体内药物分析

体内药物分析
第一部分
填空：
1.体内药物分析是一门研究生物机体中药物及其代谢和内源性物质的质与量的变化规
律的分析方法学。

2.药物体内过程有吸收、分布、代谢和排泄。

3.药物的肾排泄率与肾小球滤过率、肾小管分泌率和肾小管重吸收率有关。

4.有效血药浓度范围通常是指最低有效浓度与最低毒性浓度之间的血药浓度范围。

5.治疗药物检测的核心目的是实现合理的给药方案个体化。

6.体内药物分析采用的生物样品包括血液、尿液、唾液、头发、脏器组织、乳汁、精液、
脑脊液、泪液、胆汁、胃液、胰液、淋巴液、粪便等，其中最常用的是血浆或血清。

7.尿液的测定主要用于药物的剂量回收、尿清除率研究、推断患者是否违反医嘱用
药和药物制剂的生物利用度的研究。

8.冷藏或冷冻是生物样品常用的保存方法。

9.经有机破坏的方法有湿法破坏、干法破坏和氧瓶燃烧法。

10.固相萃取法主要通过固相填料对样品组分的选择性吸附及解吸的过程，实现对样
品的分离、纯化和富集。

简答：
1.请简述体内药物分析的特点。

答：⑴生物样品中干扰物质多⑵生物样品量少、不易重复获得⑶分析方法要求高⑷实验室仪器设备要求高⑸测定目标与数据处理复杂
2.请简述新药的概念及其分类。

新药是指在我国未上市销售的药物（创新药物）和仅在国外上市的药品。

已上市药品改变剂型，改变给药途径或者制成新的复方制剂。

按新药管理。

分类：1。

未在国内外上市销售的药品。

2，改变给药途径且尚未在国内外上市销售的制剂。

3，已在国外上市销售，但尚未在国内外上市销售的药品。

4，改变国内已上市销售药物剂型，但不改变给药途径的制剂。

5，改变上市销售盐类药物的酸根，碱基（或者金属元素）但不改变其药理作用的原料药及其制剂
6，已有国家药品标准的原料药或者制剂。

3.请简述药物转运机制的类型。

（1）被动扩散：药物从浓度高的一侧向膜对侧的扩散，其扩散速率主要取决于生物膜的通透性，以及膜两侧的浓度梯度和药物的脂/水分布系数。

（单纯扩散，膜孔转运）
（2）载体媒介的转运;是具有高度选择性，可为同类物质所竞争，具有饱和现象，需要消耗能量，能逆电化学梯度和浓度梯度而转运。

（易化扩散，主动转运）
（3）膜动转运：吞噬作用，胞饮作用。

4.影响胃肠道吸收的因素有哪些。

（1）剂型及理化特性
（2）食物
（3）胃肠道的功能状态。

（4）药物的首过效应
（5）药物的相互作用
5.请列举药物代谢反应的类型。

（1）I相反应：包括氧化（羟基化，脱烷基氧化，N-和S-氧化），还原，水解
（2）Ⅱ相反应：结合反应
（3）乙酰化反应
6.请简述生物样品预处理的目的。

（1）使药物从缀合物及结合物中释放
（2）纯化，富集样品
（3）满足测定方法对分析样品的要求。

（4）保护仪器性能，改善分析条件。

7.请简述血清、血浆和全血的制备方法。

（1）血浆的制备：制备血浆，是将采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混合后，以2500~3000r/min 离心，5~10min，使与血球分离，所得淡黄色上清液即为血浆。

（2）血清的制备：制备血清时，将采集的静脉血液置试管中，放置30min~1h，由于激活了一系列凝血因子。

血中的纤维蛋白原形成纤维蛋白。

血液逐渐凝固。

然后用细竹棒或者玻璃棒轻轻剥去凝固在试管壁上的血饼。

再在2500~3000r/min 离心5~10 min，上层澄清的淡黄色液体即为血清。

（3）将采集的血液置含有抗凝剂的试管中，但不经过离心操作，保持血浆和血细胞处于均相，称之为全血。

8.请简述液液萃取法、蛋白沉淀法和固相萃取法的优缺点。

（1）液液萃取法：
优点：有选择性。

缺点：存在乳化现象
（2）蛋白沉淀法：
优点：快速简便缺点：待测物含量低时，不适用。

（3）固相萃取法：
优点：①引入干扰物质少。

②完全避免乳化的形成
③在优化条件下，有较高的萃取率。

④可以用少量的样品
⑤柱子可弃，无污染。

⑥使用的溶剂大多可以与水混合。

易于自动化。

缺点：①价格昂贵②技术要求高③批与批之间有差异④柱子易阻塞，影响分离效果
⑤样品需要经过预处理
9.请简述如何去除生物样品中的蛋白质。

（1）溶剂解法：（2）加入中性盐（3）加入强酸（4）加入含锌盐及铜盐的沉淀剂(5)超滤法
10.请简述毛细管电泳法与色谱法的异同点。

异点：毛细管电泳：以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间的淌度和（或）分配行为上的差异而实现分离的一种液相分离技术。

色谱法：将多种成分混合物试样分离成单一组分的方法。

相同点：都可应用于物质的分离分析。

问答：
1.一种化学药进行新药审批，需要向食品药品监督管理机构提交哪些资料？
答：1.综述资料2，药学研究资料3，药理毒理研究资料。

4，临床试验资料
2.请列出测定游离型药物浓度的方法及其特点和应用。

测定游离型药物浓度的方法：（1）分光光度法。

（2）层析法（3)免疫学方法
特点：（1）药物的血浆蛋白结合率高；
（2）药物的治疗指数狭窄；
（3）游离血药浓度受生理或病理因素影响较大；
（4）药物的分布容积小于2L/Kg；
（5）游离血药浓度与药理作用密切相关。

应用：（一）根据血药浓度选择适当的药物
（二）根据血药浓度选择适当的给药途径
（三）根据血药浓度指导药物剂量的选择
（四）根据血药浓度的半衰期确定给药次数
3.生物样品制备时应考虑哪些问题？
答：1.药物的理化性质和存在形式
2.待测药物的浓度范围。

3，药物测定的目的。

4，选用的生物样品类型。

5，样品预处理与分析技术的关系。

第二部分
填空：
1.免疫分析法是以特异性抗原—抗体反应为基础的分析方法。

2.免疫分析法基本原理是竞争抑制原理。

3.活度是指抗体与相应抗原的亲和力，它可反映出抗原与抗体结合的牢固程度。

4.免疫分析法按照标记物的种类可分为放射免疫分析法、酶免疫分析法、化学发光免
疫分析法和荧光免疫分析法。

5.酶免疫分析的测定最后是通过酶与底物反应所产生的颜色深浅来进行定量分析的。

6.化学发光酶免疫分析最常使用的发光试剂是氨基苯二酰肼类，如鲁米诺及异鲁米
诺。

7.时间分辨荧光免疫分析用镧系元素的螯合物作为标记物来标记抗原或抗体的。

8.酶免疫测定法的灵敏度主要取决于酶标药物的酶活性和免疫活性。

9.放射免疫分析属于非均相免疫分析法，必须先将有力的标记药物和结合的标记药物预
先分离后，才能测定各自的放射强度。

10.酶联免疫吸附测定属于非均相酶免疫分析法。

11.液体闪烁计数器主要用于测量β射线发出的辐射。

12.滴度用免疫反应液中抗体的稀释度表示。

13.酶放大免疫测定技术属于均相酶免疫分析法。

14.化学发光免疫分析按照标记方法不同，分为直接化学发光物质标记法和化学发光酶免
疫分析法。

简答:
1.抗原—抗体反应的特点是什么？
答：①特异性②可逆性③最适比例性
2.放射免疫分析法中F与B常用的分离方法有哪些？
答：①沉淀法②吸附法③固相法④双抗体法
3.化学发光免疫分析的基本原理是什么？
答：利用某些特定的化学反应所产生的能量使其产物或反应中间态分子激发，形成电子激发态分子，当这种激发态分子回到稳定的基态时所释放的化学能量能以可见光的形式发射。

4.常见的荧光免疫分析有哪几种类型？
答：①底物标记荧光免疫分析②荧光偏振免疫分析③荧光淬灭免疫分析④荧光增强免疫分析⑤时间分辨荧光免疫分析
5.人工抗原鉴定常用方法有哪些？
a)光谱分析法
b)化学分析法
c)放射性同位素标记法
简答：
1.什么是均相免疫分析，比较均相免疫分析和非均相免疫分析有何不同？
均相免疫分析法是指酶标记抗原（AgE）同抗体（Ab）结合后，所形成的酶标抗原-抗体结合物（AgE-Ab）可使酶的活性发生改变（增强或减弱），且不需将游离的酶标药物（AgE）与结合的（AgE-Ab）酶标药物分开，就可直接通过测定酶活性的变化，求出样品含量的方法。

2.什么是交叉反应？
第三部分
填空：
1. 生物样品分析方法的建立主要依据待测药物与生物介质。

但同时尚需要考虑体内分析的目的并兼顾实验室仪器设备状况。

2. 一般而言，生物样品中待测物的预期浓度范围是决定生物样品检查方法的首要因素。

3. 生物样品分析中，常用的检查方法主要有色谱分析法，免疫分析法和生物学方法
4. 紫外可见分光光度法主要用于临床治疗药物监测(TDM)和人群代谢分型测定。

5. 胶束增敏荧光分析法中，胶束溶液，即一定浓度的表面活性剂溶液，对荧光的产生主要有三个作用，即増溶、增敏和增稳，从而提高了荧光分析方法的灵敏度和稳定性。

6. 色谱分析法中，以流动相不同可以分为气相色谱法和液相色谱法。

7. 高效液相色谱根据所选的相互作用的种类而区分为四种，即吸附作用，分配作用，离子交换作用和分子筛作用。

8. 荧光分析法选择性好的原因是由于自身具有发射荧光特性的物质相对较少
简答：
1.生物样品分析中，常用的分析方法及其适用测定对象。

①色谱分析法，对象：蛋白质，多肽等生物大分子类药物或内源性物质的检测与分析
②免疫分析法，对象：应用于临床TDM及生物大分子类物质的药物动力学及其相关研究
③生物学方法，对像：用于抗生素类药物的体内分析
2.精密度及准确度定义及各自的表示方法。

答：精密度是指在确定的分析条件下相同生物介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度，用RSD表示。

准确度是指在确定的分析条件下测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度，用RR或RE表示。

3.质控样品(QC)
即QC样品，系指在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成的样品，用于监测生物分析方法的效能和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。

4.差示分光光度法基本原理
在两种不同的化学环境中，待测物以不同的分子形式存在，其吸收光谱有明显差异，即发生特征性的光谱变化，而共存的物质不受pH或化学试剂的影响，光谱行为不发生变化，从而消除干扰。

5.双波长分光光度法中，测定波长和参比波长的选择原则
a)干扰组分b在这两个波长处具有相同的吸光度
b)待测组分a在这两个波长处的吸光度差值应足够大
6.气相色谱法测定体内药物，使用电子捕获检测器（ECD）检测体内药物的基本原理。

由放射源发出的β射线使载气分子电离，产生慢速度低能量的电子。

色谱柱流出物中含有亲电子基团组分的分子捕获了这些慢速度电子而变成负离子，这些负离子能与载气受放射粒子轰击产生的正离子复合，从而使检测器基始电流下降，而产生电信号。