血型鉴定试验

ABO血型鉴定
l 原理： 根据ABO血型的分型原则及其独特的性质，利
用凝集试验技术通过正定型（红细胞定型）和反定 型（血清定型）两组试验可准确鉴定ABO血型。 l 试剂： l 抗A、抗B 试剂血清 l A型、B型和O型试剂红细胞悬液 l 2-3 %受检者红细胞悬液和血清或全血
ABO血型鉴定
l 方法： l 玻片法 不适于血清抗体鉴定 l 试管法 正定型、反定型 l 结果解释 l 凝集为阳性
为什么在反定型中使用O型红细胞？
因为有些受血者或供血者血清中存在因免 疫、妇女妊娠或不当输血而引起的抗A或抗B以 外的抗体，这些抗体不是自然所期望存在的。 血清反定型时，使用O型红细胞可在 ABO 血型 鉴定试验过程中检测出受检血清中是否有“不规 则”抗体的存在。
为什么红细胞悬液过浓或过淡均可出现假阴性反应结 果？
因为抗原、抗体在适当的比例下，反应最强。若 红细胞悬液过浓，则抗原过剩，抗体不足，每个红细 胞均只能吸收少量抗体，不足以形成凝集。若红细胞 悬液过淡，则红细胞间距离较大，不易集聚在一起， 不形成凝集。在实际血型鉴定时，玻片法用 5% 红细 胞悬液敏感性较强，并应在鉴定过程中不断摇动玻片 以促使其相互接触。试管法用 2% 浓度的红细胞悬液 敏感性较好，容易观察凝集。
血样本
血样本
血标本
红细胞悬液制备
l 抗凝或不抗凝的血标本→洗涤→压积红细胞→配制
红细胞悬液
l 2-3% 的红细胞悬液
试管法血型鉴定、效价滴 定
l 5% 的红细胞悬液
玻片法血型鉴定、间接抗 人球蛋白试验
l 10% 的红细胞悬液
抗体亲和力测定
血清标本
抗凝或不抗凝血标本→37℃水浴箱→竹签使血块与 试管壁分离→离心→将血清吸至干净试管待用
ABO血型的分类原则是什么？ A BO 血型的分类原则是根据红细胞膜上所存在
的抗原，血清中所存在的抗体来进行分类的。通常使 用抗-A 和抗B 两种血清及 A 型、B 型和 O 型三种试 剂红细胞来鉴别。如受检者红细胞被抗血清凝集，说 明红细胞膜上存在相应的抗原；如不发生凝集说明不 存在相应抗原；如受检者血清与试剂红细胞发生凝集 ，说明血清中存在相应的抗体；如不发生凝集，说明 不存在相应抗体。
—
被检红细胞 2 —
+
被检红细胞 3 +
+
M+N+红细胞
+
M- N+红细胞 —
M+N+红细胞
+
M+N- 红细胞
—
血型 M N MN
即被检红细胞膜上有与该试剂血清抗体相对应 的抗原；或被检血清中有与该试剂红细胞抗原相对 应的抗体。
l 不凝集为阴性
加试剂抗体血清
加被检红细胞悬液
离心
相对应的抗原抗体反应
观察结果
ABO血型判断
血
正定型
反定型
型 抗-A
抗-B
AC
BC
OC
A
+
—
—
+
—
B
—
+
+
—
—
O
—
—
+
+
Hale Waihona Puke Baidu
—
AB +
+
—
—
—
思考题
凝胶试验使用的试剂和器材
凝胶技术
凝胶法鉴定ABO血型
优点：
l 敏感： 在凝胶试验中常能发现其它试验不易发现的问题 。
l 结果可保存： 凝胶试验的结果可在冰箱中保存数日，并且较容 易被拍成照片。
l 操作技术要求较低： 凝胶试验的操作主要是简单的加样和判读，孵育 、离心过程都有专门的设备。其中能被人为改变 的因素较少。
为什么玻片法血型鉴定要严格规定观察结果的时间？ 凝集反应出现的快慢与强弱是由抗原抗体的性
质决定的,如果抗原的抗原性强，抗体效价高，凝集 反应的第一，第二阶段可以在数秒内完成；如抗原 的抗原性弱，抗体效价也低，则凝集反应不明显， 反应需要一段时间才能完成。
因为血清在空中暴露时间过长，发生浓缩，从 而使红细胞聚集，造成假阳性结果；如果不等反应 完成便判定反应结果，可使阳性结果误报成阴性结 果，造成假阴性。所以玻片法血型鉴定要严格规定 观察结果的时间
为什么ABO血型鉴定应采用“正反定型”两种方法？
因为 ABO 血型鉴定,主要依据受检者红细胞与 抗A 、抗B 试剂血清反应结果确定,此法称正定型法； 也可通过受检者的血清与A型、B型和O型试剂红细 胞反应结果确定,此法称反定型法，同时采用正反定 型法,并互相核对其结果是否一致是一个可靠的血型 鉴定法。
l 无需洗涤的抗球蛋白试验：
缺点
l 不能做反定型
l 凝胶试验方法成本较高，需要特殊设备 。
l 高度敏感有时也会造成不便。
l 试剂
MN血型鉴定
l 抗M、抗N试剂血清 l M型、N型、MN型红细胞 l 受检者红细胞悬液
n 方法
l 玻片法 l 试管法
l 结果判读
MN血型结果判定
抗M
抗N
被检红细胞 1 +