茶叶中茶多酚的检测
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4 没食子酸工作液
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7
8 待测液
9
10ug
20ug
30ug
40ug 福林酚
50ug
7.5%Na2CO3 0.110 0.230 0.338 0.459 0.581 0.525 0.561 0.641
方程
y=0.0116X-0.0037
R 2 0.9996
0.561 × 10 × 100 × 100% 24.1% 6 0.0116 × 1 10 0.200
茶叶中茶多酚的检测
原理
• 茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇在70摄氏度 水浴上提取,福林酚试剂氧化茶多酚中OH基团并 显蓝色,最大吸收波长为765nm,用没食子酸做 校正标准定量茶多酚。
操作方法
• 供试液的制备
1、母液:称取0.2g(精确到0.0001g)均匀磨碎的试样于 10mL离心管中,加入70摄氏度中预热过的70%甲醇溶液 5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润,立即移入70摄氏度水 浴中浸提10min(隔5mim搅拌一次)浸提后冷却至室温, 转入离心机在3500r/min转速下离心10min,将上清液转入 10mL容量瓶中。残渣再用5mL的70%甲醇溶液提取一次重 复以上操作,合并提取液定容至10mL,摇匀,待测。 2、测试液:移取母液1.0mL于100mL容量瓶中,用水定容至 刻度,摇匀,待测
测定
1 2 3 4 5 6 7 8 待测液 9 注:在每只试管中 加入5mL福林酚试 剂摇匀后在3~8min 中内加入 7.5%Na2CO3。源自没食子酸工作液1mL
蒸馏 水
10ug 20ug 30ug 40ug 50ug
5mL
4mL
福林酚
7.5%Na2CO3
在室温下放置60min,用10mm比色皿在765nm波长条件 下用分光光度计测定吸光度。
结果计算
A ×v ×d × 100 • 茶多酚含量(%)= 6 SLOPEStd ×m × 10 ×m1
式中: A——样品测试吸光度 V——样品提取液体积,10mL d——稀释因子 SLOPEStd ——没食子酸标准曲线的斜率 m——样品干物质含量,% m1——样品的质量,单位为克(g)
1 1mL 5mL 4mL 蒸馏水
0.525 × 10 × 100 × 100% 17.4% 6 0.0116 × 1 10 ×0.206
0.641 × 10 × 100 × 100% 27.6% 0.0116 × 1 10 6 ×0.200
(17.4%+24.1+27.6)÷3=23.0%