蚕豆根瘤菌的分离、筛选及其肥效研究
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区应用 的蚕豆根 瘤菌 。
１ 材料 与 方 法
１ １ 试 验 材 料 ．
１ １ １ 蚕 豆 品 种 临 蚕 ２号 。 ．．
１１ ２ ．． Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｇ Ｇ５ Ｇ６、 Ｇ８ Ｇ９ ４ Ｇ７
装人低 氮 营养液 （ 面不 能高 于 上层 钵 底 部 ） 用 牛 液 ， 皮纸 封 口（ 用材 料 均提 前 灭 菌 ） 同 时在 牛皮 纸 中 所 ， 间剪 一小洞 （ 径 约 １ｃ 。 以上 步 骤 均 在 超 净 台 直 ｍ） 上进 行 ， 后 转入 光 照强 度 为 ６０ ０～１ ０ ｘ左 然 ０ ０００ Ｌ 右 ， 夜温度 为 （３±５ ℃， 昼 ２ ） 日照 时 数 １ ４～１ ６ｈ的 日
Ｇ ０ Ｇ １ １ 株 菌株 。 １、１共 １
光室 中培养 。待 蚕 豆 生 长 至 ４ ０～４ ５ｄ后 收 获 。收
获时 用水 冲洗 净 根 ， 别 测 定 每株 蚕 豆 的有 效 根 瘤 分 数（ 以呈现粉 红色 为标 准 ）鲜瘤 重 、 、 植株地 上部 干物
重。
１ １ ３ 供 试 土壤 采集 于 甘肃 省农 业 科 学 院兰 州 ．． 农场试 验地 ， 该土 壤 属灌 淤 土 ， 化性 状 为 ： 机 质 理 有
况下 占明显 优 势 ， 往 往 其 结 瘤 固 氮 能力 不 强＿ 。 可 ４ Ｊ 因 此 ， 豆 科 植 物 进 行 根 瘤 菌 有 效 共 生 匹 配 筛 选 就 对
１ １４ Ｙ Ａ培 养基 ． ． Ｍ
１ ２ 试 验 方 法 ．
按参 考文献 ［ ］ ６ 的配 方进行 。
１２ １ 蚕 豆根 瘤茵的 分 离与纯化 分离 、 化参 考 ．． 纯
沿 各 种 子 根 部 加 入 该 菌 液 ２ｍ 。 在 底 层 的 供 水 瓶 中 ｌ
豆 主产 区存在 蚕豆 根 系上 根瘤 有效 结 瘤较 低 ， 重 严
影 响着蚕 豆共 生 固氮效 应 的 良好 发 挥 ， 此 我们 开 为 展 了此项研 究 ， 以期 筛 选 出适 合 于 甘肃 省 蚕 豆种 植
文献 ［ ］ ７ 的方法 进行 。
１２ ２ 蚕豆 根瘤 茵 回接 ．． 菌株 培养 ： 将供 试 菌株 先 接到 Ｙ ＭＡ斜 面活化 ， 然后 转接 于 Ｙ Ａ培养液 ， 夜 Ｍ 过 培养至 对数期 ， 菌株 的生长情 况用 平板 法检测 ， 其 计
算 含菌 量 。
灭 菌处理 ： 将试 验所 需用 的镊子 、 培养皿 、 滤纸 、 玻 璃棒 包好 ，２ ℃ ， 菌 ３ ｉ。分别 称 取 ７ 蛭 １１ 灭 ０ ｍｎ ５ｇ 石 装入 塞有纱 布条 的 塑料 杯 中 ， 下 层 的玻 璃瓶 中 在 注 入 ５ Ｉ 馏 水 ， 装 有 蛭 石 的 塑 料 杯 置 于玻 璃 ０ｍ 蒸 将 瓶 上 ， 用牛皮 纸包 扎好 ， 其放 入高 压锅 中间歇 灭 再 将
根瘤菌 豆科共 生体 系是 生物 固氮 中最 有效 的成
员， 蚕豆作 为一种 豆科作 物 ， 营养价值 高 、 附加值 高 ， 是 我国大 面积种 植 的 豆科 作 物之 一 。研 究 表 明 ， 接 种根 瘤菌可 以显著 地 提 高蚕 豆 的 产 量 ， 加 土 壤肥 增 力 。以往对 高效根 瘤菌 的筛选 主要 以有效性 高作 为 最为重 要甚 至唯 一 的指 标… ， 以此 筛 选 出 的所 谓 高 效根瘤 菌 ， 用到 田问试 验 中时 ， 应 却发 现有一 些并 不 能充分 发挥 出 其应 有 的共 生 固氮 潜 能 Ｅ３， 其 原 ２ ］究 ， 因， 一是 未能筛 选 到能 适 合 土壤 环 境 与豆 科 植 物有 效 共生 匹配 的根瘤 菌 ； 是大 量 适 应 土壤 环 境 的土 二 著根瘤 菌与接 种根 瘤 菌进 行 竞 争 ， 著菌 在 很 多情 土
王文丽， 李 娟 ， 秉林 卢
（ 甘肃 省 农 业 科 学 院 土壤 肥 料 与 节 水 农业 研 究 所 ，甘 肃 兰 州 ７０７ ） ３００
摘 要 ： 甘 肃省 不 同蚕 豆 种 植 区采 集 蚕 豆根 瘤 ， 用选 择 性培 养 基 ， 离获 得 到 １ 株 蚕 豆 根 瘤 菌 ， 过 蛭 石 从 采 分 １ 经
菌 ３ｈ １ １ 。 ，２ ℃
显 得 十分 必要 。甘 肃 省豆 科作 物 面积 大 ， 其是 蚕 尤 豆， 常年播 种 面积 在 ９ ３ ．３万公 顷 以上 Ｊ但 是 在 蚕 ，
蛭石 栽培及 接 种 ： 层钵 法 ： ４粒 发芽 一 致 ， 双 将 芽 长 １ｃ ｍ左 右 的蚕 豆种 子 置 于发 酵 好 的 根瘤 菌 液 中 ， 泡 １ ｉ（ 浸 ５ｒ ｎ 以淹 没种 子为 宜 ）用无 菌镊 子 夹取 ａ ， 其植 入装 有无 菌蛭石 的塑料 杯 中 ， 每杯种 植 １ ， 粒 再
粉 和 土 壤 栽 培 筛 选 试验 ， 选 出 ７株 （ ｌ Ｇ 、 ６ Ｇ 、 ８ Ｇ ０ Ｇ １ 根 瘤 菌 ， 们 与 临 蚕 ２号 蚕 豆 有 效 共 生 匹配 效 果 筛 Ｇ 、２ Ｇ 、 ７ Ｇ 、 １ 、 １ ） 它 好 ， 生 固 氮力 强 ， 有 一定 的 生产 应 用 价 值 。 共 具 关 键 词 ： 豆 ； 瘤 菌 ； 选 蚕 根 筛 中 图 分 类 号 ：Ｓ４ ． １４ ３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ０７ ０ （０ ０ ０ 一 ｌ２ｏ １０ ．６ １２ １ ）６Ｏ １一４
第 ２ 卷第 ６期 ８
２１ ０ ０年 １ 月 １
干 旱 地 区 农 业 研 究
ｌ ｕ ａ ｓ ａ ｃ ｎ ｔ ｅ Ａｒ ｄ Ａｒ ａ ｔБайду номын сангаасｒ ｌ Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｉ ｈ ｉ ｅ ｓ
Ｖｏ ． ８ Ｎｏ． １２ ６ ＮＯ Ｖ．２ ０ ０１
蚕 豆根 瘤 菌 的分 离 、 筛选 及 其肥 效研 究
１ 材料 与 方 法
１ １ 试 验 材 料 ．
１ １ １ 蚕 豆 品 种 临 蚕 ２号 。 ．．
１１ ２ ．． Ｇ１ Ｇ２ Ｇ３ Ｇ Ｇ５ Ｇ６、 Ｇ８ Ｇ９ ４ Ｇ７
装人低 氮 营养液 （ 面不 能高 于 上层 钵 底 部 ） 用 牛 液 ， 皮纸 封 口（ 用材 料 均提 前 灭 菌 ） 同 时在 牛皮 纸 中 所 ， 间剪 一小洞 （ 径 约 １ｃ 。 以上 步 骤 均 在 超 净 台 直 ｍ） 上进 行 ， 后 转入 光 照强 度 为 ６０ ０～１ ０ ｘ左 然 ０ ０００ Ｌ 右 ， 夜温度 为 （３±５ ℃， 昼 ２ ） 日照 时 数 １ ４～１ ６ｈ的 日
Ｇ ０ Ｇ １ １ 株 菌株 。 １、１共 １
光室 中培养 。待 蚕 豆 生 长 至 ４ ０～４ ５ｄ后 收 获 。收
获时 用水 冲洗 净 根 ， 别 测 定 每株 蚕 豆 的有 效 根 瘤 分 数（ 以呈现粉 红色 为标 准 ）鲜瘤 重 、 、 植株地 上部 干物
重。
１ １ ３ 供 试 土壤 采集 于 甘肃 省农 业 科 学 院兰 州 ．． 农场试 验地 ， 该土 壤 属灌 淤 土 ， 化性 状 为 ： 机 质 理 有
况下 占明显 优 势 ， 往 往 其 结 瘤 固 氮 能力 不 强＿ 。 可 ４ Ｊ 因 此 ， 豆 科 植 物 进 行 根 瘤 菌 有 效 共 生 匹 配 筛 选 就 对
１ １４ Ｙ Ａ培 养基 ． ． Ｍ
１ ２ 试 验 方 法 ．
按参 考文献 ［ ］ ６ 的配 方进行 。
１２ １ 蚕 豆根 瘤茵的 分 离与纯化 分离 、 化参 考 ．． 纯
沿 各 种 子 根 部 加 入 该 菌 液 ２ｍ 。 在 底 层 的 供 水 瓶 中 ｌ
豆 主产 区存在 蚕豆 根 系上 根瘤 有效 结 瘤较 低 ， 重 严
影 响着蚕 豆共 生 固氮效 应 的 良好 发 挥 ， 此 我们 开 为 展 了此项研 究 ， 以期 筛 选 出适 合 于 甘肃 省 蚕 豆种 植
文献 ［ ］ ７ 的方法 进行 。
１２ ２ 蚕豆 根瘤 茵 回接 ．． 菌株 培养 ： 将供 试 菌株 先 接到 Ｙ ＭＡ斜 面活化 ， 然后 转接 于 Ｙ Ａ培养液 ， 夜 Ｍ 过 培养至 对数期 ， 菌株 的生长情 况用 平板 法检测 ， 其 计
算 含菌 量 。
灭 菌处理 ： 将试 验所 需用 的镊子 、 培养皿 、 滤纸 、 玻 璃棒 包好 ，２ ℃ ， 菌 ３ ｉ。分别 称 取 ７ 蛭 １１ 灭 ０ ｍｎ ５ｇ 石 装入 塞有纱 布条 的 塑料 杯 中 ， 下 层 的玻 璃瓶 中 在 注 入 ５ Ｉ 馏 水 ， 装 有 蛭 石 的 塑 料 杯 置 于玻 璃 ０ｍ 蒸 将 瓶 上 ， 用牛皮 纸包 扎好 ， 其放 入高 压锅 中间歇 灭 再 将
根瘤菌 豆科共 生体 系是 生物 固氮 中最 有效 的成
员， 蚕豆作 为一种 豆科作 物 ， 营养价值 高 、 附加值 高 ， 是 我国大 面积种 植 的 豆科 作 物之 一 。研 究 表 明 ， 接 种根 瘤菌可 以显著 地 提 高蚕 豆 的 产 量 ， 加 土 壤肥 增 力 。以往对 高效根 瘤菌 的筛选 主要 以有效性 高作 为 最为重 要甚 至唯 一 的指 标… ， 以此 筛 选 出 的所 谓 高 效根瘤 菌 ， 用到 田问试 验 中时 ， 应 却发 现有一 些并 不 能充分 发挥 出 其应 有 的共 生 固氮 潜 能 Ｅ３， 其 原 ２ ］究 ， 因， 一是 未能筛 选 到能 适 合 土壤 环 境 与豆 科 植 物有 效 共生 匹配 的根瘤 菌 ； 是大 量 适 应 土壤 环 境 的土 二 著根瘤 菌与接 种根 瘤 菌进 行 竞 争 ， 著菌 在 很 多情 土
王文丽， 李 娟 ， 秉林 卢
（ 甘肃 省 农 业 科 学 院 土壤 肥 料 与 节 水 农业 研 究 所 ，甘 肃 兰 州 ７０７ ） ３００
摘 要 ： 甘 肃省 不 同蚕 豆 种 植 区采 集 蚕 豆根 瘤 ， 用选 择 性培 养 基 ， 离获 得 到 １ 株 蚕 豆 根 瘤 菌 ， 过 蛭 石 从 采 分 １ 经
菌 ３ｈ １ １ 。 ，２ ℃
显 得 十分 必要 。甘 肃 省豆 科作 物 面积 大 ， 其是 蚕 尤 豆， 常年播 种 面积 在 ９ ３ ．３万公 顷 以上 Ｊ但 是 在 蚕 ，
蛭石 栽培及 接 种 ： 层钵 法 ： ４粒 发芽 一 致 ， 双 将 芽 长 １ｃ ｍ左 右 的蚕 豆种 子 置 于发 酵 好 的 根瘤 菌 液 中 ， 泡 １ ｉ（ 浸 ５ｒ ｎ 以淹 没种 子为 宜 ）用无 菌镊 子 夹取 ａ ， 其植 入装 有无 菌蛭石 的塑料 杯 中 ， 每杯种 植 １ ， 粒 再
粉 和 土 壤 栽 培 筛 选 试验 ， 选 出 ７株 （ ｌ Ｇ 、 ６ Ｇ 、 ８ Ｇ ０ Ｇ １ 根 瘤 菌 ， 们 与 临 蚕 ２号 蚕 豆 有 效 共 生 匹配 效 果 筛 Ｇ 、２ Ｇ 、 ７ Ｇ 、 １ 、 １ ） 它 好 ， 生 固 氮力 强 ， 有 一定 的 生产 应 用 价 值 。 共 具 关 键 词 ： 豆 ； 瘤 菌 ； 选 蚕 根 筛 中 图 分 类 号 ：Ｓ４ ． １４ ３ 文 献标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ０７ ０ （０ ０ ０ 一 ｌ２ｏ １０ ．６ １２ １ ）６Ｏ １一４
第 ２ 卷第 ６期 ８
２１ ０ ０年 １ 月 １
干 旱 地 区 农 业 研 究
ｌ ｕ ａ ｓ ａ ｃ ｎ ｔ ｅ Ａｒ ｄ Ａｒ ａ ｔБайду номын сангаасｒ ｌ Ｒｅ ｅ ｒ ｈ ｉ ｈ ｉ ｅ ｓ
Ｖｏ ． ８ Ｎｏ． １２ ６ ＮＯ Ｖ．２ ０ ０１
蚕 豆根 瘤 菌 的分 离 、 筛选 及 其肥 效研 究