机能实验家兔肠缺血再灌注损伤教学教材

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【如何防治I/R】
(1)尽早恢复血流灌流,缩短缺血时间 (2)再灌注时遵循低温、低压、低钙的原则 (3)清除活性氧 (4)Ca2+拮抗剂的使用 (5)减少白细胞的激活和炎性介质的释放 (6)补充能量及促进能量生成 (7)启动细胞内源性保护机制
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【实验分组】
Ⅰ组:持续缺血组 夹闭肠系膜上动脉1h
Ⅱ组:再灌损伤组 夹闭肠系膜上动脉30min,再恢复血
流30min
【实验方法与步骤】
1. 称重
2. 全 麻 ( 耳 缘 静 脉 注 射 25% 乌 拉 坦
4ml/kg)
★注意:从耳缘静脉的远心端开始注射,
排尽气泡,速度不ຫໍສະໝຸດ Baidu太快
★麻醉效果:角膜反射
他血管(缺血再灌注夹闭时注意垫橡皮管)
7.记录一段正常血压曲线
8.复制肠缺血-再灌注模型,轻轻提起肠系膜上动脉的穿 线,用动脉夹夹闭,同时观察各项生理指标变化。
9.分组进行实验并记录各项指标。(Ⅰ组:夹闭肠系膜 上动脉1h Ⅱ组:夹闭肠系膜上动脉30min,再恢复血流
30min)
肠系膜上动脉示意图
插管内事先应加入少量肝素以防凝血;排净气 泡,记录前应关闭三通管
插管易滑脱,应双线固定,结扎牢靠 勿使插管尖端与血管壁形成角度,避免刺破血

5.腹部正中切口:
腹正中线自剑突下1.5cm起向下做5cm切口
※6.寻找肠系膜上动脉:
将家兔腹腔内脏左移,找到齐右肾门对侧垂直向腹主
动脉分出的肠系膜上动脉,穿双线备用,注意避免损伤其
② 峰表示:松开肠系膜上A→ 血管床容量↑→有效循环血量相 对 →BP↓升压反射(再灌注损 伤还未来得及发生)有时②峰 不出现,BP↓直到死亡
③ 血压持续下降,有再灌注损 伤
Ⅰ组:结扎→BP↑→ BP↓趋于平稳(相似于结 扎前), 肠壁粉红→暗红(淤血)肿胀(水肿),无出血点
Ⅱ组:结扎→ BP↑→BP↓趋于平稳(机体自身调节) →再灌→BP↓,肠壁暗红、水肿、出血点BP低于正常 >1/2时→休克
基本消失,钳夹家兔
舌头无回收,四肢松软
3. 仰卧固定(背部交叉)、备皮 颈部正中(甲状软骨下缘→胸骨上切迹) 腹部正中(剑突下1.5cm起向下5cm) ★注意:平贴皮肤剪毛,勿拎起皮肤!
4.颈部正中切口行动脉插管
切口范围:颈部正中,甲状软骨下缘→胸骨 上切迹,长约5cm
分离左侧颈总动脉:胸 骨舌骨肌与胸锁乳突肌之 间深面的颈动脉鞘内,与
机能实验家兔肠缺血再灌注损伤
【实验动物】
家兔
【实验器材】
兔 手 术 台 、 BL-420生物信息采集系统、Y型气管插管、 动脉夹、动脉插管、静脉插管、注射器、纱布、棉线、 实验动物常用手术器械一套、橡皮管、三通管、1%肝素、 25%乌拉坦、生理盐水
【实验设计原理】
通 过 肠 系 膜 上 动 脉 结 扎 , 即 SMAO(Superior Mesentery Artery Occlusion)来阻断部分肠的血液供应一段时 间后再恢复血流灌注,以复制肠缺血/再灌 注损伤的动物模型,探讨缺血/再灌注损伤 的发生机制
气管平行,颜色鲜红、 较细、触之有搏动感, 长约2-3cm,穿线备用
注意:(1)钝性分离 (2)辨清颈A鞘内的血管神经
血管插管
先结扎远心端,后夹闭近心 端,剪口部位尽量靠近远心 端,成45度角朝向近心端 剪一小口,约为管径的 1/3-1/2,插管方向朝向近 心端,插入1-1.5cm
【插管的注意事项】
【注意事项】
1. 移动内脏时,动作要轻柔 2. 分离肠系膜上A时需小心细致,不要使用锐利
器械,以免损伤血管造成大出血 3. 肠系膜上A夹闭要彻底,缺血再灌注组结扎时
注意垫橡皮管,恢复血流灌流(复流)要完全
【结果分析】
① 峰表示:结扎肠系膜上A→ 血管床容量↓→ 有效循环血量相 对↑→BP↑ 压力感受器 (+) 减压 反射→BP↓
※ Ⅰ、Ⅱ组比较说明:缺血损伤与 是不同的 损伤过 程, 损伤过程,后者损伤更严重
【典型结果】
【结果不明显可能存在的问题】
(1)实验过程中是否发生了大血? (2)缺血是否完全? (3)再灌注是否通畅? (4)记录结果时基线是否改变? (5)个体差异
【I/R的发生机制】
(1)活性氧的作用 ) (2)钙超载 ) (3)白细胞的作用 ) (4)高能磷酸化合物生成障碍 )
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