氟嘧菌酯分析方法述评_杜微

量浓度为50、20、5、2、0.5、0.2、0.05、0.025、0.01、0.005、0.002 5、 3次加入10 mL正己烷萃取，处理上部的正己烷相。转移底
0.001、0.000 5、0.000 25 mg/L氟嘧菌酯标准溶液混合。放 部的乙腈-水相至100 mL梨形烧瓶中。在50 ℃水浴条件
不 同 质 量 浓 度 的 氟 嘧 菌 酯 标 准 溶 液 ，以 仪 器 响 应 峰 面 积 对 氟 嘧 菌 酯 的 质 量 浓 度 进 行 线 性 方 程 ，线 性 方 程y =8.062 5x +1.121 5，相关系数r 2=0.999 9。测定回收 率 采 用 标 准 添 加 法 ，平 行 测 定 6 次 ，方 法 的 回 收 率 为 99.9%~101.4%，测试精密度(RSD)为0.44%。
2.3 溶液配制 标准溶液的配制：称取25 mg氟嘧菌酯(异构体E -Z
体积比90∶10)于50 mL容量瓶中，用乙腈定容，配制出 质量浓度为500 mg/L氟嘧菌酯储备液。用乙腈-水(体积 比60∶40)溶液稀释至下列质量浓度：50、20、5、2、0.5、0.2、
收稿日期：2014-05-17 作者简介：杜微(1981—)，女，沈阳人，工程师，主要从事农药剂型加工工作。Tel：024-85869116，E-mail：duwei@sinochem.com。
摘要：总结了文献报道的氟嘧菌酯的分析方法。氟嘧菌酯制剂的分析主要采用高效液相色谱法，残留物的分析 主要采用高效液相色谱-质谱法、超高效液相色谱法以及气相色谱-质谱分析方法。 关键词：氟嘧菌酯；高效液相色谱法；高效液相色谱法-质谱法；超高效液相色谱法；气相色谱-质谱法；分析方法 中图分类号：TQ450 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2014)07-0542-04
5 mL的稀释液到一个配置有50 g 38~75 μm生物磁 珠的S-X3聚苯乙烯凝胶的自动化凝胶渗透色仪GPC中， 用 环 己 烷 - 乙 酸 乙 酯 ( 体 积 比 5 0 ∶ 5 0 ) 作 为 洗 脱 剂 ，流 速 为5 mL/min。放弃120 mL的第一部分(24 min)，收集随后 部分60 mL(12 min)在250 mL圆底烧瓶中。下一个样品前 用50 mL(10 min)洗。在50 ℃水浴条件下用旋转蒸发仪蒸
A Review of Analysis Methods of Fluoxastrobin
DU Wei, SUN Ke, ZHANG Min-heng
(State Key Laboratory of the Discovery and Development of Novel Pesticide, Shenyang Research Institute of Chemical Industry Co., Ltd., Shenyang 110021, China)
第7期
杜 微，等：氟嘧菌酯分析方法述评
543
0.05、0.025、0.01、0.005、0.002 5、0.001、0.000 5、0.000 25 mg/L 净化但不能除去脂肪。在萃取后能够直接进行固相萃取净
制备出氟嘧菌酯标准溶液。
化。含有高脂肪的材料，如油菜种子，在聚合物柱净化前应
内标溶液的配制：称取5 mg氟嘧菌酯-d4(异构体E -Z 进行一个额外的去除脂肪的净化步骤。去除脂肪可以用在
Abstract: This paper summarizes the analysis methods reported in literature for fluoxastrobin. The prime methods for fluoxastrobin formulation is high performance liquid chromatography and fluoxastrobin residues are high performance liquid chromatography-mass spectrometry, ultra performance liquid chromatography and Gas chromatography-mass spectrometry. Key words: fluoxastrobin; HPLC; HPLC-MS; UPLC; GC-MS; analysis
材料中含有适度脂肪，例如小麦幼芽和油菜荚，能被 留，收集洗脱液于10 mL试管中。在50 ℃用TurboVap浓
544
农 药 AGROCHEMICALS
第53卷
缩洗脱液至干燥。溶解干残渣在5 mL(4.00 mL的谷物，油 3.4 测定
现有的氟嘧菌酯(fluoxastrobin)制剂的分析方法采用 高效液相色谱法，残留量的分析方法采用高效液相色谱质谱法，高效液相色谱法以及气相色谱-质谱法。在分析 过程中通过对样品进行提取、萃取、净化及洗脱后，采用高 效液相色谱-质谱法，高效液相色谱法以及气相色谱-质谱 法进行测定。
1 氟嘧菌酯的制剂分析
2 氟嘧菌酯残留量分析方法1
用高效液相色谱-质谱法测定氟嘧菌酯的残留量[2]。
2.1 仪器与试剂 仪器：Agilent 1100高效液相色谱-三重串联四级杆质
谱仪；自动进样器。试剂：乙酸、丙酮、乙腈、环己烷、二氯 甲烷、乙酸乙酯。
2.2 操作条件
2.2.1 色谱操作条件 色谱柱：125 mm×4.0 mm，内填Superspher 60 RP-
在4 ℃(±3 ℃)的冰箱内至少可保存6个月。
下用旋转蒸发仪蒸干。收集干的残留物在5 mL水中，超声
2.4 提取
2.4.1 普通提取 称取5.0 g冷冻均匀的样品(油菜种子或豆荚称10.0 g)
放入150 mL玻璃烧杯中。加入30 mL丙酮-水(体积比 75∶25)溶液浸泡干样品至少30 min，然后使用高速搅拌混 合，直到获得均匀的混合物(如搅拌3 min)。用5 mL丙酮水(体积比75∶25)溶液清洗搅拌机，添加约2.5 g硅藻土助 滤剂有助于提取和旋流。用含折叠式过滤器的漏斗过滤 提取到100 mL容量瓶中，也可以通过一个装有脱脂棉塞的 注射器装在真空管中过滤提取。用30 mL丙酮-水(体积比 75∶25)溶液清洗玻璃烧杯和过滤的固体颗粒，并丢弃固 体颗粒。用丙酮-水(体积比75∶25)填充到滤液至100 mL， 彻底混合均匀。去除脂肪含量高的材料，对于所有其他材 料进行固相萃取。
用高效液相色谱法测定含氟嘧菌酯的制剂，外标法定 量[1]。
1.1 操作条件 色谱柱：Zorbax Extend C18柱；流动相：[硫酸/水(体积
比5∶995)]-[乙腈/四氢呋喃/甲醇(体积比500∶250∶250)] 体积比45∶55；紫外检测波长：273 nm。
1.2 方法的线性关系、回收率和精密度 在 方 法 所 确 定 的 仪 器 分 析 条 件 下 ，取 一 系 列 5 个
出氟嘧菌酯-d4内标溶液。
培养管中。用TurboVap浓缩仪在50 ℃时浓缩，剩余物大约
将0.01 mg/L氟嘧菌酯-d4内标溶液(相当于0.008 5 mg/L 1 mL。往剩余物中加入5 mL乙腈，用超声波浴混匀。将溶
氟嘧菌酯-d4 E 体和0.001 5 mg/L氟嘧菌酯-d4 Z 体)与质 液转移到50 mL分液漏斗中，用15 mL乙腈冲洗培养管。分
体积比85∶15)于100 mL容量瓶中，用乙腈定容，配制出 分液漏斗中液/液分离，或使用硅藻土柱或凝胶渗透色谱仪。
浓度为50 mg/L氟嘧菌酯-d4储备液。用乙腈-水(体积比
1) 液/液分离
60∶40)溶液稀释至下列质量浓度5、2、0.2、0.01 mg/L制备
转移稀释的5 mL滤液(根据1.4.1方法得到)加入13 mL
2.4.3 高脂肪材料的脂肪去除
2.4.4 固相萃取净化 安装一个瓦里安BondElut ENV柱管在工作位置，顶
部配置真空装置。养护这个柱管用5 mL乙酸乙酯，5 mL甲 醇中，最后5 mL水。在加入下一个溶剂前允许让每个溶剂 由下到上流过。高脂肪材料净化根据1.4.3所得溶液直接 使用。其他材料根据1.4.2所得滤液转移5~13 mL一次性培 养管中。加4~5 mL的水作为绿色环保材料，防止秸秆和小 麦发芽样品蒸发过程中沉淀，在蒸发后获得更净化的残留 物。在50 ℃用TurboVap浓缩得到残留物。应用上述步骤所 得残留物到预处理柱管，允许渗滤通过该柱，如果可能的不 应用真空或压力。用5 mL水洗培养管，水也通过该柱，丢弃 洗脱液。使用超声波浴分4次每次2.5 mL的甲醇-水(体积比 1∶1)冲洗培养管，应用冲洗液通过该柱并丢弃洗脱液。用 3 mL甲醇(ENV and HyperSep)或1 mL甲醇(Oasis)冲洗柱管， 丢弃洗脱液。用8 mL乙酸乙酯洗脱在柱管中的氟嘧菌酯残
2.4.2 微波辅助提取淀粉含量高的材料
处理。继续固相萃取净化。 2) 硅藻土净化和凝胶渗透色谱法(二选一) 装一个3 mL的硅藻土柱，顶部配置真空装置。转移稀
释的5 mL滤液(根据1.4.1方法得到)加入13 mL培养管中， 用TurboVap浓缩仪在50 ℃时浓缩，剩余物大约2 mL。往剩 余物中加入1 mL水，用超声波浴混匀。应用溶液至硅藻土 柱并使其渗透通过该柱。允许至少10 min以达到平衡。用 12 mL二氯甲烷冲洗色谱柱。收集洗脱液在一个10 mL的 试管中。用TurboVap浓缩仪在50 ℃将洗脱液蒸至干燥，收 集的干残渣来自百度文库加入10 mL的环己烷-乙酸乙酯混合物。
select B填充物，粒径4 μm；柱温：40 ℃；流动相A：水-乙腈 (体积比10∶90)+0.1 mL/L醋酸溶液，B：乙腈+0.1 mL/L醋 酸溶液；梯度：0 min 55% B，5.90 min 55% B，6.00 min 80% B， 9.90 min 80% B，10 min 55% B；流速：1.0 mL/min；停止时 间：12 min；检测波长：275 nm；进样体积：25 μL；保留时间： E体：约4 min，Z体：约5 min。
第53卷第7期
农药
2014年7月
AGROCHEMICALS
杜微, 孙克, 张敏恒. 氟嘧菌酯分析方法述评[J]. 农药, 2014, 53(7): 542-545.
Vol. 53, No. 7 Jul. 2014
氟嘧菌酯分析方法述评
杜 微，孙 克，张敏恒
(沈阳化工研究院有限公司 新农药创制与开发国家重点实验室，沈阳 110021)
2.2.2 质谱操作条件 电喷雾离子源(ESI)；正离子扫描；多反应监测(MRM)；
电喷雾电压：4 800 V；离子源温度：300 ℃；脱溶剂气温度： 300 ℃；雾化气：氮气1.48 L/min；气帘气：氮气1.44 L/min；碰 撞气：氮气，0.87 L/min；涡轮增压气：氮气7.50 L/min。
称取5.0 g冷冻的样品于装有筛板和塑料阀门的60 mL 干收集部分。收集干的残留物在5 mL水中，超声处理。继
空柱管中。加入约5 g硅藻土助滤剂和40 mL丙酮-水(体积 续固相萃取净化。
比75∶25)溶液，用巴氏吸管或玻璃刮勺混匀，浸泡干样品 30 min。放置柱管(移走巴氏吸管或玻璃刮勺)在微波萃取 仪上，在250 W加热3 min(大约10个样品)，温度大约为40 ℃。 将柱管安装在顶部有真空装置的工作位置，吸取提取液在 100 mL容量瓶中，必要时应用真空。柱管内剩余的残留物 加入20 mL丙酮-水(体积比75∶25)溶液用巴氏吸管或玻 璃刮勺混匀。再次将柱管放置(移走巴氏吸管或玻璃刮勺) 在微波萃取仪上，在250 W加热2.5 min(10个样品)，温度大 约为40 ℃。再次将柱管安装在顶部有真空装置的工作位 置，吸取提取液在同一个100 mL容量瓶中，必要时应用真 空。用大约30 mL丙酮-水(体积比75∶25)溶液洗涤柱管内 的剩余的残留物。丢弃在柱管内的残留物。合并的提取液 在100 mL容量瓶中，用丙酮-水(体积比75∶25)溶液稀释 至100 mL，混匀。继续固相萃取净化。