机能实验实验设计

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实验设计书

1、研究题目:茶多酚对氯化钡诱发的大鼠心律失常的作用

2、理论依据及研究现状:

[1]心律失常就是由于窦房结激动异常或激动产生于窦房结以外,激动的传导缓慢、阻滞或经异常通道传导,即心脏活动的起源与(或)传导障碍导致心脏搏动的频率与(或)节律异常。心律失常就是心血管疾病中重要的一组疾病。它可单独发病亦可与心血管病伴发。可突然发作而致猝死,亦可持续累及心脏而衰竭。导致心律失常的原因主要有各种器质性心脏病(冠心病、心肌病、风心病等)、植物神经系统兴奋性改变、电解质紊乱、麻醉、胸腔或心脏手术、某些药物副作用及中枢神经系统疾病等。[2]氯化钡能促进浦肯野纤维Na+内流,就是动作电位4相自发除极速率加快,心肌自律性增高,异位节律产生,导致心律失常的发生,故静脉注射氯化钡可制作心律失常病理模型。

[3]茶叶系山茶科植物茶树的干燥嫩叶或叶芽,就是一种传统的药食同源的天然保健饮品、茶叶中含有咖啡碱、茶多酚、维生素类、矿物质、氨基酸与脂多糖等物质,其中茶多酚(tea polyphenols,、TP)就是茶叶的主要生理活性成分、近年来,大量的研究发现,茶多酚具有抗肿瘤、降血脂、抗动脉粥样硬化、强心、抗心律失常、抗衰老与抗菌等多种生物活性,并且揭示这些生物活性均与其抗氧化作用有关、主要概述近年来有关茶多酚的药理、毒理与药动学方面的研究、 [4]茶多酚10mg/kg iv可显著降低CaCI2所致小鼠死亡率.15mg／kg茶多酚iv能提高哇巴因致膛鼠心律失常的用量.对氯仿诱发的小鼠心律失常有明显预防作用,并能对抗大鼠心肌缺血一再灌注所致的心律失常,但对鸟头碱诱发大鼠心律失常无作用。[5]可通过抑制Ca离子内流从而降低窦房结自律性,降低缺血时心房、心室,浦肯野纤维的异常自律性,减少或消除后除极所致触发活动;减慢房室结传导,可终止房室结折返,减慢心房扑动、心房颤动时加快的心室率;延长窦房结、房室结的有效不应期。

[5]利多卡因阻滞钠通道的激活与失活状态,通道恢复至静息状态时阻滞作用迅速解除,因此利多卡因对除极化组织作用强,对缺血或强心苷中毒所致的除极化型心律失常有较强抑制作用。并且抑制参与动作电位复极2期的少量Na内流,缩短或不影响浦肯野纤维与心室肌的动作电位时程。减小动作电位4期去极斜率,提高兴奋阈值,降低自律性。

3.研究内容:

建立急性心律失常模型,分别用茶多酚与利多卡因治疗,并比较实验结果,从而比较茶多酚与利多卡因治疗急性心律失常的疗效

4、研究方法:

(一)实验对象:健康大鼠性别:雌雄兼有规格:体重(200±50)g 数量:9只

(二)实验组与对照组的处理:

1、将大鼠随机分为3组,注射适量生理盐水治疗心律失常的大鼠(A组),注射等量利多卡因治疗心律失常的大鼠(B组),注射等量茶多酚治疗心律失常的大鼠(C组)

2、A组大鼠注射氯化钡溶液0、05ml/100g后再注射生理盐水0、1ml/100g

B组大鼠注射氯化钡溶液0、05ml/100g后再注射利多卡因0、1ml/100g

C组大鼠注射氯化钡溶液0、05ml/100g后再注射茶多酚0、1ml/100g

(三)观察指标:心电图

5、仪器与药品:

生物信号采集与处理系统, 心电电极及输入线,大鼠手术台,大鼠手术器械1 套,注射器(1ml,2ml,10ml),注射针头

10%水合氯醛,0、8%氯化钡溶液,0、5%盐酸利多卡因,0、5%茶多酚溶液,生理盐水,苦味酸

6.实验步骤:

1.实验前准备:将9只体重(200±50)g大鼠随机分为3组并编号

2.麻醉固定:将9只大鼠分别称重,腹腔注射10%水合氯醛0、3ml/100g麻醉,麻醉后背位固定于大鼠手术台上。

3.插入心电电极:将白、红、黑色心电电极分别插入大鼠的右前肢、左前肢、右后肢皮下,描记一段正常Ⅱ导联心电图。

4.复制心律失常模型:A、B、C组大鼠全部舌下静脉注射0、8%氯化钡0、05ml/100g,用适量生理盐水推入,连续描记10min,观察氯化钡引起的心电图变化。

5.当心律失常出现后,A组大鼠立即舌下静脉注射生理盐水0、1ml/100g,连续描记10min内的心电图;B组大鼠立即舌下静脉注射0、5%盐酸利多卡因0、1ml/100g,连续描记10min内的心电图;C组大鼠立即舌下静脉注射0、5%茶多酚溶液0、1ml/100g,连续描记10min内的心电图

利多卡因与茶多酚对心律失常的治疗作用

组别实验鼠数

(只) 氯化钡

(ml/100g)

生理盐水

(ml/100g)

利多卡因

(ml/100g)

茶多酚

(ml/100g)

心率(次/

分)

A组 3 0、05 0、1 ————

B组 3 0、05 ——0、1 ——

C组 3 0、05 ————0、1

7.预期实验结果:

A组大鼠经生理盐水治疗后心律失常情况未改善

B组大鼠经利多卡因治疗后心律失常情况改善,心率恢复正常

C组大鼠经茶多酚治疗后心律失常情况有改善但心率仍有部分未恢复

(附上心电图)

8.注意事项:

捉拿大鼠要注意安全,一旦被大鼠咬了要及时打疫苗

心电图针形电极应插入皮下,不能插入肌肉

舌下静脉注射时要找准位置,避免将舌头打肿,若已经打肿舌头,改用股静脉注射

参考文献:

[1]全国高等医药教材《病理生理学》•第八版•人民卫生出版社

[2]《医学机能实验学》、龚永生,陈醒言主编---北京:高等教育出版社

[3]《中草药》2004年第10期 | 陈继英郭嘉林张存彦王成港王春龙天津药物研究院制剂研究中心天津 300193

[4]《中药药理与临床》1996年第5期 | 蒋晓婷陶厚权赵振东皖南医学院生理教研室,芜湖241001 弋矶山医院心内科

[5]全国高等医药教材《药理学》•第八版•人民卫生出版社

开始实验

实验准备

麻醉固定

插入心电电极

复制心律失常模型