肺炎支原体检测的SOP内容

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支原体培养基的灵敏度检测SOP

1. 目的建立支原体灵敏度检测操作规程，保证检测结果的真实可靠。

2. 范围用于自制支原体培养基和外购支原体培养基灵敏度的检测。

3. 职责3.1.质量管理部：负责本规程的起草。

3.2. 质量管理部检验人员：负责本规程的操作。

3.3. 总经理：负责本规程的审批。

4. 定义5. 引用标准无。

6. 材料6.1. 所需材料6.1.1. 菌种：肺炎支原体（ATCC 15531）、口腔支原体（ATCC 23714）购自北京中原公司。

6.1.2. 培养基:6.1.2.1 支原肉汤培养基猪胃消化液 500ml 氯化钠 2.5g牛肉浸出液（1：2） 500ml 葡萄糖 5.0g酵母浸粉 5.0g 酚红 0.02g6.1.2.2 支原体半流体培养基按6.1.2.1项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂2.5～3.0g。

6.1.2.3 支原体琼脂培养基按6.1.2.1项处方配制，培养基中不加酚红，加入琼脂13.0～15.0g。

6.2. 仪器设备无6.3. 器械、用具6.3.1 灭菌玻璃移液管7. 流程图无8. 内容8.1.变色单位试验法：将菌种接种于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传2代后。

将培养物接种到待检培养基中，做10倍系列稀释，肺炎支原体稀释至10-7～10-9，接种到支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10-3～10-5，接种在精氨酸支原体肉汤培养基内，每个稀释度接种3支试管，置36℃±1℃培养7～14天，观察培养基变色结果。

8.2. 结果判定以接种后培养基管数的2/3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。

8.3. 液体培养基的灵敏度肺炎支原体（ATCC 15531）应达到10-3，口腔支原体（ATCC 23714）应达到10-4。

9. 注意事项无10. 附录及派生记录无11. 相关文件无12. 修订记录。

支原体培养法检查SOP (1)

1.1规范支原体培养法检查的检验操作程序，确保检验结果的准确有效。

2. 适用范围：2.1本标准规定了本公司支原体培养法检查的SOP。

2.2本标准适用于本公司支原体培养法检验。

3. 职责：3.1 检验人员：严格按照本SOP进行检定，并完成与本SOP相关的记录。

3.2检定组长：按照本SOP组织相关人员进行培训，并监督实施。

3.3质量控制室主任：负责对本SOP的实施进行管理。

4. 材料：4.1供试品：主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞、病毒收获液、原液、牛血清。

4.2 器具：1ml、10ml刻度移液管，180℃干热灭菌2小时。

4.3 仪器：电炉，超净工作台/生物安全柜，37℃生化培养箱4.4 检定用培养基：支原体肉汤培养基（由培养基室提供），支原体半流体培养基（由培养基室提供），精氨酸支原体肉汤培养基（由培养基室提供），精氨酸支原体半流体培养基（由培养基室提供），上述培养基灵敏度应符合要求。

已检定合格血清。

5. 内容：5.1 操作步骤：5.1.1 先将半流体培养基煮沸10～15分钟，然后冷却至56℃左右，再加入新生牛血清（培养基∶血清为8∶2），充分摇匀。

肉汤培养基无需煮沸，但使用前需要按照上述方法添加新生牛血清。

5.1.2 取2种支原体液体培养基各4支、相应的支原体半流体培养基各2支（已冷却至36℃±1℃），每支培养基接种供试品0.5～1.0ml，置36℃±1℃培养21天。

5.1.3 于接种后的第7天从4支支原体液体培养基中各取2支进行次代培养，每一支培养基分别转种至相应的支原体半流体培养基及支原体液体培养基各2支，置36℃±1℃培养21天，每隔3天观察一次。

5.2 结果判定：培养结束时，接种供试品的培养基均无支原体生长，则判供试品合格；如疑有支原体生长，取加倍量供试品复试，如无支原体生长，判供试品合格，如有支原体生长（液体培养基中呈极浅淡均匀浑浊，半流体培养基中呈小彗星状或沙粒状），则判供试品6.健康、安全与环境：6.1所有用过的培养基应灭菌后再废弃。

支原体检验标准操作规程记录

支原体检验标准操作规程记录
支原体是一种细菌，可以引起一些疾病，例如支原体肺炎。

支原体检验通常是通过采集患者的呼吸道分泌物样本进行检测。

下面是支原体检验的标准操作规程记录：
1. 样本采集，首先，医务人员需向患者解释采集支原体样本的过程，并确保患者理解并同意。

然后，使用标本采集棒从患者的咽部或鼻腔采集分泌物样本。

确保采集的样本足够用于后续的检测。

2. 样本保存和运输，采集完样本后，将其置于适当的容器中，并尽快送往实验室进行检测。

在运输过程中，需要确保样本的稳定性和完整性，避免样本污染或损坏。

3. 样本检测，实验室技术人员根据标准操作规程，使用适当的检测方法对支原体样本进行检测。

常见的检测方法包括PCR（聚合酶链反应）和培养法。

在检测过程中，需要严格遵守操作规程，确保结果的准确性和可靠性。

4. 结果记录和报告，一旦检测完成，实验室应当及时记录检测结果，并按照相关规定向医务人员报告。

检测结果应当包括阳性或
阴性的判定，以及可能的数量或浓度信息。

5. 结果解读和处理，医务人员在收到检测结果后，应当结合患
者的临床症状和其他检查结果进行综合分析和判断。

根据检测结果，及时采取相应的治疗措施，并告知患者相关信息。

以上是支原体检验的标准操作规程记录，这些步骤和规程的严
格执行对于确保支原体检验的准确性和可靠性非常重要。

希望这些
信息能够对你有所帮助。

资料：MycoAlert试剂盒检测支原体污染 SOP,2012

中美冠科生物技术有限公司1目的规范MycoAlert试剂盒检测支原体污染实验操作。

2职责采用MycoAlert试剂盒检测支原体污染的实验人员需执行此SOP。

3适用范围3.1 Cell bank建库细胞每批冻存前都需取样进行支原体检测。

（不要复苏检查冻存质量时再送样，避免传代麻烦。

）3.2 Cell support每次供给细胞前取样检测。

冻存任何一批细胞前都必须取样检测。

平时有时间追踪已检测阳性的细胞，若阴性，则及时扩大冻存。

3.3Cell-based assay已知支原体情况、培养时间短（3周内）、又不需回冻的细胞，可以不检测。

未知支原体污染情况的，需取样检测。

3.4 Primary cell culture符合取样条件的，立即取样送检。

不要等冻存时再取样。

因为早发现，早隔离，尽量避免交叉污染。

3.5Cell selling复苏的细胞为支原体阴性的批次，因几天后就售出。

就视为阴性，不检测。

若复苏的细胞，不知道支原体污染情况，则售出前取样检测。

（无论客户要求检测支原体）4内容/流程4.1 主要材料MycoAlert Mycoplasma Detection Kit, LT07, Lonza.微孔板分光光度计4.2 步骤4.2.1样品准备待测样品的准备：将细胞在无抗生素的培养液中传代两次，使其汇合率达到90-100%，并且三天之内（如11月4日换液，11月7日可以取样）不更换培养液。

这样的细胞培养液在无菌条件下用无菌离心管收集上清液。

阳性对照样品的准备：将已知支原体阳性的细胞，在无抗生素的培养液中传代两次，使其汇合率达到90-100%，且三天之内不更换培养液。

取培养物上清，离心，分装，-20℃保存。

4.2.2 试剂准备准备MycoAlert试剂（LT07-318）a. 向标有LT27-216的试剂瓶加入10ml McoAlert缓冲液b. 盖上白色的盖子，轻柔的混匀，c. 室温静置15分钟配制MycoAlert底物a. 向标有LT27-224的试剂瓶加入10ml McoAlert缓冲液b. 盖上绿色的盖子，轻柔的混匀，c. 室温静置15分钟d. MycoAlert试剂和MycoAlert底物分装冻存于-20度，6个月内使用。

支原体检测操作规程

支原体检测操作规程
首先，支原体检测操作规程通常包括以下内容：
1. 样本采集，根据不同的病情和病人的具体情况，支原体检测通常需要采集相应的生物样本，比如咽拭子、尿液或生殖道分泌物等。

操作规程会详细说明如何正确采集样本，以确保样本的准确性和完整性。

2. 样本保存和运输，操作规程会规定样本的保存方法和运输要求，包括保存温度、保存时间和运输条件等，以确保样本在检测前的质量和完整性。

3. 实验室操作，操作规程会详细说明实验室人员在进行支原体检测时应该遵循的操作步骤，包括样本处理、试剂使用和设备操作等，以确保检测结果的准确性和可靠性。

4. 质控要求，操作规程通常还会包括质控要求，包括内部质控和外部质控的要求，以确保实验室的检测结果符合质量标准。

其次，支原体检测操作规程的制定和执行对于医疗机构和实验
室来说非常重要。

遵循规程可以保证检测结果的准确性和可靠性，
有助于医务人员正确判断病情并采取相应的治疗措施，从而保障患
者的健康和安全。

此外，支原体检测操作规程的执行也需要严格遵守相关的法律
法规和标准，比如医疗器械管理条例和实验室质量管理规范等。

医
务人员在执行操作规程时需要严格按照规定的步骤和要求进行操作，确保检测过程的合法性和规范性。

总的来说，支原体检测操作规程是保障支原体检测质量和结果
准确性的重要保障措施。

医务人员应该严格遵守规程，确保检测过
程的科学性和规范性，从而为患者的诊断和治疗提供可靠的实验室
支持。

传染病实验资料--肺炎支原体说明书

赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA目录1.用途2.诊断意义3.赛润ELISA classic-检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质，试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1注意事项7.2样品准备和储存7.3试剂盒反应试剂的准备7.4检测程序概要7.5检测过程8.检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2检验有效性标准8.3计算赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA（定量）8.4检测结果分析9. 性能特性9.1重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理11.参考文献赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA酶联免疫法测定人体抗体（IgG/IgM/IgA）- 只限用于体外诊断-IgG试剂盒（定量）编号ESR127GIgM试剂盒（定量）编号ESR127MIgA试剂盒（定量）编号ESR127A检测评估标准: BEP 2000, BEP III, DSX, 手动操作1.用途赛润ELISA classic肺炎支原体IgG/IgM/IgA用于定性和/或定量检测人血清或血浆内肺炎支原体。

抗肺炎支原体病毒IgG，IgM和IgA联合使用会有助于对肺炎支原体感染做出确切的诊断。

IgA-Elisa的使用特别在诊断再感染时，对于IgG 和IgM诊断是一个重要的补充。

2.诊断意义支原体肺炎病毒的感染会导致许多有可能引起严重并发症的呼吸系统疾病。

在这些疾病中首先值得一提的是初级非典型肺炎，咽炎以及呼吸道支气管炎。

在美国支原体肺炎病毒的感染要占每年门诊肺炎的20%。

肺炎支原体感染的临床症状具备多样性并且与其它原因引起的呼吸道感染（如呼吸道合孢病毒，流感-感染等）很难区别。

肺炎支原体可使气管、支气管以及细支气管上皮细胞增生。

感染后10-20天之后才出现一些非特异症状，如头疼、发烧、无痰干咳等。

支原体肺炎血清学试验(测抗体)作业指导书

支原体肺炎血清学试验（测抗体）作业指导书1. 原理斑点反应板是固相MP抗原特异地与血清中抗MP抗体结合形成复合物，胶体金标记的抗人IgG或M、A抗体（试剂B）再与复合物结合，形成肉眼可见的红色圆斑。

2.标本采集2.1标本种类：血清2.2标本要求：新鲜，无溶血，无脂血。

2.3标本存放：室温﹤8小时，4℃—8℃存﹤48小时。

3.试剂组合3.1斑点反应板：40板，含固相MP抗原。

3.2试剂A：1瓶（～10ml）含TBJ缓冲液等。

3.3试剂B：1瓶（～6ml）含胶体金标记抗（IgG或IgM、A）。

3.4标本吸管：40支，每滴约50ml。

3.5阴阳性对照卡，一张。

4.操作方法4.1取出斑点反应板，室温10分钟。

4.2加试剂A（2滴）于反应板孔中，待充分吸入。

4.3用样品吸管加样品0.5ml（4滴）于反应板孔中，待体液充分吸入。

4.4去除蓝色过滤盖。

4.5加试剂B（3滴）于反应板孔中，待液体充分吸入。

4.6加试剂A（1～2滴）于反应板孔中，待液体吸入后观察结果。

5.结果判断：3分钟内与对照卡阴性阳性对照，读取结果。

6.操作性能：快速简便，特异性好，灵敏度高，重复性好。

7.结果处理7.1若结果失败，则重复测试，并作质控校正。

7.2若失控，则重检试剂盒。

8.方法局限性8.1溶血、脂血结果有影响。

8.2观察结果对弱阳性存在差异。

9.临床意义：肺炎支原体（MP）是引起呼吸道感染的常见病原微生物，它除可引起非典型肺炎外，常可引起呼吸道感染、气管炎、支气管炎、淋巴结炎，也可引起肺大泡、肺脓肿，另外，它还可引起其他系统并发症，如心肌炎、心包炎、脑膜炎、关节炎、胃炎、溶血性贫血等，由于MP对一般治疗肺炎的药物有耐药性，因此，及时进行检查有助于诊断及治疗。

本试剂可方便快速地检测血清中抗MP抗体（MP-A6），在临床上可作为支原体感染的辅助诊断，并可作为MP感染的流行病学研究的有效方法。

肺炎支原体操作规程

肺炎支原体操作规程
贮存条件：试剂应置0℃以下冷冻保存。

（-14℃冰箱）
标本要求：标本为患者咽拭子或痰液，采集标本前，用生理盐水漱口，在所采集标本为痰时，当痰标本粘度比较大需要用无菌拭子蘸取进行接种培养，当痰标本比较稀时可以用无菌拭子蘸取或用移液器量取100μl进行培养，所采集的标本应尽快接种，室内放置不得超过四小时。

检验方法：
1、取出培养液及药敏试验板，使其在接种样本前接近室温，旋开培养液瓶
盖，用吸嘴吸取100μl培养液加入C-对照孔；
2、接种咽拭子（痰拭子或痰液100μl）于剩余的培养液中，加盖摇匀使之
混匀；
3、将含样本的培养液加入其余微孔中，每孔100μl，轻轻震荡药敏试验板；
4、所有微孔滴加1滴试剂盒所附矿物油（使矿物油覆盖液面，否则培养液
蒸发，结果不准）；
5、将药敏试验板加盖后，置培养箱中，35-37℃培养24-48小时观察结果。

检验结果的解释：
1、培养24-48小时培养液由桔红色变成黄色且澄清，表示有肺炎支原体生
长，用（+）表示；培养液保持红色不变，表示没有肺炎支原体生长，用（-）表示；培养液由桔红色变成黄色但浑浊，不能作为阳性结果。

2、药敏试验板抗生素结果判定：依托红霉素（EST）孔培养液桔红色为敏感
（S），黄色为耐药（R）;其他13种抗生素如药敏试验板上孔培养液变黄而下孔桔红色判为中介（I）,如上下两孔均为桔红色判为敏感（S）,如上下两孔均为黄读为耐药（R）。

检验科
2011-9-5。

支原体与支原体药敏培养鉴定标准操作程序

SOP_15-13 支原体与支原体药敏培养鉴定标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。

二、适用范围：支原体与支原体药敏培养鉴定操作三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：1 支原体分离鉴别培养1.1标本采集男性：可取尿道分泌物、前列腺液、精液或中段尿培养（中段尿需取尿10ml，经2000r/min 离心10分钟，取沉渣接种）；女性：用扩阴器扩阴后，取宫颈口分泌物培养，也可用羊水培养。

不推荐用尿液。

1.2操作步骤1、从冰柜中取出液体培养基小瓶，复温，登记标本号。

2、打开瓶盖，揭开胶塞，将标本棉签伸入，紧靠培养液上方瓶壁挤压棉签，使标本渗入，丢弃棉签，盖上胶盖，摇匀小瓶；3、将小瓶置35-37℃培养24-48小时，观察结果。

1.3结果判定培养基澄清透明并呈明显得玫瑰红色者为有支原体生长；解脲支原体24小时，人型支原体、混合支原体48小时后培养基无任何变化，可报阴性结果。

培养明显浑浊变红者应判断无支原体生长。

必要时可做支原体固体培养，低倍镜下观察，有油煎蛋样菌落者为支原体阳性。

1.4注意事项1、用后得培养物用高压锅消毒后丢弃；2、本品仅供体外诊断用；3、本品仅供一次性使用。

4、先兆流产、月经期妇女禁用；阴道用药或灌洗后禁用。

2 支原体药敏2.1试剂盒说明本试剂盒集泌尿生殖道支原体UU、MH分离培养，鉴定计数以及10种抗生素的药敏试验于一体。

药敏抗生素：强力霉素（DOX）、美满霉素（MIN）、环丙沙星（CPE）、氧氟沙星（OFL）、司帕沙星（SPA）、罗红霉素（ROX）、阿齐霉素（AZI）、克拉霉素（CLA）、交沙霉素（JOS）、壮观霉素（SPE）、螺旋霉素（AXP）、左旋氧氟（LEV）。

2.2试剂盒组成3.5mlUU-MH 培养液20支，药敏试验板20只，无菌吸咀40个（嵌在试验板底座后面），无菌矿物油2瓶，药敏试验报告签20张，说明书1份。

2.3标本采集男性：可取尿道分泌物、前列腺液、精液或中段尿培养（中段尿需取尿10ml ，经2000r/min离心10分钟，取沉渣接种）；女性：用扩阴器扩阴后，取宫颈口分泌物培养，也可用羊水培养；阳性培养液（普通支原体培养基获得）：用无菌吸咀吸取30ul 。

肺炎支原体标准操作程序SOP文件

[临床意义]
该试验用于检测人血清或血浆中的肺炎支原体抗体的存在与否。
血清最终滴度1：40 1：80
置微型振荡器振荡30秒，放在湿盒里，室温2小时后观察结果。
[结果判断]
颗粒凝集覆盖于整个孔底，可呈多边形膜状，边缘粗糙......阳性2+--4+
颗粒凝集呈多边形粗糙大环状......阳性1+
颗粒浓集呈边缘光滑的小环状......可疑+-
颗粒聚集在孔中央,光亮,边缘光滑......阴性-
（3）“C”致敏颗粒（冻干）：用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀
（4）“D”非致敏颗粒（冻干）：用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀
（5）“E”阳性质控血清
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
[标本的收集与处理]
标本为无溶血血清。
[操作步骤]
孔号 2 3 4
血清稀释液“B”（ul）100 25 25 25
------》------》------》-----》弃去25ul
血清标本（ul）25 25 25 25
标本稀释度1：5 1：10 1：20 1：40
加非致敏颗粒“D”（ul）--- --- 25 ----
加致敏颗粒“C”(ul) ----- ----- ----- 25
ABCD医院
免疫实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-30
肺炎支原体明胶法
版序：2003-1
页码：第2页，共2页
[吸收试验]
孔内标本与非致敏和致敏颗粒均产生凝集者,标本需作下列重吸收试验
（1）加0.95ml非致敏颗粒溶液于小试管内.
（2）加入50ul血清,充分混匀,置室温吸收30分钟以上.

肺炎支原体培养试剂操作规程-SOP

陕西省人民医院检验科微生物室（SOP）文件撰写人：审核人：批准人：批准日期：2015年7月31日启用日期：2007年8月 1 日二零一五年七月一日制批准页根据《临床检验操作规程》(2006年,第三版)，肺炎支原体6小时快速培养及药敏试剂盒使用说明书；微生物检验有关试剂盒使用操作说明书；《消毒技术规范》以及医院内部有关管理制度、生物安全制度的规定和要求，临床微生物检验操作规程文件NO.1版经实际运行，现予以批准通过，于 2015年 8月 1日起生效并开始实施。

微生物室和检验科有关工作人员必须认真学习，严格遵照执行。

（NO.1版依据检验技术和我科工作发展及管理工作的需求进行的补充完善和改进另行通知）。

任何个人不得更改，实际工作中如发现不妥之处，请按程序以文字形式向审核人汇报；在未经批准人同意/批准新文件之前，仍执行此文。

陕西省人民医院检验科2015年7月31日肺炎支原体6小时快速培养及药敏试剂操作规程1.项目中文名称：肺炎支原体6小时快速培养及药敏试剂盒项目英文名称：Mp 6h Rapid Cultivation and Drug Sensitivity Kit2.实验原理与方法：把培养与生化反应相结合，利用肺炎支原体具有分解葡萄糖产酸的能力，使培养液的pH降低的原理，根据指示剂指示的颜色变化判断结果。

3.标本的要求：严格按照全国临床检验操作规程进行标本采集。

标本为患者咽拭子或痰液标本，采集标本前，用生理盐水漱口，所采集的标本应迅速接种，如不能及时接种，则室温放置不得超过四个小时。

4试剂厂家及名称：郑州安图生物工程股份有限公司5.操作步骤：1.取出培养液，使其在接种标本前接近室温；2.接种咽拭子（或痰）样本于已恢复室温的培养液中，搅拌后弃去拭子（痰样本若粘度比较大需要用无菌拭子蘸取后接种于培养液，若痰样本比较稀可以用无菌拭子蘸取或者用移液器量取50µl加入培养液中进行培养）；3.把培养液加盖后置培养箱中，35～37℃培养24～48小时观察结果；6.样本结果判断培养24～48小时培养液由桔红色（或蓝色）变成黄色（或绿色）,表示有肺炎支原体生长；培养液保持桔红色（或蓝色）不变，表示没有肺炎支原体生长。

支原体肺炎的实验室检查方法和结果解读

支原体肺炎的实验室检查方法和结果解读支原体肺炎是由支原体引起的一种呼吸道感染，它通常引起咳嗽、喉咙痛、气喘等症状。

为了确诊和治疗支原体肺炎，医生通常会进行实验室检查。

本文将介绍支原体肺炎的实验室检查方法以及结果的解读。

一、支原体肺炎的实验室检查方法1. 咽拭子检查：医生会使用棉签取样板，从患者的咽拭子（喉咙后壁）内取样。

这个过程通常不会导致不适或疼痛。

2. 咳嗽诱导试验：这种检查方法通常用于那些无法自行咳嗽的患者。

医生会使用一种特殊仪器，对患者进行刺激，引起他们咳嗽，然后收集样本。

3. 咳嗽样本收集：医生会要求患者主动咳嗽，将咳出的痰液采集到特殊容器中进行分析。

二、支原体肺炎的实验室检查结果解读1. Polymerase Chain Reaction (PCR)检测：PCR检测是最常用的支原体检查方法之一。

它通过扩增支原体DNA片段，从而检测是否存在支原体感染。

结果通常为阳性或阴性，阳性表示存在支原体感染。

2. 酸性染色检查：酸性染色方法可以染色识别支原体的存在。

阴性结果可能需要进一步的检查确认，因为酸性染色方法可能会出现假阴性的情况。

3. 免疫荧光染色法：这种方法通过使用荧光标记的抗体来检测支原体感染。

阳性结果显示出荧光染色的细菌形态，可用于确认支原体感染。

4. 细菌培养：支原体培养是一种以时间为基础的检测方法，它需要较长时间才能得到结果（通常需要1-2周）。

这种方法适用于病情严重或治疗无效的患者，以便确定感染菌株的敏感性。

三、实验室检查的局限性1. 结果的准确性：尽管实验室检查对支原体肺炎的诊断起着至关重要的作用，但结果并非始终准确。

特别是在患者开始接受抗生素治疗之前，支原体可能会被有效控制，导致检测结果为阴性。

2. 假阳性：实验室检查结果中也可能出现假阳性的情况。

这可能是由于实验操作错误、交叉反应或其他干扰因素导致的。

3. 检测方法选择：不同的实验室可能使用不同的检测方法，导致结果存在差异。

09-SOP-026-01 支原体检验操作规程

1.目的制定支原体检验操作规程，确保支原体检验正常进行。

2.适用范围适用于成品、半成品及种毒的支原体检验。

3.定义和缩略词无。

4.角色与职责经理和主检人负责相关操作人员培训，确保操作按照规程进行。

5.健康与安全由于支原体具有危害性，检验结束后要及时高压，高压时应戴耐热手套。

6.材料电热恒温水浴锅（设定温度37.5±0.5℃）电热恒温培养箱生化培养箱（设定温度37.5±0.5℃）生物安全柜立式高压灭菌器电磁炉二氧化碳培养箱正置显微镜冷冻箱冷藏柜电动移液器不锈钢锅Frey液体培养基Frey固体培养基Frey培养基辅助液试管架75%酒精塑料废液缸无菌PBS一次性注射器(5 mL 、10mL)一次性吸管（1mL、10mL）一次性平皿60*15mm禽滑液支原体阳性菌株待检样品7.程序7.1.准备工作以下操作在负压生物安全柜中进行。

提前一天码好培养基，放入生化培养箱（37±1℃），发现浑浊的培养基弃去不用。

将准备的物品按照《生物安全柜操作规程》放入生物安全柜。

将固体培养基放入不锈钢锅中100℃水浴至完全融化。

分装固体培养基5 mL/皿。

分装液体培养基1.8mL/管。

7.2.样品处理以下操作在无菌室进行。

接种前，操作者应：将带有铝塑盖样品的塑料盖取下，露出胶塞；用75%酒精擦拭消毒胶塞注射部位或安瓿瓶瓶颈；冻干样品需用2mLTG培养基复原。

7.3.接种用5mL注射器分别吸取5瓶待检样品各1mL接种于20mL液体培养基中，并混匀。

取一瓶20mL液体培养基不接种作为阴性对照。

取一瓶20mL液体培养基接种禽滑液支原体阳性菌株0.1mL作为阳性对照。

在瓶身写上名称、批号、检验日期等信息。

7.4.移植样品接种后第0、3、7、10、14天时，用1mL一次性吸管从小瓶培养物中取0.6mL分别移植于到2支液体培养基及1个固体培养基，各接种0.2mL。

阴性对照在接种后第0、3、7、10、14天时，用1mL一次性吸管从小瓶培养物中取0.4mL 分别移植于到1支液体培养基及1个固体培养基，各接种0.2mL。

肺炎支原体IgM抗体检测SOP

肺炎支原体IgM抗体检测SOP一、检验目的规范实验室人员操作，以保证实验结果的准确性。

二、预期用途该产品用于定性检测血清、血浆或全血中的肺炎支原体IgM抗体。

是引起社区获得性呼吸道感染的主要病原体之一，可以导致支气管炎和非典型性肺炎。

主要引起人非典型肺炎、气管炎及支气管炎，多经口和呼吸道等途径传播，多发于儿童和青年人。

MP感染已占小儿呼吸道疾病30%以上，且有增加趋势。

人体感染肺炎支原体后，能产生特异性IgM和IgG抗体。

IgM 抗体出现早，一般在感染后1周出现，3~4周达高峰，以后逐渐降低。

再次感染或重复感染后，常在1-2周内出现较高水平的IgG抗体。

MP肺炎与一般呼吸道感染和肺炎的临床症状没有明显区别，MP感染早期诊断有利于MP肺炎的治疗。

血青学诊断法是临床常用的主要诊断方法之一，灵敏度和特异性适中，常用的主要有酶联免疫吸附试验和凝集试验。

三、检验原理本产品以胶体金作为指示标记，用胶体金标记抗人IgM单抗，以基因工程技术表达肺炎支原体P1蛋白抗原标被硝酸纤维素膜，应用“间接法”免疫层析技术原理，检测的肺炎支原体感染病人血清、血浆或全血中的肺炎支原体抗体IgM,在检测过程中，若样本中存在肺炎支原体抗体gM, 则肺炎支原体抗体1gM与样本吸附垫中的胶体金一抗人IgM单抗结合物形成复合物，复合物沿硝酸纤维素膜移动到检测区，与检测线上包被的肺炎支原体P1蛋白抗原结合，多余的未被结合的结合物继续移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG 抗体结合，反应膜上出现1条红色的检测线和1条红色的质控线；若样本中不存在肺炎支原体抗体IgM,则胶体金一抗人IgM单抗结合物直接沿硝酸纤维素膜移动到质控区，与质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体结合，仅形成一条红色的质控线。

四、主要组成成份1、试剂盒组分包括肺炎支原体1gM抗体检测卡，样品稀释液。

1.1、检测卡主要组分：包括金标垫和硝酸纤维素检测膜，金标垫内包被有胶体金标记的抗人IgM单克隆抗体；硝酸纤维素检测膜的检测线上包被有基因工程技术表达的肺炎支原体P1蛋白抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG抗体。

支原体药敏SOP手册

支康体药物救感性分析一、测定原理：为了定量测定抗菌药物的活性，抗菌药物与肉汤或琼脂培养基混合进行稀释，然后种入试验细菌，孵育过夜，能抑制细菌生长的最低浓度称为该抑制剂的最低抑俊浓度（MIC）,然后将MIC与机体血清或体液中可获得药物浓度相比较，来确定恰当的临床疗效。

二、所用仪器：35-37°C孵育器，冰箱，HX-21细菌鉴定药敏分析仪（合肥恒星科技发展有限公司）三、试剂来源：带有8种抗生素的药敏分析试剂板（合肥恒星科技发展有限公司）。

四、试剂板和培养基的贮存：试剂板包装标示的保质期内应避光贮存在4℃以下。

五、操作程序：5.1试剂板的准备：5.1.1将试剂板从包装中取出。

5.1.2弃去干燥剂和固定干燥剂的纸片。

5.2菌悬液的制备：5.2.1挑取单菌落于5m1无菌生理盐水中制成0.5麦氏单位的混悬液（A管），从中吸取OjmI,加入IOm1无菌盐水中混匀（B管）。

B管倒入经灭菌后的菌液槽里制成B液。

5.2.2利用12道微量加样器吸取B液，加入试剂板C、D、E等3排孔中，每孔0.1m1。

5. 2.3盖好试剂板,置于35°C培养箱培养24-48小时。

六、判读试剂板：6.1连接仪器：7.1.1将电脑，微生物细菌鉴定药敏分析仪和打印机连接。

6.1.2打开电脑，再开启微生物鉴定药敏分析仪，并在需要打印时开启打印机。

6.2打开软件：6.2.1点击“细菌分析”程序，单击主菜单“鉴定分析”，从中选择下拉框“细菌分析:6.2.2将基本信息填写完整，在“菌属”里选择“支原体”，点击下一步，进入“生化鉴定”菜单。

6.2.3输入生化鉴定出的结果，再点击下一步，进入“药敏分析”菜单。

6.3判读结果：6.3.1点击“分析”菜单，仪器自动读出结果，也可人工勾选。

6.3.2对应右边界面的抗生素名称，左边会有反映MIC值高中低的三个不同梯度，仪器读取后会根据试剂板相应结果在各个梯度选项前打“√z,o6.3.3仪器会根据每个抗生素在试剂板最终反映出的现象判读药敏结果。

肺炎支原体抗体检操作流程

肺炎支原体抗体检操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!肺炎支原体抗体检操作流程一、准备工作阶段。

在进行肺炎支原体抗体检测之前，需要做好充分的准备。

支原体检测SOP

支原体检测ＳOP目的：制定支原体检验标准操作规程，确保检验操作正确。

范围：本标准适用于本公司主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞、病毒收获液、原液的支原体检验操作。

依据:《中国药典》201０年版三部通则330１支原体检测法。

一、培养法１、检测原理：直接培养支原体于培养基中，观察其生长及菌落生成。

2、适用器材：灭菌锅、试管（带盖)、10ｍｌ移液管、１ml移液管、37℃培养箱、3、检测步骤:（1）培养基的制备：【外购培养基】(2)检测培养基的灵敏度:将菌种接于适宜的支原体培养基中，经36℃±1℃培养至培养基变色，盲传两代后,将培养物接种至待检培养基中，做1０倍系列稀释,肺炎支原体稀释至10-7～10-９,接种在支原体肉汤培养基内；口腔支原体稀释至10－3～1０-５，接种在精氨酸支原体肉汤培养基内。

每个稀释度接种3支试管,置３６℃±1℃培养７～1４天,观察培养基变色结果。

结果判定以接种后培养基管数的２/3以上呈现变色的最高稀释度为该培养基的灵敏度。

液体培养基的灵敏度：肺炎支原体(AＴCC 1５531株)应达到１0－8,口腔支原体（ＡTCC 2371４株)应达到10-4。

（3）培养基前处理:检查支原体采用支原体液体培养基和支原体半流体培养基(或支原体琼脂培养基）。

半流体培养基(或琼脂培养基)在使用前应煮沸1０～１5分钟,冷却至56℃左右,然后加入灭能小牛血清(培养基︰血清为8︰2），并可酌情加入适量青霉素,充分摇匀。

液体培养基除无需煮沸外,使用前亦应同样补加上述成分。

(４)接种培养:取每支装量为１０ml的支原体液体培养基各4支、相应的支原体半流体培养基各2支（已冷却至36℃±1℃）,每支培养基接种供试品0.5~1.0ml，置３6℃±1℃培养21天。

于接种后的第7天从4支支原体液体培养基中各取2支进行代次培养，每支培养基分别转种至相应的支原体半流体培养基及支原体液体培养基各2支，置36℃±1℃培养21天,每隔3天观察1次。