巯基

巯基
巯的字和音均由氢硫二字拼合而成。

带有巯基的化合物最常见的是半胱氨酸
HOOC-CH（NH2）-CH2-SH、谷胱甘肽G-SH以及含半胱氨酸残基的各种蛋白质。

1基本介绍
巯基又称氢硫基。

是由一个硫原子和一个氢原子相连组成的一价原子团，结构式为：—SH
巯基是硫醇（R—SH）、硫酚（Ph—SH）、硫代羧酸（硫羟羧酸，或俗称硫赶羧酸）分子中的官能团。

2结构介绍
由氢和硫两种原子组成的一价原子团。

也叫氢硫基。

巯的字和音均由氢硫二字拼合而成。

带有巯基的化合物最常见的是半胱氨酸HOOC-CH（NH2）-CH2-SH、谷胱甘肽G-SH 以及含半胱氨酸残基的各种蛋白质。

两个半胱氨酸的两个巯基可以脱氢氧化为胱氨酸而在分子中形成-S-S-结构，-S-S-称为二硫键（二硫桥），二硫键是巯基的氧化形式，二硫键可加氢再还原为巯基。

谷胱甘肽、巯基蛋白及巯基酶的活性基团是巯基，通过巯基参与反应。

3检测方法
1. RP-HPLC法测定巯基含量
采用色谱柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm)，流动相A(0.1%TFA)和流动相B（甲醇）梯度洗脱：流动相B 40%~80%，0~10min，然后80% B保持5min，流速0.8mL/mi n，检测波长327nm，得到NTB标准曲线y=3.67059x+0.14123，回收率101.9%，RSD=l. 17%，从而建立了一种高灵敏度巯基检测方法。

2. 采用分子荧光光谱法作为反应条件，用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定巯基
用OPA、丹酰氯、茚三酮与半胱氨酸反应，测其可见紫外吸收光谱及荧光光谱；在不同PH、温度、反应时间条件下，用OPA与半胱氨酸反应测其荧光度；分别吸收0.1mmol/ L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100 μl，各加入10 μlH2O2,室温下反应30min，然后加热蒸干，残渣用200μl OPA衍生液，定容至5 ml，4 min时测其荧光光谱。

取pH8. 4的硼酸缓冲溶液5μl，混合10次；加入OPA衍生液2μl，混合进样走HPLC。

梯度条件：洗脱液B所占比例0min为0，17min线性增加至60%，17.5min线性增加至100%，20mi n洗脱结束。

激发波长为340nm,荧光检测波长为450nm。

3.柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法
以tris(2-carboxylethyl) –phosphine (TCEP)为还原剂，7–fluorbenzo–2–oxa –1,3–diazole–4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂，N-乙酰半胱氨酸为内标，C8色谱柱分离，流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（pH =3. 0）,梯度洗脱,385 nm处检测。

线性范围为8. 3～1042.
6 μmol/L,最低检测限为0. 42μmol/L,日内精密度为1. 67%～1. 86%,日间精密度为2. 08%～3. 06 %,平均回收率为98. 1%～103. 2 %。

4. 电化学脱附与荧光技术联用
将样品固定在烷基硫醇自组装膜修饰的金电极表面,通过荧光试剂马来酰亚胺与游离巯基反应原位标记GSH,恒电位条件下脱附电极表面吸附物,检测脱附物在0.1 mol·L.KO H溶液中的荧光强度。