除作⽤的⽐⾊测定法。
2）⽔杨酸法[71]实验原理：羟⾃由基易攻击芳环化合物产⽣羟基化合物，因此可⽤⽔杨酸捕集Fenton 反应体系中的·OH，⽣成的2,3－⼆羟基苯甲酸⽤⼄醚萃取，⽤钨酸钠和亚硝酸钠显⾊，然后⽤分光光度计测定其在510nm 处的吸光值，此吸光值可反映体系中的羟⾃由基浓度。
自由基清除剂
自由基清除剂自由基是一种具有单个未成对电子的分子或原子，它们在人体内的产生受到许多因素的影响，例如环境污染、紫外线照射、吸烟等。
过多的自由基会导致氧化应激，进而损伤细胞和组织，促进衰老和疾病的发生。
为了抵御自由基的危害，科学家们研发了一系列自由基清除剂，以帮助身体减少自由基的量，保持健康。
自由基的危害自由基对人体的危害主要体现在以下几个方面： - 氧化应激：自由基与细胞内的重要生物分子如蛋白质、脂质和核酸反应，损害细胞结构和功能，导致疾病的发生。
- 促进衰老：自由基的积累会导致细胞老化加速，促进皮肤松弛和皱纹产生。
- 健康问题：氧化应激与多种疾病如心血管疾病、糖尿病、癌症等密切相关。
自由基清除剂的作用自由基清除剂是一类化合物，能够帮助中和自由基，降低氧化应激水平，保护细胞免受自由基造成的损害。
自由基清除剂的主要作用有： - 直接中和自由基：自由基清除剂具有捐赠电子的能力，可直接中和自由基。
- 间接增强自由基清除：自由基清除剂能够激活细胞内的抗氧化酶，增加自由基的清除效率。
- 保护细胞膜：自由基清除剂可以稳定脂质双层结构，保护细胞膜避免被氧化损伤。
常见的自由基清除剂自由基清除剂多种多样，常见的包括： - 维生素C：具有很好的抗氧化性质，能够捐赠电子中和自由基，维护细胞功能。
- 维生素E：主要存在于脂肪组织中，能够稳定脂质双层结构，保护细胞膜。
- 类胡萝卜素：如β-胡萝卜素、叶黄素等，具有抗氧化作用，有助于眼睛健康。
- 多酚类物质：如茶多酚、花青素等，存在于茶叶、蔬菜水果中，具有较强的抗氧化能力。
如何摄取自由基清除剂为了摄取足够的自由基清除剂，可以通过合理饮食和补充的方式来满足身体需求： - 多食新鲜水果蔬菜：水果蔬菜富含维生素C、类胡萝卜素等抗氧化物质，有助于增加抗氧化能力。
- 适量摄入坚果：坚果富含维生素E和多酚类化合物，可作为抗氧化零食。
- 合理使用油脂：选择富含不饱和脂肪酸和维生素E的植物油，有助于摄入抗氧化成分。
自由基清除剂及其加工技术讲课文档
• 溶剂萃取法
• 利用茶多酚及其杂质在不同溶剂中溶解度 的不同；
• 用溶剂去杂或抽提。
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• 粗制品的纯化
• 粗制品溶于水，用乙醚萃取，乙醚层 减压回收，干燥即得较纯茶多酚；
• 水层用乙酸乙酯反复萃取，除去水层， 收集乙酸乙酯层；
• 将乙酸乙酯溶液层减压低温浓缩，干 燥，得茶多酚初级氧化聚合物。
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第二节 黄酮类化合物
黄酮类化合物的结构及生理功能 • 黄酮类化合物的结构 • 基本母核：2-苯基色原酮类化合物； • 黄酮、黄酮醇，人体每天从食物中摄取可
达1g； • 二氢黄酮、二氢黄酮醇类、异黄酮、二氢
异黄酮、双黄酮类、查尔酮类、橙酮类、 黄烷醇类、花青素、新黄酮类。
• 抗癌作用
• 致癌物(苯、苯并芘、亚硝基化合物)，由 惰性物经生物转化成的高活性物质，能 破坏细胞结构，引发疾病，转化中产生 一些自由基中间物，进一步形成活性很 强的羟基自由基和单线态氧，引发癌症。
• 黄酮类化合物作为寻找有效抗癌活性物 质。
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• 抗炎作用
• 用热水浸提出多糖、脂类及黄酮类化 合物等可溶性成分，再用有机物溶剂 进一步提纯。
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• 树脂柱纯化法
• 离子交换树脂是一种不溶性高分子物 质，对溶液中的离子具有选择吸附能 力;
• 适宜的树脂，极性相近的黄酮类被吸 附在树脂柱内，得到富集、纯化，用 洗脱剂洗脱。
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• 茶多酚的生理功能
• 清除自由基、增强机体免疫力
自由基清除剂
谢谢观看
谷胱甘肽过氧化物酶是含硒的自由基清除酶，一般通过补硒增加人体内该酶的合成能力，对人体发挥保健发挥作用必须满足三个条件
第一，自由基清除剂要有一定的浓度；第二，因为自由基活泼性极强，一旦产生马上就会与附近的生命大分 子起作用，所以自由基清除剂必须在自由基附近，并且能以极快的速度抢先与自由基结合，否则就起不到应有的 效果；第三，在大多数情况下，清除剂与自由基反应后会变成新的自由基，这个新的自由基的毒性应小于原来自 由基的毒性才有防御作用 。
化学成分
化学成分
自由基清除剂临床疗效图(14张)自由基是具有高度化学活性的物质，是生命活动中多种生化反应的中间产物， 人的生命活动离不开自由基，但体内自由基过多或清除过慢，自由基则会攻击并损坏大分子，对细胞膜、核酸及 机体蛋白质等造成损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发恶性肿瘤等到许多疾病的重要起因。因此，自由 基清除剂可作为保健食品的重要功效成分。
作用
作用
自由基清除剂对维持机体的正常生命活动，保持健康起着重要的作用。但是。随着年龄的增长，机体内产生 自由基的能力逐渐下降，从而减弱了对自由基损害的防御能力，使机体组织器官容易受损，加速了机体的衰老， 引发一系列的疾病。为了防止此类现象的发生，可以人为地由膳食补充自由基清除剂，从而达到防御疾病、延缓 衰老的目的。
主要介绍
主要介绍
自由基清除剂分为非酶类清除剂和酶类清除剂。非酶类清除剂主要有维生素E、维生素C、β-胡萝卜素、微 量元素硒等。酶类清除剂主要有超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶等。
重要产品
重要产品
SOD是最重要的自由基清除剂，已广泛的应用于保健食品的生产中，目前主要从动物血液（如猪血、牛血等） 的红细胞中提取，另外在牛乳、细菌、真菌、高等植物中都含有SOD。
自由基清除剂依达拉奉的临床应用
自由基清除剂依达拉奉的临床应用
朱友志
【期刊名称】《中国社区医师（医学专业）》
【年(卷),期】2009(011)016
【摘要】@@ 药理作用rn依达拉奉的主要成分为3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮.药效学研究及动物实验证实依达拉奉是一种强效的羟自由基清除剂和抗氧化剂,能清除缺血周边和缺血再通部位产生的大量OH-,从而抑制神经细胞功能障碍.依达拉奉作为自由基捕获剂能抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶的活性,刺激前列环素的生成,减少炎症介质白三烯的生成,降低羟自由基的浓度,缩小缺血半暗带发展成梗死的体积,并抑制迟发性神经元死亡[1].
【总页数】1页(P19)
【作者】朱友志
【作者单位】273500,山东兖矿集团总医院急诊科
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.自由基清除剂依达拉奉的作用机制及临床应用 [J], 骆海坤;袁耀辉;王丽华
2.自由基清除剂依达拉奉在缺血性脑卒中的临床应用 [J], 张千;汪莉
3.重组组织型纤溶酶原激活剂联合自由基清除剂依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效和安全性分析 [J], 穆锋;张召平;李苗
4.中药复方制剂疏血通注射液联合自由基清除剂依达拉奉对未经溶栓治疗老年脑梗
死患者的疗效 [J], 李振华
5.疏血通注射液联合自由基清除剂依达拉奉对未经溶栓治疗的老年脑梗死患者的疗效和安全性 [J], 白静; 张静; 曹爽
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自由基清除剂依达拉奉的作用机制及临床应用
自由基清除剂依达拉奉的作用机制及临床应用
骆海坤;袁耀辉;王丽华
【期刊名称】《北方药学》
【年(卷),期】2018(015)006
【摘要】近年来,自由基清除剂在临床实践中被广泛关注,以改善急性脑梗死患者的神经功能障碍及日常生活能力.依达拉奉的化学名称为3-甲基-1-苯基-2-吡唑琳-5-酮,于2001年4月在日本第一次上市,是第一个用于临床治疗急性脑梗死的自由基清除剂,进一步的研究发现,依达拉奉在其他组织、器官也能起到抗氧化应激作用,具有较高的临床应用价值.本文对依达拉奉的作用机制及临床应用进行综述.
【总页数】2页(P138-139)
【作者】骆海坤;袁耀辉;王丽华
【作者单位】邢台市第三医院邢台 054000;邢台市第三医院邢台 054000;邢台市第三医院邢台 054000
【正文语种】中文
【中图分类】R969
【相关文献】
1.自由基清除剂依达拉奉的临床应用 [J], 朱友志
2.自由基清除剂依达拉奉在缺血性脑卒中的临床应用 [J], 张千;汪莉
3.中药复方制剂疏血通注射液联合自由基清除剂依达拉奉对未经溶栓治疗老年脑梗死患者的疗效 [J], 李振华
4.疏血通注射液联合自由基清除剂依达拉奉对未经溶栓治疗的老年脑梗死患者的疗
效和安全性 [J], 白静; 张静; 曹爽
5.依达拉奉右莰醇神经保护作用机制及临床应用进展 [J], 梁新;王亚丽
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机体内活性氧自由基产生的途径
物理因素：(1)X射线→水射解→H·+ OH· +O2 O2-· (2) 光离 R· +O2 O2-· + R 光 光激发 +O2 O2-· 化学因素：无机：M+ +O2→M2+ +O2-· 有机：RH+O2→R·+ O2-·+H+ +O2 O2-·+R 生化因素： 非催化：正铁血红蛋白Fe2++O2→正铁血红蛋白Fe3++O2-· 催 化：胰上的酶：线粒体、微粒体、质膜 可溶性酶：胞外：血浆铜蓝蛋白酶 胞内：黄嘌呤氧化酶、髓过氧化酶
3．参与脂肪加氧酶的生成
血小板脂肪加氧酶作用于花生四烯酸生成 1，2-氢过氧化-5，8，11，14-碳四烯酸（12HPETE），该化合物是具有强生物学活性化合物的前体。在HPETE形成过程中有活性氧自 由基参与。
自由基反应机理
自由基反应动力学有别于普通单分子或双分子反应，因为
Hale Waihona Puke 自由基可以连续传递出现连锁反应。 自由基反应机理：引发、增长和终止3个阶段。
反应初始引发阶段占主导地位，反应体系中的新生自由基形成
许多链的开端，反应物浓度高。 引发后的扩展阶段为反应的主体，如果起始有几个引发自由基， 在扩展阶段没有消失或增加，那么反应中有几条链。
Part
人体内的自由 基令肌肤缺水， 缺乏光泽，出 现干纹，色斑 等问题
击退体 内自由 基 健康 肌肤
有效抑制自由 基，肌肤的质 素明显得到改 善
击退体内的自 由基，彻底解 决底层肌肤问 题，令肌肤光 滑细嫩
第一节 自由基理论
(一)自由基的概念：
由单质或化合物的均裂而产生的带有未成对电子的原子或基 团。它的单电子有强烈的配对倾向，倾向于以各种方式与其
H2O2 也是一种重要的非自由基活性物，容易在活细胞中扩散。过氧化
氢酶能有效地将其转变成水，生成氧自由基。
OH·的活性最强，其半衰期估计为 10-9 秒，其产生后能迅速起反应。 在射线等高能辐射下，通过体内水的均裂作用或经金属催化过程由内 源的过氧化氢分子形成。紫外线能将过氧化氢分子分裂成两个羟自由 基分子。
二、自由基积极的生物学功能
自由基作为人体正常的代谢产物，对机体危害物有 积极的防御作用。 1．增强白细胞的吞噬功能，提高杀菌效果 白细胞在吞噬细菌的过程中，对氧的消耗量激增，会产生大量的 O2 －·和H O ，两者通过Haber-Weiss 反应还会进一步产生OH·，这些活 2 2 性氧对病原菌都有很强的杀灭效果。OH·还可引发被吞噬细菌的不饱 和脂肪酸降解，降解终产物丙二醛也是一种强力杀菌剂，足以致细菌 死亡。 2．促进前列腺素的合成 前列腺素是人体内的一种重要的激素，它以花生四烯酸为前驱物质， 经膜上多酶系统催化氧化生成，其生物合成途径中必须有氧自由基 （OH·或O2－·）的参与。
待到一定阶段，体系中的反应物浓度越来越少，自由基本身互
相碰头的机会越未越多，反应速度不能保持扩展阶段时那徉快，
自由基越来越少，最后反应终于停止。
A-A→ 2A· A· +B-C→A-B+ C· C· + A-A→A-C+ A· 2A· →A- A 2C· →C- C A· +C· →A -C
1O2是另一种非自由基的活性物，可能是体内的组织暴露于光中
形成的。其半衰期估计为10-6秒，具体时间取决于周围基质的性 质。它能通过转移其激发态能量或通过化学结合与其它分子相 互作用。
NO·也是一种很重要的自由基，它是精氨酸在酶作用下形成的
一种信号化合物，能松弛血小管平滑肌，防止血小板的凝集， 从而降低血压。也可通过激活参与初级免疫的巨嗜细胞而产生。 它的半衰期为 6 ～ 50 秒，很容易与氧发生反应，反应产物 NO2 也 是自由基。它还能与生物分子直接反应或与O2－·结合形成过氧 亚硝酸盐（ONOO－）。NO·过多会产生细胞毒性。
第六章 自由基清除剂
本章要点 自由基理论的产生机理及来源 自由基对机体活动的影响 自由基清除剂的基本概念
英国人Harman于1956年提出了自由基学说：自由
基攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机 体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的 重要起因，其中的观点被越来越多的实验所证明。
他原子基团结合，形成更稳定的结构，因而自由基非常活泼，
成为许多反应的活性中间体。 （二）自由基的产生： 人体细胞在正常的代谢过程中，或者受到外界条件的刺激 （如高压氧、高能辐射、抗癌剂、抗菌剂、杀虫剂、麻醉剂 等药物，香烟烟雾和光化学空气污染物等作用），都会刺激
机体产生活性氧自由基。
人体内的自由基分为氧自由基和非氧自由基。
氧自由基占主导地位，约占自由基总量的95%。
超氧阴离子 过氧化氢分子 O2－· 烷氧基 RO· H2O2 氮氧自由基 NO· 羟自由基 OH· 氢过氧基 HO2－· 烷过氧基 ROO· 单线态氧
1O2
过氧亚硝酸盐 氢过氧化物 ONOO－ ROOH
它们又统称为活性氧，都是人体内最为重要的自由基。 非氧自由基主要有氢自由基（H·）和有机自由基（R·）。
引发 扩展
终止
如果反应体系中有自由基清除剂存在，它就能很快地捕捉自由基使扩 散不能形成。 因为氧分子与许多有机物反应时产生自由基，而自由基清除剂能捕捉 过氧自由基而中断连锁反应，阻止有机物的氧化，所以自由基清除剂 又称为抗氧化剂。
（三）自由基的来源
人体内特定的自由基有不同的来源。 O2－·扮演着非常重要的角色，因为在反应顺序上其他许多活性中间 产物的形成都始于与 O2－·起作用。它是从黄嘌呤氧化酶、NADPH氧 化酶通过酶的一电子还原作用释放的氧产生的或由呼吸链裂解生成的。 人体利用的氧气中约有1%～3%转化为O2－·。
自由基是人体生命活动中各种生化反应的 中间代谢产物，具有高度的化学活性，是 机体有效的防御系统，若不能维持一定水 平则会影响机体的生命活动。 但过多的自由基会攻击机体内的生命大分 子物质及各种细胞器，造成机体在分子水 平、细胞水平及组织器官水平的各种损伤， 加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。
受自由 基影响 的肌肤