肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)
被动凝集法检测肺炎支原体
被动凝集法检测肺炎支原体
肺炎支原体抗体检测
人体感染肺炎支原体后, 首先出现 IgM 类抗体，IgM 类抗体一般在感染后1 周出现,2~4周达高峰, 后逐渐降低，可持 续数月。IgG类抗体于感染后20天左右 出现，感染一个月左右达高峰，在体内 可维持1.5~2年。
肺炎支原体抗体检测
MP感染判断标准：
被动凝集法
原理： 是用表面吸附了MP抗原的明胶 颗粒代替动物红细胞制成致敏人工 明胶颗粒，再与人血清中存在的MP 抗体产生凝集反应。
被动凝集法
优点：
1.操作简单快速，设备要求低，结果判读容 易，过夜后再判读不发生显著变化。 2.消除红细胞载体引起的非特异性凝集。 3.特异性、灵敏性较高。 4.血清MP抗体滴度与MP感染者病情的严重 程度呈正相关。
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
阳性对照：MP抗体滴度为1:320
被动凝集法
被动凝集法
缺点：
1.检测总抗体。 2.该试验仅用于检测MP抗体，而非 直接检测MP，因而阳性结果并不能确诊 是MP感染。 3.假阴性。
被动凝集法
被动凝集法
Байду номын сангаас
被动凝集法
判定：
滑的圆形。→（-）
肺炎支原体抗体检测(被动凝集法)和肺炎支原体核酸检测(实时荧光定量PCR法)在儿童肺炎支原体感染中的
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）和肺炎支原体核酸检测（实时荧光定量PCR法）在儿童肺炎支原体感染中的应用价值摘要目的：评估MP抗体检测与MP-DNA检测在儿童肺炎支原体感染中的应用价值。
方法：将2018年1月至12月在本院进行治疗的100 例MP 感染患儿作为研究对象，同时用被动凝集抗体检测法和实时荧光定量PCR法进行检测，对检测结果进行统计分析。
结果：对100 例MP感染的患儿进行检测，其中应用被动凝集抗体检测法检测出94例呈阳性，阳性率为94.00%，应用实时荧光定量PCR法检测出95例呈阳性，阳性率为95.00%，两种检测方法检出的4-6岁组患儿阳性率均最高，均为100%，两种方法检测阳性率在各年龄组均无显著性差异（P<0.05）。
结论：被动凝集法以及实时荧光定量PCR法在儿童肺炎支原体感染的检测中特异性强，且两种检测方法无显著性差异（P<0.05），均可以应用于临床检测。
关键词：被动凝集法；实时荧光定量PCR；儿童肺炎支原体肺炎支原体肺炎是学龄前和学龄期儿童常见的一种肺炎，婴幼儿亦常见，占住院儿童社区获得性肺炎的10%～40%，其病原体为肺炎支原体 [1-2]。
临床上感染肺炎支原体的儿童在感染初期没有很明显的临床症状，而且有很多症状不会体现在肺部，而且该类疾病的临床进展期比较长，这就致使肺炎支原体感染在临床上有较高的误诊率[3-4]。
虽然有关MP感染而死亡的儿童报道较少，但如果不对这类疾病进行及早的治疗与控制，会给患病儿童带来多种并发症，严重的并发症可能会损伤儿童脆弱的神经，影响儿童的生长发育［5-6］。
就目前临床对MP感染的了解来看，仅仅通过临床症状很难将MP于其他的病原体引起的呼吸道感染进行分辨，由于MP感染后的治疗不同于其他病原微生物，对MP进行及早的诊断，是临床减少抗生素滥用的有效手段，发现准确、快速的MP诊断方法意义重大[3-7]。
目前，在我国对MP进行临床诊断，一般采用血常规分析结合患儿临床症状以及细菌培养或MP抗体检测。
支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书
支原体肺炎血清学试验被动凝集法作业指导书1.原理本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。
本试剂试验室基于如下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。
2.标本采集2.1标本种类：血清2.2标本要求：新鲜，无溶血，无脂血。
2.3标本存放：室温﹤8小时，4℃—8℃存﹤48小时。
3.试剂组合3.1U型微量反应板：FASTEC。
3.2血清稀释液（液体）：30ml*1瓶。
3.3致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。
3.4未致敏粒子（冻干）：1.5ml*5瓶。
3.5阳性对照（液体）：0.5ml*1瓶。
4.操作方法4.1用一支校准的滴管，向第1孔加100ul，向第2-第8孔各加25ul血清稀释液。
4.2用微量移液管向第1孔中滴加25ul样品。
4.3用加样器或移液管，从第1孔至第8孔进行对倍稀释。
4.4用试剂盒中提供的一支滴管向第2孔中滴加25ul未致敏粒子，用试剂盒中提供的另一支滴管向第3孔至第8孔各滴加25ul致敏粒子。
4.5用平板混合器混合各孔中内容物约30秒，以便充分混匀。
给反应物加盖。
5.结果判断：在室温下静置3小时，然后在平板观测器上读取凝集图像。
6.操作性能：特异性，灵敏度，重复性，相关性。
7.结果处理7.1若结果失败，则重复测试，并作质控校正。
7.2若失控，则重检试剂盒。
8.方法局限性8.1溶血、脂血结果有影响。
8.2观察结果对弱阳性存在差异。
9.临床意义：肺炎支原体（MP）是引起呼吸道感染的常见病原微生物，它除可引起非典型肺炎外，常可引起呼吸道感染、气管炎、支气管炎、淋巴结炎，也可引起肺大泡、肺脓肿，另外，它还可引起其他系统并发症，如心肌炎、心包炎、脑膜炎、关节炎、胃炎、溶血性贫血等，由于MP对一般治疗肺炎的药物有耐药性，因此，及时进行检查有助于诊断及治疗。
被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析
被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析作者：程云华来源：《医学美学美容·中旬刊》2014年第01期【摘要】目的：探讨被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用及流行病学分析。
方法对2012年11月～2013年10月在我院2038份疑似肺炎支原体感染者进行SERODIA-MYCO Ⅱ被动凝集法检测血清抗体，判断肺炎支原体感染者并分析其流行病学资料，包括总阳性率、年龄组差异、季节阳性率差异及不同标本来源阳性率差异等。
结果 2038份临床疑似肺炎支原体感染者中，MP阳性405例，总阳性率19.9%，其中0～2岁，2～4岁，4～6岁，6～8岁，8～14岁，14～60岁，>60岁的各年龄段的阳性率分别为17.9%，28.2%，31.7%，37.7%，15.5%，15.1%，7.3%，其中6～8岁组阳性率最高；不同季度MP阳性率分别为第一季度（1～3月），第二季度（4～6月），第三季度（7～9月），第四季度（10～12月）分别为23.9%，14.7%，14.5%，25.1%，第一、四季度总阳性率为24.5%，第二、三季度总阳性率为14.6%感染率，两者之间差异有统计学意义（X2=4.382，P【关键词】肺炎支原体；抗体；被动凝集法；临床应用；流行病学分析【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）01-0095-01肺炎支原体（mycoplasma pneumoniao，MP），是引起呼吸道感染的一种病原体，所引起的人类支原体肺炎病理变化以间质性肺炎为主，平时散在发病，主要经飞沫传染，在幼儿园、学校、家庭等流行。
首先引起上呼吸道感染，然后下行引起气管炎、支气管炎、毛细支气管炎和肺炎，同时也可引起肺外并发症，如脑膜炎、脑干炎、脊髓炎等[1]。
MP培养所需营养比一般细菌高，生长缓慢，培养时间长。
而用SERODIA-MYCO Ⅱ被动凝集法检测血清肺炎支原体抗体，操作简单，3个小时就可以报告结果，为临床提供信息，及时治疗。
支原体抗体凝集法
支原体抗体凝集法
支原体抗体凝集法是一种用于检测支原体感染的实验室检验方法。
支原体是一类微生物，可以引起多种感染，包括肺炎、尿路感染和生殖道感染等。
支原体抗体凝集法是通过测量血清中的特定抗体与支原体的抗原结合，形成凝集反应来检测支原体感染。
该方法使用患者血清中的抗体与感染的支原体进行反应，看是否形成凝集。
凝集的程度可以通过观察凝结物的形状和大小来确定。
这种方法相对简单且易于执行，但与其他检测方法相比，它的特异性和敏感性相对较低。
因此，当初步结果为阳性时，通常需要进行进一步的确认性实验，如酶联免疫吸附法（ELISA）或免疫荧光法等。
支原体抗体凝集法的应用范围较窄，在现代实验室检测中已逐渐被更先进和准确的技术所取代。
然而，在一些资源有限或技术条件较差的地区，仍然可能使用该方法作为支原体感染的筛选和初步诊断工具。
日本富士试剂盒被动凝集法检测肺炎支原体讲义课件
实验过程中出现误差或异常结果。处理方法：仔细核对实验数据，找 出问题所在，重新进行实验。
07
CATALOGUE
实验总结及展望
实验总结及体会
实验原理掌握
通过实验，我们深入了解了日本富士试剂盒被动凝集法检测肺炎 支原体的原理，掌握了实验操作流程和注意事项。
实验技能提升
实验过程中，我们提高了实验操作技能，学会了如何进行阳性、阴 性和空白对照的设置，如何判断实验结果等。
试剂盒中使用的肺炎支原体抗原为经 过优化和筛选的纯化抗原，可有效避 免交叉反应，提高检测准确性。
试剂盒的操作流程
用加样器分别吸取 一定量的样本血清 或痰液，加入到试 剂盒的相应孔中。
将试剂盒放置在室 温下孵育一段时间 ，观察各孔的反应 情况。
准备好试剂盒，将 所需试剂从冰箱取 出，放置室温，并 摇动均匀。
。
被动凝集法是一种快速、简便的 检测方法，用于检测肺炎支原体
抗体。
日本富士试剂盒是一种常用的被 动凝集法检测试剂盒，具有高灵
敏度和特异性。
目的和意义
目的
了解日本富士试剂盒被动凝集法 检测肺炎支原体的原理、操作方 法和临床意义。
意义
为临床医生提供一种快速、简便 的检测方法，帮助诊断肺炎支原 体感染，指导临床治疗。
数据分析能力培养
通过对实验数据的分析，我们学会了如何使用统计软件进行数据分 析，掌握了数据分析的技巧和方法。
对未来工作的展望和建议
推广应用
开展培训
建议将日本富士试剂盒被动凝集法检测肺 炎支原体技术推广应用到临床实践中，为 肺炎支原体的快速诊断提供有效手段。
建议定期开展针对新进人员的实验操作和 数据分析培训，提高实验操作水平和数据 分析能力。
被动凝集法检测肺炎支原体抗体在小儿肺炎支原体感染诊断中的应用
成血栓预防工作 好・
质量督导检查是保证各项措施 有效落实的重要手段 ， 质
控组定期对科 室预 防措 施进行督导检查 ， 并走 访每一位全髋
干预组 Ｄ Ｖ Ｔ发生 率和死 亡率 均显 著低于 对照 组 ， 取得 了良
被动凝集法检测肺炎支原体抗体在ｓ ｂ Ｊ Ｌ 肺炎支原体感染诊断 中的 应 用
叶 秀仪 （ 东莞市桥头镇桥头人民医院检验科 ， 广东 东莞 ５ ２ ３ ０ ０ ０ ）
摘要 ： 选 取我 院收治的 ９ Ｏ例 疑似 肺炎支原体感 染的患儿 ， 采用被 动凝集法 检测肺炎 支原体抗体 ， 分 析 比较不 同性 别、 年龄 、 季节 的阳性率 。９ Ｏ例 患儿 中 ， 总阳性率 ３ ５ ． ６ ％。其 中 ， 男性 抗体 阳性率 为 ３ ２ ． １ ％， 女性 中抗体 阳性 率为 ４ ２ ． ５ ％， 男女 比例差异 明显 ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 夏季肺炎支原体抗体 阳性率 为 ２ １ ． ７ ％， 冬季 为 ５ Ｏ ． １ ％， 两者差异 明显０ Ｐ ＜ Ｏ ． ０ ５ ） ， 春、
秋季为 ３ ３ １ ３ ％ 及３ ５ ． １ ％． 差异不明显 尸 ＞ ０ ． ０ ５ ） ； ３ 岁以下组的 阳性率为 ２ ３ ． ８ ％， ３ ５ 岁 阳性率为 ５ ０ ． ０ ％。 ５ 岁 以上组 阳性
率６ ６ ． ７ ％。 可见年龄不同阳性率有所差异 ） ＜ Ｏ ． ０ ５ ） 。运用被动凝集法对肺炎支原体抗体进行检测 ， 对ｄ ， Ｊ Ｌ 肺炎支原体 感染具有重要的诊断意义。 ’
炎支原体引起呼吸道感染 的同时 ． 还易并发其他 的肺 外系统
被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值
应用研究被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值王居鹏1，2，朱黎娜2，马明坤2，陈慧3，郭素香3，任丽1△摘要：目的分析被动凝集法（PA）、间接免疫荧光法（IFA）和胶体金法（GICT）联合检测对儿童肺炎支原体（MP）感染的诊断价值。
方法选取进行MP抗体检测的患儿617例，以临床诊断为判断标准，分为MP感染组（345例）和非MP感染组（272例）。
所有患儿均经PA检测MP总抗体，经IFA和GICT检测MP-IgM抗体。
分析PA、IFA和GICT 这3种方法单独检测及两两联合检测与临床诊断的一致性，受试者工作特征（ROC）曲线评价其对MP感染的诊断价值，分析PA联合IFA检测2组患儿抗体情况。
结果MP感染组PA检测MP总抗体、IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性率较非MP感染组高（P＜0.01）。
PA检测MP总抗体的阳性检出率高于IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性检出率（P＜0.01）。
PA联合IFA与临床诊断为中度一致（Kappa值=0.41，P＜0.05）。
3种方法单独检测和两两组合检测中PA联合IFA的曲线下面积、敏感度、总符合率、阴性预测值最高，阴性似然比最低。
GICT单独检测特异度最高。
IFA单独检测阳性预测值和阳性似然比最高。
当MP-IgM抗体阳性时，MP感染组23.44%的患儿总抗体滴度＜1︰160，非MP感染组47.22%的患儿总抗体滴度≥1︰160。
当MP-IgM抗体阴性时，MP感染组91.91%的患儿MP总抗体滴度≥1︰160，非MP感染组有73.50%的患儿总抗体滴度＜1︰160。
结论PA和IFA联合检测可为临床诊断儿童MP 感染提供更客观、准确的检测结果。
关键词：肺炎支原体；儿童；胶体金；免疫球蛋白M；荧光抗体技术，间接；被动凝集法；间接免疫荧光法中图分类号：R446文献标志码：A DOI：10.11958/20212561Diagnostic value of particle agglutination,indirect immunofluorescence assay and immunecolloidal gold technique combined detection for Mycoplasma pneumoniae antibody inchildren with Mycoplasma pneumoniae infectionWANG Jupeng1,2,ZHU Lina2,MA Mingkun2,CHEN Hui3,GUO Suxiang3,REN Li1△1Department of Clinical Laboratory,Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital,National Clinical ResearchCenter for Cancer;Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy,Tianjin;Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin300060,China;2Department of Clinical Laboratory,3Department of Pediatrics,Second TeachingHospital of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine△Corresponding Author E-mail:*************.cnAbstract:Objective To analyze the diagnostic value of particle agglutination(PA),indirect immunofluorescence assay(IFA)and immune colloidal gold technique(GICT)combined detection for Mycoplasma pneumoniae(MP)infection in children.Methods A total of617children were selected for MP antibody detection,and children were divided into the MP infection group(345cases)and the non-MP infection group(272cases)based on clinical diagnosis.All the children were detected MP total antibody by PA,and MP-IgM antibody by IFA and GICT.The consistency of PA,IFA and GICT detection alone or in combination with clinical diagnosis was analyzed.The diagnostic value of receiver operating characteristic(ROC) curve in the diagnosis of MP infection was evaluated,and the antibody detection of PA combined with IFA was analyzed.Results The positive rate of total MP antibody detected by PA and MP-IgM antibody detected by IFA and GICT was higher in the MP infected group than those in the non-MP infected group(P＜0.01).The positive rate of total MP antibody detected by PA was significantly higher than MP-IgM antibody detected by IFA and GICT(P＜0.01).PA combined with IFA was moderately consistent with clinical diagnosis(Kappa=0.41,P＜0.05).The area under the curve of the diagnostic value,基金项目：国家自然科学基金资助项目（81904250）；天津市教委科研计划项目（2019KJ045）作者单位：1天津医科大学肿瘤医院检验科（邮编300060），国家肿瘤临床医学研究中心；天津市“肿瘤防治”重点实验室；天津市恶性肿瘤临床医学研究中心；2天津中医药大学第二附属医院检验科，3儿科作者简介：王居鹏（1990），男，主管技师，主要从事临床免疫学相关研究。
被动颗粒凝集法测定肺炎支原体抗体的临床应用
导 临 床 正 确 使 用 抗 生 素 ， 制 抗 菌 药 物 的 使 用 和 滥 用 ， 制 那 限 限
些 耐药 率 高 的 药 物 的 使用 ， 以减 少 医 院 内感 染 的 发 生 率 。
参考文献 ：
［］ 李 影 林 ． １ 中华 医学 检 验 全 ［ ． 民 卫 生 出 版 社 ， ９ ６ Ｍ］ 人 １９
收 稿 日期 ： ０ ９０ — ７ ２ ０ — ８２ ）
检 验 与 临 床
・
被 动 颗 粒 凝 集 法 测 定 肺 炎 支 原 体 抗 体 的 临 床 应 用
张 德 文 ， 兴 旺 罗
（ 川 省 自贡 市 第 三 人 民 医 院 ６ ３ ２ ） 四 ４ ０ ０
【 要 １ ｇ的 摘 ｌ 探讨 ２ ０ ０ ７年 本 地 区 儿 童 各 年 龄 组 呼 吸 道 肺 炎 支 原 体 （ ） 染 情 况 。 方 法 用 被 动 （ 胶 ） 粒 凝 集 法 ＭＰ 感 明 颗
金 吴 等 北京 地 区 医 院细 菌 对 常 见 抗 生 ［］ 张风凯 ， 少鸿 ， 铨 ， ． ５ 家 耐 药 性 现 状 及 变 迁 ［ ］ 中华 医 学 杂 志 ， ９ ７ ７ （ ０ ： Ｊ． １９ ，７ ２ ）
３ — ８ ２７ ３２ ．
（ 文 责 任 编 辑 陈开 红 本
●
素 ， 致 患 者 的感 染 灶 分 离 到 的致 病 菌常 对 目前 临床 上 使 用 的 导
多 种抗 菌 药 物 产 生 耐 受性 。 本 文 资 料 中 在重 症监 护 病 房 患 者 的 ｌ 分 离 株 ， 临床 主要 是 来 自血液 、 液 、 管 分 泌物 以及 创 伤 部 位 分 泌 物 ， 培 养 结 果 以 尿 气 其 呼 吸道 标 本 中 的 分 离 率 为 最 高 ， 次 是 创 伤 部 位 分 泌 物 ， 以 其 而 血 液 的 分离 率 为最 低 ， 映 出开 放 性 部 位 是 医 院 内感 染 的重 要 反
间接免疫荧光法被动凝集法检测肺炎支原体抗体结果的对比分析
间接免疫荧光法被动凝集法检测肺炎支原体抗体结果的对比分
析
张玮玮
【期刊名称】《山西医药杂志》
【年(卷),期】2014(000)014
【摘要】肺炎支原体（MP）是呼吸道感染的主要病原体之一。
研究发现人感染MP后，可刺激机体免疫系统，使体液中的可溶性白细胞介素-2受体水平上调，一方面抑制机体的细胞免疫，另一方面激发机体的体液免疫，使IgM 、IgG、IgA 等免疫球蛋白逐渐升高，并在一段时间内保持在较高水平。
因此，检测上述抗体对诊断是否感染 MP具有重要的临床意义［1，2］。
我院检验科免疫室用于检测M P抗体的方法有间接免疫荧光法和被动凝集法。
本研究选择本院自2013年6月3日至2014年1月23日用2种方法均检测过M P抗体的134例结果进行对比分析，更好地了解其不同的临床应用价值。
【总页数】2页(P1727-1728)
【作者】张玮玮
【作者单位】071000 保定，中国人民解放军第252医院检验科
【正文语种】中文
【相关文献】
1.被动凝集法和ELISA法检测肺炎支原体抗体及其IgM、IgG分型研究 [J], 欧阳芳;吴豫;龚跃云
2.被动凝集法检测肺炎支原体抗体在小儿肺炎支原体感染诊断中的应用 [J], 叶秀仪
3.被动凝集法检测儿童肺炎支原体抗体的临床分析 [J], 张玲;冯仕川;魏少军;高黝
4.免疫层析法和被动凝集法检测肺炎支原体抗体的临床应用比较 [J], 初云霞
5.胶体金法与被动凝集法检测肺炎支原体抗体结果比较 [J], 冯星星;鲁文志;陈丽萍;李小娟;周百灵
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被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法是一种用于检测抗体或抗原的间接凝集反应，此方法中，可溶性抗原（或抗体）被吸附在载体微粒的表面，然后与相应的抗体（或抗原）发生作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性的凝集现象。
以肺炎支原体MP的检测为例，被动凝集法主要用于检测肺炎支原体感染。
灵敏度很高，而且简便、快捷、价格便宜，它用于临床常规的检测和筛查。
目前的正常值是1:40，如果大于1:40就存在弱阳性，如果大于1:80，就是肺炎支原体抗体检测阳性。
但请注意，如果肺炎支原体检测是阳性的，并不能说明就是肺炎支原体的急性感染。
因为肺炎支原体抗体感染一般是7-10天就可以出现，20天左右就能出现长期的抗体，而7-10天出现的是短期的IgM 抗体。
这种IgM抗体最长可以持续一年，甚至有达到两年的记录。
因此，我们判断这个患者是不是有肺炎支原体急性的感染，要根据他的临床症状来加以分析和判断。
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
样本保存
将采集的样本放入无菌试 管中，加入适量的运输培 养基或生理盐水，密封后 冷藏保存。
样本处理
将采集的样本在实验室内 进行离心、分离、稀释等 处理，以备后续实验使用 。
实验操作步骤及判读结果
实验操作步骤 1. 将处理后的样本与特异性抗体致敏的载体颗粒混合。
2. 在适宜温度下孵育一定时间，使抗体与抗原充分反应。
05
被动凝集法检测肺炎支原 体的实验结果分析
实验结果的判读与分析方法
定量结果分析
根据被动凝集法测得的OD值进行定量结果分析，判断肺炎支原体 抗体滴度。
阳性判断标准
根据OD值和阳性判断标准，确定血清中是否含有肺炎支原体抗体 。
抗体滴度与感染程度关系
根据抗体滴度判断感染程度，并确定相应的治疗措施。
实验结果异常情况的处理与解释
被动凝集法是血清学检测中的一 种方法，具有快速、简便、灵敏
度高等优点。
02
被动凝集法检测肺炎支原 体原理
被动凝集法的定义和原理
被动凝集法是一种基于抗原抗体结合 的检测方法，通过将特异性抗体与可 溶性抗原结合，形成可见的凝集反应 ，从而实现对目标病原体的检测。
在被动凝集法中，使用已知的特异性 抗体与可溶性抗原进行反应，如果存 在目标病原体，抗体将与抗原结合并 形成可见的凝集反应。
根据凝集反应结果，可以判断是否存在肺炎支原体感染。
如果出现凝集反应阳性，提示可能存在肺炎支原体感染，需要进一步进行其他实验室检查以 确诊。
被动凝集法检测肺炎支原体具有快速、简便、灵敏度高等优点，是临床常用的诊断方法之一 。
03
被动凝集法检测肺炎支原 体的应用
在临床上的应一种快速、简便的 检测肺炎支原体的方法，常用于 临床诊断和疗效监测。
被动凝集法检测肺炎支原体
缺点：
一．检测总抗体。
二．该试验仅用于检测MP 抗体，而非直接检测MP， 因而阳性结果并不能确 诊是MP感染。
三．假阴性。
被动凝集法
被动凝集法
被动凝集法
判定：
1.颗粒呈纽扣状聚集，呈现出外周边缘均
匀且平滑的圆形。→（-）
2.粒子形成小环状，呈现出外周边缘均匀且平 滑的圆形。→（±）
单/击/此/处/添/加/副/标/题/内/容
被动凝集法检测肺炎支原体
汇报人姓名
汇报日期
肺炎支原 体抗体检 测
人体感染肺炎支原体后, 首先出现IgM 类 抗体，IgM 类抗体一般在感染后1 周出 现,2~4周达高峰, 后逐渐降低，可持续数 月。IgG类抗体于感染后20天左右出现， 感染一个月左右达高峰，在体内可维持 1.5~2年。
被 动 凝 集 法
被 动 凝 集 法
被动凝集 法
被动凝集 法
被动凝集法
阳性对照：MP抗体滴度为1:320
被动凝集法
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3.粒子环明显变大，其外周边缘不均匀且杂乱 地凝集在周围。→（+）
4.产生均一的凝集，凝集粒子在底部整体上呈 膜状延展。→（++）
1.
2.
3.
被动凝集法
一．判定标准： 二．阳性：样品与未致敏粒子（最终稀释倍数1:20）的反应图像判定为（-）；而与致敏粒子（最终稀释倍 数1:40）的反应图像判定为（+）或（++），则结果判定为阳性。将显示出反应图像为（+）时的最终稀 释倍数作为抗体滴度。 三．阴性：不论样品与未致敏粒子呈现何种反应图像，只要与致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像 显示为（-），则结果判定为阴性。 四．保留（-）；（±）
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
对实验数据进行统计和分析，以评估实验结 果的可靠性和准确性。
重复实验
对于关键实验结果，应进行重复实验以验证 结果的稳定性。
方法学评价
定期对实验方法进行评价，以发现潜在问题 并不断完善实验方法。
避免误差和干扰因素
减少操作误差
通过培训和实践提高实验人员的操作 技能，减少操作误差。
控制环境因素
该方法操作简便，结果易 于判断，适用于临床快速 检测。
灵敏度和特异性
被动凝集法具有较高的灵 敏度和特异性，能够准确 检测肺炎支原体感染。
02
实验准备
实验材料准备
血清样本
来自待检患者，需分离血清， 避免溶血、污染和脂血等干扰 因素。
阳性对照血清
来自已确诊肺炎支原体感染的 患者，用于验证实验的准确性 和可靠性。
被动凝集法检测肺炎支原体ppt课件
汇报人： 日期:
目 录
• 引言 • 实验准备 • 实验步骤与操作 • 结果判定与解读 • 临床意义与应用价值 • 注意事项与质量控制
01
引言
肺炎支原体概述
01
02
03
肺炎支原体
一种常见的呼吸道病原体 ，可引起肺炎等呼吸道感 染疾病。
传染途径
主要通过飞沫传播，也可 通过接触传播。
临床症状
包括咳嗽、发热、头痛、 乏力等。
检测方法及原理
检测方法
常用的检测方法包括培养法、 PCR法、血清学方法等。
原理
通过检测肺炎支原体的特异性抗 原或抗体，判断是否感染肺炎支 原体。
被动凝集法简介
被动凝集法
一种血清学检测方法，利 用特异性抗体与肺炎支原 体抗原结合形成凝集物的 原理进行检测。
被动颗粒凝集法检测1890例儿童肺炎支原体抗体分析
５ ３ ７ ０ ０ ０广西 壮族 自治 区 玉林市 妇 幼保健 院 ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ．１ ０ ０ ７ —６ １ ４ ｘ ． ２ ０ １ ３ ．
０ ７． ２ ２１
释液。用 微 量 移 液 管 向第 １孔 中 滴 加
２ ５ 样 品。用 加佯 器 或 微量 移 液 管 ， 从
】 ８ ９ ０例 儿 童 肺 炎 支 原 体 检 测 阳性
５ ４ ９例 ， 阳性率为 ２ ９ ． ０ ５ ％ 。其 中 ， 男童 检
测 １ １ ９ ５例 ， 阳性 ３ ０ １例 ， 阳性率 ２ ５ ． １ ９ ％； 女 童检 测 ６ ９ ５例 ， 阳性 ２ ４ ８例 ， 阳性 率 ３ ５ ．
末致敏粒子 （ 最终 稀 释倍 数 １ ：２ ０ ） 的反 应 图像判定 为（一） ， 而与致 敏粒子 （ 最终 稀 释倍数 １ ：４ ０ ） 的反应 图像 判定 为（＋） 或（＋ ＋） ， 则结 果判 定 为 阳性 。将 显 示 出反应 图像 为（＋） 时 的最终 稀释倍数 作
体 方 法 简便 ， 特 异性 强 ， 是 检 测 儿 童 肺 炎
年青霉素第一个应用 于在 临床 ， 在临 床取 得较好 或 显著 的 疗效 ， 随着 抗 菌 素 的 广泛使用 ， 耐药 性 口渐突 出 ， 引起 医学 界 的关 注， 支原 体 的治 疗 使用 抗 菌 药 物 治 疗， 治疗 前要 进行诊 断 ， 支原体 检 测有 多 种方 法 ， 各种 检测都 有其 局 限性 ， 从 选择 药物方 面来考虑 ， 有条件 的应做 支原 体培 养及药敏 ， 以便选择有效抗 生素以提高治 疗效果 ， 但 榆测 时 问 长 、 复杂 、 病情 不 等
６ ８ ％ 。 见表 １ 。
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）
肺炎⽀原体抗体检测（被动凝集法）肺炎⽀原体抗体检测（被动凝集法）1.⽬的：规范实验室肺炎⽀原体抗体检测操作。
2.范围： xxxx院xxxx科3.测定原理：将肺炎⽀原体（Mac株）的细胞膜成分致敏⼈⼯载体明胶粒⼦制造⽽成。
这种致敏粒⼦和样本中的肺炎⽀原体抗体进⾏反应发⽣凝集，由此可以检测出⾎清和⾎浆中的肺炎⽀原体抗体，并且⽤来测定抗体的效价。
4.标本：4.1采⽤正确医⽤技术收集⾎清/⾎浆样本，⾎浆样本推荐使⽤肝素钠抗凝⾎浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。
4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离⼼除去，并确定样本未变质⽅可使⽤。
4.3严重溶⾎或脂⾎的样本不能⽤于测定。
4.4样本收集后在室温放置不可超过8⼩时；如果不在8⼩时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48⼩时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。
使⽤前恢复到室温，轻轻摇动混匀。
5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。
5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防⽌冷冻，避免强光照射，有效期12个⽉。
5.2 试剂盒开启使⽤后，冷冻⼲燥品配好后，2℃—10℃保存可使⽤7⽇，使⽤前必须做对照试验。
5.3试剂组成5.3.1⾎清稀释液（液体）：⽤于稀释样品和复溶致敏粒⼦和未致敏粒⼦。
5.3.2致敏粒⼦（冷冻⼲燥）：肺炎⽀原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒⼦。
使⽤时加⼊规定量的⾎清稀释液。
复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒⼦。
5.3.3未致敏粒⼦（冷冻⼲燥）鞣化的明胶粒⼦冻⼲制品。
使⽤时加⼊规定量的⾎清稀释液。
5.3.4阳性对照⾎清（液体）肺炎⽀原体（Mac株）抗体阳性的兔⾎清⽤⾎清稀释液1:10稀释后的制品。
6.临床标本测定6.1试剂的准备6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使⽤。
6.1.2⾎清稀释液（液体）：按照测定操作规则使⽤。
6.1.3致敏粒⼦（冷冻⼲燥）：加⼊⼀定量的溶解液进⾏调制。
请在使⽤前30分钟于室温（15~30℃）下进⾏调制。
最新 肺炎支原体
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）1 目的熟悉肺炎支原体检测（被动凝集法）标准操作规程，以便于更加规范化的操作，提高免疫检验质量，保证结果的准确性。
2 适用范围适用于免疫室内肺炎支原体检测（被动凝集法）检测3 职责检验科主任负责组织人员制定肺炎支原体检测（被动凝集法）标准操作程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。
4 该SOP变动程序本标准程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，，并报经下述人员批准签字：专业组长、科主任。
5 测定原理：本试剂是一种检测肺炎支原体抗体的体外诊断试验，它用肺炎支原体（Mac 株）细胞膜成分致敏人工明胶粒子制造而成。
本试剂试验是基于以下原理：致敏粒子与人血清中存在的肺炎支原体抗体发生凝集反应。
2标本采集：随机静脉血2mL，分离血清备用。
也可使用血浆标本进行检测。
标本宜新鲜，无污染，避免无溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。
3标本存放：室温放置不超过8小时，2-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存(应伟血清或血浆)，应避免反复冻融。
4标本运输： 2-8℃密闭运输。
5标本拒收条件：蛋白变性标本，标本中含有颗粒物质，细菌污染、严重溶血或止血标本不能作测定。
6试剂6.1试剂名称：肺炎支原体抗体检测试剂盒（被动凝集法）6.2试剂生产厂家：FUJIREBIO INC(富士瑞必欧株式会社)6.3包装规格：5次定量测试×5（25人份）6.4试剂盒组成：完整的试剂盒提供下列试剂和附带器具血清稀释液（液体）致敏粒子（冻干）未致敏粒子（冻干）阳性对照（液体） 5次定量测试×530ml×１瓶 1.5ml×５瓶0.5ml×３瓶0.5ml×１瓶6.4.1血清稀释液（液体）用于稀释样品盒复溶致敏粒子及未致敏粒子6.4.2 致敏粒子（冻干）肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子冻干制品。
使用时加入规定量的血清稀释液。
复溶后的试剂含0.9%致敏粒子。
被动凝集法检测肺炎支原体
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判定标准与方法
采用间接血凝法（IHA）进行检测， 将肺炎支原体抗原致敏的红细胞与待 测血清混合，观察红细胞凝集情况。
根据红细胞凝集程度判断抗体滴度， 进而判定是否感染肺炎支原体。
结果记录与分析
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02
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记录每份血清的检测结果，包 括滴度值和凝集程度。
对阳性结果进行分析，结合临 床其他检查结果，判断是否确
被动凝集法检测原理
抗体与抗原的结合
01
02
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抗体
是免疫球蛋白，能够识别 并特可以是一种微生物、毒素 、蛋白质等
抗体与抗原的结合
是特异性的结合，只有当 抗体与抗原相对应时才会 发生结合
凝集反应的原理
凝集反应
是一种通过观察颗粒性抗原或抗 体凝集成肉眼可见的颗粒来判断 抗原-抗体结合的反应
被动凝集法检测肺炎 支原体
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目录
• 肺炎支原体简介 • 被动凝集法检测原理 • 实验操作流程 • 结果解读与判定 • 被动凝集法的优缺点 • 应用与展望
01
肺炎支原体简介
肺炎支原体的特性
一种常见的肺炎支原 体，属于细菌领域。
高度多态性，存在多 种血清型。
无细胞壁，革兰染色 阴性。
诊为肺炎支原体感染。
对阴性结果进行分析，排除肺 炎支原体感染的可能性。
对临界值结果进行分析，结合 临床其他检查结果，判断是否 存在肺炎支原体感染的可能性
。
05
被动凝集法的优缺点
优点：简便、快速、经济、有效
简便
快速
被动凝集法是一种简便快捷的检测方法， 操作相对简单，不需要复杂的仪器设备， 方便在基层医疗单位或实验室内进行。
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肺炎支原体抗体检测
（被动凝集法）
1.目的：规范实验室肺炎支原体抗体检测操作。
2.范围： xxxx院xxxx科
3.测定原理：
将肺炎支原体（Mac株）的细胞膜成分致敏人工载体明胶粒子制造而成。
这种致敏粒子和样本中的肺炎支原体抗体进行反应发生凝集，由此可以检测出血清和血浆中的肺炎支原体抗体，并且用来测定抗体的效价。
4.标本：
4.1采用正确医用技术收集血清/血浆样本，血浆样本推荐使用肝素钠抗凝血浆，枸橼酸钠和EDTA抗凝剂。
4.2样本中的沉淀物和悬浮物，红细胞等其它有形成分可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。
4.3严重溶血或脂血的样本不能用于测定。
4.4样本收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2~8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。
使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。
5.试剂：珠海丽珠试剂股份有限公司提供的试剂。
5.1试剂盒在2℃—10℃储存，防止冷冻，避免强光照射，有效期12个月。
5.2 试剂盒开启使用后，冷冻干燥品配好后，2℃—10℃保存可使用7日，使用前必须做对照试验。
5.3试剂组成
5.3.1血清稀释液（液体）：用于稀释样品和复溶致敏粒子和未致敏粒子。
5.3.2致敏粒子（冷冻干燥）：肺炎支原体（Mac株）抗原致敏的明胶粒子。
使用时加入规定量的血清稀释液。
复溶后的试剂含有0.9%的致敏粒子。
5.3.3未致敏粒子（冷冻干燥）鞣化的明胶粒子冻干制品。
使用时加入规定量的血清稀释液。
5.3.4阳性对照血清（液体）肺炎支原体（Mac株）抗体阳性的兔血清用血清稀释液1:10
稀释后的制品。
6.临床标本测定
6.1试剂的准备
6.1.1溶解液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.2血清稀释液（液体）：按照测定操作规则使用。
6.1.3致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
6.1.4未致敏粒子（冷冻干燥）：加入一定量的溶解液进行调制。
请在使用前30分钟于室温（15~30℃）下进行调制。
6.1.5阳性对照血清（液体）：按照操作规则使用。
6.2 手工操作步骤
6.2.1 用微量滴管将血清稀释液滴入微量反应板第1孔中，共计4滴（100ul），从第2孔至第8孔（或更多）各滴入1滴（25ul）血清稀释液。
6.2.2 用微量移液管取样品25ul至第1孔中，然后用微量加样器或微量移液管以倍比稀释的方式从第1孔稀释至第8孔中（或更多）。
6.2.3用试剂盒中提供的滴管在第2孔中加入1滴(25ul)未致敏粒子，用另一个滴管向第3
孔至第8孔（或更多）各加入1滴（25ul）致敏粒子。
6.2.4用平板混匀器以不会导致微量反应板中的检测物溅出的强度混合30秒钟，加盖后于室温（15~30℃）下水平静置。
3个小时后，在观察镜上记录并观察其反应图像，即使静置至次日也不影响结果的判定。
6.3对照试验
6.3.1 能够确认每例样品未致敏粒子的反应（最终稀释倍数1:20）均是（-）
6.3.2能够确认每次检查中血清稀释液和致敏粒子以及未致敏粒子的反应均是（-）（介质对照）。
6.3.3每个试剂盒中的阳性对照血清都要与样品用相同的测定方法进行试验，阳性对照血清调制成抗体效价为1：320（最终稀释倍数）。
6.4吸收操作
对于未致敏粒子和致敏粒子均显示（±）以上的凝集样品，要按照下列顺序在完成吸收操作的基础上进行再试验。
6.4.1取用450ul的血清稀释液调制好的未致敏粒子加入小试管中。
6.4.2加入样品50ul混合，于室温（15~30℃）下放置30分钟（孵育期间混合一或两次）。
6.4.3 离心分离（2000rpm，5分钟），然后分取上清液【吸收完毕的稀释样品（1:10）】50ul 至反应板第2孔中，特别注意不要混入粒子。
6.4.4从第3孔以后，要预先各滴入25ul血清稀释液，从第3孔至最后一孔用微量加样器倍比稀释。
以后就与检验方法中样品检测同样的操作后进行判定。
通常情况下可以用上述的吸收操作吸收完全，但如果吸收不干净时，请用其他的检测方法。
7.性能指标:
7.1特异性试验：将室内参考品按照规定程序进行试验时，阴性参考品显示阴性结果，阳性参考品显示阳性结果。
7.2灵敏度试验：试剂盒中带有的阳性对照血清按规定进行试验时，抗体的效价相对于标准值（最终稀释倍数1:320）在±1管内。
7.3重复性试验：将室内参考品重复进行5次测定，各抗体效价最大频数在±1管以内。
7.4相关性：取样品86例阳性样品，用本试剂和FUJIREBIO INC.的间接血凝试验（PHA）检测，一致率 96.5%（在一个对倍稀释度内）。
8.方法的局限性:
8.1 本试剂仅用于检测肺炎支原体抗体，不是直接检测肺炎支原体，因此阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。
要结合临床症状分析。
8.2 极低量的抗体不能被检测出来，可能会显示阴性结果。
当怀疑感染时，即使阴性结果也要一段时间后复查。
8.3注意前带现象。
9.检测结果的解释
9.1反应图像的判定
在判定用观测板上静置微量反应板，观察粒子的反应图像。
将反应图像与介质比照的图像进
阳性：未致敏粒子（最终稀释倍数1:20）的反应图像判定为（-）。
致敏粒子（最终稀释倍数1:40以上）的反应图像判定为（+）时，最终判定为阳性。
将显示出反应图像为（+）时的最终稀释倍数作为抗体滴度。
阴性：无论未致敏粒子呈现何种反应图像，只要致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像显示为（-）时，最终判定为阴性。
保留：未致敏粒子（最终稀释倍数1:20）的反应图像判定为（-），且致敏粒子（最终稀释倍数1:40）的反应图像判定为（±）时，最终判定为保留。
10.注意事项
10.1 操作前仔细阅读使用说明书，严格按照试剂盒说明书进行试验操作。
10.2 避免在恶劣的环境（如含有84消毒液、次氯酸钠、酸碱或乙醛等高浓度腐蚀性气体及
灰尘的环境）条件下进行试验。
10.3 用本试剂判定结果为保留时，请用其他的检测方法进行检测。
10.4 本试剂是用来测定样品中的肺炎支原体的抗体效价，不是用来测定肺炎支原体。
在判
定为抗体阳性的情况下，请结合其他的检查结果以及临床症状来进行综合判定。
10.5 样本中若存在沉淀物、悬浮物等可见杂质会影响试验结果。
此类样本不得使用。
10.6 肺炎支原体感染早期，有可能不产生抗体，或者产生很少量的抗体。
如果坏意感染，
即使本试剂的判定结果为阴性，也要经过一段时间再进行检查并且于其他检查的结果和临床症状结合起来综合判定。
10.7 试剂需在有效期内使用。
剩余试剂要及时密封，放置2~8℃条件下贮存，冻干试剂复
溶后，最多保存5天。
10.8 血清免疫反应要注意前区现象。
10.9 服用含有免疫球蛋白血液制品的患者样品中，由于可能因服用制剂所致的阳性反应。
要注意判定。
10.10本试剂的溶解液，血清稀释液和阳性对照血清中含有0.1%的叠氮钠防腐剂，在废弃时
要用大量的水冲洗，避免生成具有爆炸性的金属叠氮钠。
10.11不同批号的试剂绝对不能混用。
11.临床意义
肺炎支原体（M.Pneumonia）是人类支原体肺炎的病原体。
支原体肺炎的病理改变以间质性肺炎为主，有时并发支气管肺炎，称为原发性非典型性肺炎。
主要经飞沫传染，潜伏期2～3周，发病率以青少年最高。
临床症状较轻，甚至根本无症状，若有也只是头痛、咽痛、发热、咳嗽等一般的呼吸道症状。
支原体肺炎的临床表现和胸部X 线检查并不具特征性，单凭临床表现和胸部X线检查无法做出诊断。
若要明确诊断，需要进行病原体的检测。
目前，国内支原体肺炎的诊断主要依靠血清学检测。
12.安全防护措施及处理：
12.1 按要求穿白大褂，带一次性手套。
12.2处理试剂和样本时需戴一次性手套，操作后应彻底洗手。
所有样本及使用后的试剂盒
应视为潜在的传染性物质，废弃处理时，按照当地政府和有关国家规定进行。
12.3如果发生污染，视污染范围，部位选择合适的处理方法（以下浓度84消毒液均由原液
配置成）：
12.3.1 血液标本污染台面，用7000mg/L的84消毒液浸泡抹布，擦拭污染区域，小心处理
容器碎片，消毒后置于利器盒内
12.3.2 血液标本溅洒在白大褂上，应脱去衣物，并用300mg/L的84消毒液消毒。
12.3.3 血液标本溅洒在眼睛上，应立即用洗眼器冲洗眼部15min后，上报主任，并去眼科
就诊。
12.3.4 血液标本在离心机内破损，应在第一时间停止离心机运行，待其完全停止后，等
30min内部气溶胶散去，并带口罩后，用7000mg/L的84消毒液浸泡抹布，擦拭污染区域，小心处理容器碎片，消毒后置于利器盒内
13.相关记录文件
试剂出库记录
14.参考资料
肺炎支原体抗体检测（被动凝集法）使用说明书
编者：审核：批准：
批准时间：2020年07月01日。