基因工程、细胞工程_0
基因工程、克隆技术
控制药品合成的相应基因
①体外基因治疗 ②体内基因治疗
5.两种基因治疗途径及其特点
途径
方法
特点
体外基因 不 治疗 同 点
体内基因 治疗
从患者体内获得某种、 细胞扩增→输入体内(实 例中第一个)
状。
蛋白质功能
蛋白质
氨基酸
脱氧核苷酸
听课心得
审题关键：“工具酶”、“植物细胞”、“原理”、“染 色体上”、“预期”
命题来源：基因工程和蛋白质工程。
思路分析：(1)转基因植物的培育过程中，基因工程的工具酶是限 制制性核酸内切酶的DNA连接酶，目的基因只有含有启动子，才 能被RNA聚合酶识别并与之结合进行转录。(2)接受目的基因的受 体细胞若 植物体细胞，可采用植物组织培养技术获得转基因植物 。(3)通过对比转基因植物是否普通的非转基因植物的出油率高。 (4)蛋白质工程设计流程是：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白 质结构→推测出应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列。
获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
区别
实质
定向改造或生产人类所需的蛋白质
定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品
结果
生产自然界没有的蛋白质
生产自然界中已有的蛋白质
联系
蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现
动物细胞
显微注射法 受精卵
微生物细胞
Ca2＋处理法 原核细胞
转化过程
目的基因插入Ti 质粒的T-DNA上 →农杆菌→导入 植物细胞→整合 到受体细胞的染 色体DNA→表达
2012高三生物二轮复习课件：第1部分 专题9 第1讲
• 1．转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。 质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等 四种限制酶切割位点，培养皿中含有卡那 霉素，会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。 下列说法错误的是( )
• A．构建含抗病基因的表达载体A时，应选 用限制酶PstⅠ、SmaⅠ 对含抗病基因的 DNA、质粒进行切割 • B．导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表 达载体A中含有抗卡那霉素基因，作为标记 基因 • C．香蕉组织细胞具有全能性，因此，可以 利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉 组织细胞培育成植株 • D．图中①、②依次表示组织培养过程中香 蕉组织细胞的脱分化，再分化
• 3.蛋白质工程与基因工程的比较
项目 蛋白质工程 基因工程
预期蛋白质功能→ 获取目的基
设计预期的蛋白 质结构→推测氨 区 过 基酸序列→找到 因→构建 表达载体 →导入受 体细胞→ 目的基因
别 程 对应的脱氧核苷 酸序列→合成
项目
实 质
区 别
结 果
蛋白质工程 基因工程 定向改造或 定向改造生物的遗传 生产人类 特性，以获得人类 所需的蛋 所需的生物类型或 白质 生物产品 生产自然界 生产自然界中已有的 没有的蛋 蛋白质 白质
•
(2011·浙江理综卷)将ada(腺苷酸脱氨酶 基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功 表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 ( )
• A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
• B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内
• 解析： 受体大肠杆菌成功表达腺苷酸脱 氨酶，说明每个大肠杆菌细胞至少含有一 个重组质粒，且每个ada至少指导合成一个 腺苷酸脱氨酶分子。重组质粒的形成需先 用限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒 形成相同的黏性末端，再在DNA连接酶的 作用下连接起来，连接起来的序列中会含 有限制性核酸内切酶的识别位点。不同的 限制性核酸内切酶识别位点不同，不是每 个限制性核酸内切酶的识别位点都能插入 ada，C项错误。 • 答案： C
生物技术与工程之细胞工程与基因工程 微课微练(二) 基因工程中限制酶的选取与基因表达载体的构建
专题9 生物技术与工程之细胞工程与基因工程微课微练(二) 基因工程中限制酶的选取与基因表达载体的构建一、选择题1．(2022·东城区一模)自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。
我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如图)，通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。
下列相关叙述错误的是()A．上述获得蓝色玫瑰的方案中无需转入能调控液泡pH的基因B．将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeⅠ和Bam HⅠC．sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的D．农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上解析：选B蓝色玫瑰细胞质基质中的靛蓝能够稳定显色，不受pH的影响，故本题方案中无需转入能调控液泡pH的基因，A正确；将sfp基因插入Ti质粒时若使用的限制酶是PmeⅠ和Bam HⅠ，则会将终止子1一同切除，故只能用Bam H Ⅰ，B错误；sfp和idgS基因具有各自的启动子，表达是相互独立进行的，C正确；将目的基因导入植物细胞可采用农杆菌转化法，故农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上，D正确。
2．(2022·辽宁三模)ACC合成酶是乙烯合成的关键酶，乙烯的合成会影响番茄的储藏和运输。
如图为科学家利用ACC合成酶基因的反向连接构建载体，通过基因工程设计的耐储转基因番茄流程图。
下列说法不正确的是()A．引物的特异性是能够从番茄DNA中获取ACC合成酶基因的关键B．反向连接的ACC合成酶基因合成的mRNA通过与正常的ACC合成酶基因的mRNA 互补，限制了细胞内乙烯的合成C．可以在培养基中加入氨苄青霉素和四环素，存活下来的细胞内则含有携带目的基因的质粒D．设计双酶切处理目的基因及载体的目的是更好地保证目的基因的反向连接解析：选C引物能与ACC合成酶基因通过碱基互补配对结合定位ACC合成酶基因的位置，因此引物的特异性是能够从番茄DNA中获取ACC合成酶基因的关键，A正确；反向连接的ACC合成酶基因合成的mRNA通过与正常的ACC合成酶基因的mRNA互补，使ACC合成酶基因不能正常表达，限制了细胞内乙烯的合成，B正确；从题图中可知，基因表达载体中ACC合成酶基因破坏了四环素抗性基因，因此含有携带目的基因质粒的细胞能在氨苄青霉素培养基中存活，但不能在四环素培养基中存活，C错误；设计双酶切处理目的基因及载体是为了更好地保证目的基因的反向连接，D正确。
技术领域分类及代码
技术领域分类及代码01．信息技术：指研制计算机硬件、软件、外部设备、通信网络设备的活动，以及利用计算机硬件、软件及数字传递网对信息进行文字、图形、特征识别、信息采集、信息处理和传递的活动。
02．生物技术：包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程，指为了生物技03040506．自动化技术：指在控制系统、自动化技术应用、自动化元件、仪表与装置、人工智能自动化、机器人等领域中的活动。
07．航天技术：有关运载火箭及人造卫星本体的研究及有关为了跟踪、通讯而使用的地面设备的研究而进行的活动。
不包括天文学及气象观察。
08．海洋技术：包括有关维护海洋权益和公益服务技术研究、海洋生物资源的开发利用及产业化、海洋油气勘探开发技术、海洋环境要素监测技术等活动。
09．其它技术领域：属于技术领域，但不能归入上述八类领域的其它技术活动。
课题活动类型分类及代码1．基础研究：为获得新知识而进行的独创性研究。
其目的是揭示观察到的现象和事实的基本原理和规律，而不以任何特定的实际应用为目的。
2．应用研究：为获得新的科学技术知识而进行的独创性研究。
它主要针对某一后者。
34存在的技术问题而进行的系统性活动。
它不具有创新成份。
此类活动包括为达要生产目的而进行的定型设计和试制以及为扩大新产品的生产规模和新方法、新技术、新工艺等的应用领域而进行的适应性试验。
＊研究与试验发展、研究与试验发展成果应用和工业生产活动三者之间的界限大致划分如下：①新产品的研制实质性的新产品，即完全新的新产品或对现有产品的性能进行重大改进的设计、制造和试验，是研究与发展活动。
对引进（或购买）现成的技术成果（如专利、技术诀窍、图纸和样机等）进行复制或直接应用而形成新产品的过程，不是研究与试验发展活动，而是研究与试验发展成果的应用活动。
定。
④试生产试生产是在完成了生产前各项技术准备后，在正式生产前的“试验性”生产，试生产的直接目的不是对产品或生产过程在技术方面作进一步的改进，而是为了使生产能顺利地进行，因而既不属于研究与试验发展，也不属于研究与试验发展成果应用活动。
生物技术制药课后习题答案
第一章绪论1生物技术是以生命科学为基础，利用生物体（或生物组织、细胞及其组分）的特性和功能，设计构建有预期性状的新物种或新品系，并与工程相结合，进行加工生产，为社会提供商品和服务的一个综合性的技术体系。
2生物技术的主要内容：P1基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程蛋白质工程：运用基因工程全套技术改变蛋白质结构的技术。
染色体工程：探索基因在染色体上的定位，异源基因导入、染色体结构改变。
生化工程：生物反应器及产品的分离、提纯技术。
3生物技术制药采用现代生物技术人为创造条件，借助微生物、植物或动物来生产所需的医药品过程被称为4生物技术药物采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物才能被称为5生物药物生物技术药物与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品一起归类为PPT复习题第二章基因工程制药1、简述基因工程制药的基本程序。
P162、说明基因工程技术用于制药的三个重要意义。
P15第一段第一行3、采用哪两种方法来确定目的cDNA克隆？P18（7目的基因cDNA的分离和鉴定）①核酸探针杂交法用层析法或高分辨率电泳技术(蛋白质双向电泳技术或质谱技术)分离出确定为药物的蛋白质，氨基酸测序，按照密码子对应原则合成出单链寡聚核苷酸，用做探针，与cDNA文库中的每一个克隆杂交。
这个方法的关键是分离目的蛋白，②免疫反应鉴定法（酶联免疫吸附检测）4、说明用大肠杆菌做宿主生产基因工程药物必须克服的6个困难。
①原核基因表达产物多为胞内产物，必须破胞分离，受胞内其它蛋白的干扰，纯化困难；②原核基因表达产物在细胞内多为不溶性(包含体, inclusion body)，必须经过变性、复性处理以恢复药物蛋白的生物学活性，工艺复杂；③没有翻译后的加工机制，如糖基化，应用上受到限制；④产物的第一个氨基酸必然是甲酰甲硫氨酸，因无加工机制，常造成N-Met冗余，做为药物，容易引起免疫反应；⑤细菌的内毒素不容易清除；⑥细菌的蛋白酶常常把外源基因的表达产物消化；5、用蓝藻做宿主生产基因工程药物有什么优越性？蓝藻：很有前途的药物基因的宿主细胞①有内源质粒，美国Wolk实验室已构建1200种人工质粒，可用做基因载体。
基因工程
作用： 将外源基因送入受体细胞。 利用载体在受体细胞内，对外源基因 进行大量复制。
条件： 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基 因等。 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。
质
DNA诊断
DNA点杂交 寡聚核苷酸探针杂交分析法
PCR/单链构象多态性分析（SSCP）
(single strand conformation polymorphism, SSCP) 限制性内切酶谱分析法 DNA限制性长度多态性 (restriction fragment length polymorphism, RLFP) 分析
2.基因诊断
基因诊断：采用分子生物学的技术方法来分 析受检者的某一特定基因的结构(DNA水平) 或功能(RNA水平)是否异常，以此来对相应 的疾病进行诊断。是病因的诊断。
基因诊断的原理
DNA诊断----检测相关基因的结构及其 表达功能是否正常。 RNA诊断----对表达产物mRNA的质 和量进行分析。
基因工程为人类开辟新的食物来源。 1）鸡蛋白基因在大肠杆菌和酵母菌中表达获得 成功。这表明，未来能用发酵罐培养的大肠杆菌 或酵母菌来生产人类所需要的卵清蛋白。 2）用基因工程的方法从微生物中获得人们所需 要的糖类、脂肪和维生素等产品。
（三）基因工程与环境保护
基因工程在环保方面有什么应用？
1）用于环境监测。 2）用于被污染环境的净化。
基因治疗就是把基因直接导入人体或先导入人的 细胞然后再输入人体，让这种基因达到治疗目的。 首先是治疗基因的选择。
现代生物技术
现代生物技术摘要：现代生物技术，主要包括五项技术：基因工程，细胞工程，酶工程，蛋白质工程，发酵工程。
五项技术的应用十分广泛，在人们的生产生活中占有重要地位。
关键词：基因工程细胞工程酶工程蛋白质工程发酵工程应用随着时代的发展，现代生物技术在人们的生活中也越来越重要了。
现代生物技术对解决人类面临的重大问题如：粮食、健康、环境和能源等将开辟广阔的前景，因此越来越为各国政府和企业界所关注，现代生物技术已经与信息、新材料和新能源技术并列成为影响国计民生的四大科学技术支柱，是21世纪高新技术产业的先导。
生物技术(biotechnology),也称生物工程(bioengineering)，指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品的技术。
生物技术是由多个学科综合而成的一门新学科。
主要包括以下5项技术：1.基因工程（gene engineering）2.细胞工程（cell engineering）3.酶工程（enzyme engineering）4.发酵工程（fermentation engineering）5.蛋白质工程（protein engineering ）。
一、基因工程基因工程原称遗传工程。
从狭义上讲，基因工程是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。
广义的基因工程定义为DNA重组技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。
上游技术指的是外源基因重组、克隆和表达的设计与构建；而下游技术则涉及到含有重组外源基因的生物细胞的大规模培养以及外源基因表达产物的分离纯化过程。
基因工程之所以能够实现，主要有六个原因：1.不同基因具有相同的物质基础；2. 基因是可切割的；3. 基因是可以转移的；4. 多肽和基因之间存在对应关系；5. 遗传密码是通用的；6. 基因可以通过复制把遗传信息传给下一代。
生物技术概论
《生物技术概论》复习题及参考答案一、名词解释1. 生物技术（biotechnology）：有时也称为生物工程（bioengineering），是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2．基因工程（gene enginerring）：是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。
即按照人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA分子）在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录和表达的操作，也称DNA重组技术。
3．细胞工程（cell engineering）：是指在细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种的目的，加速繁育动植物个体，或获得某种有用物质的技术。
4．酶工程（enzyme engineering）：是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。
5．发酵工程（fermentation engineering）：是指利用包括工程微生物在内的某些微生物或动、植物细胞及其特定功能，通过现代工程技术手段（主要是发酵罐或生物反应品的自动化、高效化、功能多样化、大型化）生产各种特定的有用物质；或把微生物直接用于某些工业化生产的一种技术。
由于发酵多与微生物密切联系在一起，所以又称之为微生物工程或微生物发酵工程。
6. 生物反应器（bioreactor）：主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器，动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器，转基因动物生物反应器等。
7. 转基因动物：是指在基因组中稳定地整合有导入的外源基因的动物。
8. 转基因植物：是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织，从而获得新遗传特性的再生植物。
高二生物三大工程知识点
高二生物三大工程知识点在高二生物学习中，三大工程知识点是遗传工程、生物技术和生态工程。
这些知识点在生物学领域中具有重要的意义和应用。
本文将详细介绍这三大工程知识点及其相关内容。
一、遗传工程遗传工程是指通过改变生物体的遗传物质DNA，来改变其性状和功能的一项技术。
常见的遗传工程技术包括基因克隆、基因转导、基因敲除等。
1. 基因克隆基因克隆是将特定基因从一个生物体中复制并转移到另一个生物体中的过程。
利用限制性内切酶和DNA连接酶等工具，可以将目标基因剪切、连接到载体DNA上，并通过转化等手段将其导入宿主细胞中，使宿主细胞表达目标基因。
2. 基因转导基因转导是将外源基因导入目标细胞内的一种方法。
通过利用载体，将目标基因载入到病毒、质粒等载体中，再将其转移到目标细胞，从而使细胞表达目标基因。
基因转导在基因治疗、疫苗研发等方面有着广泛应用。
3. 基因敲除基因敲除是通过诱导或设计，使目标基因在生物体中发生突变或丧失功能的一种技术。
通过基因敲除可以研究基因的功能及其与生物性状之间的关系，对深入理解基因与物种进化、生物发育等方面具有重要意义。
二、生物技术生物技术是利用生物体的组成、结构、功能或代谢特性等，进行实践性应用和开展技术活动的一门学科。
常见的生物技术包括基因工程、细胞工程、酶工程等。
1. 基因工程基因工程是利用DNA重组技术，通过改变生物体的遗传物质来改变其性状或功能的技术。
基因工程在农业、医药、环境等领域有着广泛应用，如转基因作物的培育、基因治疗的开发等。
2. 细胞工程细胞工程是应用生物技术的原理和方法，对细胞进行设计、改造和应用的一种技术。
细胞工程在药物生产、组织工程、再生医学等方面具有重要作用，例如利用干细胞进行组织修复和再生。
3. 酶工程酶工程是利用酶的特异性催化反应和酶的稳定特性，进行合成反应、降解反应等的一种技术。
酶工程应用广泛，如制药领域中的酶催化合成、食品工业中的酶法制备等。
三、生态工程生态工程是为了改善和保护生态环境，利用生物学原理和技术，进行人为干预和调整的一项工程。
细胞工程复习资料
第一章简介1.生物工程（bioengineering）（生物技术）：是以生物科学为基础，利用生物个体或生物器官、组织、细胞的特性和功能，设计构建具有预期性状的新物种或新品系（包括细胞系），以及与工程原理相结合进行产品加工生产的综合性技术体系。
2.传统生物工程：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程（各个定义见书）后来：基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程以及生化工程。
3.细胞工程（cell engineering ）是以细胞为研究对象，应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的原理或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。
广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。
思考题：1．细胞工程的概念、研究范畴、在生物工程中与其它工程的关系。
2．动物细胞工程发展的主要标志性成就。
3．植物细胞工程技术的主要标志性成就。
4．细胞工程的作用与应用领域。
第二章细胞工程基础1、组成细胞的基本元素有哪些？O、C、H、N、Si、K、Ca、P、Mg，其中O、C、H、N占90%以上。
细胞化学物质分为：有机物和无机物。
2、原核细胞与真核细胞有哪些区别？原核细胞真核细胞DNA区域没有被摸包被DNA区域有被摸包被没有典型的细胞核和细胞器（只有核糖体）有细胞核（染色体、核仁、核液）和细胞器（核糖体、内质网、叶绿体、高尔基体等）结构简单结构比原核细胞复杂例：细菌、蓝藻例：动植物细胞3、染色体与染色质有什么区别？染色质是指细胞分裂间期遗传物质的存在形式。
染色体是指细胞有丝分裂或减数分裂过程中，由染色质聚成的棒状结构。
（染色质由DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA组成）4、什么叫细胞周期？也称细胞分裂周期，是指一个细胞经生长、分裂增殖成两个细胞所经历的全过程。
包括分裂期（M期）与间期，间期由G1、S、G2三个阶段组成。
生物工程
生物工程生物工程（biological engineering；bion）生物工程，是20世纪70年代初开始兴起的一门新兴的综合性应用学科。
所谓生物工程，一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有超远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。
生物工程包括五大工程，即遗传工程(基因工程)、细胞工程、微生物工程(发酵工程)、酶工程(生化工程)和生物反应器工程。
在这五大领域中，前两者作用是将常规菌(或动植物细胞株)作为特定遗传物质受体，使它们获得外来基因，成为能表达超远缘性状的新物种——“工程菌”或“工程细胞株”。
后三者的作用则是这一有巨大潜在价值的新物种创造良好的生长与繁殖条件，进行大规模的培养，以充分发挥其内在潜力，为人们提供巨大的经济效益和社会效益。
生物工程的应用领域非常广泛，包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料等。
它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响，为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。
主要课程：有机化学、生物化学、化工原理、生化工程、微生物学、细胞生物学、遗传学、生物化学、分子生物学、基因工程、细胞工程、微生物工程、生化工程、生物工程下游技术、发酵工程设备等。
主要实践性教学环节：包括教学实习、生产实习和毕业论文(设计等，一般安排10-20周。
修业年限：四年授予学位：工学学士相近专业：生物科学生物技术生物信息学生物信息技术生物科学与生物技术动植物检疫生物化学与分子生物学医学信息学植物生物技术动物生物技术生物工程生物安全开办院校：北京北京航空航天大学中国农业大学北京理工大学北京化工大学北京工商大学北京联合大学天津天津大学天津理工大学天津科技大学天津商学院天津农学院上海上海交通大学华东理工大学上海大学东华大学重庆重庆大学西南农业大学重庆工商大学重庆工学院河北燕山大学河北大学河北工业大学河北农业大学河北科技大学河北经贸大学河南周口师范学院平顶山工学院河南大学河南师范大学河南农业大学河南工业大学郑州轻工业学院南阳师范学院河南科技学院商丘师范学院山东山东大学中国海洋大学山东农业大学山东科技大学曲阜师范大学山东理工大学青岛科技大学聊城大学烟台大学烟台师范学院莱阳农学院山东建筑大学泰山医学院山西山西大学太原理工大学中北大学山西农业大学安徽合肥工业大学安徽大学淮北煤炭师范学院安徽工程科技学院安徽技术师范学院合肥学院江西南昌大学江西师范大学江西农业大学江西理工大学江西中医学院宜春学院江苏东南大学中国矿业大学苏州大学南京理工大学南京农业大学南京工业大学江南大学中国药科大学南京林业大学淮海工学院盐城工学院浙江浙江大学浙江工业大学宁波大学浙江工商大学浙江万里学院中国计量学院浙江中医学院浙江科技学院湖州师范学院湖北华中科技大学华中农业大学湖北大学长江大学武汉科技大学三峡大学中南民族大学湖北工业大学武汉工程大学武汉科技学院武汉工业学院湖北民族学院孝感学院武汉生物工程学院湖南中南大学中南林业科技大学湘潭大学长沙理工大学湖南农业大学吉首大学湖南理工学院湖南中医学院湖南工程学院邵阳学院怀化学院湖南科技学院广东华南理工大学华南师范大学华南农业大学广东工业大学广州大学广东医学院广州医学院嘉应学院广西广西大学桂林电子科技学院广西工学院云南昆明理工大学贵州贵州大学贵州工业大学遵义医学院四川四川大学成都大学西南交通大学成都理工大学西南石油大学四川农业大学西华大学四川理工学院宜宾学院攀枝花学院陕西西安交通大学西北大学西北农林科技大学陕西科技大学西安工程科技学院陕西理工学院西安生物医药技术学院黑龙江哈尔滨工业大学黑龙江大学东北林业大学东北农业大学齐齐哈尔大学哈尔滨商业大学黑龙江八一农垦大学吉林吉林大学吉林农业大学延边大学长春工业大学东北电力大学吉林工程技术师范学院吉林化工学院辽宁大连理工大学东北大学沈阳农业大学沈阳药科大学沈阳大学辽宁石油化工大学辽宁科技大学大连大学沈阳化工学院大连轻工业学院大连民族学院新疆新疆大学内蒙古内蒙古大学内蒙古农业大学内蒙古科技大学内蒙古工业大学海南海南大学福建厦门大学福州大学福建师范大学华侨大学集美大学福建师范大学闽南科技学院甘肃兰州理工大学兰州交通大学甘肃农业大学西北民族大学现代生物工程技术现代生物技术(生物工程)是指对生物有机体在分子、细胞或个体水平上通过一定的技术手段进行设计操作，为达到目的和需要，以改良物种质量和生命大分子特性或生产特殊用途的生命大分子物质等。
基因工程细胞工程知识点汇总
基因工程细胞工程知识点汇总一、基因工程（一）基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
基因工程和细胞工程
2 环境风险
基因工程和细胞工程可能 对自然环境和生物多样性 产生潜在风险。
3 社会影响
应用基因工程和细胞工程 技术会对社会、经济和法 律等方面带来深远影响。
当前和未来的发展趋势
1
未来
2
预计基因工程和细胞工程将继续发展，为
人类创造更多的科学和生活价值。
3
当前
基因工程和细胞工程技术正在不断完善和 应用于医学、农业和工业等领域。
结论与要点
基因工程和细胞工程是现代生物科学的重 要组成部分，具有广阔的应用前景和深远 的社会影响。
1953年，沃森和克里克发现了 DNA的双螺旋结构，为基因工程 的发展奠定了基础。
重组DNA技术
1972年，科学家开发出重组DNA 技术，使得基因工程成为可能。
基因编辑技术的突破
近年来，基因编辑技术的快速发 展为Байду номын сангаас因工程带来了全新的可能 性。
细胞工程的应用领域
1 组织工程
利用细胞工程技术培植新 的人工组织，应用于医学 和再生医学。
基因工程和细胞工程
基因工程和细胞工程通过对生物体的基因和细胞进行操作和改造，创造了一 种前所未有的科学领域。
基因工程和细胞工程的定义
基因工程
利用分子生物学技术改变生物体的遗传信息，创造新的生物特性。
细胞工程
利用细胞生物学技术处理和改造生物体的细胞，实现特定功能。
基因工程的历史和背景
发现DNA双螺旋结构
2 生物燃料生产
利用细胞工程技术改造微 生物，实现高效生物燃料 生产。
3 农业改良
通过细胞工程技术提高作 物的抗病性、产量和品质。
基因工程和细胞工程的关系
基因工程
关注基因的改变和调控。
专题9 生物技术与工程之细胞工程与基因工程 环节一 基础考法——自主评价
专题9 生物技术与工程之细胞工程与基因工程环节一基础考法——自主评价1．植物组织培养的常见流程为：外植体的消毒处理、接种→诱导愈伤组织→分化长芽与生根→试管苗过渡等。
下列相关叙述正确的是()A．外植体和培养基需消毒后再接种，接种时需注意外植体的方向，不要倒插B．愈伤组织的诱导受激素组合的影响，不受营养、光照等因素的影响C．获得原生质体后需在无菌水中用纤维素酶和果胶酶混合处理悬浮组织D．试管苗移栽到室外前需用自来水洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根解析：选D培养基需灭菌，外植体需消毒再接种，A错误；愈伤组织的诱导受激素组合的影响，也受营养、光照等因素的影响，B错误；在获得植物原生质体时，应用纤维素酶和果胶酶混合液处理实验材料，将细胞壁消化除去，获得球形的原生质体，C错误；经过炼苗的幼苗移栽到实验室外前需要洗苗，目的是洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，此时试管苗出瓶后需要进行一定时间对外界环境的适应，故洗苗时通常用自来水，D正确。
2．紫罗兰花色丰富、抗虫性强、种子富含亚麻酸。
为了让油菜具有紫罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了下图所示实验。
下列叙述错误的是()A．制备原生质体需将植物组织切块用含纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液处理B．细胞融合依赖生物膜的流动性，获得的融合原生质体需放在无菌水中以防杂菌污染C．由愈伤组织到杂种植株培养过程中，需调整生长素与细胞分裂素比例以诱导根、芽分化D．获得杂种植株后，可借助抗原—抗体杂交、病虫感染实验进行新性状表达的鉴定解析：选B用酶解法制备原生质体时，用等渗或略高渗溶液处理是为了避免原生质体吸水涨破，A正确；细胞融合依赖于生物膜的流动性，但获得的原生质体(没有细胞壁)不能放在无菌水，以防原生质体吸水涨破，B错误；由愈伤组织到杂种植株培养过程中，需调整生长素与细胞分裂素比例以诱导根、芽分化，其中诱导生根时生长素/细胞分裂素的比值高，而诱导芽分化时生长素/细胞分化的比值，C正确；获得杂种植株后，可借助抗原—抗体杂交、病虫感染实验进行新性状表达的鉴定，其中前者属于分子水平的鉴定，后者属于个体生物学水平的鉴定，D正确。
[现代生物制药技术题库] 判断题
![[现代生物制药技术题库] 判断题](https://img.taocdn.com/s3/m/5975d47e26fff705cd170a03.png)
1.基因工程、细胞工程是生物技术的核心基础。
答案：对2.酶工程和发酵工程是生物技术产业化及大规模生产的关键环节。
答案：对3.基因工程.细胞工程是生物技术产业化及大规模生产的关键环节。
答案：错4.酶工程和发酵工程是生物技术的核心基础。
答案：错5.生物制药技术的核心特征是生化反应。
答案：错6.生物药物包括从动物、植物、微生物等生物体中制取的各种天然生物活性物质，以及人工合成或半合成的天然物质类似物。
答案：对7.生物药物包括从动物.植物.微生物等生物体中制取的各种天然生物活性物质，不包括人工合成或半合成的天然物质类似物。
答案：错8.中国科学家参与了“人类基因组计划”。
答案：对9.胰岛素是预防药物。
答案：错10.H5N1疫苗是预防药物。
答案：对11. 反复冻融将细胞破碎的方法是细胞破碎中的化学法。
答案：错12. 使用表面活性剂将细胞破碎的方法是细胞破碎中的物理法。
答案：错13.双水相萃取可用于醇类、脂肪族羧酸、氨基酸、抗生素、维生素等生物小分子的分离与纯化。
答案：错14.溶剂萃取技术可分离蛋白质和多肽，包括许多酶的分离纯化。
答案：错15.蛋白质分子结合阳离子，p I值降低。
答案：错16.蛋白质分子结合阴离子，p I值升高。
答案：错17.蛋白质分子结合阳离子，p I值升高。
答案：对18.蛋白质分子结合阴离子，p I值降低。
答案：对19.凝胶色谱分离操作中，各个组分按分子从大到小的顺序依次流出。
答案：对20.凝胶色谱分离操作中，各个组分按分子从小到大的顺序依次流出。
答案：错21.平衡水分能够用一般干燥法去除。
答案：错22.自由水分能够用一般干燥法去除。
答案：对23.利用固定相的配基与生物分子间的特异性分离色谱是离子交换色谱。
答案：错24.纯RNA溶液的A260 /A280值为1.8。
答案：错25.冷冻干燥将冰升华直接变为汽，达到脱水的目的。
答案：对26.枸橼酸钠常用于红细胞沉降率的测定，也可用于凝血因子的检测。
食品生物技术
1食品生物技术包括哪些方面基因工程，细胞工程，酶工程，蛋白质工程，发酵工程，生物工程下游技术2食品生物技术的概念：现代生物技术在食品领域中的应用。
是指以现代生命科学的研究为基础，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料。
3质粒：是细菌等生物细胞内一类独立于染色体之外而能自主复制的遗传物质。
4人工接头：是人工合成的具有特定限制性内切酶识别位点和切割序列的双股平端DNA短序列。
5基因探针：是一段与目的基因互补的核酸序列，可以是DNA，也可以是RNA，用它与待测样品DNA 或RNA进行核酸分子杂交，可以判断两者的同源程度。
6蛋白质工程：以蛋白质的结构及其功能关系为基础，通过基因修饰、蛋白质修饰等分子设计，对现存蛋白质加以改造，组建新型蛋白质的现代生物技术。
7发酵工程：A、直接利用微生物的机能将物料加工，以提供产品或为社会服务的技术。
B、利用生物细胞或酶的某种特性，通过现代化工程技术进行工业规模化生产的技术。
8酶分离纯化的方法：沉淀法、离心法、过滤和膜分离、层析分离、电泳分离9酶修饰的方法：大分析结合修饰、金属置换修饰、侧链基因修饰、肽链有限水解修饰、分子内交联修饰、氨基酸置换修饰10酶固定化方法：载体结合法（物理吸附法、离子吸附法、共价结合法）、包埋法(网格包埋法、微囊法) 11单细胞蛋白：主要是指酵母、细菌、真菌等微生物蛋白质资源。
12生物工程下游技术特点：1、在原料液中目标成分的含量较低，且生理活性越高的成分在原料液中的含量越低。
2、原料液是复杂的多相体系。
3、目标成分的稳定性较差，对热、pH、酶、空气、光、重金属离子、机械剪切力十分敏感，不适宜的分离条件会分解和失活。
4、要求产品的纯度很高。
一般情况下，超过20%的目标成分在分离纯化过程中损失掉了。
13生物工程下游技术目的产物特点：1、通常是活的有机体或具有生理活性的有机化合物，不稳定，易变性，易失活。
生物工程专业介绍
生物工程专业介绍Bioengineering生物工程专业研究涉及微生物工程、生化工程、基因工程、细胞工程、发酵工程和工艺及生物制药、环境治理等方面，主要解决工程菌的挑选、细胞的大规模培育、生物大分子的分离、发酵工艺的设计和进程控制和基因工程在发酵、化工、制药、环境生物治理等方面的应用问题，生物工程及其相关产业在新产品的开发、科研功效的转化和产业化进程中具有举足轻重的作用。
培育目标本专业培育具有系统、扎实的生物工程基础理论、基础知识和实践能力，能从事生物工程进程设计、控制、研究和新技术、新工艺开发与应用的高层次工程科技人材和管理人材。
同时也为研究生教育输送合格人材。
课程设置在学习高等数学、化学、物理和运算机等基础理论知识的基础上，本专业主要学习化工原理、生物化学、微生物学、生化工程、细胞工程、生物工艺学、发酵工程与设备、基因工程、生物制药和环境生物学等专业基础知识和专业知识。
同时，安排赴发酵、制药企业和环境保护基地进行熟悉实习、生产实习、科研训练、生物工艺设计、毕业设计和管理能力的训练。
培育特色本专业从2001年招生，前后有三届学生毕业。
本专业投资了数百万元成立了微生物与环境生物学、生物化学与分子生物学、细胞工程和发酵工程等四个实验室，具有良好的实验条件和仪器设备。
本专业注重综合素质和创新精神的培育，注重理论知识和实践操作能力的培育，专门是成立的发酵企业、化工厂、生物药厂和环境治理等实习基地，为学生的设计能力、管理能力和创新能力的培育提供了平台。
就业深造本专业有生物化工硕士授予权，学生能够进一步深造。
近两年毕业生46%-50%被录取为研究生，另一部份出国深造或到高校、研究所、企业及工程技术部门和国家机关从事本专业或相邻专业的教学、科研、技术开发和管理工作，就业形势良好。
业务培育目标：本专业培育掌握生物技术及其产业化的科学原理、工艺技术进程和工程设计等基础理论、大体技术，能在生物技术与工程领域从事设计、生产、管理和新技术研究、新产品开发的工程技术人材。
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基因工程、细胞工程1、(12分)(xx南通模拟)利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，需要构建一种能高水平表达的表达载体，选择合适的基因启动子至关重要。
由于无法由基因表达产物推知启动子的碱基序列，运用PCR技术单独克隆启动子存在困难。
科研人员经过长期研究，终于发明了下图所示的一种克隆启动子的方法。
请回答：(1)培育转基因奶牛时，需要在生长激素编码序列前插入________的启动子。
(2)由基因表达产物无法推知启动子碱基序列，其原因是_________________________________________________________ _________________________________________________________ ______________________________。
(1)过程①需选择的限制酶是____________，过程③需选择的限制酶是____________。
过程④需要使用的工具酶是_________________________________________________________ _________________________________________________________ ______________________________。
(4)过程④中可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计____________进行扩增。
扩增过程中，在第________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
【解析】(1)利用转基因奶牛乳腺生物反应器生产人的生长激素，应使生长激素基因与乳腺蛋白基因相连接，以使乳腺细胞在产生乳腺蛋白的同时产生人的生长激素。
(2)启动子部分不能被转录，与蛋白质分子的氨基酸序列不存在对应关系，因此由基因表达产物无法推知启动子碱基序列。
(3)根据图示，过程①切出启动子和基因编码序列，应使用限制酶BamHⅠ，其他两种限制酶会破坏基因编码序列；通过过程③使启动子序列置于克隆DNA片段中间、已知序列的基因编码序列位于两端，应使用限制酶HindⅢ。
限制酶MboⅠ与BamH Ⅰ有相同的酶切位点，会使环状结构恢复原状。
(4)PCR过程中，需要根据模板DNA已知的碱基序列设计引物；在扩增过程中，在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
【答案】(1)乳腺蛋白基因(2)基因中启动子的碱基序列不能被转录(3)BamHⅠHindⅢ耐高温的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)(4)引物三2、(12分)(xx滨州模拟)转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(①至④代表过程，A至C代表结构或细胞)：(1)图中①过程用到的酶是________，所形成的B叫做________。
(2)②过程常用________处理农杆菌，使之成为________细胞，利于完成转化过程。
(3)图中③过程叫做________________，④过程叫做________________，将叶盘培养成草莓幼苗的技术是________________。
(4)在分子水平上，可采用____________的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
【答案】(1)DNA连接酶基因表达载体(重组质粒)(2)CaCl2溶液(或Ca2＋) 感受态(3)脱分化(去分化) 再分化组织培养 (4)抗原－抗体杂交3、(12分)(xx课标Ⅱ)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。
若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题：(1)理论上，基因组文库含有生物的________基因；而cDNA 文库中含有生物的________基因。
(2)若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中________出所需的耐旱基因。
(3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。
要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的________，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的________是否得到提高。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时，则可推测该耐旱基因整合到了________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。
【解析】(1)基因组文库包含某种生物的所有基因，而cDNA文库包含某种生物的部分基因。
(2)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关，若要从植物甲中获得耐旱基因，首先应建立该植物的基因组文库，然后再从中筛选出所需的耐旱基因。
(3)从植物甲中获得该耐旱基因后，通常采用农杆菌转化法，将该耐旱基因导入植物乙的体细胞中，经过植物组织培养得到再生植株。
若要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的表达产物，如果检测结果为阳性，说明该耐旱基因已经翻译成相应的蛋白质。
此后还需要进行个体生物学水平的检测，即在田间试验中检测植株的耐旱性是否得到提高。
(4)用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的数量比为3∶1，符合基因的分离定律，可知得到的二倍体转基因耐旱植株为杂合子，因此可推测该耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。
【答案】(1)全部部分(其他合理答案也给分)(2)筛选(其他合理答案也给分)(3)乙表达产物(其他合理答案也给分) 耐旱性(4)同源染色体的一条上4、(14分)(xx青岛模拟)下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题。
(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是，限制酶Ⅱ识别序列和切点是，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶__________切割抗虫基因。
(2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有________的培养基上，若能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。
(3)要确定抗虫基因导入后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，则在个体水平上的鉴定过程可简述为：_________________________________________________________ _________________________________________________________ ______________________________。
经筛选分析，该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。
理论上，该转基因植株自交产生的F1中，仍具有抗虫特性的植株占总数的________。
(4)⑤过程所用的现代生物技术称为________，从遗传学角度来看，细胞通过⑤过程能形成棉植株的根本原因是细胞具有_______________________________________。
【解析】(1)在切割质粒时不能同时将两个标记基因切开，至少保留一个，所以只能用限制酶Ⅱ切割，如果用限制酶Ⅰ切割则两个标记基因将都会被破坏。
而从目的基因两侧碱基序列可知，只能用限制酶Ⅰ才可得到含目的基因的DNA片段。
(2)如果导入了重组质粒，此时重组质粒中四环素抗性基因能正常表达，所以如果涂布在含有四环素的培养基上的大肠杆菌群落能够生长，说明导入了重组质粒。
(3)在个体水平上鉴定抗虫棉是否培育成功，可以用转基因棉叶片饲喂害虫，观察害虫存活情况；如果把携带一个抗虫基因的DNA片段看作杂合子，可以认为是Aa，自交产生的F1中仍具有抗虫特性的植株占总数的比例为3/4。
(4)把一个细胞培养成植株的技术称为植物组织培养，依据的原理是细胞的全能性。
【答案】(1)ⅡⅠ(2)四环素(3)让害虫吞食转基因棉花的叶片，观察害虫的存活情况，以确定其是否具有抗虫性状3/4(4)植物组织培养发育成完整个体的全部遗传物质5、(12分)(能力挑战题)植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用如图所示图解简单表示：d,胚状体(1)培育胚状体利用了________这一项生物技术，胚状体再继续培养，则可培育出完整的植株，这体现了________________。
培养基中除了含有一定的营养外，还必须含有__________等植物激素，还需要对培养基进行严格的__________。
(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的，若为了获得三七的细胞产物，则只需培养到________；若为了获得三七的人工种子，则需要培养到____________。
如果愈伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的，通过基因工程要获取抗虫棉，目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是________________法。
(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中，必须要经过________________。
①无丝分裂②有丝分裂③减数分裂④原代培养⑤传代培养⑥植物体细胞杂交⑦细胞融合⑧脱分化⑨再分化【解析】(1)离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织，通过再分化形成具有根和芽的胚状体，再通过细胞分裂、分化发育成一个完整的植株。
该技术为植物组织培养，其原理为植物细胞的全能性。
培养基的成分为水、无机盐、维生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生长素和细胞分裂素等)等；培养基要求进行严格的灭菌。
(2)三七的细胞产物为细胞的代谢产物，将三七叶肉细胞培养到愈伤组织即可；获得人工种子需培养至胚状体；棉花为双子叶植物，导入抗虫基因常用农杆菌转化法。
(3)离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分化和有丝分裂形成愈伤组织，再分化和有丝分裂形成具有根和芽的胚状体。
【答案】(1)植物组织培养植物细胞的全能性细胞分裂素、生长素灭菌(2)愈伤组织胚状体农杆菌转化(3)②⑧⑨6、(12分)(xx新课标全国卷)甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。
某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题：(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用________酶和________酶去除细胞壁，获得具有活力的________，再用化学诱导剂诱导二者融合。
形成的融合细胞进一步培养形成________组织，然后经过________形成完整的杂种植株。
这种培育技术称为____________。
(2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指________________________。
假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是_________________________________________________________ _________________________________________________________ ______________________________。