酶的特性实验

酶的特性

一、实验目的

1．通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、PH对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响

二、实验原理

本实验由温度对酶活力的影响；PH对酶活力的影响；酶的激活剂及抑制剂；酶的专一性4组实验组成。

（一）温度对酶活力的影响

酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-40℃，植物酶的最适温度为50-60℃。

酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显的改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低酶或抑制酶的活性，但不能使酶失活。

淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色，糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色，在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。

（二）PH对酶活力的影响

酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH 对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6.8。

（三）唾液淀粉酶的活化及抑制

酶的活性受活化剂或抑制剂的影响，氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。

酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。

（四）酶的专一性

淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。

三、实验物品

仪器：试管及试管架，恒温水浴，冰浴，沸水浴，吸管，滴管，锥形瓶

药品：稀释30倍的唾液(用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释30倍。混匀备用。)

KI－I2碘溶液(将KI 20g及I210g溶于100ml水中，使用前再稀释10倍。)

0.2 mol Na2HPO3溶液，1% NaCl溶液，1% CuSO4溶液，1%Na2SO4溶液，2%蔗糖溶液，

0.1%淀粉溶液，溶于0.3% NaCl的1%淀粉溶液，溶于0.3% NaCl的0.2%淀粉淀粉溶液，溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液

四、实验过程

（一）温度对酶活力影响

往三只试管各加入1.5ml0.2%淀粉的0.3% NaCl溶液，冰浴5min，再加入已冰浴

5min的稀释唾液1ml ，摇匀后，将1号试管继续冰浴、2号两试管放入37 ℃恒温水浴中，3号试管放入沸水浴中，10min后去处，将2号管内液体分为两半，用KI－I2溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37℃水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何？

（二）PH对酶活力的影响

取四个标有号码的50ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1柠檬酸溶液以制备pH5.0－8.0的四种缓冲液。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。随后于每个试管中添加0.5％淀粉溶液2ml和稀释200倍的唾液2ml，待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴KI－I2溶液。添加KI－I2溶液，检验淀粉的水解程度。待混合变为棕黄色后，向所有试管依次添加1-2滴KI－I2溶液。添加滴KI－I2溶液的时间间隔，从第1管起，亦均为1分钟。

观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。

（三）唾液淀粉酶的活化及抑制

往四只编好号的试管中各加入1.5ml的0.1%淀粉溶液，然后往1号试管加入0.5ml 1% NaCl溶液，往2号试管加入0.5ml 1% CuSO4溶液，往3号试管加入0.5ml 1% 1% Na2SO4溶液，往4号试管加入0.5ml蒸馏水,于37℃恒温水浴中保温5分钟，然后加入2-3滴KI－I2溶液，观察实验现象，并分析酶的活化及抑制。

（四）酶的专一性

取四只编好号的试管，往1和3号加入4滴1%淀粉的0.3% NaCl溶液，往2和4号加入4滴2%蔗糖溶液；往1和2号试管加入1ml蒸馏水；3和4号试管加入1ml 唾液稀释液，将四支试管置于37℃恒温水浴中5min，再加入1ml Benedict氏试剂，沸水浴2-3min，观察实验现象，，并分析酶得专一性

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