酶工程思考题
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第一章绪论p25
2.酶有哪些显著的催化特性。
转移性强,催化效率高,作用条件温和
3.简述影响酶催化作用的主要因素。
底物浓度、酶浓度、温度的影响ph的影响抑制剂的影响
第二章P63
4.简述分解代谢物阻遏作用的原理和解除方法。
原理:由于某些物质分解放出能量,一部分储存在ATP中,TAP升高,则AMP减少由于cAMP+H2O-----AMP,则cAMP减少,cAMP-CAP复合物是结合在启动基因上促进酶的合成,cAMP-CAP复合物减少,酶的生物合成受到抑制。
解除方法:必要时添加一定量的cAMP。
7.提高酶产量的措施主要有哪些。
①添加诱导物。
②控制阻遏物的浓度。
③添加表面活性剂。
④添加产酶促进剂。
11.固定化微生物原生质体发酵产酶有何特点?
①提高产酶率。②可以反复使用或连续使用较长时间。③基因工程菌的质粒稳定,不易丢失④发酵稳定性好。⑤缩短发酵周期,提高设备利用率。⑥产品易分离纯化。⑦适用于胞外酶等胞外产物的生产。
第三章P84
2.何谓抗体酶?试述获得抗体酶的主要方法。
抗体酶是一类具有生物催化功能的抗体分子,同时具有抗体的高度特异性。
诱导法:根据所采用的抗原不同。诱导法有半抗原诱导法和酶蛋白诱导法,利用特点的抗原诱导抗体酶的合成。
修饰法:是对抗体进行分子修饰,在抗体与抗原结合部位引进催化基团而成为抗体酶的方法。
3.植物细胞培养产酶有何特点?
①提高产率。
②缩短周期。
③易于管理,减轻劳动强度。
④提高产品质量。
5.试述植物细胞产酶的工艺条件及其控制。
第四章P135
1.细胞破碎的方法主要有哪些?各有何特点?
2.试述酶提取的主要方法。
3.简述酶沉淀分离方法的原理与特点。
第五章p157
1.试述酶分子修饰的概念和作用。
概念:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变从而改变酶的催化活性的技术过程。
作用:酶的分子结构发生某些合理改变有可能提高酶的催化效率,增加酶的稳定性,降低或消除酶的抗原性,改变酶的底物专一性。同时在美学和酶工程研究方面具有重要意义。2.简述定点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的应用。
定点突变技术在酶分子姿势中的应用:定点突变技术是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。是蛋白质工程和酶分子组成单位置换修饰中常用的技术。定点突变技术,为氨基酸或核苷酸的置换修饰提供了先进、可靠、行之有效的手段。
酶分子定点突变的过程:①新的酶分子结构的设计。②突变基因碱基序列的确定。③突变基因的获得。④新酶的获得。
7.酶分子物理修饰有何特点。
物理修饰的特点:在于不改变酶的组成单位及基因,酶分子中的共价键不发生改变,知识在物理因素作用下,副键发生某些变化和重拍,使酶的空间构象发生改变。
第七章p204
第八章p223
第九章p240