生物化学讲义第九章基因信息的传递

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第九章基因信息的传递

【目的和要求】

1. 掌握DNA的复制的定义及特征。

2.熟悉参与DNA复制的酶及DNA复制过程。

3.掌握引发DNA损伤的因素和损伤的类型及修复。

4.掌握逆转录的定义,转录的定义及特点。

5.熟悉转录的过程和转录后的加工。

6.掌握参与蛋白质生物合成的物质及遗传密码的定义及特点。

7.掌握;,熟悉蛋白质生物合成的过程

8. 了解蛋白质生物合成与医学的关系

【本章重难点】

1. DNA复制的定义、特征及过程。

2.转录的定义、特点及过程,转录后的加工。

3.遗传密码的定义、特点及三类RNA在蛋白质生物合成中作用。

4.蛋白质生物合成的过程。

学习内容

第一节 DNA的生物合成

第二节 RNA的的生物合成

第三节蛋白质的生物合成

第一节 DNA的生物合成

一、DNA的复制:以亲代DNA为模板合成子代DNA,将遗传信息准确地复制到子代DNA分子上的过程。

遗传中心法则:

复制复制DNA

RNA

转录RNA

蛋白质逆转录

蛋白质

翻译

1.DNA复制的特征(1)半保留复制(2)半不连续复制

(3)有特定的起始点(4)双向复制

2.参与DNA复制的物质

(1)模板:DNA的两股链。

(2)底物:四种dNTP(即dATP、dTTP、dCTP、dGTP)。

(3)引物:RNA.。

(4)DNA聚合酶:真核生物有五种:DNA聚合酶α、β、γ、δ、ε;

原核生物的DNA聚合酶有:polⅠ、polⅡ、polⅢ三类。

原核生物DNA聚合酶性质和功能比较

polⅠpolⅡpolⅢ

分子量109000 120000

400000

5′→3′聚合作用++

3′→5′核酸外切酶作用++

5′→3′核酸外切酶作用+-

主要功能校读、填补空隙?

复制酶

切除引物

(5)引物酶:一种RNA聚合酶。能以DNA为模板,识别DNA复制的起始点,催化一段引物RNA的合成。引物以氢键与模板结合。

(6)解链和解旋酶类:

①拓扑异构酶:有内切酶、连接酶功能,分为酶Ⅰ、酶Ⅱ。

酶Ⅰ又称ω蛋白可切开一股链,不需消耗ATP。

酶Ⅱ又称旋转酶在消耗ATP的作用下,可切断双链,且分开双链。

②解链酶解开一个碱基对,消耗2个分子ATP。作用在复制叉处,可沿模板

随复制叉伸展(5′→3′)而移动。

③单链结合蛋白(SSB)稳定解开的单链DNA,阻止复性和保护单链部分

不被核酸酶水解。

(7)DNA连接酶催化以氢键结合于模板DNA的两个DNA片段通过磷酸二

酯键连接起来。在DNA复制、修复和基因工程中起作用。

参加DNA复制酶的主要作用

作用分子量(万)引物酶合成RNA引物 6

解链酶解开DNA双链 6.5

SSB 稳定已解开的单链7.4

拓扑酶Ⅱ克服解链中的打结缠绕40

拓扑转型

拓扑酶Ⅰ切断DNA中的一股链,在解旋中不致打――

结,又可封闭切口,使DNA变为松弛态。

polⅢ真正的‘复制酶’55

polⅠ填补引物遗留空隙10.9

DNA连接酶连接5′-P和3′-OH末端7.4

3.复制的过程

(1)复制的起始

①拓扑异构酶将正超螺旋转变为负超螺旋;解链酶消耗ATP将氢键打断把

DNA由双链变为单链。

②SSB与单链DNA结合,起稳定单链避免核酸酶水解的作用。

③引物酶以解开的DNA单链为模板,以dNTP为原料,按5′→3′方向催

化引物RNA的生成(十几个~数十个核苷酸链等)。随从链不连续,需多次

合成引物。

(2)复制的延长

①在引物RNA上延长DNA链在DNApolⅠ催化下,以四种dNTP为原料、按碱基配对的原则、在引物3′-OH端开始,沿5′→3′方向逐个加入脱氧核苷酸,使DNA链得以延长。

②复制的不连续性模板DNA 的两股单链:一条链的方向与解链方向相同,子链DNA可沿5′→3′方向连续合成,这条链称前导链;而另一条链与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,必须等待模板链解出足够长度,复制才能开始并延长,这些不连续的片断称冈崎片断,这条链称随从链。

(3)复制的终止在DNA合成的片段内,由DNA聚合酶I外切酶活性切除RNA引物,致使各片段之间形成空隙,然后由DNA聚合酶I的聚合酶活性催化填补空隙,最后由DNA连接酶将这些片段再连接起来,成为一条长链。

二、DNA的损伤与修复

1.引发DNA损伤的因素:

(1)紫外线的照射

(2)碱基和核苷酸的类似物的作用

(3)抗菌素及其类似物的作用

2.基因突变的后果及类型

(3)后果:致死;功能缺失;改变基因型;进化

(4)类型:点突变;复突变

3.损伤的修复

(1)光修复(2)切除修复(3)重组修复(4)SOS修复

其中切除修复是人体细胞内DNA的主要修复机制。

三、逆转录

1.概念:逆转录又称为反转录,是RNA指导下的DNA合成作用,即以RNA 为模板,由d NTP聚合生成DNA的作用,遗传信息的流动呈逆方向进行,所以称逆转录作用。在致癌的RNA病毒中,有逆转录酶的存在。

2.逆转录酶有三种作用:RNA指导的DNA合成反应;RNA的水解反应;DNA 指导的DNA合成。

3.逆转录过程:以病毒基因RNA为模板,在反转录酶的作用下,先合成一条与模板RNA互补的DNA单链,产物与模板形成DNA-RNA杂交分子。然后,以新合成的DNA单链为模板,合成另一条互补的DNA链,形成双链DNA分子,方向5′

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