肉兔人工授精操作规程
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肉兔人工授精操作规程
1 范围
本标准规定了肉兔人工授精的器具用品准备、采精、精液质量检查、输精准备、精液稀释、输精和器具清洗消毒。
本标准适用于我省肉兔的人工授精。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
肉兔人工授精
用人工方法将采集的兔精液输入母兔生殖道内,使母兔卵子受精的方法。
2.2
精子密度
是指单位容积内所含的精子数目。
2.3
精子活力
指精液中呈直线前进运动精子的百分率。
3 器具用品准备
3.1 器具用品
包括干燥箱、恒温保温箱、恒温水浴锅、采精器、集精瓶、连续输精枪、输精套管、显微镜、载玻片、胶用手套等器具、生理盐水等用品。
3.2 器具消毒
将器具清洗干净,放入干燥箱消毒(20~30)min,烘干备用。
3.3 稀释液
采用0.9%的氯化钠或5%的葡萄糖溶液或兔精液稀释粉配制稀释液,放入30℃水浴锅内保存。
4 采精
4.1 采精器的准备
采精器由假阴道和集精瓶组成,选用直径(3~4)cm,内径(2.5~3 )cm的硬塑料管作假阴道外壳,选用大小合适的橡胶套做内胎,内胎两端翻出固定在外壳上,下连集精瓶,内胎注水至2/3左右,
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4.2 公兔选择
根据品种特征,选择生产性能好,生殖器官发育正常,性欲旺盛,配种能力强的公兔。
4.3 采精
4.3.1采精在公兔笼内进行。采精者左手抓住母兔双耳及颈皮,将母兔置于公兔笼内诱情,使其后躯朝向笼内,右手持采精器伸入母兔腹下,假阴道开口端紧贴母兔阴部。待公兔“爬背”时,右手呈43°角持采精器放在母兔后腿中间,将公兔阴茎导入假阴道,待公兔射精后,立即将假阴道口朝上。
4.3.2每次采精应更换集精瓶,将装有精液的集精瓶放入35℃水浴锅中保存。
4.3.3 公兔每天采精一次,连采5d休息1d。
5 精液质量检查
5.1 外观检查
正常精液为乳白色,是具有特殊腥味的液体。呈清水样、颜色不一致或混有血、粪便等的精液不得用于输精。
5.2 显微镜检查
将采集的精液取部分样本混匀后,涂抹在载玻片上(载玻片在水浴锅中加热维持在37℃左右),用高倍镜观察精子密度和精子活力。显微镜观测精子呈云雾状,快速涡旋,无法看清单个精子,看似黑云状为优秀等级;呈云雾状,快速涡旋,偶见单个精子为良好等级;呈薄云状,快速运动,可见少数单个精子闪现为合格;精子不动、运动慢、间距大于一个精子头长的为不合格。
6 精液稀释
根据显微镜检查结果确定稀释倍数,一般以(5~10)倍为宜,稀释操作过程中,切忌用力摇动或振荡。稀释液应与精液等温,维持(25~30)℃,稀释液注入集精瓶的速度不应过快,注入后用玻璃棒轻轻搅动,使其混合均匀。稀释后的精液应作显微镜检查,活力在合格以上的方可用于授精。
7 输精前准备
7.1 灯光催情
人工授精前6d增加光照刺激,光照16h(5:00~21:00),光照强度(40~60)Lux(5个笼位用1个26瓦的节能灯)。
7.2 输精器准备
将稀释后的精液置入连续输精枪中,调节输精刻度。
7.3 母兔选择
选择健康无病、发情期的母兔输精。
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8 输精
8.1 注射激素
输精时先给母兔注射0.5μg促排卵激素。
8.2 输精
保定员左手抓住兔双耳和颈皮,右手将尾翻压在背部并抓起尾部及背部皮肉,将后躯向上,呈45度角固定。输精员左手将外阴部翻开,右手持连续输精枪,轻晃插入母兔阴道内子宫颈口附近,输精0.5 mL。输精后将连续输精枪缓缓抽出,并轻拍母兔臀部。每次输精应更换输精套管。
8.3 补光
输精后母兔继续补光6d,光照12h(7:00~19:00)。
9 器具清洗与消毒
人工授精后,将所有器具用清水洗净,蒸馏水冲洗,输精套管臭氧消毒(1~2)h,连续输精枪、采精器、集精瓶等玻璃和橡胶器具121℃高压灭菌15min,烘干冷却备用。
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