13859-生物-植物-染色-植物气孔保卫细胞GUS染色法

植物气孔保卫细胞GUS染色法

（1）选取2-3周大小的拟南芥莲座叶。

（2）将叶片擦干，反面粘在涂有胶水的盖玻片上，并用刀片刮掉叶肉，只留下透明的表皮条，将盖玻片粘有表皮条的一面向上置于GUS染液中。37 o C 避光孵育2-3天。GUS染液配方如下：

表 2.3 GUS染液配方

Table 2.3 Recipe for GUS Staining Solution

试剂浓度单位母液（M）

Na2HPO4100 mM 1

NaH2PO4100 mM 1

EDTA-Na2，pH8.0 5 mM 0.5

Triton X-100 20 g/l —

K3Fe(CN)6 2.5 mM 0.5

K4Fe(CN)6·3H2O 2.5 mM 0.5

X-Gluc母液为DMF配制的0.05 g/ml母液存于-80 o C冰箱，

用时用GUS染液稀释100倍为0.5 mg/ml终浓度溶液。

（3）将带有表皮条的盖玻片贴在载玻片上，置于带有彩色CCD的显微镜下拍照。