肺炎支原体抗体的标准操作程序

肺炎支原体抗体的标准操作程序
1 试剂盒的来源：
2试剂盒反应原理：本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体(Mac株)细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。

本试剂试验是基于如下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。

3试剂盒组成：血清稀释液(液状) 致敏粒子(冷冻干燥), 未致敏粒子(冷冻干燥), 阳性对照血清(液状)
滴管25 u L 2支"U"型微量反应板一块
4操作步骤
1) 取空试管一支，用微量加样器加人稀释液100 u L，再用微量加样器在第1-4孔中各加人稀释液25 u L。

2) 用微量加样器取样品25 u L至已加人稀释液100 u L的试管中。

混匀
后用微量加样器取25 u L加入到微量血清反应板第1孔中，混匀。

3）用加样器从第1至第4孔(或更多)进行对倍稀释。

4)用试剂盒中提供的一支滴管向第1孔中滴加1滴末致敏粒子，用试剂盒中提供的另一支滴管向第2至第4孔(或更多)各滴加1滴致敏粒子。

5)用平板混合器彻底混合各孔中内容物约30秒钟，以便充分混匀(小心不要将孔中内容物溅出)。

给反应板加盖，在室温下(1500℃)静置3个小时，然后在平板观测器上读取凝集图像。

静置过夜不会使图像产生显著变化。

5测定结果的判定方法
阳性
样品与未致敏粒子(最终稀释倍数1：20)的反应图像判定为(一)，而与致敏粒子(最终稀释倍数1：40)的反应图像判定为(+)或(++)，则结果判定为阳性。

将显示出反应图像为(+)时的最终稀释倍数作为抗体滴度。

阴性
不论样品与未致敏粒子呈现何种反应图像，只要与致敏粒子(最终稀释倍数1：40)的反应图像显示为(一)，则结果判定为阴性。

6吸收操作
对于未致敏粒子和致敏粒子均显示(±)以上凝集的样品，要按照下列顺序在完成吸收操作的基础上进行再试验。

1)将450 u l用规定量血清稀释液复溶后的末致敏粒子加入到一支小试管中。

2)加入50 u l样品，充分混匀，在室温下(15～30℃)孵育30分钟(在孵育期间混合一或两次)。

3)离心(2000r．p．m；5分钟)，吸取上清液重复4操作步骤的内容
7注意事项
1．使用前应充分混匀致敏粒子和未致敏粒子。

2．在滴加致敏粒子和未致敏粒子后，应充分混匀微量反应板各孔中的内容物。

3．静置期间，微量反应板要加盖并避免振荡。

4．每批试剂盒都有质量保证。

不要将不同批次试剂混用。

5.冻干试剂必须在复溶后的当天使用。

但如果保存在2-10℃，最多可使用5天。

6.避免冻结试剂盒内试剂。

8临床意义
1.本试剂试验仅用于检测肺炎支原体抗体，而非直接检测肺炎支原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。

对患者状况的综合性评估应该包括对患者临床症状和试验结果的严谨分析。

2．极低含量的抗体不能被此试验检测出来是可能的。

一些肺炎支原体感染的患者，不产生抗体或只产生少量抗体。

用这些患者的样品进行本试剂试验，可能显示阴性结果。

当怀疑感染时，即使样品进行本试剂试验显示阴性结果，也要问隔一段时间再进行重新检测，而且对患者状况的综合性评估应该包括对患者的临床症状和试验结果的严谨分析。

3．注意一些高抗体滴度的样品可能在低稀释度时出现前带现象。