常用静脉麻醉药物在下肢缺血/再灌注损伤防治中的研究进展
参麦注射液减轻肢体缺血再灌注后肺功能障碍的机制研究

eain b gn ig( aeie rt e inn b sl ),a d0 5, 6 a d2 hatr o riu td f t n o p rt ne dn rbod gsa ayi n a ue n o n n . 2, n 4 f unq e e ai ro eai n igf lo a n lssa dme s rme t et l o o o
lgc lsl e 1 0 ,w i ainsi ru / r ne td e u l ou fn r lsl eised 1 n eoetunq e n ain o ia ai 0 ml hl p t t n go pI R weeijce q a lmeo oma ai n ta 5misb fr o riu tif t . n e e v n l o
t d o t u o r qu t To r i ue r u o o e fp te t pea ig fr t a r a kl r curs wih a tu nqu t Th n t e n wi ho ta tu ni e . u n q tg o p c mp s d o ai n so r tn o i lo n e fa t e t o r i e . bi e he pa
医 研究 志 21年1 第4卷 第l 学 杂 0 2 月 1 期
・ 论
看 ・
参 麦 注射 液 减 轻 肢 体 缺 血 再 灌 注后 肺 功 能 障 碍 的 机 制 研 究
赵 喜越 吉 伟 祝 卿 姚 海 霞 蒋柳 明 林丽 娜
摘 要 目 的 观 察 参 麦 注射 液 对 使 用 止 血 带 的 下 肢 手 术 患者 肺 功 能 的 影 响 及 可 能 的 机 制 。 方 法 选 择 单 侧 下 肢 手 术 患 者4 1例 , 龄 2 6 年 0— O岁 , 重 指 数 1 2 k/ A A分 级 I Ⅱ级 , 血 带 持 续 充 气 或 手 术 时 间 10—15 , 据 是 否 应 用 止 血 体 8~ 8 gm , S 或 止 . .h根 带 分为无止血带组 ( 组 , N n=1 ) 止 血 带 组 , 将 止 血 带 组 患 者 按 单 盲 法 随 机 分 为 缺 血 再 灌 组 (/ 5和 再 IR组 , n=1 ) 参 麦 组 ( M 4和 S 组, n=1 ) 2 。所 有 患 者 于 L 或 L , 隙行 腰 麻 一硬 膜 外 联 合 阻 滞 , 觉 阻 滞 平 面 控 制 在 T 间 感 以下 。S 组 在 上 止 血 带 前 1mi M 5 n将
丹红注射液对断肢再植缺血再灌注后心肌损伤的保护作用

【 中图分类号】 R 522 4.
【 文献标识码】 A
【 文章编号】 10- 0 (020 - 1- 040 12 1)3 59 3 5 0 0
E et fd n o gije o n poet gtemy c rili uy i i elna o . E 昭 S N in ‘ f c a h n net n o r t i h oada n r n l o i cn j mb rpa tt n H i ,O GJ 一 , a Z A GMe . . a go o i l Qn un do H i i 6 0 2 2 Mae a n hl el o i l Qnu n do H i i H N i 1 G nku H s t , i ag a , e e 0 60 ; . t n l d C i H at H s t , iha g a , e e pa h b r a d h pa b
( 4 ,2 T )7 h时 ( 5 共 5个 时点 采 集 中心静 脉 血 , 测 两 组 血 清 肌 酸 激 酶 ( K) 肌 酸 激 酶 同功 酶 ( K MB 、 门冬 酸 氨 基 T) 检 C 、 C — )天
转移酶 ( S 、 A T) 乳酸脱 氢酶 ( D 、 羟丁 酸脱 氢 酶 ( B H) 丙二 醛 ( D 的含 量 变 化。结 果 对照 组血 清 C L H) . HD 和 M A) K、 C . A T L H、 B H及 MD K MB、 S 、 D H D A含量于 1 2时点 已开始上 升 , 之后 呈逐 渐升 高趋 势( P<00 ) 而丹 红组 各 时点血 清 .5 ; C C — 、 S 、 D HB H及 MD K、 K MB A T L H、 D A含 量变化 波动不明显。两组在 、 T 、 5时点血 清 C C - 、 S 、 D HB r 4T 乃、 K、 K MB A T L H、 —
脊髓缺血再灌注损伤的病理机制及治疗(一)

脊髓缺血再灌注损伤的病理机制及治疗(一)脊髓损伤至今仍然被认为是一种无特殊治疗方法的伤病。
近20年来人们对脊髓损伤的病因及机制进行了大量的基础研究和临床观察,认识到原发性脊髓损伤后的继发性损害,如缺血再灌注损伤是造成神经损伤的一个重要因素。
本文将目前对脊髓缺血再灌注损伤的研究进展做一综述。
1脊髓缺血再灌注损伤模型自Stenonis(1667年)以来,脊髓缺血损伤(SpinalCordIschemiaInjury,SCII)动物模型的制作是SCII研究中首先面临的一个重要课题。
目前此模型多以阻断腹主动脉致SCII为代表〔1〕,经腹膜后左肾动脉下腹主动脉阻断造成SCII模型,亦被广泛的应用;后来有学者经股动脉插气囊或液囊导管阻断腹主动脉制作模型。
这些模型均存在一共同的不足之处,即同时导致了腹腔及下肢等广泛的缺血损伤,这无疑影响了对研究脊髓损伤后的行为功能学的评估。
伍亚民等〔2〕应用选择性阻断日本大耳白家兔腰动脉制作脊髓缺血损伤轻、中、重度模型获得很好的效果。
徐明在数字减影(DSA)设备监视下行选择性脊髓动脉造影和栓塞,建立急性SCII 动物模型,这在国内外尚少有报道。
他发现小颗粒聚乙烯醇(PVA,直径118~154μm)经椎间动脉注入后,滞留于脊髓前、后纵行动脉链内,能有效阻断局部脊髓血供。
这是制备SCII 动物模型的一种较为实用的方法。
2脊髓缺血再灌注损伤机制研究脊髓缺血再灌注损伤的具体机制尚不清楚,但氧自由基介导的脂质过氧化反应、钙离子超载、兴奋性氨基酸、前列腺素等因素在脊髓损伤机制中起重要的作用已得到公认。
近年来在损伤机制研究方面取得了很多进展,较为引人注意的有以下几个方面。
2.1脊髓缺血损伤后神经元的死亡方式Sakurai-M等〔3〕通过对家兔脊髓缺血再灌注损伤的研究,认为脊髓短暂缺血后运动神经元的死亡方式不是坏死,而是凋亡。
他发现在缺血15min、再灌注2天后电泳发现少数神经元细胞核的DNA碎片,并于运动神经元的细胞核中观察到末端脱氧核苷酸转移酶1介导的三磷酸脱氧尿苷酸生物素阳性染色。
膜联蛋白A5在缺血性卒中诊疗中的研究进展

膜联蛋白A5在缺血性卒中诊疗中的研究进展摘要:缺血性卒中是导致我国中老年人群残疾和死亡的重要病因之一,从诊断到治疗需要面临许多复杂的问题。目前,血管再通治疗已成为缺血性卒中最重要的治疗方法。但是,单纯行血管再通治疗后,部分患者的预后仍不理想。此外,目前针对单一靶点的神经保护药物治疗缺血性卒中的效果仍不显著。膜联蛋白A5具有多种生物学功能,其抗凝血、抗炎症、促进神经元存活等功能可用于减轻脑血管再通后再灌注损伤等神经保护治疗。膜联蛋白A5因其与磷脂酰丝氨酸具有紧密结合特性,可用于卒中诊断、靶向治疗载体构建等。作者总结膜联蛋白A5的多种功能,分析其在缺血性卒中中可能产生的影响,以期为后续研究提供参考。缺血性卒中是威胁全世界人类健康的主要问题之一,也是导致成人永久性残疾的主要病因之一。在缺血性卒中发病早期,缺血-再灌注损伤可引起缺血区域炎症级联反应,导致不良预后。尽管机械血栓切除术能有效提升卒中患者的血管再通率,但部分大动脉闭塞相关卒中患者术后仍有发生血管再闭塞的可能]。现有的针对单一靶点设计的神经保护药物的临床转化效果仍不理想,无法在整个复杂脑疾病网络中发挥有效作用。Tiedt等总结相关研究后提出,最初以神经元为中心进行研究的观点已被神经血管单元的概念所取代,神经元、胶质细胞、周细胞和微血管内皮细胞均在卒中病程中发挥作用,且各细胞存在信号交流。研究者开始关注具有广泛活性的多靶点药物,其在治疗脑疾病中可能具有潜在的益处。多靶点治疗缺血性卒中成为新的研究方向,其中抑制凝血、抑制炎症、神经保护是多靶点治疗急性缺血性卒中的关键要点。膜联蛋白A5是膜联蛋白家族的一员,具有多种生物学功能及潜在应用价值。笔者就ANXA5的多种功能对急性缺血性卒中可能产生的影响进行综述。1 、ANXA5的结构特点ANXA5是一种大小为36kDa的膜联蛋白,膜联蛋白家族是拥有核心结构域约70个氨基酸残基的保守序列,在钙存在的情况下具有结合带负电荷磷脂的能力;ANXA5与磷脂酰丝氨酸的结合受蛋白质上的钙结合位点调节,结构域Ⅳ对钙与PS膜结合至关重要[9]。ANXA5的核心基团有3个不同的钙结合位点(Ⅱ型钙结合),该位点增强了ANXA5与PS结合的能力;Ⅲ型钙结合位点可以结合12个钙分子,增加了ANXA5对细胞膜的结合亲和力,并促进了ANXA5三聚体化,同时可将膜保持在液晶相[10]。ANXA5在钙存在下对PS的高结合亲和力使其成为具有辅助检测缺血性卒中潜力的新生物标志物[11]。ANXA5具有稳定的构象,可在三聚体化形成后保持其凹形弯曲形状,有助于细胞内化;ANXA5三聚体可自组装成有序的二维晶格,增加表面张力,使质膜向内凹陷;ANXA5内化是非受体介导的,无需内部细胞信号传导,该机制提高了其内化的效率;内化后,含有ANXA5的内体与溶酶体融合,蛋白质被降解,因此过量的ANXA5可以被自身代谢[12],有助于提高后期ANXA5作为临床治疗药物时的安全性。2 、ANXA5的抗血小板聚集、抗凝作用阿司匹林作为抗血小板聚集药物,是预防缺血性卒中后卒中复发的有效药物之一[13]。但是,有研究显示,长期使用阿司匹林会增加消化道出血发生风险[14]。ANXA5作为人源性蛋白可能能够弥补传统药物的一些缺陷,提高其在使用过程中的安全性。在机体凝血时所发生的级联反应中,血小板的活化是极为重要的一步,此时血小板膜中PS会外翻暴露[15]。ANXA5作为细胞内蛋白,广泛存在于内皮细胞和血小板中,并在组织损伤时释放[16]。ANXA5能与PS结合,中断PS与其他促凝因子的反应,从而抑制凝血的发生。另一方面,ANXA5也能与血小板表面的鞘糖脂———硫苷脂结合,通过阻碍硫苷脂活化凝血因子Ⅻ来抑制凝血的发生[18]。此外,ANXA5能抑制内皮细胞介导的凝血酶形成,起到抗凝血作用]。Kuypers等[20]使用重组DNA技术制备了ANXA5的同源二聚体(diannexin V, DAV),实验结果显示,DAV的半衰期可达6.5h。为了验证DAV是否可以作为体内抗血栓剂,该研究通过注射组织因子和结扎下肢血管诱导大鼠血栓形成,在诱导血栓形成前10min注射不同浓度梯度DAV溶液,以检测最佳抗血栓剂量,结果显示,与注射等量等渗盐水比较,注射0.04mg/kg的DAV大鼠的平均血栓产生量降低(15mg/只比26mg/只,P<0.01),提示DAV具有抗血栓的作用;注射1mg/kg的DAV大鼠的平均血栓产生量较注射0.04、0.20mg/kg DAV均更小(分别为2、5、4mg/只,均P<0.05),提示1mg/kg剂量的DAV的抗栓效果最强,该研究结果表明,DAV可以作为高效抗血栓剂,并在1mg/kg时具有最大的抗栓效果。Tait等[21]报道了基于ANXA5靶向血小板血栓而制备的82kDa和69kDa两种嵌合体溶栓剂,通过对含碘放射性同位素的ANXA5(125I-ANXA5)的竞争性测定,确定嵌合体对暴露PS的细胞膜的亲和力,结果显示,在1 nmol/L的竞争性抑制剂存在的情况下,69kDa嵌合体、82kDa嵌合体、125I-ANXA5与暴露PS的细胞膜结合率分别为77%、83%和84%,差异无统计学意义(P>0.05),提示嵌合体与ANXA5的亲和力相近;用纤溶酶活化后,82kDa嵌合体的酰胺水解活性为(9.5±1.0)IU/pmol,69kDa嵌合体的酰胺水解活性为(4.9±1.6)IU/pmol,该数据与尿激酶的酰胺水解活性(9IU/pmol)相似,提示ANXA5作为血栓靶向成分,构建嵌合型溶栓剂具有可行性。此外,Jing和Sun[22]基于ANXA5和蛇毒来源的抗血小板肽,设计构建了一种新型的多机制融合蛋白,该融合蛋白表现出整合素调控和PS结合的双重特性,采用酶标仪测量不同血浆样品的浊度动力学,结果显示,将重组蛇毒锯鳞蝰素-ANXA5融合蛋白添加至PS包被的孔中的血浆中时,与注射等量等渗盐水相比,20μmol/L的r-EchAⅤ可将凝血起始时间从30min延迟至50min;随着r-EchAⅤ浓度的增加,血浆凝固时间延长(浓度分别为0、5、10、20、30μmol/L时,血浆凝固时间分别可延长至30、35、40、50、65min),提示ANXA5构建的r-EchAⅤ在体内表现出良好的抗凝活性。3、 ANXA5的抗炎症作用炎症是缺血性卒中的重要病理生理。脑缺血损伤和血流再灌注可导致炎症级联反应,进一步导致神经组织损伤和细胞死亡]。PS的外翻是介导细胞凋亡的重要信号,降低PS在脑缺血半暗带中的暴露,可能能够减少神经元凋亡,延缓缺血半暗带组织转变为梗死灶]。ANXA5能高亲和力结合PS,抑制巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬,具有干扰凋亡细胞的免疫抑制作用。Gao等研究使用ANXA5抑制神经炎症,探索其在改善创伤性脑损伤)中的作用,在TBI发生30min后,干预组经尾静脉注射重组人ANXA5(50μg/kg),结果显示,在Morris水迷宫实验中,TBI+ANXA5处理的小鼠在找到目标象限之前的移动距离短于TBI小鼠;在空间探寻实验中,TBI+ANXA5小鼠在目标象限中停留的时间更长,并且比TBI小鼠有更多的平台交叉互动时间(均P<0.05,鼠数为10只)。为了证实ANXA5的神经保护作用,研究者采用改良神经系统严重程度评分和旋转棒实验评估了TBI后小鼠的神经功能和运动功能,结果显示,在所有时间点,假手术小鼠均未表现出明显的神经功能损害(改良神经系统严重程度评分1~3分),TBI+ANXA5组的改良神经系统严重程度评分均低于TBI组(均P<0.05,鼠数为10只)。此外,从TBI后第1天至第5天,TBI+ANXA5小鼠在旋转棒实验中的运动表现优于TBI组小鼠(P<0.01),提示ANXA5可改善TBI后小鼠的神经损伤和运动功能;蛋白质印迹分析表明,与正常小鼠相比,TBI上调了小鼠受损皮质中炎症蛋白———高迁移率族蛋白B1的水平,而TBI+ANXA5组有效地降低了TBI小鼠中高迁移率族蛋白B1表达水平(均P<0.01,鼠数为6只);此外,蛋白质印迹分析结果显示,与TBI组相比,TBI+ANXA5组中抗炎因子血红素加氧酶1上调(P<0.01)。上述研究结果提示ANXA5在TBI小鼠中发挥了神经保护作用,可通过调节高迁移率族蛋白B1信号通路和血红素加氧酶1抗氧化系统来改善神经炎症、氧化应激。DeJong等[28]使用表达人类突变载脂蛋白E的ApoE3-Leiden转基因小鼠作为高胆固醇鼠,高胆固醇诱导心肌炎症反应,引起心肌缺血-再灌注(myocardial ischemia - reperfusion, MI-R)损伤,为了探究模型小鼠MI-R损伤后ANXA5对左心室功能和重构的影响,治疗组对模型小鼠每天腹腔注射200μl浓度为1mg/kg 的ANXA5,非治疗组模型鼠注射等量等渗盐水作为对照,分别在连续注射2d和3周时进行检测,结果显示,在MI-R损伤3周时,与非治疗组比较,ANXA5治疗组心肌梗死面积显著减小[(13.4±1.8)%比(18.3±1.1)%,P= 0.022],心脏舒张末期容积显著减少[(34.5 ±2.2)μl比(44.4 ±2.4)μl,P= 0.004],左心室射血分数增加了29%,左心室纤维含量减少了42%,同时梗死区域左心室壁的厚度增加了17%;在MI-R损伤后2d,与非治疗组小鼠相比,ANXA5治疗小鼠的心肌梗死区和交界区中增殖巨噬细胞的数量显著减少[梗死区:(73.8±17.0)个/mm2比(188.6±41.7)个/mm2,P=0.009;交界区:(69.3±8.6)个/mm2比(142.2±27.5)个/mm2,P= 0.008],白细胞介素6的产生降低[(1071±28)ng/L比(1455±65)ng/L,P< 0.01],该研究提示,ANXA5治疗可减弱缺血后炎症反应,改善左心室重塑,进而改善高胆固醇血症Apoe*3-Leiden小鼠MI-R损伤2d和3周后的心脏功能。目前尚未检索到ANXA5在缺血性卒中中抗炎症作用的具体研究。通过调节缺血性卒中中ANXA5蛋白表达的水平,探究其是否可以抑制脑缺血损伤和血流再灌注过程中的炎症级联反应,进而保护缺血脑组织,将可能成为缺血性卒中神经保护相关研究的新方向。4 、ANXA5在缺血性卒中诊断检测中的应用缺血性卒中发生后,准确评估梗死灶位置、大小至关重要,目前临床多采用影像识别进行诊断[29]。Lee等[30]研究了抗膜联蛋白Ⅴ抗体(anti - annexin Ⅴ antibody, aAⅤ)在急性缺血性卒中患者中的临床应用,共纳入187例急性脑梗死或短暂性脑缺血发作患者和66例健康者(对照组),采用酶联免疫吸附试验检测患者组和对照组的aAⅤ蛋白水平,结果显示,与对照组相比,患者组中aAⅤ阳性受试者的检出比例更高[13.9%(26/187)比4.5%(3/66),P=0.043];排除年龄的混杂因素后,患者组的aAⅤ阳性率仍高于对照组(P=0.018),表明急性缺血性卒中患者aAⅤ的检出率较高,提示ANXA5可能成为急性缺血性卒中的辅助诊断标志物。ANXA5可与多种标记信号分子耦联。Mari等[31]采用锝-99的核同质异能素锝-99m来标记ANXA5制成锝-99m-ANXA5,评估其能否无创监测局灶性大脑中动脉闭塞-再灌注损伤后大鼠的神经元损伤,制备16只成年雄性Sprague - Dawley大鼠的左侧大脑中动脉闭塞(2h)-再通模型,4只正常大鼠作为对照组。每天经尾静脉注射锝-99m-ANXA5约185~370MBq(MBq:电离辐射的单位,用来衡量放射性活度,即单位时间内原子核的衰变数量),并在注射1h后开始对实验动物进行不同时间点的单光子发射计算机体层摄影(SPECT)和放射自显影检测,结果显示,大鼠大脑右半球和左半球在注射后4h的平均最大ANXA5摄取率分别比对照组高出(310±85)%和(365±151)%,均P<0.03,在第3天达到峰值[右半球(925±734)%,P<0.01;左半球(1194±643)%;P<0.01),在第7天开始下降[右半球(489±233)%,左半球(785±225)%,P<0.01]。缺血损伤后4、24、72h左半球总梗死体积分别比右半球增加226%、261%、451%(均P<0.03);双荧光显微镜显示,ANXA5可定位于闭塞-再灌注损伤部位同侧受损神经元的细胞质以及对侧半球其他外观正常的神经元;该研究表明,大脑中动脉闭塞-再灌注损伤后,受损大脑组织区域对ANXA5的摄取量更高,提示ANXA5标志物可以监测局灶性大脑中动脉闭塞-再灌注损伤后神经元损伤。Blankenberg等[32]制备锝-99m肼烟酰胺标记的ANXA5(99mTc - HYNIC - ANXA5)确定其能否评估急性卒中患者的缺血性损伤以及局灶性缺血损伤动物模型中动物的治疗情况,2例急性缺血性卒中患者静脉注射1110MBq的示踪剂,1h后对患者进行SPECT,结果显示,患者的99mTc - HYNIC - ANXA5摄取区域与其MRI中大脑受损部位重合;动物实验中制备29只Sprague - Dawley大鼠的左侧大脑中动脉闭塞-再通模型,其中8只进行MFL4抗体(FasL细胞死亡因子的一种抗体,对缺血性卒中具有治疗作用[33])处理,21只大鼠注射等量等渗盐水作为对照组,再灌注1d和6d后根据大鼠体质量注射185 ~ 370MBq示踪剂,MRI和SPECT结果显示,与对照组相比,治疗组中99mTc - HYNIC - ANXA5的摄取率降低92%,并且第1天半胱天冬酶8染色神经元数量减少60%。在第6天,与对照组相比,治疗组大鼠的99mTc - HYNIC - ANXA5摄取率减少了80%,梗死面积减少了75%。对照组和治疗组大鼠的99mTc - HYNIC - ANXA5摄取率与梗死面积(r²=0.603,P=0.0036)及凋亡细胞数(r²=0.728, P=0.00084)呈线性相关。该研究结果提示,ANXA5显像可用于辅助评价缺血性脑损伤治疗效果。5 ANXA5在缺血性卒中其他相关方向研究进展5.1 基因ANXA5的基因多态性对缺血性卒中具有一定影响。ANXA5基因于1994年被详细探究[34],随后Tsakanova和Boiadzhian[35]研究显示,缺血性卒中的发病与编码ANXA5蛋白的基因rs11575945存在关联,该研究纳入了94例缺血性卒中患者[35例男性和59例女性,平均年龄为(67±9)岁]和110名健康者[48名男性和62名女性,平均年龄为(57±9)岁],通过聚合酶链反应与等位基因特异性引物和免疫球分析进行测定,结果显示,患者ANXA5的等位基因rs11575945平均突变频率比健康人高 2.6倍(P<0.01,OR=3.06,95%CI:1.85 ~ 5.06),血清中ANXA5平均浓度比健康受试者高3倍[(4.74±1.64)μg/L比(1.55 ±0.53)μg/L,P<0.01];此外,ANXA5等位基因rs11575945-T 的突变体携带者比rs11575945-C的正常纯合个体血清中ANXA5的浓度高4倍(P<0.01),该研究提示ANXA5基因的突变可能增加缺血性卒中发病风险。5.2 构建靶向载体有研究者利用ANXA5与PS高亲和力的特性进行了靶向载体构建的创新性探究。Quan等[36]开发了一种基于ANXA5和血小板膜的新型组织型纤溶酶原激活剂递送平台,实验者对12只c57小鼠进行大脑中动脉闭塞后再灌注,随后分为4组,每组3只,APLT - PA治疗组注射0.5mg/kg的APLT - PA,其余3组分别注射等量等渗盐水、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)、APLT作为对照组,结果显示,与注射等量等渗盐水、tPA、APLT处理组相比,注射APLT - PA组小鼠在给药后72h和7d时的梗死体积均显著降低(均P<0.01),血-脑屏障渗透率显著降低(均P<0.05),提示用ANXA5构建靶向载体来治疗缺血性卒中具有可行性。该研究为缺血性卒中的精准溶栓治疗提供了一种新型、安全的仿生血小板纳米药物,并为细胞模拟纳米药物的多种生物医学应用的设计和开发提供了新的思路。5.3 神经保护ANXA5可作为一种营养因子保护神经元。Takei等[37]使用胚胎大鼠原代皮质神经元进行神经元存活测定,在培养第1天和第3天将不同浓度重组ANXA5加入培养基中,实验结果显示,与不添加ANXA5组比较,相对较低剂量(1μg/L)ANXA5处理组中皮质神经元存活数量更多(细胞计数分别为230、160个/mm2);当给予浓度30μg/L的重组ANXA5时,神经元存活数量达到最大(细胞计数分别为400、160个/mm2);当向培养基中另加入10mg/L的ANXA5抗体时, ANXA5+抗体组细胞数量多于ANXA5组(分别为300、450个/mm2),提示ANXA5的神经营养活性被抑制,上述研究结果表明,人源重组ANXA5蛋白对体外培养的胚胎大鼠皮质神经元有促存活作用,对皮质神经元具有神经保护作用。6 总结与展望在缺血性卒中的相关研究中,ANXA5作为具有多种生物学功能的内源性蛋白,具有辅助诊断、抗凝、抗炎症、参与靶向载体构建、促进神经元存活等多种功效,有望转化为一种对于缺血性卒中有效的多靶点治疗药物。但其在人体上应用的实际功效仍需进一步的动物实验研究以及临床转化研究验证。。
缺血-再灌注损伤Ischemia-reperfusioninjury

(2)细胞内高H+间接激活Na+-Ca2+交换蛋白 质膜Na+/H+交换蛋白主要受细胞内[H+]的变化调节 [Na+]o [H+]o Na+ H+ > [Na+]i [H+]i 缺血时:无氧代谢↑→产生H+增多 再灌时:组织间液H+迅速减少→细胞内外较高的 H+浓度差→激活Na+/H+交换蛋白→细胞内 [Na+]↑ 激活钠泵 激活Na+-Ca2+交换蛋白
- +e →H 0 +e→ OH· O2+e→ O· +e→H20 +O2+e → O· 2 2 2 2
Ca2+进入线粒体使Mn-SOD减少
清除OFR的能力↓
4. 儿茶酚胺
自氧化 自由基
CA
正常代谢
肾排出
(应激时80%O2) 肾上腺素红+ O-2·
Organic substance
O2 Synthesis Metabolism energy Transport
肠管缺血时,液体通过毛细血管滤出而形成间质水肿。 缺血后再灌注,肠管毛细血管通透性更加升高。 从形态学变化来看,严重肠管缺血所致损伤的特征为粘 膜病变(粘膜损伤)。不论人和动物,在出血性休克及局部 肠管缺血后出现肠粘膜损伤。粘膜损伤的特点表现为:广泛 的上皮与绒毛分离,上皮坏死,固有层破坏,出血及溃疡形
2.细胞损伤
小结
代谢、能量改变
钙超载
OFR 血管内皮中粒细胞
钙超载是细胞不可逆死亡的共同通路
第三节 机体的变化
一、 心肌缺血-再灌注损伤的变化
(一)心功能变化 1.再灌注性心律失常 特点: 室性心律失常为主 电生理改变: 兴奋性、传导性↓ ECG改变:缺血心肌对应部位ST段抬高,R波振幅↑ 再灌使R波振幅迅速↓,ST段高度恢复原 水平,Q波出现, 心律失常
迈之灵治疗下肢血管成形术后缺血再灌注损伤的临床研究

1062018.10药物应用迈之灵治疗下肢血管成形术后缺血再灌注损伤的临床研究程 斌 何 强 李应龙 高建花 候红丽 庞尊中贵州省人民医院介入放射科 贵州省贵阳市 550002【摘 要】目的:观察迈之灵治疗下肢动脉成形术后缺血再灌注损伤的临床疗效。
方法:回顾性分析2014年10月-2016年8月贵州省人民医院收治的40例下肢动脉硬化闭塞症(ASO)患者的临床资料,将患者随机分为观察组22例(口服迈之灵组),对照组18例(未接受迈之灵组),根据泛大西洋多学科共识(Transatlantic intersociety consensus,TASC)分型标准,完成下肢血管腔内成形术。
术前3天开始口服迈之灵2片、3次/日,观察术前、术后第1天、3天、7天肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)指标的变化情况,观察开通术后肢体肿胀程度。
结果:观察组患肢肿胀程度较对照组轻,术后CK-MB、cTn 均明显升高,尤其以术后1天升高显著,此后不同程度下降。
观察组CK-MB、cTn 术后第1天、第3天明显低于对照组(P<0.05),第7天恢复正常。
结论:迈之灵能够降低下肢血管成形术后心肌标志物水平,减轻术后患肢肿胀程度,因此对于下肢缺血再灌注损伤具有较好的临床疗效。
【关键词】缺血再灌注损伤;迈之灵;下肢血管成形术随着社会整体生活水平的提高和人口的老龄化进程,下肢动脉缺血性病变的发病率呈逐年增加趋势,严重影响患者生活质量,导致截肢甚至危及生命[1]。
近年来,随着介入器材的发展,经皮血管腔内成形术(Percutaneous transluminal angioplasty ,PTA )因其微创、可重复性等特点,日益受到重视,逐渐成为下肢动脉缺血性病变首选治疗方法[2]。
但此种治疗仍不可避免会产生并发症,较为常见的是下肢缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury ,常用的消炎镇痛与解热性的药物,可以有效的控制脑梗塞所引发的脑组织炎症反应,改善脑水肿问题。
血必净注射液和丹参注射液治疗兔肢体缺血再灌注损伤的比较研究

关键词 : 兔; 四肢 ; 再灌注损伤 ; 丹 参 注射 液 ; 血 必 净 注射 液
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 1 — 8 3 4 8 . 2 0 l 3 . 3 1 . 0 0 2 文献 标 识 码 : A 文章 编 号 : 1 6 7 1 8 3 4 8 ( 2 0 1 3 ) 3 1 3 7 2 4 0 4
Zh a n g Li a n g, Da i We i , Ga o Zh i mi n g, Zh o u J i h o n g , Li u Da we i
( I n s t i t u t e o f Fi e l d Su r g e r y Re s e a r c h Fo u r C h a mb e r, S t a t e Ke y La b o r a t o r y o f Tr a u ea r Bu r n s a n d Co mb i n e d I n j u r y
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重 庆 医学 2 0 1 3年 1 1月 血 必净 注射 液 和丹 参 注射 液治 疗 兔肢 体缺 血 再灌 注 损伤 的 比较 研 究
张 良 , 代 维 , 高志明 , 周 继 红 △, 刘 大 维
( 第三 军 医大学 大坪 医院野战 外科研 究所 四 室/ 创伤 、 烧伤 与复合 伤 国 家重 点 实验 室 , 重庆 4 0 0 0 4 2 )
2 h MD A 含 量 显 著 低 于对 照 组 ( P <0 . 0 5 ) ; 血必净组缺血再灌注后 1 ~4 h及 丹 参 组 缺 血 再 灌 注后 2 h S O D 活性 显 著 高 于 对 照 组
喷他佐辛对止血带致下肢缺血再灌注后心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响重点

ob“ous
changed
at
the times of Tiand来自T2@’o.05).No
significant change
in the concentration of CGRP of group C was detected at the time of Tl and
T2(P>O.05),while
I,cTnI)的
peptide,cGRP)的关系。
方法选取择期在蛛网膜下腔麻醉下行单侧
下肢骨科手术使用止血带患者60例,按照随机数字表法分为对照组(C组)和喷他佐辛组(P组),每组30例。止血带充气前P 组患者给予喷他佐辛O.5 ms/kS静脉滴注,C组在相同时刻给予等量生理盐水。在止血带充压前(To)及止血带释压后0.5 h(T,)、
24
h(T2)时采集输液对侧肘静脉血5 Illl,采用ELISA法检测血清中cTnI和CGRP的含量。
结果两组患者一般资料比较,差
异无统计学意义(踟.05)。与To时cTnI[(0.21±o.06)№几]比较,c组cTnI在Tl时无明显变化(踟.05),在T2[(O.28±0.10)“∥L]时
明显升高(P<O.05),P组cTnI在TI、T2时无明显变化(踟.05);与T0时CGRP[(16.9±2.2)ns/L]比较,c组CGRP在Tl、T2时均无 明显变化(脚.05),P组CGRP在Tl[(17.9±2.7)n以]、T2[(18.8±2.8)ns/L]时均明显升高(P<O.05 o与c组在Tl、T2时cTnI
a
not
transfusion ann
immediately
before inflating
tourniquet㈨,
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常用静脉麻醉药物在下肢缺血/再灌注损伤防治中的研究进展下肢缺血/再灌注损伤是临床常见的病理过程,其损伤机制主要包括氧自由基的释放、细胞内钙离子超载,白细胞的作用和微循环障碍。
研究报道指出,常用的静脈麻醉类药物如镇静催眠类、阿片类药物和非甾体抗炎类药物对下肢缺血/再灌注损伤均有一定的保护作用,其机制主要是通过药物自身的抗氧化作用、减少氧自由基的生成、抑制炎症因子的合成和释放等。
本文针对缺血/再灌注损伤的相关机制及对肢体缺血/再灌注损伤具有保护作用的常用的静脉麻醉类药进行了概括总结,旨在为临床用药提供新的指导。
[Abstract] Lower limb ischemia/reperfusion injury is a common pathological process in clinical.The injury mechanism mainly includes releasing of oxygen free radicals,intracellular calcium overload,the role of white cell and microcirculation disturbance.Some research reports that commonly used intravenous anesthesia drugs liking sedative hypnotic,opioids and non-steroidal anti-inflammatory drug have protection role in lower limb ischemia/reperfusion injury.The mechanism mainly includes antioxidant effect of the drug itself,reducing the generation of oxygen free radicals and inhibiting synthesis and release of inflammatory factors.This paper summarizes the related mechanism of lower limb ischemia/reperfusion injury and commonly used intravenous anesthesia drugs that have protection role in lower limb ischemia/reperfusion injury and is aim to provide new guidance for clinical.[Key words] Lower limb ischemia/reperfusion injury;Anesthesia drugs;Sedative hypnotic;Non-steroidal anti-inflammatory drug临床工作中,下肢各类骨科手术常应用止血带,因其可减少手术的出血、提供清晰的术野,但其也可引起下肢缺血/再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI),严重时不仅损伤肢体局部组织、导致骨骼肌的纤维化、挛缩甚至肢体坏死,同时再灌注后大量氧自由基合成释放、炎症细胞激活、过量炎症因子的释放等可引起远隔器官的损害,甚至发生多器官功能衰竭[1],因此减轻止血带诱发的下肢IRI具有重要意义,本文旨在肢体IRI的机制和常用的静脉麻醉类药物对肢体IRI的保护作用研究进展进行综述。
1 肢体IRI机制IRI是指缺血组织恢复血液灌注后,细胞代谢障碍及结构破坏不但未减轻反而损伤加重的现象。
缺血/再灌注损伤机制尚未完全明确,目前关于IRI机制主要包括如下。
1.1 氧自由基组织缺血/再灌注时,通过黄嘌呤氧化增加、儿茶酚胺氧化增强、中性粒细胞呼吸爆发等使氧自由基的生成增多,氧自由基通过生物膜的脂质过氧化增强使膜结构破坏、膜蛋白功能受到抑制、线粒体功能受损、DNA断裂和染色体畸变、蛋白变性和酶活性降低。
丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的重要产物,可通过测定MDA反映氧自由基对组织的损伤程度[2]。
1.2 钙超载缺血/再灌注时细胞膜对钙离子的通透性增加,ATP依赖性钙泵功能失活及钠钙交换蛋白反向转运加强等促使钙离子大量进入细胞内,导致细胞内钙离子发生超载。
细胞内高钙促使黄嘌呤氧化增加产生大量氧自由基,同时导致线粒体功能障碍,能量生成减少,另外细胞内高钙可激活钙依赖性生物酶,导致细胞结构受损,甚至细胞死亡。
膜磷脂被降解产生大量花生四烯酸代谢产物,同时细胞内高钙促使黄嘌呤氧化增加产生大量的氧自由基,加重细胞损伤,另外细胞内高钙可导致线粒体功能障碍,最终导致细胞死亡。
1.3 白细胞缺血/再灌注可引起白细胞的激活、趋化,白细胞与血管内皮细胞黏附堵塞毛细血管,形成无复流现象,加重组织缺血缺氧[3],中性粒细胞和氧自由基的代谢产物是骨骼肌IRI的重要因素[4],再灌注时,在趋化因子作用下大量白细胞向缺血组织游走、聚集、活化,同时活化的白细胞可通过呼吸爆发释放大量的氧自由基,加重再灌注组织的损伤。
1.4 微循环障碍缺氧时,血管内皮细胞和组织细胞的通透性增强,再灌注后内皮细胞和间质肿胀,增多活化的白细胞在粘附分子的作用下堵塞微循环血管,在细胞因子和P-选择素的作用下,大量血小板在缺血组织中聚集粘附,形成血小板栓子,加重组织无复流现象。
2 麻醉药物在下肢缺血/再灌注防治中的研究下肢手术患者常规接受麻醉,有关麻醉药物在IRI中的保护有大量研究,其在下肢IRI的预防和治疗中的作用机制包括:①药物本身的抗氧化作用;②减少氧自由基的生成;③清除氧自由基;④抑制炎症因子的合成和释放等。
常用的静脉麻醉药物主要分为:静脉麻醉类、阿片类和非甾体抗炎类。
2.1 常用静脉麻醉类药物2.1.1 咪达唑仑常用的镇静催眠类药物,具有良好的抗焦虑、镇静和催眠作用,临床常用于麻醉诱导和手术时的镇静。
Ghori等[5]研究发现,咪达唑仑可抑制中性粒细胞MAPK信号转导通路的激活,减少缺血/再灌注后细胞表面粘附分子CD11b/CD18的表达,还可抑制中性粒细胞,减少呼吸爆发引起的大量氧自由基生成[6],体外研究表明咪达唑仑本身具有抗氧化的作用[7]。
2.1.2 丙泊酚临床应用最广的静脉麻醉药物,化学结构类似于维生素E,可抑制氧自由基的产生,对IRI有预防和治疗作用。
国外研究[8-9]表明丙泊酚可降低下肢IRI的损伤作用,主要是通过减少氧自由基的生成、滅活氧自由基、抑制脂质过氧化反应、降低组织氧耗、调节细胞内钙离子的平衡,同时还可以保护血管内皮细胞,减轻其损伤,丙泊酚还可通过抑制细胞凋亡来减轻下肢缺血/再灌注对远隔器官的影响,因此可产生良好的器官保护效应。
2.1.3 右美托咪定高度选择性的α2受体激动剂,具有良好的镇静、催眠、镇痛和抑制交感神经的作用,用于手术病人和ICU病人的镇静。
报道显示[10],右美托咪定可通过影响基因的表达、离子通道的激活、递质的释放和调节炎症过程及细胞的凋亡等多种机制,对各类器官的IRI具有保护效应。
阮孝国等[11]研究发现,右美托咪定可降低止血带诱发IRI后患者血清中MDA和TNF-α水平,可能机制是通过激动α2受体,抑制去甲肾上腺素释放,降低血浆中的儿茶酚胺,减少儿茶酚胺代谢产生的氧自由基;另外还通过激活胆碱能神经通路抑制细胞因子的产生,从而产生抗炎作用[12]。
右美托咪定还可减轻下肢缺血/再灌注导致的肺损伤,可能是通过下调Toll样受体4的表达,使IL-6,IL-8和TNF-α生成减少[13],进而减轻下肢缺血/再灌注导致的肺损伤。
2.1.4 依托咪酯常用的静脉麻醉药物,常作为麻醉诱导药物。
研究发现[14],与单纯缺血/再灌注组比较,依托咪酯可显著降低肢体缺血/再灌注后MDA水平,表明其可抑制氧化应激,减轻下肢IRI。
研究发现,大鼠脑缺血/再灌注时,依托咪酯可显著降低脑细胞凋亡,抗凋亡相关基因Bcl-2表达明显增高,凋亡相关基因Bax下调,Bcl-2/Bax升高,提示依托咪酯可有效地抑制缺血/再灌注后的细胞凋亡。
2.2 常用的阿片类药物阿片类药物是一类可通过激动阿片受体产生良好的镇痛作用及其他具有镇痛作用的药物,常用于手术患者的手术和术后镇痛,阿片受体主要分为μ、δ、κ和σ四种类型,广泛分布于人体各组织。
关于阿片类药物在下肢缺血/再灌注研究较少,现就阿片类药物对下肢缺血/再灌注的进展报道。
2.2.1 芬太尼经典的阿片受体激动剂,通过激动μ受体产生良好的镇痛作用,其在下肢的缺血/再灌注中研究较少。
在兔的心肌缺血/再灌注模型中[15],芬太尼可有效地降低缺血/再灌注后TNF-α、IL-6的产生,可能机制为芬太尼作用于单核细胞膜上的μ受体,通过一系列胞内机制使细胞内cAMP浓度下降,抑制IL-6的合成和释放,对TNF-α抑制作用与其刺激抗炎介质IL-10的合成和释放有关。
2.2.2 舒芬太尼孙晓峰等[16]在动物研究中发现,舒芬太尼预处理可以减轻肢体缺血/再灌注后对肺脏损伤,机制可能是通过抑制NF-κB的激活,与减少中性粒细胞趋化因子介导的中性粒细胞聚集有关。
王学平等[17]研究发现,舒芬太尼术中应用对肢体IRI无保护作用,而术后应用可减轻其损伤,可能是舒芬太尼术后镇痛可以有效缓解再灌注血管的痉挛,改善局部血液循环,从而减轻再灌注损伤。
2.2.3 瑞芬太尼徐阳等[18]研究发现,瑞芬太尼可减轻上肢手术止血带致缺血/再灌注后CK、LDH、AST的升高,可能是瑞芬太尼抑制交感神经兴奋,减少去甲肾上腺素的释放,同时激活内源性抗损伤物质,维持微循环血管壁的完整性。
杨禄坤等[19]研究显示,下肢IRI后肾小管坏死严重,肾小管上皮细胞脱落,肾小管腔堵塞,细胞凋亡指数明显增高,同时血清肌酐和尿素氮的含量及炎症因子TNF-α和IL-6明显升高,瑞芬太尼可有效地改善下肢缺血/再灌注后的肾组织损伤,减少细胞凋亡,降低炎症因子的含量,其肾保护机制可能与其抑制炎症和细胞凋亡有关。
2.2.4 喷他佐辛人工合成的阿片受体激动-拮抗剂,主要激动κ受体,大剂量时激动σ受体,对μ受体具有拮抗作用,常用于手术后镇痛。
研究发现[20],在脂多糖介导的视网膜小胶质细胞炎症模型上,喷他佐辛可通过激动小神经胶质细胞上的σ1受体,使活性氧的生成减少,TNF-α和IL-10下降,同时减少单核细胞趋化蛋白1的合成,其机制可能是通过抑制细胞内的ERK和JNK信号转导通路产生良好的抗炎作用,但骨骼肌是否具有σ受体,且是否具有同样的抗炎作用,尚未可知。